NMOSD患者外周血Th17/Treg细胞失衡与肢体伤残的相关性分析

目的探讨视神经脊髓炎谱系疾病(NMOSD)患者外周血辅助性17型T细胞(Th17)细胞/调节性T细胞(Treg)失衡与肢体伤残的关系及其临床意义。方法收集2019年1月至2020年12月在新疆维吾尔自治区人民医院确诊为NMOSD患者19例和对照组20例,根据扩展残疾状况量表EDSS对视神经脊髓炎患者进行评分,用流式细胞术检测外周血Th17、Treg细胞比例和外周血白介素17(IL-17)和白介素10(IL-10)细胞因子水平,比较两组患者Th17、Treg细胞比例及其细胞因子的改变,分析Th17、Treg细胞比例及其细胞因子与患者肢体残疾的相关性。结果NMOSD组与对照组之间对比,Th17细胞比例差异无统计学意义(P>0.05);但NMOSD组中Treg细胞比例较对照组低,Th17/Treg比值较对照组高,差异有统计学意义(P<0.05)。两组之间IL-17和IL-10水平之间差异均无统计学意义(P>0.05),但IL-17/IL-10比值差异有统计学意义(P>0.05)。NMOSD患者急性期EDSS评分与Treg比例、IL-10水平及IL-17/IL-10比例均有相关性(P<0.05)。结论NMOSD患者外周血Th17/Treg细胞失衡可能与Treg下降相关,Treg细胞比例、IL-10水平及IL-17/IL-10比例与患者肢体伤残相关。

艾拉莫德对类风湿关节炎患者Th17细胞与Treg细胞失衡的调节作用

目的探讨艾拉莫德对类风湿关节炎患者17型辅助性T细胞(Th17)与调节性T细胞(Treg)失衡的调节作用。方法选取2016年6月至2017年1月住院的活动期类风湿关节炎患者74例,随机分为A组44例和B组30例。B组给予安慰剂口服,A组给予艾拉莫德口服,两组均坚持服药24周。采用流式细胞术检测外周血Th17和Treg细胞比例;采用酶联免疫吸附技术检测血浆Th17和Treg细胞分泌的相关细胞因子;治疗前后对患者进行DSA28,ACR20,ACR50和ACR70等综合疾病临床评分。结果 A组治疗24周后DSA28评分较治疗前有明显改善,差异有统计学意义(P<0.05);治疗24周后A组DSA28评分及ACR20,ACR50,ACR70改善情况均优于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗24周后,A组外周血中Th17细胞(CD4+IL-17+)比例相较于治疗前降低,但差异无统计学意义(P>0.05),而Treg细胞(CD4+CD25+)比例相较于治疗前显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);治疗24周后,B组外周血中Th17细胞比例无明显改变,Treg细胞比例略有升高,但与治疗前比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗24周后,A组促炎细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-17A水平较治疗前显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);治疗24周后,B组促炎细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-17A水平较治疗前升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论艾拉莫德可通过下调Th17细胞,上调Treg细胞来恢复类风湿关节炎患者内环境细胞稳态,从而缓解疾病进展。

复发性流产患者抗精子抗体水平与T17/Treg及IL-10/IL-17关系

目的:分析复发性流产(RSA)患者抗精子抗体(AsAb)水平与辅助T型17细胞(Th17)/调节性T细胞(Treg)及白细胞介素(IL-10)/IL-17关系。方法:收集2022年1-12月于本院就诊的122例复发性流产患者为研究对象,53例女性RSA患者,69例配偶有RSA病史的男性患者;无不良孕产史已生育健康女性40例和配偶无RSA史男性55例作为对照组。检测纳入对象AsAb水平,Th17、Treg细胞数及IL-10、IL-17水平;采用Spearman相关性法分析AsAb阳性表达与Th17、Treg、IL-10、IL-17水平关系。结果:RSA组AsAb阳性8例,其中女性2例、男性6例,对照组阳性仅1例男性;RSA组AsAb阳性率(6.6%)高于对照组(1.1%);RSA组Th17(3.29±1.04个)、Th17/Treg(0.82±0.41)高于对照组(2.01±0.65个、0.29±0.46),Treg(4.02±1.34个)低于对照组(6.85±1.59个);IL-10(399.25±67.96 ng/ml)、IL-10/IL-17(1.34±0.25)低于对照组(602.09±54.31 ng/ml、2.96±0.38),IL-17(298.17±33.54 pg/ml)高于对照组(203.11±27.60 pg/ml);经Spearman法分析,AsAb阳性表达与Th17、Th17/Treg、IL-17水平呈正相关,与Treg、IL-10、IL-10/IL-17水平呈负相关(均P<0.05)。结论:RSA患者AsAb阳性率较高,且与Th17/Treg细胞及IL-10/IL-17相关。

