基于Logistic回归分析尖锐湿疣患者复发的影响因素及与皮损局部辅助性T细胞1/辅助性T细胞2免疫失衡的相关性

目的探讨尖锐湿疣(CA)患者复发的影响因素及与皮损局部辅助性T细胞1/辅助性T细胞2(Th1/Th2)免疫失衡的相关性。方法选取2019年1月至2020年6月第四军医大学西京皮肤医院收治的224例CA患者作为研究对象。随访1年,统计复发率,并根据复发情况分为复发组和未复发组。比较两组的基线资料、Th1细胞因子[白介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]和Th2细胞因子[白介素-4(IL-4)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)]水平。构建预测复发的Logistic回归模型,分析模型及Th1/Th2细胞因子的预测价值。结果文化程度、IL-2、IFN-γ、TNF-α是复发的保护因素,饮酒、性伴侣数量、性伴侣伴有CA、经常熬夜、IL-4、IL-6、IL-10是复发的危险因素(P<0.05);Logistic回归模型预测复发的曲线下面积(AUC)为0.742;IL-2、IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-6、IL-10联合预测复发的AUC为0.890。结论文化程度、饮酒、性伴侣数量、性伴侣伴有CA、经常熬夜及皮损局部Th1/Th2免疫失衡均与CA复发有关,联合检测皮损局部Th1/Th2细胞因子有望成为量化预测CA复发的手段之一。

靶向调节哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路对心力衰竭小鼠调节性T细胞/辅助性T细胞17免疫自稳失衡的影响

目的:探究哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的拮抗剂雷帕霉素(RAPA)调节mTOR信号通路对心力衰竭(心衰)小鼠调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)免疫自稳失衡的影响。方法:选用34只健康C57BL/6小鼠,采用冠状动脉左前降支结扎术构建心肌梗死后心衰小鼠模型。按随机数字表法将其随机分为假手术组、心衰组、低剂量RAPA组(RAPAL组)、中剂量RAPA组(RAPAM组)、高剂量RAPA组(RAPAH组),除心梗后心衰造模手术过程中死亡4只,最终每组6只小鼠。假手术组采取同样手术操作但不结扎。采用尾静脉给药的方式,RAPAL组、RAPAM组、RAPAH组的给药剂量分别为1、2、4 mg/(kg·d),其余组尾静脉注射等量生理盐水,持续干预4周。超声心动图检测小鼠心脏结构和功能;苏木素-伊红(HE)染色观察心肌组织病理形态;天狼星红染色观察心肌纤维化程度;流式细胞技术检测外周血Treg、Th17水平;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测心肌组织mTOR、磷酸化mTOR(p-mTOR)蛋白表达水平。结果:超声心动图检测发现,与假手术组相比,心衰组左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(LVFS)均显著降低(P均<0.01),左心室舒张末期容积(LVEDD)、左心室收缩末期容积(LVEDS)均显著升高(P均<0.05);RAPAL、RAPAM、RAPAH组LVEF、LVFS均显著高于心衰组(P均<0.05)。RAPAM、RAPAH组LVEDS均显著低于心衰组(P均<0.05)。HE染色、天狼星红染色发现,与假手术组相比,心衰组小鼠的心肌组织排列紊乱、断裂,心肌纤维化。与心衰组相比,RAPAL组、RAPAM组、RAPAH组小鼠的心肌组织排列紊乱、断裂,心肌纤维化等现象有所改善;流式细胞技术、Western blot法检测发现,与假手术组相比,心衰组小鼠外周血Treg百分比降低,Th17细胞百分比升高(P<0.01),Treg/Th17比值降低(P<0.01)、心肌组织p-mTOR蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。与心衰组相比,RAPAL组、RAPAM组、RAPAH组小鼠的外周血Treg百分比均升高(P均<0.01),Th17细胞百分比均降低(P均<0.05),RAPAM组、RAPAH组的Treg/Th17比值均升高(P均<0.01),心肌组织p-mTOR蛋白表达水平均降低(P均<0.01)。结论:靶向抑制mTOR信号具有调节心衰小鼠Treg/Th17免疫自稳失衡,改善心肌纤维化及心功能的作用,其中高剂量RAPA的作用最显著。

