辅助卵母细胞激活技术在体外受精中的临床应用

目的观察辅助卵母细胞激活(assisted oocyte activation,AOA)技术在体外受精周期中的应用,并对受精、胚胎发育情况、临床结局等激活效果进行评价。方法回顾性分析进行卵胞浆内单精子显微注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)联合AOA处理的23例助孕者的临床资料,观察卵母细胞激活后的原核形成、胚胎发育情况及临床结局等。结果23例共进行23周期的ICSI+AOA,全部采用钙离子载体A23187进行激活处理,9例获得临床妊娠,临床妊娠率为39.1%。其中至少有1次ICSI完全受精失败8例(A组),AOA周期的2PN受精率、2PN卵裂率、优质胚胎率和可利用胚胎率分别为50.0%、93.3%、39.3%和71.4%,临床妊娠率和胚胎种植率分别为12.5%和7.1%;精子严重畸形(如圆头精子症等)15例(B组),AOA周期的2PN受精率、2PN卵裂率、优质胚胎率和可利用胚胎率分别为53.9%、98.8%、48.8%和65.9%,临床妊娠率和胚胎种植率分别为53.3%和40.7%。结论AOA可以改善ICSI完全受精失败者的受精率及胚胎发育质量,并可用于严重精子畸形如圆头精子症的ICSI,对临床应用有一定的价值。

辅助卵母细胞激活对经睾丸显微取精术获取活动精子患者卵胞浆单精子注射治疗结局的影响

【目的】探讨辅助卵母细胞激活(AOA)对经睾丸显微取精术(micro-TESE)成功获得活动精子患者行卵母细胞胞质内单精子注射(ICSI)治疗的实验室和临床结局影响。【方法】回顾性分析2018年至2020年间经micro-TESE已获取活动精子的非梗阻性无精子症男性患者167人,配偶经常规超排卵获得成熟卵母细胞行ICSI治疗230个周期,比较分析ICSI后是否经钙霉素行AOA处理的实验室和临床结局差异。【结果】激活组(G1)和未激活组(G2)的女方平均年龄(29.96±4.61vs.30.59±4.50,P=0.297),平均移植胚胎数(1.51±0.50 vs.1.56±0.50,P=0.154),移植囊胚数占比(24.37%vs.25.00%,P=0.915),差异均无统计学意义。G1组的总受精率和2PN受精率、首次移植妊娠率高于G2组(72.77%vs.67.59%,P=0.005;64.33%vs.60.22%,P=0.036;67.09%vs.50.00%,P=0.039)差异有统计学意义。G1组的无可用胚周期发生率(10.85%vs.9.90%,P=0.815)、D3可用胚率(41.29%vs.40.74%,P=0.817)、种植率(34.87%vs.32.05%,P=0.533)和临床妊娠率(43.87%vs.41.00%,P=0.651)均高于G2组,但差异无统计学意义;G1组的优胚率(13.44%vs.15.44%,P=0.265)和持续妊娠率(36.13%vs.40.00%,P=0.533)却低于G2组,组间差异无统计学意义。【结论】AOA处理可以提高经micro-TESE获取活动精子患者ICSI治疗的2PN受精率,有增加Day3可用胚胎数的趋势,但未改善胚胎质量和持续发育能力。对于使用活动micro-TESE精子行ICSI之后的AOA处理应仅用在精子形态畸形可疑受精低下的情况。

人工辅助卵母细胞激活成功妊娠分娩1例

自1978年第一例采用体外受精-胚胎移植助孕技术的婴儿出生以来,在几十年的人类辅助生殖技术助孕治疗中,目前受精方式除了常规体外受精(in vitro fertilization,IVF)外,还有卵胞质内单精子显微注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI),并且二者存在不同的适应证。IVF主要用于女方因素引起的不孕症如:卵子运输障碍、排卵障碍以及子宫内膜异位症等。而ICSI主要适用于男方严重少弱精子症、梗阻性无精子症和IVF受精失败等。