Treg/Th17在变应性鼻炎发病机制中作用的研究进展

变应性鼻炎(AR)是耳鼻喉科的常见疾病,过去发现Th1/Th2平衡与该疾病密切相关,其下游因子白细胞介素(IL)-4、IL-5和IL-13更是与疾病的发展密切相关。但是随着对人体免疫机制研究的不断深入,发现Th1/Th2平衡不足以完美诠释AR的发病,所以结合Th17/调节性T细胞(Treg)平衡提出了Th1/Th2/Th17/Treg平衡的理论体系,并发现Th17/Treg平衡在AR的免疫调节中有着重要作用。对Th17/Treg平衡在AR疾病发病中的作用进行研究,可完善AR发病的分子机制,为药物治疗分子机制的研究提供参考,本文就Treg/Th17在AR发病机制中的作用进行综述。

CD4^(+)T细胞亚群在皮肌炎发病机制中的研究进展

目的探讨皮肌炎(DM)的免疫学发病机制,特别关注CD4^(+)T细胞亚群在其发病过程中的作用。方法从免疫失衡的角度,通过分析近10年来的文献,深入探讨了DM与CD4^(+)T细胞亚群的关联,全面梳理了细胞因子及相关信号分子等方面的信息。结果主导免疫反应的CD4^(+)T细胞亚群,在DM的发病过程中有显著影响。其中,辅助性T细胞1型(Th1)与Th2和Th17与调节性T细胞(Tregs)比值的不平衡在DM的病理过程中起着核心作用。新发现的CD4^(+)T细胞亚群,Tph细胞(PD-1hiCXCR5−CD4^(+))可能也参与DM的发病过程。结论CD4^(+)T细胞因子的异常表达及其网络失衡参与了DM的免疫学发病机制,为治疗DM提供了新的视角。

胃癌患者外周血Th17细胞相关因子检测及其临床意义

目的探讨检测外周血Th17细胞相关因子在胃癌患者中的意义。方法将我院收治的86例胃癌患者纳入胃癌组,并根据胃癌分期标准分为早期胃癌组46例和中晚期胃癌组40例,将同期35例健康体检者纳入对照组。检测所有研究对象的血清IL-17、IL-21、IL-23及TGF-β1水平。结果胃癌组患者的血清IL-17、IL-21、IL-23及TGF-β1水平均明显高于对照组(P<0.01);早期胃癌组患者血清IL-17、IL-21、IL-23及TGF-β1水平均明显低于中晚期对照组患者(P<0.01)。结论胃癌患者血清IL-17、IL-21、IL-23及TGF-β1等Th17细胞相关因子明显升高,且随着病情的进展,Th17细胞相关因子水平持续升高,因此检测Th17细胞相关因子水平有助于疾病进展的判断。