核孔蛋白160基因对肾病综合征小鼠肾脏辅助性T细胞17/调节性T细胞免疫平衡的影响

目的探讨核孔蛋白160(NUP160)基因对肾病综合征小鼠肾脏辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)免疫平衡的影响。方法将30只小鼠随机分为空白组(n=10)和造模组(n=20)。造模组小鼠经尾静脉注射阿霉素溶液(7.5 mg·kg-1)制备原发性肾病综合征(PNS)模型,空白组小鼠经尾静脉注射等容积的生理盐水。造模成功后将造模组小鼠随机分为PNS组和NUP160组,每组10只。NUP160组小鼠经尾静脉注射NUP160(10 mg·kg-1),每日1次;PNS组和空白组小鼠经尾静脉注射等量生理盐水,每日1次;3组小鼠均连续干预4周。给药0、2、4周时,应用生化自动检测仪检测小鼠24 h尿蛋白定量(24 h HUPQ);给药结束后,采用酶联免疫吸附试验法检测各组小鼠血清白细胞介素(IL)-17和IL-10水平;苏木精-伊红(HE)染色、过碘酸希夫(PAS)染色、Masson染色法观察各组小鼠肾组织病理学变化;流式细胞术检测各组小鼠肾组织中Th17、Treg细胞比例。结果给药0、2、4周时,PNS组和NUP160组小鼠24 h HUPQ显著高于空白组(P<0.05)。给药0周时,PNS组与NUP160组小鼠24 h HUPQ比较差异无统计学意义(P>0.05);给药2、4周时,NUP160组小鼠24 h HUPQ显著低于PNS组(P<0.05)。与空白组比较,PNS组和NUP160组小鼠血清IL-17水平显著升高,IL-10水平显著降低(P<0.05);与PNS组比较,NUP160组小鼠血清IL-17水平显著降低,IL-10水平显著升高(P<0.05)。空白组小鼠肾组织无明显病理学变化。与空白组相比,PNS组小鼠HE染色发现肾小球细胞排列紊乱,肾小球轻度萎缩,少许炎症细胞浸润,球囊壁轻度增厚,小球囊腔轻度扩张;PAS染色发现系膜出现增生,肾间质可见炎症细胞浸润;Masson染色发现小鼠肾小球基底膜和间质蓝色胶原沉积明显增多,组织纤维化程度显著升高。与PNS组相比,NUP160组小鼠肾组织以上症状均得到明显改善。与空白组比较,PNS组和NUP160组小鼠肾组织中Th17占比、Th17/Treg比值显著增加,Treg占比显著降低(P<0.05);与PNS组比较,NUP160组小鼠肾组织中Th17占比、Th17/Treg比值显著降低,Treg占比显著增加(P<0.05)。结论NUP160可调节PNS小鼠的Th17/Treg免疫平衡,进而发挥改善PNS的作用。

血清自分泌运动因子、甲壳质酶蛋白40与妊娠期肝内胆汁淤积症患者辅助性T细胞17/调节性T细胞失衡和妊娠结局的关系研究

目的探讨血清自分泌运动因子(ATX)、甲壳质酶蛋白40(YKL-40)与妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)患者辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)失衡和妊娠结局的关系。方法选取2017年8月至2022年8月宝鸡市妇幼保健院收治的ICP患者178例作为观察组,根据患者病情严重程度分为轻度组(n=126)和重度组(n=52);且患者根据妊娠结局分为正常妊娠组(n=128)和不良妊娠组(n=50)。另选同期健康孕妇80例作为对照组。检测血清ATX、YKL-40水平并计算Th17/Treg比值。采用Pearson相关性分析血清ATX、YKL-40与Th17/Treg的关系。采用多因素Logistic回归分析ICP患者不良妊娠结局的危险因素。结果重度组ATX、YKL-40、Th17、Th17/Treg高于对照组和轻度组,且轻度组高于对照组(P<0.05);重度组Treg水平低于对照组和轻度组,且轻度组低于对照组(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,ATX、YKL-40与Th17/Treg均呈现显著正相关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,高Th17/Treg、高YKL40、高ATX、高TBA、高TBil为ICP患者不良妊娠结局的独立危险因素(P<0.05)。结论血清ATX、YKL-40与ICP患者Th17/Treg失衡相关,高TBil、高TBA、高ATX、高YKL40、高Th17/Treg为ICP患者不良妊娠结局的独立危险因素。

