糖皮质激素对口腔扁平苔藓辅助性T细胞平衡的影响

目的 明确口腔扁平苔藓 (OLP)患者的Th1 /Th2免疫应答模式,探讨糖皮质激素对OLP患者辅助性T细胞平衡的影响。方法 密度梯度离心法分离OLP患者和对照组外周血单个核细胞,分别用植物血凝素(PHA)和地塞米松刺激OLP患者外周血单个核细胞,采用酶联免疫吸附法,检测培养上清液中干扰素γ(IFN γ)和白细胞介素 4(IL 4)的含量;应用半定量逆转录聚合酶链反应技术,检测培养细胞中IFN γ和IL 4mRNA的表达水平。结果 外周血单个核细胞经PHA诱导培养,OLP患者组IFN γ的水平低于健康对照组 (P<0 05),IL 4的水平高于对照组,但差异无统计学意义(P>0 05),IFN γ/IL 4的比值低于对照组 (P<0 05 )。地塞米松可抑制IFN γ和IL 4的水平(P<0 01),且对IFN γ的抑制作用较IL 4更为显著。结论 OLP患者存在Th1 /Th2的平衡失调,为Th2占优势的免疫应答,糖皮质激素对OLP的Th1 /Th2细胞因子均有抑制作用。

T-bet重组腺病毒调节哮喘小鼠辅助性T细胞1型/2型免疫平衡

目的研究静脉注射T-bet重组腺病毒(AdT-bet)对小鼠哮喘模型过敏性气道炎症及辅助性T细胞1型/2型(Th1/Th2)免疫失衡的影响。方法随机将36只C57BL/6小鼠分为AdT-bet治疗(A)组、模型对照(B)组、正常对照(C)组。以卵蛋白、氢氧化铝免疫建立哮喘模型,A组激发前尾静脉注射1×10~8 pfu/100μL的AdT-bet,各组激发后进行肺泡灌洗分析细胞组分,分离肺T淋巴细胞测定细胞因子分泌水平,以流式细胞仪检测CD3^+、CD4^+T细胞比例及表达γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素(IL)-4、IL-5的比例,比较各组肺组织学改变。结果A组与B组相比:①明显抑制抗原激发后气道内嗜酸性粒细胞的浸润(0.004±0.003比0.221±0.067,P<0.01);②明显抑制肺T淋巴细胞产生IL-4[(22±12)pg/mL比(170±28)pg/mL]、IL-5[(16±13)pg/mL比(330±30)pg/mL],增加了IFN-γ[(2100±360)pg/mL比(60±50)pg/mL]的产生,差异均有统计学意义(P值均<0.01);③肺T淋巴细胞CD4^+IFN-γ%及IFN-γ^+/IL-4^+明显升高(P值均<0.01),而CD4^+IL-4^+%明显下降(P<0.01);④明显抑制哮喘鼠气道内及肺泡内的过敏性炎症反应。结论激发前静脉应用AdT-bet对哮喘小鼠过敏性气道炎症有明显的防治作用,其机制可能与表达的T-bet上调Th1/Th2比值,从而调整了免疫平衡有关。

虾制品致敏性诱发豚鼠相关细胞因子及Th1/Th2细胞平衡的变化

以消减致敏性南美白对虾的虾仁、虾肉和虾蛋白为样品,以pH 7.5的磷酸盐缓冲液为阴性对照,未处理的虾蛋白为阳性对照,建立豚鼠过敏模型,研究过敏豚鼠血清中相关细胞因子与食物过敏的相关性,并推断食物过敏对辅助性T(type 1/type 2 T-helper, Th1/Th2)细胞平衡的影响。收集过敏豚鼠的血清,采用酶联免疫吸附测定法检测血清中免疫球蛋白E(immunoglobulin E,IgE)、组胺(histamine,HIS)、相关细胞因子(白细胞介素(interleukin,IL)-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)质量浓度。结果表明,用未处理的虾蛋白致敏豚鼠,用致敏性消减程度不同的虾制品(虾蛋白、虾肉、虾仁)提取的蛋白激发,消减致敏性的虾蛋白、虾肉和虾仁提取蛋白激发后豚鼠血清中IgE含量分别为(3.905±0.120)、(4.813±0.188)、(5.199±0.327)U/mL,HIS质量浓度分别为(16.437±1.120)、(19.656±1.080)、(21.071±1.732)μg/mL,激发后血清中IgE和HIS质量浓度变化与致敏性程度呈正相关,致敏性越低,血清中IgE和HIS质量浓度越低。过敏豚鼠血清中IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-6、TNF-α质量浓度的变化与虾制品致敏程度呈正相关;同时,与IgE和HIS质量浓度变化规律具有一致性;血清中IL-10质量浓度变化与致敏性程度呈负相关;因此,这些细胞因子与食物过敏具有很好的相关性。过敏血清中IFN-γ没有呈现规律性变化,但IFN-γ/IL-4随着致敏性的增强而减小。因此,推测虾制品激发过敏豚鼠的Th1/Th2细胞平衡向Th2细胞偏移。