肺炎支原体感染儿童血外周血辅助性T细胞17型和白细胞介素-17变化及其临床意义

目的探讨外周血辅助性T细胞(Th)17型和白细胞介素(IL)-17在肺炎支原体(MP)急性感染儿童体内变化及其临床意义。方法选择2009年6月至2010年12月在南通市第一人民医院儿科接受住院治疗并确诊为肺炎支原体肺炎(MPP)的32例患儿为研究对象,并纳入MPP组,平均年龄为(9.3±2.5)岁。将其进一步按照感染症状分为MPP亚组1(普通肺炎症状,n=18)和MPP亚组2(肺炎合并肺外症状,n=14);选择同期于该院门诊行健康体检儿童纳入对照组(n=26)(本研究遵循的程序符合本院人体试验委员会所制定的伦理学标准,得到该委员会批准,分组征得受试对象监护人的知情同意,并与之签署临床研究知情同意书)。MPP组与对照组、MPP亚组1与MPP亚组2受试者的年龄、性别等比较,差异无统计学意义(P>0.05)。常规分离外周血单核细胞(PBMC),采用流式细胞术(FACS)检测各组外周血Th17;酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清细胞因子IL-17水平。结果①MPP亚组1与MPP亚组2的外周血Th17频率均高于对照组[(2.05±0.65)%vs.(1.21±0.36)%,(2.98±0.72)%vs.(1.21±0.36)%;P<0.01];MPP亚组2外周血Th17频率均高于MPP亚组1[(2.98±0.72)%vs.(2.05±0.65)%,P<0.01]。②MPP亚组1与MPP亚组2血清IL-17水平均高于对照组[(11.62±5.37)pg/mLvs.(6.45±1.62)pg/mL,(17.34±7.45)pg/mLvs.(6.45±1.62)pg/mL;P<0.01];MPP亚组2血清IL-17水平高于MPP亚组1[(11.62±5.37)pg/mLvs.(17.34±7.45)pg/mL;P<0.01]。结论 MP感染患儿体内Th17频率明显改变,且伴炎症性细胞因子IL-17水平升高,Th17频率异常在MP感染的发病机制中起重要作用。

IL-17/Th17细胞在1型糖尿病中的潜在致病作用

胰岛β细胞的自身免疫破坏与T细胞的免疫耐受破坏有关,其中辅助性T细胞17型(Th17)细胞是重要的分泌白介素17(IL-17)的促炎性CD4+T细胞亚群。Th17细胞在T1DM病因中起重要作用,指定阻断Th17细胞分化的小分子是T1DM的潜在治疗剂。本文对IL-17/Th17细胞在T1DM中的潜在致病作用进行评述。

细胞肌腱膜纤维肉瘤因子调节免疫细胞分化及功能机制

细胞肌腱膜纤维肉瘤因子(c-MAF)是一种具有广泛功能的转录因子,其C端的碱性亮氨酸拉链(Basic Leucine Zipper,b-Zip)结构域高度保守,可与细胞核内含有b-ZIP结构的转录因子结合形成同源或异源二聚体形式并结合DNA发挥转录激活功能调节机体免疫状态。c-MAF通过与IL-10、IL-21、IL-4等细胞因子的基因座启动子或增强子部位结合调控其表达,从而双向调节包括2型辅助T(T helper type 2,Th2)细胞、Th17细胞、Tfh细胞和调节性T(Regulatory T,Treg)细胞在内的多种淋巴细胞及巨噬细胞的分化或功能形成。c-MAF信号网络的阐述对于免疫细胞绝对数及功能异常所引起的自身免疫性疾病的发病机制的探讨及靶向治疗具有重要意义。