辅助性T细胞1/辅助性T细胞2标志性细胞因子与晚期肺腺癌化疗近远期疗效的关联性分析

目的分析辅助性T细胞(TH)1/TH2标志性细胞因子与晚期肺腺癌化疗近远期疗效的关联性。方法选取2021年1月至2023年12月江苏省徐州市中医院收治的82例晚期肺腺癌患者为研究对象,均给予培美曲塞+顺铂或卡铂治疗,21 d为1个周期,连续治疗3个周期。比较不同近期临床疗效者化疗前及化疗3个周期后血清γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-10变化及不良反应发生情况,并记录化疗后2年生存与死亡者化疗3个周期后血清IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10差异。结果82例晚期肺腺癌患者均完成3个周期的化疗,其中完全缓解(CR)1例,部分缓解(PR)34例,疾病稳定(SD)28例,疾病进展(PD)19例,晚期肺腺癌患者化疗3个周期后血清IFN-γ、IL-2均高于本组化疗前,血清IL-4、IL-10均低于本组化疗前,差异有统计学意义(P<0.05);CR+PR患者化疗后血清IFN-γ、IL-2高于SD+PD者,差异有统计学意义(P<0.05),血清IL-4、IL-10低于SD+PD者,差异有统计学意义(P<0.05)。CR+PR患者与SD+PD患者的化疗期间不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。42例获得随访终点的晚期肺腺癌患者中死亡8例(19.05%),生存34例(80.95%),化疗后2年死亡者化疗3个周期血清IFN-γ、IL-2低于生存者,差异有统计学意义(P<0.05),血清IL-4、IL-10高于生存者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论TH1/TH2平衡不仅与晚期肺腺癌患者化疗近期疗效有关,也与患者远期预后生存情况有关。

衣康酸二甲酯对树突状细胞分泌促炎因子以及实验性自身免疫性葡萄膜炎小鼠辅助性T细胞17的影响

目的探究衣康酸二甲酯(DMI)对树突状细胞(DCs)分泌促炎因子的作用,并初步研究其对实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)小鼠光感受器间维生素A类结合蛋白1-20(IRBP_(1-20))特异性辅助性T细胞17(Th17)的影响。方法分离C57BL/6J小鼠双侧股骨和胫骨得到骨髓细胞,利用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素(IL)-4将其定向诱导分化为骨髓来源的DCs。诱导分化6 d,将细胞分为DMI组和PBS组,分别用250μmol·L^(-1)DMI及等量的磷酸盐缓冲液(PBS)预处理3 h后,每组加入100μg·L^(-1)脂多糖(LPS)刺激24 h。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测两组DCs中促炎因子IL-6、IL-1β和IL-23 mRNA相对表达量。采用IRBP_(1-20)、弗氏不完全佐剂及结核分枝杆菌H37RA主动免疫小鼠构建EAU模型,免疫后13 d,将分离的EAU小鼠脾脏及淋巴结T细胞与PBS或DMI处理的DCs在含有IRBP_(1-20)的培养基中共培养,并向Th17方向极化。流式细胞仪检测共培养细胞中Th17细胞比例。ELISA检测共培养上清液中IL-17水平。qRT-PCR检测共培养细胞中维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)、IL-17、IL-23R和GM-CSF mRNA相对表达量。结果qRT-PCR检测结果显示,DMI组DCs中IL-6、IL-1β和IL-23 mRNA相对表达量均明显低于PBS组,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。流式细胞仪检测结果显示,DMI组共培养细胞中Th17细胞比例明显低于PBS组,差异有统计学意义(P<0.05)。ELISA检测结果显示,DMI组共培养上清液中IL-17水平明显低于PBS组,差异有统计学意义(P<0.05)。DMI组共培养细胞中IL-17、RORγt、IL-23R和GM-CSF mRNA相对表达量均明显低于PBS组,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论DMI能够抑制DCs中促炎因子IL-6、IL-1β和IL-23的表达,进而负向调控IRBP_(1-20)特异性Th17细胞反应。

香菇多糖对哮喘大鼠模型气管炎性反应及辅助性T淋巴细胞1/辅助性T淋巴细胞2免疫应答失衡的调节

目的研究哮喘大鼠模型辅助性T淋巴细胞(Th)1/Th2免疫应答失衡及香菇多糖(LNT)对哮喘气管炎性反应及Th1/Th2失衡影响。方法雄性SD大鼠30只随机分为健康对照组、哮喘组和LNT组。以卵清清蛋白(OVA)致敏激发法复制大鼠哮喘模型。对支气管肺泡灌洗液(BALF)进行嗜酸性粒细胞(Eos)计数和分类计数;应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(Sandwich ELISA)法测定BALF中IL-4和γ干扰素(IFN-γ)水平变化。结果1.哮喘组BALF中Eos绝对值和Eos占细胞总数百分比(Eos%)均高于对照组(t=21.94,12.81 Pa<0.01),LNT组上述指标均低于哮喘组(t=17.26,8.55 Pa<0.01);2.BALF中IL-4水平哮喘组显著高于对照组(t=8.04 P<0.01),LNT组显著低于哮喘组(t=6.25 P<0.01);而IFN-γ水平哮喘组显著低于对照组(t=10.82 P<0.01),LNT组显著高于哮喘组(t=11.63 P<0.01)。结论LNT下调IL-4表达水平,上调IFN-γ水平,可能为其抑制哮喘呼吸道炎性反应的重要作用机制之一。