钙离子载体辅助卵母细胞激活在卵胞浆内单精子注射中的应用

目的探讨钙离子载体辅助卵母细胞激活(AOA)对因受精不良或精子因素行卵胞浆内单精子注射(ICSI)患者临床结局的影响。方法回顾性分析2012年1月至2020年12月在我中心行ICSI助孕时采用钙离子载体AOA患者的临床资料(共115个周期)。根据采用钙离子载体AOA的时间不同分为2组,第1个ICSI周期采用钙离子载体AOA助孕的为A组(n=66)和第2个ICSI周期采用钙离子载体AOA助孕的为B组(n=49)。同时,A组患者根据不同精子来源分为2个亚组:采用手术穿刺取精的为手术组(n=14),采用手淫法取精的严重少弱精子症组(n=52);以同期于我中心就诊的未使用激活剂的不同精子来源ICSI周期为A组的对照组。B组患者根据第1次ICSI受精情况不同分为3个亚组:前次ICSI助孕受精失败(非精子因素)的为未受精组(n=12),前次ICSI助孕受精率低的为受精低下组(n=31)和前次ICSI助孕因精子质量差导致受精失败的为精子因素组(n=6);并分别以自身既往未采用激活剂的ICSI周期为B组的对照组,比较各组患者的一般资料、实验室指标和临床结局。结果A、B两组患者的一般资料比较均无显著性差异(P>0.05)。A组患者中,严重少弱精子症组和手术组的激活周期2PN受精率均显著高于同组对照周期(P<0.05)。在B组患者中,未受精组和受精低下组的激活周期2PN受精率和2PN卵裂率均显著高于同组对照周期(P<0.05),而获卵数、MⅡ卵数、临床妊娠率和活产率比较均无显著差异(P>0.05);在精子因素组中,激活周期2PN卵裂率显著高于对照周期(P<0.05),而获卵数、MⅡ卵数、2PN受精率、优质胚胎率、临床妊娠率和活产率比较均无显著差异(P>0.05)。采用钙离子载体AOA的115个周期中,共有24例健康婴儿分娩(20例单胎和2例双胎),且未见先天缺陷和畸形。结论钙离子载体AOA可以显著提高严重少弱精子症、手术取精、既往ICSI未受精和受精低下患者的受精率,改善前次因精子因素不育患者的卵裂率。

钙离子载体辅助卵母细胞激活对患者妊娠结局影响的Meta分析

目的 采用Meta分析方法评价钙离子载体辅助卵母细胞激活对患者妊娠结局的影响。方法 检索中国知网知识发现网络平台、维普中文期刊服务平台、万方数据知识服务平台、PubMed、Cochrane图书馆、Ebase数据库,搜集钙离子载体辅助卵母细胞激活对患者妊娠结局影响的随机对照试验(RCT)文献,检索时段从数据库建立到2022年10月。所有文献均由两位人员分别独立审阅、评价、抽取临床相关数据,使用RevMan5.4软件进行分析。结果 4篇RCT文献被纳入本研究,经分析在精子畸形或ICSI低受精的患者中,钙离子载体激活组的胚胎受精率、临床妊娠率和新生儿活产率显著高于对照组(P<0.05)。激活组的优胚率与对照组相差不大。结论 在精子畸形或ICSI低受精的患者中,钙离子载体辅助卵母细胞激活能提高其胚胎受精率,不影响受精后胚胎的发育,且能显著改善患者妊娠结局。

反复种植失败患者行卵母细胞辅助激活技术后活产1例

本文报道温州医科大学附属第二医院收治的反复种植失败患者行卵母细胞辅助激活后活产1例。该患者于本中心共经历5次促排、6次胚胎移植,在第3次胚胎移植失败后补充诊断反复种植失败。最后患者在行卵母细胞辅助激活后获得3枚胚胎,于第9周期移植2枚第7天囊胚后成功妊娠并活产一子。卵母细胞辅助激活技术提升胚胎质量的临床应用价值及安全性值得进一步研究证实。

ICSI联合氯化锶辅助激活人卵母细胞成功妊娠1例及文献复习

观察氯化锶(SrCl2)在人卵母细胞辅助激活中的应用,为其临床应用的安全性及可行性积累资料。方法回顾性分析我院生殖医学中心2017年收治的一对不育夫妇采用SrCl2辅助激活卵母细胞并行ICSI助孕的临床资料,随访其妊娠结局,并对相关文献进行复习。结果2019年1月3日复苏该患者的2枚第3天(D3)卵裂期胚胎,常规内膜准备后行冻融胚胎移植(FET)。8月27日顺产分娩一男婴,体重2700 g,各项指标正常。结论应用SrCl2行卵母细胞辅助激活可以获得满意的妊娠结局,但目前文献累计的数据资料尚较少,其远期安全性及具体的应用规范等均需要更深入的研究探讨。