约氏疟原虫感染小鼠树突状细胞对Th17分化和功能的调控作用

目的探讨约氏疟原虫(Plasmodium yoelii)17XL株(Py17XL)感染小鼠过程中树突状细胞(DCs)对辅助性T细胞17型(Thl7)细胞分化和功能的调控作用及机制。方法将12只雌性BALB/c小鼠随机分为感染组(Py17XL)、Toll样受体4(TLR4)阻断组(Py17XL+TLR4)、Toll样受体9(TLR9)阻断组(Py17XL+TLR9)和TLR4联合TLR9阻断组(Py17XL+TLR4+TLR9),每组3只。感染前1 d,腹腔注射10μg抗-TLR4单抗(TLR4阻断组)或50μg抗-TLR9单抗(TLR9阻断组)阻断DCs的功能,注射体积为0.4 ml,对照组注射等量的PBS。4组小鼠均腹腔注射1×10~6 Py17XL感染的红细胞。感染后第0、3和5天计数红细胞感染率,同时制备脾细胞悬液,流式细胞仪检测脾脏细胞中CD11c+TLR9+和Th17细胞数量变化,ELISA检测脾细胞培养上清中干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-10(IL-10)水平的变化。结果流式细胞仪检测表明,DCs阻断模型构建成功。感染后第5天,感染组、TLR4阻断组、TLR9阻断组和TLR4联合TLR9阻断组小鼠原虫血症分别为28.0%、29.0%、31.0%和16.3%;感染后第7天,原虫血症分别为43.3%、47.5%、32.5%和8.0%,感染组和TLR4阻断组小鼠全部死亡,其余阻断组小鼠于感染后第6天开始出现死亡。与感染组比较,TLR9阻断组和TLR4联合TLR9阻断组小鼠原虫血症上升缓慢,生存期明显延长至11 d和15 d。流式细胞仪检测结果显示:感染后第5天,TLR9阻断组和TLR4联合TLR9阻断组Th17细胞数量分别为1.2%和1.4%,与感染组(1.9%)相比,数量明显减少(P<0.05,P<0.01)。ELISA检测结果显示:感染后第5天,TLR4联合TLR9阻断组小鼠IFN-γ和IL-10水平分别为(232.4±15.5)pg/ml和(1 791.2±58.2)pg/ml,与感染组[(90.7±50.1)pg/ml和(962.6±409.0)pg/ml]相比,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论 Py17XL感染小鼠过程中DCs调控了Thl7细胞的分化和功能。DCs阻断(Py17XL+TLR4+TLR9)后,感染小鼠原虫血症降低,生存期延长。

CD4＋T淋巴细胞亚群在儿童过敏性紫癜病理机制中的调控作用

目的：探讨 CD4＋ T 淋巴细胞亚群及相应转录因子和上游转录调节因子在过敏性紫癜（HSP）病理机制中的调控作用。方法采用流式细胞术（FCM）、酶联免疫吸附法（ ELISA）、荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）测定41例 HSP 急性期患儿（急性期组）、35例 HSP 临床缓解期患儿（缓解组）和30例健康儿童（健康对照组）外周血单个核细胞（PBMC）中辅助性 T 淋巴细胞（Th）1、Th2、调节性 T 淋巴细胞（Treg）、Th17细胞百分比，血浆干扰素-γ（IFN-γ）、白细胞介素（IL）-4、转化生长因子-β1（TGF-β1）、IL-17水平和 PBMC 中 T 淋巴细胞 T-box（ T-bet）、GATA 结合蛋白-3（ GATA3）、插状头/翅膀状螺旋转录因子-3（ Foxp3）和孤核受体γ（ROR-γt）mRNA 表达。结果1. HSP 急性期组、缓解组患儿 PBMC 中 Th1、Treg 细胞百分比，相应血浆 IFN-γ、TGF-β1水平，T-bet、Foxp3 mRNA 表达均低于健康对照组（P 均﹤0.05），Th2、Th17细胞百分比，血浆 IL-4、IL-17水平和 GATA3、ROR-γt mRNA 表达均高于健康对照组（P 均﹤0.05），Th1/ Th2和 Treg/ Th17失衡；2. HSP 缓解组患儿 PBMC 中 Th1、Th2、Th17、Treg 和 Treg/ Th17与急性期组比较差异均无统计学意义（ P 均﹥0.05）， Th1/ Th2、TGF-β1及相应 T-bet mRNA、Foxp3 mRNA 高于急性期组（P 均﹤0.05），IL-4、IL-17及相应 GATA3、ROR-γt mRNA 均低于急性期组（P 均﹤0.05），Th1/ Th2和 Treg/ Th17仍存在失衡；3. Th1、Th2、Treg、Th17百分数分别与 IFN-γ、IL-4、TGF-β1、IL-17，T-bet、GATA3、Foxp3和 ROR-γt mRNA 表达均呈正相关（ P 均﹤0.05）。结论 HSP 存在 Th1/ Th2、Treg/ Th17免疫失衡，Treg 诱导的免疫耐受被打破，并贯穿整个病理过程。