克拉霉素对铜绿假单胞菌慢性肺部感染小鼠辅助性T淋巴细胞1型/辅助性T淋巴细胞2型免疫平衡的调节作用

目的探讨克拉霉素对铜绿假单胞菌(PA)慢性肺部感染小鼠肺组织辅助型T淋巴细胞(Th)1/Th2免疫平衡的调节作用。方法将54只小鼠随机分入克拉霉素组、0.9%氯化钠溶液组和对照组。克拉霉素组和0.9%氯化钠溶液组通过小鼠气道接种由包裹PA的琼脂糖珠方法建立的PA慢性肺部感染模型,自建模后第7天起分别给予克拉霉素和0.9%氯化钠溶液治疗,对照组小鼠经气道接种无菌琼脂糖珠给予0.9%氯化钠溶液。分别于建模后第7、10、14天处死小鼠。标本进行肺组织细菌培养、病理学检查、支气管肺泡灌洗液(BALF)中γ-干扰素(IFN-γ)/白细胞介素(IL)-4水平测定和肺组织转录因子T-betmRNA/GATA-3mRNA表达水平分析。结果克拉霉素组小鼠在治疗后慢性肺部感染的症状明显改善。经气道接种后第7天,0.9%氯化钠溶液组和克拉霉素组BALF中IFN-γ、IL-4水平均显著高于对照组(P值均<0.05)。气道接种后第14天,克拉霉素组的IFN-γ水平显著低于0.9%氯化钠溶液组(P<0.05)。气道接种后第10、14天,克拉霉素组BALF中IL-4水平均显著高于0.9%氯化钠溶液组和对照组同时间点(P值均<0.05),而IFN-γ/IL-4比值均显著低于0.9%氯化钠溶液组同时间点(P值均<0.05)。气道接种后第7、10天,克拉霉素组与0.9%氯化钠溶液组的Th1、Th2细胞转录因子T-betmRNA、GATA-3mRNA表达水平相近,均显著高于对照组(P值均<0.05)。气道接种后第14天,克拉霉素组T-betmRNA表达水平、T-betmRNA/GATA-3mRNA比值均显著低于0.9%氯化钠溶液组(P值均<0.05)。结论在PA慢性肺部感染初期采用克拉霉素治疗可使小鼠肺组织的Th1/Th2平衡向Th2偏移,有利于缓解气道炎症。