SPK1基因转染脂肪间充质干细胞对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠的治疗效果及对辅助性T细胞17/调节性T细胞平衡的影响

目的考察SPK1基因转染脂肪间充质干细胞(ADMSC)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠的治疗效果及对辅助性T细胞17/调节性T细胞(Th17/Treg)平衡的影响。方法采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55对小鼠进行EAE诱导,将44只小鼠随机分为4组:空白对照组(NC组)、模型组(EAE组)、ADMSC组和ADMSC-鞘氨醇激酶1(SPK1)组。在免疫后40 d时,对小鼠进行脑与脊髓的病理学观察、脑组织Th17/Treg相关炎症指标检测、脑和脊髓组织中白细胞介素17和叉头框蛋白P3蛋白表达检测以及脾脏免疫细胞的流式细胞术分析。结果免疫后40 d时,EAE组小鼠脑和脊髓组织发生严重炎性细胞浸润髓鞘脱失严重,ADMSC组与ADMSC-SPK1组脱髓鞘和轴突损伤得到改善;与EAE组比较,ADMSC组和ADMSC-SPK1组的脑组织IL-17A(Z=1.021,P=0.017;Z=1.193,P=0.009)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)(Z=2.540,P=0.004;Z=3.005,P=0.006),与ADMSC组比较,ADMSC-SPK1组的脑组织IL-17A与TNF-α水平显著降低(Z=1.223,P=0.011;Z=2.364,P=0.010);小鼠脑和脊髓组织中IL-17A在ADMSC组的表达水平显著降低(t=10.323,P=0.013;t=7.422,P=0.008),且ADMSC-SPK1组显著低于ADMSC组(t=14.244,P=0.017;t=16.865,P=0.006);Foxp3在ADMSC组的表达水平显著升高(t=14.544,P=0.008;t=9.420,P=0.002),且ADMSC-SPK1组显著高于ADMSC组(t=9.654,P=0.005;t=11.535,P=0.009);ADMSC-SPK1组小鼠脾脏中的IL-17+IFN-γ+T细胞比例降低,CD25+Foxp3+Treg细胞比例升高。结论SPK1转染ADMSC对EAE小鼠具有理想的治疗效果,且该效果优于未经SPK1转染的ADMSC,其机制可能与ADMSC-SPK1能显著降低EAE小鼠Th17/Treg细胞比率并减少相关炎症细胞因子的释放有关。

BAFF调节免疫性血小板减少症模型小鼠的Th17/Treg平衡的研究

目的:探讨B细胞激活因子(BAFF)对免疫性血小板减少症模型小鼠体内辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的调节作用和潜在机制。方法:制备豚鼠抗小鼠血小板抗血清(GP-APS),并将150只无特定病原级别的成年雄性BALB/c小鼠(7~8周龄)随机分为5组,每组30只。分别为对照组(空白对照)和ITP组(GP-APS诱导),ITP+rhBAFF组(ITP组联合静脉注射50μg/kg/50μL重组人BAFF蛋白),并在ITP+rhBAFF组处理的基础上分别联合Notch1的抑制剂(DAPT)或PI3K/Akt的抑制剂Polygalacin D(PGD),设立ITP+rhBAFF+DAPT组和ITP+rhBAFF+PGD组,除对照组和ITP组外,均为静脉注射给药,DAPT注射剂量100μg/kg;PGD注射剂量25μg/kg,静脉注射总体积均为50μL,每日1次。1周后取小鼠1mL外周血并分离血清和单个核细胞。用免疫荧光化学检测单个核细胞中BAFF和Notch1的定位。对外周血中的血小板进行计数。酶联免疫吸附法(ELSIA)检测小鼠外周血血清BAFF的水平。Western blot检测小鼠外周血单个核细胞中PI3K、AKT、Notch1、p-Akt(Thr308)、p-Akt(Ser473)的蛋白表达。流式细胞术检测单个核细胞中Th17/Treg的比例变化。结果:ITP小鼠外周血单个核细胞的BAFF与Notch1共定位在细胞膜。与对照组比较,ITP组BAFF、Notch1、p-Akt(Thr308)、p-Akt(Ser473)的表达增加,血小板数目和Treg比例减少,Th17比例增加(P<0.05)。与ITP组比较,ITP+rhBAFF组BAFF、Notch1、p-Akt(Thr308)、p-Akt(Ser473)的表达增加,血小板数目和Treg比例减少,Th17比例增加(P<0.05)。与ITP+rhBAFF组比较,ITP+rhBAFF+DAPT组BAFF、Notch1、p-Akt(Thr308)、p-Akt(Ser473)的表达降低,血小板数目和Treg比例增加,Th17比例降低(P<0.05)。与ITP+rhBAFF组比较,ITP+rhBAFF+PGD组BAFF、Notch1、p-Akt(Thr308)、p-Akt(Ser473)的表达降低,血小板数目和Treg比例增加,Th17比例降低(P<0.05)。结论:BAFF通过激活Notch1/PI3K/Akt信号通路促进免疫性血小板减少症模型小鼠体内Th17比例增加及Treg比例减少。