PLCZ1基因突变患者配偶经卵母细胞辅助激活妊娠1例并文献复习

PLCZ1蛋白主要定位于精子头部顶体内膜和核膜之间的核周鞘,PLCZ1基因突变的精子常表现出卵母细胞激活障碍。本文回顾性分析1例男方PLCZ1基因突变伴多次受精障碍的患者,女方经钙离子载体A23187(浓度10μmol/L)卵母细胞辅助激活(AOA)后获得较好的受精率,最终获得临床妊娠。同时对国内外关于PLCZ1基因缺陷的文献进行复习。提示对于PLCZ1基因缺陷导致受精障碍的患者,经ICSI联合AOA技术可以明显改善妊娠结局。但在临床工作中,仍需严格注意AOA的适应证,注意累积病例和治疗数据,同时要关注子代安全性问题。

少弱精子症ICSI受精失败后行补救性卵母细胞辅助激活成功妊娠1例

卵胞浆内单精子注射(ICSI)技术为少弱精子症患者带来了福音,该技术能够显著提高受精率,但仍有少部分患者ICSI周期会发生完全受精失败。本文就2019年我院生殖医学中心1例少弱精子症患者ICSI受精失败后,行补救性卵母细胞辅助激活(AOA)治疗并成功顺产1名健康男婴的病例进行分析总结,并结合相关文献进行讨论。

ICSI完全受精失败的机制、原因及处理

卵胞浆内单精子注射(ICSI)已广泛用于治疗男性因素不育,但ICSI后完全受精失败(total fertilization failure,TFF)的发生率仍有1%~4%。卵子激活失败(oocyte activation failure,OAF)是ICSI-TTF的主要机制。本文综述了卵母细胞激活的机制、ICSI-TTF的发生机制和原因、OAF的鉴别方法以及相应的处理策略。

两种辅助激活方案对反复受精患者受精率低下时妊娠结局的影响

目的比较钙离子载体A23187激活和钙离子载体A23187联合6-二甲氨基嘌呤(6-DMAP)两种辅助激活方案对反复受精患者受精率低下时妊娠结局的影响。方法回顾性分析有受精率低下史的卵细胞质内单精子注射(ICSI)后反复受精患者21例,分别采用钙离子载体A23187激活(9例)和钙离子载体A23187联合6-DMAP激活(12例),比较两组患者的受精情况、胚胎情况及妊娠结局。结果两组患者的平均年龄、既往周期的平均获卵数、MⅡ卵数、受精率、卵裂率、可用胚胎率和优质胚胎率比较差异均无统计学意义(均P>0. 05)。两组患者激活周期的获卵数、MⅡ卵数、受精率、受精类型、卵裂率、可用胚胎率、可用胚胎数、优质胚胎率、优质胚胎数比较差异均无统计学意义(均P>0. 05)。9例钙离子载体激活组患者均行冻胚移植,临床妊娠4例; 12例联合激活组患者移植11例,临床妊娠3例。结论两种辅助激活方案均能显著提高反复受精患者的受精率,增加可用胚胎数和优质胚胎数,但钙离子载体激活组的胚胎持续妊娠能力优于联合激活组。

1例PLCZ1复合杂合突变致IVF多原核受精及ICSI受精低下

目的探讨一例继发不孕不育夫妻体外受精(IVF)中观察到大部分受精卵存在多原核(MPN)受精的遗传病因。方法该病例夫妻双方全血DNA样本行全外显子组测序。男方及其父母外周血DNA样本行磷脂酶Cζ1(PLCZ1)突变位点Sanger测序家系验证。成熟卵子在卵胞质内单精子注射(ICSI)后,行卵母细胞辅助激活(AOA)。结果女方未检出与MPN或受精障碍表型相关的变异。男方检出与受精障碍表型相关的1个致病性及1个疑似致病性变异,呈复合杂合,为PLCZ1(NM_033123.3)[c.588C>A/p.Cys196*];[c.590G>A/p.Arg197His]。患者配偶第二周期行拮抗剂方案促排卵,一半卵子行ICSI,正常受精率为12.50%(1/8),受精卵受精后凋亡;另一半卵子行ICSI+AOA,正常受精率为22.22%(2/9),形成4枚低等级卵裂胚。移植后未孕,囊胚培养失败。第三周期配偶行拮抗剂方案加生长激素促排卵,全部成熟卵子均行ICSI+AOA,正常受精率为44.44%(4/9),均形成优质胚胎。新鲜移植后单胎活产。这两个ICSI周期的受精卵均无MPN表型。结论PLCZ1基因缺陷的男性除受精失败和早期胚胎发育阻滞外,IVF时可呈现多精受精所致的多原核表型。采用ICSI+AOA的治疗策略可有效改善精子PLCZ1缺陷病例的受精情况及妊娠结局。