甾体激素核受体与辅助调节因子对基因表达的协同调控

甾体激素受体作为核受体家族中的一大类别,决非单独与DNA靶序列上的应答元件作用调节靶基因的表达,而是在一系列辅助调节因子参与下,通过蛋白-蛋白之间的相互作用,实现对靶基因的协同调控。而且各种辅助调节因子又受各种不同信号途径的调节,形成了不同信号途径之间的交叉调节。在辅助调节因子的参与下,激素-受体-靶基因调控方式与多种信号传导途径间通过交叉调节,形成建立在不同时空上的基因表达网络调控模式。

PGC-1α辅助激活人PEPCK基因转录

【目的】构建人磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)基因启动子荧光素酶报告质粒PGL3-hPCK-luc,并探讨过氧化物酶体增殖物活化受体γ辅助激活因子1α(PGC-1α)在转录因子肝细胞核因子4α(HNF4α)介导下对人PEPCK基因启动子活性的影响。【方法】从人全血基因组DNA中克隆PEPCK启动子基因片段,并重组进荧光素酶报告载体PGL3-basic,将pcDNA3.1-PGC-1α、pcDNA3.0-HNF4α表达质粒与PGL3-hPCK-luc按不同组合共转染进人肝癌细胞株HepG2细胞或正常人肝细胞株LO2细胞,培养48h后检测细胞裂解液中荧光素酶活性。【结果】通过酶切鉴定及测序证明扩增的人PEPCK启动子片段成功插入载体质粒中。转染后人PEPCK启动子基因荧光素酶活性较空白对照组增加60倍(P<0.05);共转染质粒进HepG2细胞或LO2细胞后,HNF4α均可以增强人PEPCK启动子基因荧光素酶活性,在HepG2细胞,荧光素酶活性是对照组的2.69倍(P<0.05),而在LO2细胞中,荧光素酶活性是对照组的3.64倍(P<0.05);PGC-1α可以明显增强HNF4α对人PEPCK启动子的激活作用,在HepG2细胞,荧光素酶活性是PGL3-HPCK-luc+HNF4α组的2.01倍(P<0.05),而在LO2细胞中,荧光素酶活性是PGL3-HPCK-luc+HNF4α组的2.82倍(P<0.05)。而与单一转染组相比,共转染pcDNA3.1-PGC-1α与pcDNA3.0-HNF4α显著增加了PEPCK的mRNA和蛋白表达水平(P<0.05)。【结论】人PEPCK启动子基因报告质粒成功构建,且转录因子HNF4α可以激活人PEPCK启动子活性,辅助激活因子PGC-1α可以进一步加强HNF4α的作用。

H19基因在辅助生殖技术领域中的研究进展

辅助生殖技术(ART)虽然已成为人们解决不孕不育的主要手段,但该项技术仍存在一定安全隐患,如经卵胞浆内单精子注射(ICSI)和体外受精-胚胎移植(IVF-ET)获得的胎儿有表观遗传学改变的可能,这些表观遗传学的改变是否对后代造成不利影响,有待进一步深入研究和探讨。H19基因为母源性基因,是最早被鉴定的印迹基因之一。研究显示H19基因变异与胎儿表观遗传学性状改变相关。综述H19基因与ART的关系。

乳腺癌新辅助化疗中Survivin、Ki-67的表达及其意义

目的:研究Survivin、Ki-67在乳腺癌新辅助化疗前后的表达及其意义。方法:应用免疫组织化学法检测41例乳腺癌新辅助化疗前后标本中Survivin、Ki-67的表达。结果:新辅助化疗有效率为70.73%。化疗前后Survivin、Ki-67变化显著,分别由化疗前的63.41%和(47.30±19.71)%,降到化疗后的34.15%和(30.01±12.43)%(P<0.05)。新辅助化疗前后Survivin表达与Ki-67显著相关(P<0.05)。新辅助化疗后Survivin表达阳性者,化疗效果差(P<0.05);而Ki-67高表达者化疗有效率高于低表达者(P<0.05)。结论:Survivin、Ki-67可作为指导乳腺癌化疗并预测化疗敏感性的分子生物学指标。