开玄泄浊方对阳虚型银屑病大鼠外周血Th细胞平衡及相关细胞因子表达的影响

目的:探究开玄泄浊方对阳虚型银屑病大鼠外周血辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡及相关细胞因子表达的影响。方法:将72只大鼠随机分为空白对照组(16只)、模型组(56只)。所有大鼠背部脱毛后,空白对照组大鼠外涂凡士林,模型组大鼠予5%咪喹莫特乳膏外用+大黄灌胃建立阳虚型银屑病SD大鼠模型。将50只造模成功大鼠随机分为模型对照组、雷公藤多苷片组和开玄泄浊方低、中、高剂量组,每组10只。各组大鼠予以相应药物灌胃干预,1次/d,连续7 d。观察并记录大鼠背部皮损银屑病面积与严重性指数(PASI)评分,流式细胞仪检测外周血Th17/Treg比例,ELISA法检测白介素-17(IL-17)、转化生长因子β(TGF-β)水平,并取背部皮肤行病理组织切片观察。结果:与模型对照组比较,雷公藤多苷片组和开玄泄浊方低、中、高剂量组PASI评分、Th17/Treg比例、IL-17水平下降(P<0.05),TGF-β水平上升,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:开玄泄浊方治疗阳虚型银屑病的机制可能与调节Th17/Treg比例及相关因子的表达有关。

脂溶性维生素对支原体肺炎患儿促炎/抗炎平衡及Treg/Th17细胞平衡的影响

目的探讨脂溶性维生素对支原体肺炎(MPP)患儿促炎/抗炎平衡及调节性T细胞/辅助性T细胞(Treg/Th17)平衡的影响。方法选择2016年5月至2019年6月本院收治的126例支原体肺炎患儿作为研究对象,随机分为两组,各63例。对照组采用对症治疗,基于此,观察组加用脂溶性维生素治疗,比较两组促炎/抗炎平衡及Treg/Th17细胞平衡。结果治疗后,两组IFN G-γ、IL-1β水平均降低,且观察组低于对照组,两组IL-10、TGF-β、Treg/Th17水平水平均升高,且观察组高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论支原体肺炎患儿采用脂溶性维生素治疗,可有效调控患儿促炎/抗炎平衡及Treg/Th17细胞平衡,利于患儿转归。