结直肠癌患者血清总蛋白、白蛋白、血红蛋白与Th1/Th2免疫平衡及调节性T细胞、辅助性T细胞17相关性分析

目的探究结直肠癌患者血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、血红蛋白(Hb)与其辅助性T细胞(Th)1/Th2免疫平衡及Treg、Th17相关性。方法使用主观全面评定量表中营养状态评分对2018年12月至2021年10月河北北方学院附属第一医院收治的结直肠癌患者500例进行营养评估,根据患者营养评估结果随机抽取其中营养状态优者162例,营养状态良者161例,营养状态差者177例。使用简单随机抽样法,选取营养状态优组(40例)、轻中度营养不良组(40例)、重度营养不良组(40例)。观察不同组别患者营养指标,Th1/Th2、Treg/Th17免疫平衡相关指标并进行相关性分析。结果营养状态优组TP、ALB、Hb、白细胞介素(IL)-2、γ-干扰素、肿瘤坏死因子-α、Th1细胞表达、Th1/Th2显著高于轻中度营养不良组及重度营养不良组(P<0.05),轻中度营养不良组显著高于重度营养不良组(P<0.05);营养状态优组运铁蛋白(TF)、IL-6、IL-10、IL-5、Th2细胞表达低于轻中度营养不良组及重度营养不良组(P<0.05),轻中度营养不良组显著低于重度营养不良组(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,TP与患者IL-2、TNF-α水平及Th1细胞表达、Th1/Th2呈正相关(r=0.500、0.471、0.413、0.332,P<0.05),与IL-6、IL-10、IL-5水平及Th2、Treg、Th17细胞表达呈负相关(r=-0.443、-0.442、-0.396、-0.213、-0.422、-0.419,P<0.05);ALB与患者IL-2、IFN-γ、TNF-α水平及Th1细胞表达、Th1/Th2呈正相关(r=0.493、0.338、0.393、0.336、0.321,P<0.05),与IL-6、IL-10、IL-5水平及Th2、Treg、Th17细胞表达呈负相关(r=-0.360、-0.313、-0.269、-0.231、-0.369、-0.306,P<0.05);TF与患者IL-6、IL-10、IL-5水平及TH2、Treg、Th17细胞表达呈正相关(r=0.577、0.490、0.345、0.394、0.507、0.490,P<0.05),与IL-2、IFN-γ、TNF-α水平及Th1细胞表达、Th1/Th2呈负相关(r=-0.665、-0.401、-0.590、-0.540、-0.432,P<0.05);Hb与患者IL-2、TNF-α水平及Th1细胞表达呈正相关(r=0.280、0.392、0.194,P<0.05),与IL-6、IL-10、IL-5水平及Th2、Treg、Th17细胞表达呈负相关(r=-0.284、-0.188、-0.308、-0.210、-0.266、-0.327,P<0.05)。结论结直肠癌患者营养学指标与其Th1/Th2免疫平衡及Treg、Th17相关性具有相关性,随着结直肠癌患者营养学指标变化会引起其Th1/Th2免疫平衡及Treg、Th17表达水平改变,营养状态较差患者Th1/Th2免疫平衡向Th2漂移,Treg、Th17升高,抗肿瘤免疫能力减弱。

循环滤泡型辅助性T淋巴细胞及IL-21在自身免疫性肝炎中的初步研究

目的检测外周血滤泡型辅助性T淋巴细胞百分率(Tfh)及细胞上CCR7、PD-1、IL-21R等分子的表达水平,血清IL-21的表达水平,为进一步研究Tfh细胞及其相关分子在自身免疫性肝炎发病机制中的作用提供实验依据。方法收集20例自身免疫性肝炎患者与20例健康志愿者外周抗凝血,流式细胞仪检测循环Tfh细胞百分率与细胞膜上CCR7,PD-1,IL-21R等分子的表达水平,并进一步分析CCR7+Tfh亚型细胞上PD-1、IL-21R等分子的表达水平,同时ELISA检测外周血血清IL-21的水平;统计分析健康对照与自身免疫性肝炎患者的外周血Tfh细胞百分率、细胞膜上PD-1与IL-21R分子表达水平,血清IL-21表达水平的差异。结果 1)循环Tfh细胞百分率在健康对照(4.793%±1.5609%)与自免肝患者(8.915%±3.235%)具有显著性差别;循环Tfh细胞表达的PD-1分子(健康对照:91.173%±5.032%,自免肝患者:5.177%±3.267%)与IL-21R(健康对照97.625%±1.137%,自免肝患者27.800%±7.918%)具有显著性差别;2)外周血血清IL-21水平[健康对照(:444.75±75.05)pg/ml,自免肝患者(:862.80±109.83)pg/ml]也具有显著性差别;3)自身免疫性肝炎患者循环Tfh细胞百分率与血清GGT、ALP呈正相关与细胞上的PD-1表达水平呈负相关,后者与血清TB呈正相关。结论 Tfh细胞及其表达的相关分子(PD-1,IL-21R)在健康人与自免肝患者的表达水平是不同的,可能参与介导了自身免疫性肝炎的发生与发展。