IL-6对视神经脊髓炎谱系病患者Th17/Treg失衡的调控机制研究

目的研究调控白细胞介素(IL)-6对视神经脊髓炎谱系病(NMOSD)患者辅助性17型T细胞(Th17)/调节性T细胞(Treg)比值失衡的影响。方法收集2019年1月至2020年12月就诊的9例AQP4-IgG阳性的NMOSD患者为NMOSD组和同期8例健康志愿者为对照组,收集并培养外周血单个核细胞(PBMC)后,分别予以IL-6或IL-6受体抑制剂共培养,采用流式细胞术检测Th17和Treg比例,流式微球检测技术检测调控IL-6水平后对Th17、Treg、IL-17、IL-10水平的影响。结果NMOSD组PBMC细胞添加IL-6共培养后,可见Th17比例及Th17/Treg比值增高(均P<0.05)。添加IL-6阻滞剂共培养后,IL-10水平下降,Treg表达增加,Th17/Treg比值下降(均P<0.05)。结论NMOSD患者PBMC中的外源性IL-6可以上调Th17比例而导致Th17/Treg比值失衡;但外源性IL-6受体阻滞剂可以升高IL-10水平,通过增加Treg比例恢复Th17/Treg比值平衡。

重组IL-12表达载体构建及对妊娠期哮喘小鼠气道炎症的调节与免疫应答影响

目的:构建携带IL-12重组基因的真核表达载体,探讨其对妊娠期哮喘小鼠气道炎症的免疫调节作用及其可能机制。方法:PCR扩增mIL-12基因cDNA,利用DNA重组技术将线性化片段定向插入载体pcDNA3.1(+)质粒中,经酶切和测序鉴定,通过脂质体介导瞬时转染P815细胞,观察荧光蛋白在细胞中的表达和定位。以鸡卵清蛋白(OVA)致敏和激发建立妊娠期哮喘小鼠模型,通过气道内灌注:妊娠期哮喘(AP)+pcDNA3.1(+)-mIL-12组(AP1组)、单纯哮喘(ANP)+pcD-NA3.1(+)-mIL-12组(ANP1组)给予50μl pcDNA3.1(+)-mIL-12/脂质体混合液;AP+pcDNA3.1(+)组(AP2组)、ANP+pcDNA3.1(+)组(ANP2组)给予50μl pcDNA3.1(+)/脂质体混合液;单纯妊娠组(HP组)、阴性对照组(HNP组)给予50μlPBS。于末次激发24小时后,观察肺泡灌洗液(BALF)炎性细胞计数及肺组织HE染色以评价小鼠气道炎症程度;RT-PCR、Western blot鉴定小鼠肺组织匀浆中IL-12蛋白及mRNA表达;流式细胞术检测小鼠脾细胞IL-17+及IFN-γ+分泌水平;ELISA测定小鼠外周血上清中细胞因子含量变化。结果:成功构建重组pcDNA3.1(+)-mIL-12真核表达载体,并在P815细胞中获得高效表达。与HP、HNP组相比,AP1、ANP1组BALF中白细胞总数及Eos,Neu,Lym占细胞总数百分比均显著低于AP2、ANP2组,但高于HP和HNP组,AP1与ANP1组间尤以AP1组降低显著(P<0.05),且肺组织炎症细胞浸润明显减轻,炎症反应明显轻微。肺组织标本中,AP1、ANP1组IL-12蛋白含量及mRNA表达水平在重组质粒干预后显著高于AP2、ANP2组。脾组织标本中AP1、ANP1组IFN-γ+含量明显升高,而CD4+IL-17+明显降低(P<0.05);IFN-γ+与CD4+IL-17+比例高于AP2、ANP2组(P<0.05);此变化趋势AP1组比ANP1组更为明显(P<0.05);HP组IFN-γ+及IL-17+含量变化与HNP组组间差异不显著。外周血上清中细胞因子检测结果 AP1、ANP1组IFN-γ明显升高,IL-4、IL-17显著降低(P<0.05)。结论:构建的pcD-NA3.1(+)-mIL-12真核表达载体能够在明显改善妊娠期哮喘小鼠气道炎症反应的同时上调IFN-γ表达,使Th2、Th17型细胞分化和增殖功能受抑,证实IL-12表达上调参与了妊娠期哮喘的发生发展。