基于Notch信号通路探讨芪蛭皱肺颗粒对慢性阻塞性肺疾病大鼠Th1/Th2免疫平衡的调节机制

目的探讨果蝇双翅边缘缺刻同源基因(Notch)信号通路在慢性阻塞性肺疾病(COPD)辅助性T细胞1(Helper T cells 1,Th1)和辅助性T细胞2(Helper T cells 2,Th2)失衡中的作用及芪蛭皱肺颗粒的干预机制。方法70只Wistar大鼠随机挑选10只作为空白对照组,其余大鼠均采用香烟烟雾(CS)联合气管滴注脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)法建立COPD模型,空白对照组及造模组各随机挑选3只大鼠验证造模是否成功。造模结束进行灌胃给药干预,造模组大鼠随机分为模型对照组、阳性对照组(67.5μg·kg^(-1))及芪蛭皱肺颗粒高中低剂量组(3.24、1.62、0.81 g·kg^(-1)),分别给予生理盐水、醋酸地塞米松混悬液、芪蛭皱肺高、中、低剂量混悬液进行灌胃干预,空白对照组同模型对照组,灌胃等体积生理盐水。经28天造模及28天治疗后,采用动物肺功能测试系统检测吸气峰流速(Peak Inspiratory Flow,PIF)和呼气峰流速(Peak Expiratory Flow,PEF),处死大鼠提取肺脏、脾脏、血清及支气管肺泡灌洗液(BALF),苏木素-伊红(HE)染色评价肺组织病理变化,酶联免疫吸附实验法(ELISA)测定血清及BALF中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,流式细胞仪检测脾脏Th1/Th2细胞水平,免疫组织化学法(Immunohistochemistry,IHC)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肺组织Notch1、Hes家族发状分裂相关增强子1(Hes1)、Hey家族发状分裂相关增强子1(Hey1)蛋白水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR,RT-PCR)检测肺组织Notch1、Hes1、Hey1基因表达水平。结果与空白对照组比较,模型对照组大鼠肺功能显著降低(P<0.05),肺组织出现炎性细胞浸润、支气管结构破坏等病变,血清及BALF中TNF-α含量显著升高(P<0.05),脾Th1细胞百分比显著降低(P<0.05),Th2细胞百分比显著升高(P<0.05),肺组织Notch1、Hes1、Hey1蛋白及mRNA表达显著升高(P<0.05),差异均具有统计学意义;与模型对照组比较,各给药组大鼠肺功能显著升高(P<0.05),肺组织病理损伤均有所减轻,血清及BALF中TNF-α含量显著降低(P<0.05),脾Th1细胞百分比显著升高(P<0.05),Th2细胞百分比显著降低(P<0.05),肺组织Notch1、Hes1、Hey1蛋白及mRNA表达显著降低(P<0.05),差异均具有统计学意义。结论芪蛭皱肺颗粒通过抑制Notch信号通路调节Th1/Th2平衡,从而改善COPD大鼠肺功能及病理损伤,影响其免疫功能。

妊娠糖尿病患者血清中FPR2的表达情况与Th1/Th2细胞平衡的相关性研究

目的探讨妊娠糖尿病(GDM)患者血清中甲酰肽受体2(FPR2)的表达情况与辅助性T细胞1(Th1)/辅助性T细胞2(Th2)平衡的相关性。方法采用回顾性研究,将2020年1月至2022年1月于北京市顺义区妇幼保健院进行产检并住院分娩的52例GDM孕妇设为研究组,并选择同期在北京市顺义区妇幼保健院产检和分娩的健康孕妇60名作为对照组。采用实时荧光定量PCR检测两组孕妇血清中FPR2的相对表达水平;采用流式细胞术检测两组孕妇血清中Th1/Th2细胞比例;采用酶联免疫吸附试验检测两组孕妇血清中干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-10水平;采用Pearson法分析GDM患者血清中FPR2的表达水平与Th1/Th2细胞比例之间的相关性。结果研究组患者血清中FPR2、Th1表达水平分别为1.59±0.41、(9.59±2.56)%,均明显高于对照组[0.97±0.25、(8.61±2.02)%],Th2表达水平为(2.06±0.51)%,明显低于对照组[(3.28±0.88)%],且Th1/Th2细胞比例为5.11±1.02,高于对照组(3.20±0.79),差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组患者血清中IFN-γ、IL-2水平分别为(27.96±5.21)、(16.69±4.02)pg/mL,均明显高于对照组[(20.19±4.59)、(14.12±3.86)pg/mL],而IL-4、IL-10水平分别为(11.46±2.36)、(31.52±6.24)pg/mL,均明显低于对照组[(13.09±3.01)、(38.81±7.16)pg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson法分析结果显示,GDM患者血清中FPR2的表达与Th1/Th2细胞比例之间呈正相关(r=0.373,P<0.05)。结论GDM患者血清中FPR2高表达、Th1/Th2细胞比例升高,两者呈正相关,FPR2可能通过调节Th1/Th2细胞比例影响GDM的发生。