AFM观察小鼠心肌核DNA转录调控和蛋白质相互作用

用原子力显微镜(AFM)直接观察、体外转录、PAGE电泳等多种实验技术组合,发现小白鼠(Balb/c)心肌核DNA片段中非转录状态的活性基因仅两端的调控序列结合支架蛋白(不可解离蛋白),同时非共价键特异结合自己编码的蛋白质与特定辅助信息小分子所形成的复合体(可解离蛋白)等多种转录调控蛋白质,中间的编码序列无结合蛋白质。转录状态的基因除两端的调控序列特异结合上述两类蛋白质外,中间的编码序列还以非共价键特异结合可完全解离的转录活性因子等多种蛋白质。本工作展示了未来运用AFM观察和体外转录等技术组合研究基因表达与调控机制的前景,并为阅读人类基因组图谱中确定某一特定基因的位置奠定了理论基础。

红景天苷对力竭大鼠心肌线粒体生物发生关键调控因子的影响

目的观察力竭运动对大鼠心肌线粒体生物发生关键调控因子过氧化物酶增殖物激活受体γ辅助激活因子-1α(peroxisome proliferator-activated receptorγcoactivator 1α,PGC-1α)、核呼吸因子-1(nuclear respiratory factor-1,NRF-1)和核呼吸因子-2(nuclear respiratory factor-2,NRF-2)蛋白表达的影响及红景天苷(Salidroside,SAL)对这些因子的干预作用。方法将104只雄性SD大鼠随机分为对照(C)组、力竭(EE)组(即刻、6 h、12 h、24 h)、低剂量SAL力竭(LS)组(即刻、6 h、12 h、24 h)、高剂量SAL力竭(HS)组(即刻、6 h、12 h、24 h),每组8只。C组及EE组予生理盐水(10 ml/kg)灌胃2周,LS和HS组分别给予SAL 100、300 mg/kg灌胃2周,EE、LS和HS组灌胃结束后建立力竭游泳模型。比较EE、LS、HS组力竭游泳时间,测定对照组及力竭运动后各组不同时相心肌PGC-1α、NRF-1、NRF-2蛋白的表达。结果 1LS、HS组大鼠游泳时间均较EE组明显延长(P<0.05),HS组较LS组延长得更为显著(P<0.05)。2PGC-1α蛋白表达量均为即刻最低,6 h最高,差异有统计学意义(P<0.05);NRF-2蛋白的表达量均为即刻最低,12 h最高,差异有统计学意义(P<0.05);NRF-1蛋白的表达量无明显的时间趋势。与C组比较,EE组各时相心肌PGC-1α蛋白的表达量均显著降低(P<0.05),即刻、6 h、24 h组心肌NRF-1和NRF-2蛋白的表达量显著降低(P<0.05)。与相同时相的EE组比较,LS组即刻、6 h、24 h PGC-1α蛋白表达量,6、12、24 h心肌NRF-1蛋白表达量,即刻、6 h、12 h NRF-2蛋白表达量均显著增高(P<0.05);HS组PGC-1α及NRF-2蛋白表达量均显著增高(P<0.05),即刻、12 h组心肌NRF-1蛋白的表达量均显著降低(P<0.05)。与相同时相的LS组比较,HS组即刻、24 h PGC-1α蛋白表达量显著降低,6、12 h显著增高(P<0.05);HS组各时相心肌NRF-1蛋白表达量均显著降低(P<0.05);HS组6、12、24 h心肌NRF-2蛋白表达量均显著增高(P<0.05)。结论 SAL能通过刺激力竭大鼠心肌PGC-1α、NRF-2蛋白表达的上调诱导线粒体生物发生,起到保护心肌的作用。