T-bet重组腺病毒调节哮喘小鼠辅助性T细胞1型/2型免疫平衡

目的研究静脉注射T-bet重组腺病毒(AdT-bet)对小鼠哮喘模型过敏性气道炎症及辅助性T细胞1型/2型(Th1/Th2)免疫失衡的影响。方法随机将36只C57BL/6小鼠分为AdT-bet治疗(A)组、模型对照(B)组、正常对照(C)组。以卵蛋白、氢氧化铝免疫建立哮喘模型,A组激发前尾静脉注射1×10~8 pfu/100μL的AdT-bet,各组激发后进行肺泡灌洗分析细胞组分,分离肺T淋巴细胞测定细胞因子分泌水平,以流式细胞仪检测CD3^+、CD4^+T细胞比例及表达γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素(IL)-4、IL-5的比例,比较各组肺组织学改变。结果A组与B组相比:①明显抑制抗原激发后气道内嗜酸性粒细胞的浸润(0.004±0.003比0.221±0.067,P<0.01);②明显抑制肺T淋巴细胞产生IL-4[(22±12)pg/mL比(170±28)pg/mL]、IL-5[(16±13)pg/mL比(330±30)pg/mL],增加了IFN-γ[(2100±360)pg/mL比(60±50)pg/mL]的产生,差异均有统计学意义(P值均<0.01);③肺T淋巴细胞CD4^+IFN-γ%及IFN-γ^+/IL-4^+明显升高(P值均<0.01),而CD4^+IL-4^+%明显下降(P<0.01);④明显抑制哮喘鼠气道内及肺泡内的过敏性炎症反应。结论激发前静脉应用AdT-bet对哮喘小鼠过敏性气道炎症有明显的防治作用,其机制可能与表达的T-bet上调Th1/Th2比值,从而调整了免疫平衡有关。

免疫性血小板减少症患者外周血中滤泡辅助性T细胞和IL-21的水平及临床意义

目的探讨滤泡辅助性T细胞(Tfh细胞)和IL-21在免疫性血小板减少症(ITP)中的作用。方法采集15例ITP患者及20例健康对照者外周血,用流式细胞术检测外周血单个核细胞(PBMC)中CXCR5+CD4+Tfh细胞的百分率,ELISA法检测血清IL-21水平;用实时荧光定量PCR检测PBMC中IL-21 mRNA的表达。结果 ITP组PBMC中CXCR5+CD4+Tfh细胞比例(17.55±1.015)%显著高于健康人对照组(10.19±0.343)%,差异有统计学意义(t=7.657,P<0.01);ITP组血清中IL-21水平(100.7±3.71)pg/mL显著高于健康人对照组(64.6±0.81)pg/mL,差异有统计学意义(t=10.84,P<0.01),且两者之间存在明显相关性(r=0.689 3,P<0.01)。ITP患者IL-21 mRNA的相对表达量4.319±0.767明显高于健康人对照组1.125±0.052,差异有统计学意义(t=4.813,P<0.01)。结论 ITP患者外周血Tfh细胞比例、IL-21水平及IL-21 mRNA表达均增高,可能在ITP的发病机制中发挥重要作用。

Th17和调节性T细胞在人类免疫缺陷病毒疾病进展中的作用及其调控机制

目的本研究通过观察人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者外周血Th17、Treg细胞及其相关转录因子、细胞因子的表达,进一步揭示Th17、Treg细胞的调控机制及其在HIV感染者疾病进展中的作用。方法选取2019年1月—2019年10月河南省上蔡县HIV感染者80例作为研究组,选取同地区健康人群20例作为对照组。采用流式细胞术检测外周血CD4^(+)T、CD8^(+)T及外周血单个核细胞Th17、Treg,酶联免疫吸附试验检测血浆中细胞因子白细胞介素-17(IL-17)、IL-23水平,实时聚合酶链反应检测转录因子ROR-γt及Foxp3 mRNA表达,Pearson法分析Th17、Treg与CD4^(+)T的相关性。结果研究组CD4^(+)T、CD4^(+)T/CD3+T、CD4^(+)T/CD8^(+)T低于对照组(P<0.05),CD8^(+)T和CD8^(+)T/CD3+T高于对照组(P<0.05)。研究组Th17/CD4^(+)T、Th17/Treg低于对照组(P<0.05),Treg/CD4^(+)T高于对照组(P<0.05)。研究组ROR-γtmRNA高于对照组(P<0.05),Foxp3mRNA低于对照组(P<0.05)。研究组IL-17、IL-23水平低于对照组(P<0.05)。Pearson相关性分析结果表示,Th17细胞百分比与CD4^(+)T细胞计数呈正相关(r=0.293,P<0.05),Treg细胞百分比与CD4^(+)T细胞计数呈负相关(r=-0.198,P<0.05)。结论HIV感染能降低Th17细胞、升高Treg细胞,破坏机体免疫平衡,其机制与调控转录因子ROR-γt、Foxp3及细胞因子IL-17、IL-23表达有关,Th17细胞、Treg细胞与HIV感染者疾病进展密切相关。