过敏性鼻炎患儿血清miR-124-3p和GATA3表达水平与疾病严重程度、Th1/Th2平衡的关系

目的探讨过敏性鼻炎(AR)患儿血清微RNA-124-3p(miR-124-3p)、GATA结合蛋白3(GATA3)表达与患儿疾病严重程度、Ⅰ型辅助性T细胞(Th1)/Ⅱ型辅助性T细胞(Th2)平衡的相关性。方法选择2020年6月至2022年4月在江苏省无锡市妇幼保健院(以下简称“我院”)儿童保健耳鼻喉科确诊的AR患儿87例为观察对象(AR组),按症状严重程度分为轻度组53例、中重度组34例,另选取同期在我院健康体检儿童85例为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清miR-124-3p表达水平,流式细胞术检测Th1、Th2细胞比例及Th1/Th2,采用酶联免疫吸附法检测血清γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素12(IL-12)、IL-4、IL-5、IL-10、GATA3水平,Pearson法分析AR患儿血清miR-124-3p表达与GATA3相关性,mi R-124-3p、GATA3与Th1/Th2及细胞因子相关性。结果AR组血清mi R-124-3p表达水平低于对照组,GATA3水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);中重度组血清mi R-124-3p表达水平低于轻度组,GATA3水平高于轻度组,差异有统计学意义(P<0.05)。AR组Th1细胞比例和Th1/Th2比值低于对照组,Th2细胞比例高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。AR组血清IFN-γ、IL-12水平低于对照组,IL-4、IL-5、IL-10水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,AR患儿血清miR-124-3p表达水平与GATA3水平呈负相关(r<0,P<0.05)。miR-124-3p与Th1、Th1/Th2、IFN-γ、IL-12呈正相关(r>0,P<0.05),与Th2、IL-4、IL-5、IL-10呈负相关(r<0,P<0.05);GATA3与Th1、Th1/Th2、IFN-γ、IL-12呈负相关(r<0,P<0.05),与Th2、IL-4、IL-5、IL-10呈正相关(r>0,P<0.05)。结论AR患儿血清mi R-124-3p表达水平降低,GATA3水平升高,与患儿疾病严重程度和Th1/Th2失衡有关。

自身免疫性甲状腺炎患者血浆中Th1/Th2细胞及甲状腺自身抗体水平变化及临床意义

目的探讨辅助性T淋巴细胞分化平衡比(Th1/Th2)及血浆抗甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、促甲状腺激素受体抗体(TRAb)检测应用于自身免疫性甲状腺炎(AIT)诊断及病情评估的临床价值。方法回顾性分析96例AIT患者临床资料,根据其血浆免疫球蛋白G4(IgG4)检测情况分为阳性组(IgG4>1.35 g/L,n=34)与阴性组(IgG4≤1.35 g/L,n=62),并将同期确诊的47例非炎症性甲亢患者纳入对照。比较AIT患者与非炎症性甲亢患者、阳性组与阴性组患者Th1/Th2及血浆TGAb、TPOAb、TRAb水平差异,以受试者工作特征(ROC)曲线,评估上述指标分别或联合诊断AIT效能,分析上述指标与IgG4的相关性。结果AIT患者Th1/Th2及血浆TGAb、TPOAb水平高于非炎症性甲亢患者,血浆TRAb水平低于非炎症性甲亢患者(P<0.05)。Th1/Th2、TGAb、TPOAb、TRAb诊断AIT的cut-off值分别为12.83、228.13 U/ml、503.63 U/ml、33.45 U/L,ROC曲线下面积(AUC)均小于联合诊断(P<0.05),联合诊断灵敏度90.62%,特异度97.87%。两组Th1/Th2、TRAb水平比较差异无统计学意义(P>0.05),阳性组TGAb、TPOAb水平高于阴性组(P<0.05)。AIT患者Th1/Th2、TRAb水平与IgG4水平未见相关性(P>0.05),TGAb、TPOAb水平与IgG4水平呈正相关(P<0.05)。结论Th1/Th2及血浆TGAb、TPOAb、TRAb水平应用于诊断AIT效能较为理想,其中TGAb、TPOAb水平与患者病情进展密切相关,具有较高临床检测价值。

特发性少弱精子症Th1/Th2细胞因子与自身抗体表达水平及临床意义

目的探讨特发性少弱精子症辅助性T淋巴细胞分化平衡比(Th1/Th2)细胞因子与自身抗体表达水平及临床意义。方法选取于我院就诊的特发性少弱精子症患者150例为观察组,根据精子浓度分为,轻、中度组(n=95):精子浓度(5~15)×10^(6)/mL;重度组(n=55):精子浓度(1~5)×10^(6)/mL。另选取同期于我院就诊的精液常规检查结果正常、确定为女方不孕因素的男性80名为健康对照组。比较三组精液中IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-ɑ和IFN-γ水平,观察三组AhCGAb、aAsAb阳性表达率。结果重度组IL-2、TNF-ɑ、IFN-γ、IL-4、IL-6、IL-10水平明显高于轻中度组,轻中度IL-2、TNF-ɑ、IFN-γ、IL-4、IL-6、IL-10水平明显高于对照组(P<0.05)。重度组AhCGAb、AsAb抗体阳性表达率明显高于轻中度组,轻中度组AhCGAb、AsAb抗体阳性表达率明显高于对照组(P<0.05)。结论Th1/Th2细胞因子与自身抗体表达水平与特发性少弱精子症的发生发展具有相关性,是影响男性不育的重要因素。