PGC-1—一种新的核受体辅助活化因子

PGC-1是一种新发现的核受体转录辅助活化因子。它具有多功能性,诱导线粒体增殖、呼吸、能量代谢及适应性产热,并与糖尿病、肥胖等密切相关。PGC-1具有调节多种核受体和转录因子活性的能力。此外,PGC-1不仅通过与核受体转录因子相互作用调节基因转录,也通过参与RNA后加工过程调节基因表达。

CS3纤毛抗原表达调控机理的研究

定居因子抗原(CFA)是肠毒素大肠杆菌(ETEC)的重要毒性因子和保护性抗原,大多以菌毛的形式存在。此类抗原的表达及菌毛的装配需要2类基因的共同作用,即亚基结构基因和辅助蛋白结构基因。亚基是纤毛抗原的基本组成单位,而辅助蛋白则参与亚基蛋白分子的输送及装配过程。CS3亚基结构基因位于辅助蛋白结构基因的下游,处于CS3操纵子的3′端。CS3亚基结构基因的核苷酸序列分析揭示。

热休克后表达受抑基因的差别显示及克隆

热休克反应是生物体对高于其正常生长温度环境而作出的一系列分子应答反应。热休克基因及其表达的正调控机制现已得到广泛而深入的研究。

POLB基因在动物上的研究进展

DNA聚合酶β(DNA polymerase beta,POLB)属于DNA聚合酶X家族中的一员,主要参与真核生物DNA的复制、DNA损伤修复、基因重组以及细胞周期调控等多种生物代谢过程。POLB所在的DNA修复基因与癌基因、抑癌基因、细胞周期调节基因以及细胞凋亡基因共同维持着细胞基因组的稳定性和完整性。若特异性敲除POLB会导致胚胎致死。近年来研究发现,POLB与细胞的生长发育、周期调控等息息相关。POLB表达下降使得上述的癌基因、抑癌基因受到损伤后却不能得到正确修复,从而导致细胞周期的紊乱、增殖失控。因此,本文将从POLB的基因结构、生物学功能、POLB在动物方面的研究等几个方面的相关研究进展进行综述,重点阐述其生物学功能,以期更深入了解POLB,为畜禽品种的改良奠定理论基础。

转录因子Ascl-2调控Tfh细胞分化在慢性乙型肝炎中的作用

Tfh细胞是一种特殊的辅助性T细胞。在机体对抗病毒的过程中,Tfh细胞参与机体免疫应答,对维持机体免疫平衡起重要作用。全基因组分析结果表明,Ascl-2可诱导T细胞向Tfh细胞的分化,并抑制TH1和TH17细胞分化相关基因的表达,Ascl-2是Tfh细胞发育早期不可少的调控因子。

人工智能将辅助育种家实现低成本定向育种

近日,中国农业科学院生物技术研究所汪海博士与美国康奈尔大学爱德华·巴克勒(Edward Buckler)院士团队合作,开发出从基因组DNA序列预测基因表达调控模式的人工神经网络模型,为实现人工智能(AI)辅助定向育种奠定了基础。相关研究成果已在线发表于《美国科学院院刊》。

术前FOLFOX6方案联合腹腔镜胃癌根治术对进展期胃癌患者Lgr5、Oct4表达的影响

目的探讨术前FOLFOX6方案辅助化疗联合腹腔镜胃癌根治术对进展期胃癌患者Lgr5、Oct4表达的影响。方法选取2012年3月至2015年3月河南省中医院Ⅱ、Ⅲ期胃癌患者124例,采用随机数字表法分为对照组和实验组,各62例。对照组患者接受胃癌根治术治疗,实验组患者接受术前FOLFOX6方案辅助化疗联合腹腔镜胃癌根治术治疗。评估治疗后两组患者的近期有效率和不良反应发生率;比较手术前后两组患者胃黏膜组织中Lgr5和Oct4表达情况。结果实验组的治疗有效率高于对照组(P <0.05);两组患者在白细胞减少、肝肾功能损害、腹泻及肠梗阻这几种并发症的发生率上差异无统计学意义(P>0.05);治疗后两组患者Lgr5和Oct4表达均降低(P<0.05),但治疗后实验组Lgr5和Oct4表达低于对照组(P<0.05)。结论术前FOLFOX6方案辅助化疗联合腹腔镜胃癌根治术治疗进展期胃癌患者效果优异,治疗安全性好,可有效降低胃癌组织Lgr5和Oct4表达。