Periostin、Notch1、维生素D与自身免疫性甲状腺炎淋巴细胞浸润程度、Treg/Th17的相关性研究

目的探讨骨外膜素(Periostin)、Notch跨膜受体-1(Notch1)m RNA、维生素D(VitD)与自身免疫性甲状腺炎(AIT)淋巴细胞浸润程度、调节性T细胞/辅助性T细胞17(Treg/Th17)的相关性。方法选取2021年7月至2023年12月郑州大学第一附属医院收治的92例AIT患者纳入AIT组,另选取同期50例无甲状腺疾病的健康人群纳入对照组。比较两组受检者的淋巴细胞浸润程度及抗体水平,采用Spearman、Pearson相关系数分析淋巴细胞浸润程度、Treg/Th17与甲状腺功能、抗体水平的相关性,比较两组受检者的Periostin、Notch1 m RNA、VitD及Treg/Th17,采用Pearson相关系数分析Periostin、Notch1 mRNA、VitD与淋巴细胞浸润程度及Treg/Th17的相关性。结果AIT组患者的CD3^(+)、CD3^(+)CD4^(+)、CD4^(+)CD25^(+)CD127^(-)、TgAb、TPOAb、TRAb水平及甲亢/亚临床甲亢、甲减/亚临床甲减患者占比明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);Pearson相关系数分析结果显示,CD3^(+)(r=0.579、0.602、0.563)、CD3^(+)CD4^(+)(r=0.612、0.637、0.606)、CD~4+CD25^(+)CD127^(-)(r=0.655、0.643、0.687)与TgAb、TPOAb、TRAb呈正相关(P<0.05);AIT组患者的Periostin、Notch1 m RNA分别为(4.27±1.40)μg/L、1.73±0.56,明显高于对照组的(2.86±0.49)μg/L、1.02±0.14,VitD、Treg/Th17分别为(17.82±5.09)ng/mL、2.82±0.97,明显低于对照组的(22.30±3.76)ng/mL、12.36±2.03,差异均有统计学意义(P<0.05);Pearson相关系数分析结果显示,Periostin(r=0.792、0.811、0.737)、Notch1 mRNA(r=0.812、0.775、0.792)与CD3^(+)、CD3^(+)CD4^(+)、CD4^(+)CD25+CD127-呈正相关(P<0.05),VitD(r=-0.687、-0.753、-0.799)与之呈负相关(P<0.05),且Periostin(r=-0.823)、Notch1 m RNA(r=-0.772)与Treg/Th17呈负相关(P<0.05),VitD(r=0.745)与之呈正相关(P<0.05)。结论Periostin、Notch1 mRNA在AIT患者血清中表达上调,VitD表达下调,各指标与AIT淋巴细胞浸润程度及Treg/Th17均具有一定相关性,可为临床判断病情提供参考,并对后续临床治疗具有一定指导价值。

梅毒血清固定患者中NOD样受体蛋白3和Toll样受体4表达与Th1/Th2相关细胞因子的相关性研究

目的探究梅毒血清固定患者中NOD样受体蛋白3(NLRP3)、Toll样受体4(TLR4)表达与辅助性T细胞1/辅助性T细胞2(Th1/Th2)相关细胞因子的相关性。方法选取2021年2月至2022年4月川北医学院附属三台医院收治的197例梅毒患者作为研究对象。将进行驱梅治疗后血清转阴者纳入转阴组(n=88),未进行驱梅治疗者纳入梅毒组(n=45),接受驱梅治疗后血清固定者纳入固定组(n=64)。另选取同期进行体检的健康人作为对照组(n=53)。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测外周血单个核细胞(PBMCs)中NLRP3、TLR4 mRNA相对表达水平;采用酶联免疫吸附试验法检测Th1/Th2相关细胞因子的表达水平;采用Pearson法分析TLR4、NLRP3 mRNA与Th1/Th2相关细胞因子的相关性。结果各组PBMCs中TLR4、NLRP3 mRNA表达水平比较,梅毒组>转阴组>对照组>固定组,差异具有统计学意义(P<0.05);各组白介素(IL)-2、γ干扰素(IFN-γ)水平比较,对照组>转阴组>梅毒组>固定组,差异具有统计学意义(P<0.05);各组IL-1β、IL-4、IL-10及IL-18水平比较,对照组<转阴组<梅毒组<固定组,差异具有统计学意义(P<0.05);梅毒血清固定患者TLR4、NLRP3 mRNA表达与IFN-γ、IL-2呈正相关,与IL-1β、IL-4、IL-10、IL-18呈负相关(P<0.05)。结论梅毒血清固定患者NLRP3、TLR4 mRNA表达水平显著降低,且与Th1/Th2相关细胞因子密切相关。