人巨细胞病毒感染与冠心病患者Treg/Th17平衡及miR-155表达的关系

目的分析人巨细胞病毒(HCMV)感染与冠心病患者外周血调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)平衡及微小RNA-155(miR-155)表达的相关性,探讨HCMV感染在冠心病发生发展中的作用。方法选择2018年1月至2019年1月期间保定市第四中心医院心内科住院部收治的冠心病患者160例,其中急性冠状动脉综合征(ACS)患者84例作为ACS组,稳定型心绞痛(SAP)76例作为SAP组,另选取同期到本院体检的非冠心病者80例作为对照组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清HCMV-IgG、HCMV-IgM及血清白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17(IL-17)、转化生长因子-β(TGF-β)水平;实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)检测血清miR-155表达;流式细胞术检测外周血Th17、Treg亚群比例,并计算Treg/Th17比值;Pearson分析ACS患者血清HCMV-IgM与miR-155、Treg/Th17相关性。结果与对照组比较,SAP组与ACS组HCMV-IgM阳性率及HCMV-IgM水平、HCMV-IgG阳性率及HCMV-IgG水平、Th17比例、IL-17水平升高,血清miR-155、IL-10、TGF-β水平、Treg比例、Treg/Th17比值降低,三组差异均有统计学意义(χ^(2)/F=35.744、38.400、36.526、151.238、114.878、439.705、185.429、384.825、127.762、53.129、533.803,均P<0.05)。与SAP组比较,ACS组HCMV-IgM阳性率及HCMV-IgM水平、Th17比例、IL-17水平升高,血清miR-155、IL-10、TGF-β水平、Treg比例、Treg/Th17比值降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。ACS组HCMV-IgM阳性患者血清miR-155水平、Treg比例、Treg/Th17比值低于HCMV-IgM阴性患者,Th17比例高于HCMV-IgM阴性患者,差异均有统计学意义(t=-9.430、-3.127、-5.005、2.366,均P<0.05);相关性分析显示,ACS患者血清HCMV-IgM与miR-155、Treg/Th17呈负相关(r=-0.647、-0.569,P<0.05)。结论HCMV感染可能参与冠心病的发生发展,与冠心病患者血清中miR-155、Treg/Th17比值有关。

艾灸通过调节滑膜G蛋白偶联受体43和辅助性T细胞17/调节性T细胞平衡改善佐剂性关节炎大鼠滑膜炎性反应

目的:观察艾灸对佐剂性关节炎(AA)大鼠G蛋白偶联受体43(GPR43)和辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的影响,探讨艾灸治疗类风湿关节炎(RA)的部分机制。方法:Wistar大鼠随机分为正常组、模型组和艾灸组,每组8只。采用风、寒、湿环境因素加弗氏完全佐剂注射法复制AA大鼠模型。艾灸组艾灸“肾俞”“足三里”,20 min/次,1次/d,持续21 d。观察各组大鼠关节肿胀度(JSD)、关节炎指数(AI)变化;采用透射电镜和HE染色观察各组大鼠踝关节滑膜细胞结构的改变;Western blot法检测大鼠踝关节滑膜组织中GPR43蛋白表达水平;流式细胞术检测外周血中Treg和Th17的百分比;ELISA法检测血清中白细胞介素-10(IL-10)和生长转化因子-β1(TGF-β1)含量;对滑膜组织GPR43与外周血Treg的表达进行相关性分析。结果:与正常组相比,模型组JSD和AI均升高(P<0.01),滑膜病理和超微结构损伤明显,滑膜组织中GPR43蛋白表达降低(P<0.01),外周血中Treg百分比降低(P<0.01),Th17百分比升高(P<0.01),血清IL-10、TGF-β1含量降低(P<0.01)。与模型组相比,艾灸组的JSD和AI均降低(P<0.01),滑膜病理和超微结构损伤程度降低,滑膜组织中GPR43蛋白表达升高(P<0.05),外周血中Treg百分比升高(P<0.01),Th17百分比降低(P<0.01),血清IL-10、TGF-β1含量升高(P<0.01)。滑膜组织GPR43蛋白相对表达量与外周血Treg百分比呈正相关(r=0.967,P<0.01)。结论:艾灸可显著改善AA大鼠滑膜炎性反应,其作用机制可能与调控GPR43从而恢复Th17/Treg平衡有关。