AFLP标记及其在园艺植物遗传育种中的应用

AFLP(扩增片段长度多态性)标记是一种新的 DNA 分子标记技术.对其基本原理、方法及特点做了简要介绍。从遗传多样性和亲缘关系分析、品种鉴定和指纹图谱构建、遗传图谱构建、基因定位与克隆、QTL 定位、标记辅助选择育种、基因表达与调控研究等方面概述了 AFLP 标记在园艺植物上的应用进展,并对其存在的问题和应用前景做了探讨。

同源结构域相互作用蛋白激酶2的研究进展

同源结构域相互作用蛋白激酶2(HIPK2)是一个核内丝氨酸／苏氨酸激酶,作为辅助因子,广泛参与转录调控。HIPK2位于核斑,在Sp100和TP53INPls的辅助下能够磷酸化p53的46位丝氨酸,加速p53的乙酰化,拮抗MDM2对p53的抑制作用,强化p53的功能。通过磷酸化,HIPK2加速CtBP和c- Myb被蛋白酶体降解,引起细胞发生不依赖p53的凋亡或分化。许多肿瘤细胞低表达HIPK2,表明HIPK2 可能是一个重要的抑癌基因。

葡萄球菌生物膜形成影响因素的研究进展

细菌感染已成为临床中不能完全避免的情况,包括致病菌和条件致病菌。细菌生物膜成为细菌的有效保护途径,增强了细菌对抗机体的免疫防御作用及对抗生素的抵抗性。葡萄球菌生物膜形成受多因素及多基因调控,外部环境因素主要是机体免疫反应及外界有机物,内部基因调控主要是sar A、agr、aap、ica。本文就葡萄球菌生物膜的形成及影响生物膜形成的外部环境因素和内部基因调控因素进行综述,为葡萄球菌生物膜的靶向药物研究与治疗提供参考。

SarA/Agr调控金黄色葡萄球菌生物被膜形成的研究进展

金黄色葡萄球菌生物被膜的形成是一个复杂的程序,受多种基因的共同调控。葡萄球菌辅助调节子A(SarA)和辅助基因调节子(Agr)分别属于转录调节系统和二元调节系统,二者可直接或间接调控多种生物被膜形成相关基因的表达。SarA/Agr在调控生物被膜形成的同时,对金黄色葡萄球菌耐药性及毒力因子也存在显著影响。本文从SarA对生物被膜形成的调控、Agr对生物被膜形成的调控以及SarA/Agr对生物被膜形成的双重调3个方面进行了综述,旨在为金黄色葡萄球菌生物被膜形成机制或干预机制的研究提供新思路。

金黄色葡萄球菌Agr群体感应系统及其抗毒力治疗研究进展

辅助基因调控(Auxiliary gene regulation,Agr)群体感应系统广泛存在于金黄色葡萄球菌中,是研究最广泛的细菌双组分调节系统之一,在金黄色葡萄球菌定植、感染过程中通过调控大量毒力因子、生物膜形成等起着至关重要的作用;抗毒力治疗是一种通过降低或阻断病原体感染后的毒力表达但不影响细菌生存能力,使其易被宿主的免疫防御系统杀死的治疗方法。本文通过对金黄色葡萄球菌Agr群体感应的表达调控与阻断Agr表达抑制其毒力产生的抗毒力治疗等两个方面进行阐述,以期为金黄色葡萄球菌的治疗提供新的研究思路。