Treg/Th17在变应性鼻炎发病机制中作用的研究进展

变应性鼻炎(AR)是耳鼻喉科的常见疾病,过去发现Th1/Th2平衡与该疾病密切相关,其下游因子白细胞介素(IL)-4、IL-5和IL-13更是与疾病的发展密切相关。但是随着对人体免疫机制研究的不断深入,发现Th1/Th2平衡不足以完美诠释AR的发病,所以结合Th17/调节性T细胞(Treg)平衡提出了Th1/Th2/Th17/Treg平衡的理论体系,并发现Th17/Treg平衡在AR的免疫调节中有着重要作用。对Th17/Treg平衡在AR疾病发病中的作用进行研究,可完善AR发病的分子机制,为药物治疗分子机制的研究提供参考,本文就Treg/Th17在AR发病机制中的作用进行综述。

中医药调节代谢类疾病Th17/Treg免疫平衡的研究进展

代谢类疾病是肥胖、免疫异常、遗传等多种因素共同作用引起的以碳水化合物、脂质、蛋白质等营养物质代谢异常为特征的疾病,属于重大公共卫生问题之一。代谢类疾病的发病机制未完全明确,近年来认为核心机制之一为慢性系统性微炎症免疫炎症反应,其中调节性T细胞(Treg)以及辅助性T细胞17(Th17)发挥着重要作用,而调节Th17/Treg平衡成为代谢类疾病防治的新靶点。就2型糖尿病(T2DM)、肥胖、非酒精性脂肪肝(NAFLD)3种常见代谢类疾病与Th17/Treg平衡的关系,以及中医药对各病Th17/Treg免疫平衡的影响进行综述,以期为中医药防治代谢类疾病提供新思路。

反复呼吸道感染患儿血清维生素A水平变化及其对Th1/Th2平衡的影响

目的分析反复呼吸道感染(RRTI)患儿血清维生素A水平变化及其对辅助性T细胞1/辅助性T细胞2(Th1/Th2)平衡的影响。方法回顾性选取2017年9月至2019年6月期间在徐州市儿童医院接受治疗的108例RRTI患儿作为研究对象(RRTI组),另选取同期于本院进行体检的健康儿童100例作为健康对照组,采用高效液相色谱法测定两组血清维生素A(>0.3mg/L划分为正常组,≤0.3mg/L划分为不足组)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素6(IL-6)、γ-干扰素(IFN-γ)及Th1/Th2细胞亚群比值;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析维生素A、Th1/Th2对RRTI患儿治疗后无效的预测价值。结果RRTI组血清维生素A水平低于健康对照组,差异有统计学意义(t=12.841,P<0.05);维生素A不足组Th1、Th1/Th2及IFN-γ水平均低于正常组(t值分别为13.653、30.010、53.329,P<0.05),Th2、IL-4及IL-6水平均高于正常组(t值分别为10.406、22.100、35.180,P<0.05);治疗无效组患儿血清维生素A水平和Th1/Th2均低于有效组,差异有统计学意义(t值分别为12.183、18.277,P<0.05);ROC曲线分析结果显示维生素A联合Th1/Th2预测RRTI患儿治疗后无效的曲线下面积为0.965,高于维生素A、Th1/Th2单独预测的0.722、0.862(Z=3.402,P<0.05)。结论RRTI患儿血清维生素A低于正常水平;与维生素A正常患儿相比,维生素A不足患儿的Th1/Th2、IFN-γ水平均较低,IL-4、IL-6水平较高;维生素A和Th1/Th2联合预测RRTI患儿疗效具有一定的价值。

电针刺激上巨虚、天枢对溃疡性结肠炎模型大鼠Th17相关特异性因子及Treg的影响

目的观察电针刺激上巨虚、天枢对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)模型大鼠辅助性T细胞17(T helper cell 17,Th17)相关特异性因子及调节性T细胞(T regulatory cell,Treg)的影响,探讨合募配穴理论指导下电针刺激大肠腑下合穴、募穴治疗UC的作用机制,为特定穴的临床应用提供实验依据。方法50只SD大鼠随机分出10只作为空白组,剩余40只UC模型造模成功的大鼠随机分为模型组、合募配穴组、天枢组和上巨虚组,每组10只。2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid,TNBS)/乙醇法制备UC大鼠模型。合募配穴组予以电针刺激双侧天枢、上巨虚,天枢组予以电针刺激双侧天枢,上巨虚组予以电针刺激双侧上巨虚,每次20 min,每天1次,共10次。观察大鼠一般情况,计算大鼠疾病活动指数(disease active index,DAI);肉眼观察大鼠结肠黏膜损伤情况,评估结肠黏膜损伤指数(colonic mucosa damage index,CMDI),HE染色观察结肠形态学变化;流式细胞术检测大鼠脾脏CD4+T细胞中Treg细胞百分比,荧光定量PCR检测大鼠结肠组织中转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)、维甲酸相关孤儿受体γt(retinoid acid related orphan receptor gamma t,RORγt)、白细胞介素-17A(interleukin-17A,IL-17A)mRNA相对表达量。结果(1)与空白组比较,模型组一般情况不佳,肠黏膜坏死,有明显溃疡面,炎性浸润严重,DAI及CMDI评分显著升高(P<0.05),Treg细胞百分比及TGF-βmRNA相对表达量显著降低(P<0.05),RORγt、IL-17A mRNA相对表达量显著升高(P<0.05);(2)与模型组比较,合募配穴组、天枢组及上巨虚组一般情况明显好转,炎性浸润和结肠黏膜坏死情况明显减轻,DAI及CDMI评分显著降低(P<0.05),Treg细胞百分比及TGF-βmRNA相对表达量显著升高(P<0.05),RORγt、IL-17A mRNA相对表达量显著降低(P<0.05);(3)与天枢组和上巨虚组比较,合募配穴组Treg细胞百分比显著升高(P<0.05),RORγt mRNA相对表达量显著降低(P<0.05)。结论电针刺激大肠合募穴上巨虚、天枢对UC有良好的治疗作用,合募配穴疗效优于单穴疗效,其作用机制可能是通过调节Th17/Treg平衡,降低炎性细胞因子表达,以调控肠黏膜免疫失衡状态,恢复肠黏膜免疫稳态,减轻炎症反应。

兔椎间盘生理屏障损伤后髓核组织辅助性T细胞1／辅助性T细胞2平衡漂移状态的研究

目的探讨兔椎间盘生理屏障损伤后辅助性T细胞1（Thl）／辅助性T细胞2（Th2）平衡漂移状态。方法采用纤维环穿刺构建兔椎间盘退变的动物模型，在术后1、3d、1、3周采集外周静脉血，采用双抗夹心酶联免疫吸附测定（ELISA）方法，分别检测血清中Th1、Th2型细胞因子水平[肿瘤坏死因子（TNF）-α、干扰素（IFN）-1、白细胞介素（IL）-10及IL-4]。结果造模后的1、3d、1、3周兔血清中TNF-α含量分别为（150．531±56．74）、（83．833±37．434）、（90．990±3．554）、（87．950±13．289）ng／L；IFN-γ含量分别为（99．263±18．421）、（125．427±9．156）、（180．368±18．293）、（165．531±12．548）ng/L，明显高于造模前（P〈0．05），术后各个时间点模型组血清中TNF-α与IFN-γ含量高于假手术组与正常组（P〈0．05）。造模后的1、3d、1、3周兔血清中IL-10含量分别为（33．947±3．164）、（27．928±0．493）、（29．992±4．33）、（30．0254-2．339）ng/L；IL4含量分别为（34．517±3．032）、（35．056±1．882）、（35．983±2．369）、（32．549±5．086）ng／L，与术前比较未见明显增高（P〉0．05）。术后各个时间点模型组血清中IL-10与IL-4含量与假手术组及正常组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论生理屏障损伤后椎间盘发生退变的机制与Th1优势状态有关。

黄芪活性成分调控Th17/Treg细胞免疫平衡作用的研究进展

本文综述了黄芪活性成分在调控(辅助性T细胞17/调节性T细胞)Th17/Treg细胞免疫平衡方面的研究进展。黄芪作为一种传统草药,具有广泛的药理活性和临床应用价值。黄芪中的活性成分黄芪多糖(APS)、黄芪甲苷具有显著的免疫调节效果,能够抑制Th17细胞的分化和功能,并增加Treg细胞的数量和功能。通过调节免疫细胞的信号通路、抑制炎症因子的产生以及调节免疫耐受等机制影响Th17/Treg细胞免疫平衡,抑制自身免疫性疾病、过敏性疾病和感染性疾病等存在的过度免疫应激病理过程,减轻炎症反应。因此,黄芪及其制剂、活性成分具有潜力成为治疗感染性炎症疾病、变态反应性疾病、炎症性肠病及自身免疫性疾病的候选药物。然而,仍需进一步深入研究黄芪活性成分的作用机制以及其在临床应用中的安全性和有效性,为黄芪注射液、黄芪颗粒等中成药制剂扩大适应证和临床推广提供理论基础。