滤泡辅助性T淋巴细胞在自身免疫性肝炎中的作用机制

自身免疫性肝炎(AIH)是由自身免疫系统攻击肝细胞导致的慢性肝炎,随着病程的延长,可逐渐发展为肝硬化,甚至肝癌。尽管目前对于AIH的认识和治疗已取得很大进展,但其病因和发病机制仍不明确。T淋巴细胞在AIH的发生、发展过程中发挥至关重要的作用,本文聚焦于滤泡辅助性T淋巴细胞,阐述其在AIH机制中的研究进展,以期为AIH的临床治疗提供新的思路和策略。

不同中医证型特应性皮炎患者外周血Th1、Th2、Th17细胞及miR-155表达分析

目的:分析研究不同中医证型特应性皮炎(AD)患者外周血辅助性T细胞1(Th1)、Th2、Th17细胞及微小RNA-155(miR-155)表达。方法:回顾性选取2021年6月~2022年6月我院收治的AD患者作为AD组(n=112),根据不同中医证型将患者分为脾虚湿蕴组(n=46)、湿热内蕴组(n=37)和血虚风燥组(n=29),另选60例本院同期体检健康人群为对照组(n=60)。比较各组外周血Th1、Th2、Th17细胞百分比差异、Th1类细胞因子(IFN-γ)、Th2类细胞因子(IL-4)、Th17类细胞因子(IL-17)及miR-155表达。结果:AD组外周血Th1、IFN-γ水平低于对照组,Th2、Th17、IL-4、IL-17、miR-155表达均高于对照组(P<0.05);不同中医证型的AD患者外周血Th1、IFN-γ水平比较差异无统计学意义(P>0.05);不同中医证型的Th2、Th17、IL-4、IL-17表达水平相比,湿热内蕴组>脾虚湿蕴组>血虚风燥组(P<0.05);不同中医证型的miR-155表达水平相比,湿热内蕴组>脾虚湿蕴组>血虚风燥组(P<0.05)。结论:不同中医证型AD患者外周血Th2、Th17细胞及相关细胞因子与miR-155表达存在差异性,检测其表达水平有助于指导AD中医辨证分型和治疗。

哮喘患者全血在尘螨主要过敏原刺激下辅助性T淋巴细胞1/辅助性T淋巴细胞2细胞内细胞因子的表达与偏移

目的对尘螨过敏的哮喘儿童外周全血体外持续给予尘螨主要过敏原Der p和Der f刺激,观察辅助性T淋巴细胞(Th)内细胞因子的表达,探讨过敏原暴露对Th1/Th2偏移的影响。方法选择尘螨皮试阳性的哮喘患者23例,采集全血,体外与尘螨主要过敏原Der p、Der f共同孵育培养8h,以单克隆抗体对T淋巴细胞表面抗原、细胞内白介素(IL)-4,干扰素(IFN)-γ进行标记,应用流式细胞技术检测Th细胞内细胞因子的表达。结果哮喘患者全血体外Der p、Der f持续暴露后(过敏原暴露组),Th0、Th1、Th2表达率分别为(0.83±0.45)%、(10.70±4.42)%、(2.16±1.17)%,非过敏原暴露组Th0、Th1、Th2表达率分别为(0.93±0.52)%、(9.19±3.75)%、(1.67±0.82)%。过敏原暴露组Th2表达率显著高于非过敏原暴露组(P<0.05),而两组Th0、Th1表达率的差异无显著性(P>0.05)。过敏原暴露组因Th2增高,Th1/Th2比例降低,Th1/Th2平衡向Th2偏移,与非过敏原暴露组的差异有显著性(P<0.01)。结论Der p、Der f对Th细胞有明显的选择性,过敏原的持续暴露促进Th2优势表达,Th1/Th2平衡向Th2转化,可能是引起哮喘症状反复和加重的机制之一。因此,过敏原的回避和特异性的脱敏治疗也是哮喘治疗的措施之一,应予以必要的重视。

辅助性T细胞17与肿瘤免疫

辅助性T细胞(Th17细胞)是近年新定义的一类CD4+效应T细胞,其与肿瘤的发生、发展密切相关。在不同的免疫背景下,Th17细胞表型存在可塑性。这种可塑性与Th17细胞及其相关细胞因子在肿瘤免疫中作用的双向性密切相关。进一步明确Th17细胞表型重塑过程中所需的各种细胞因子的结构及功能,将有助于提高肿瘤免疫治疗的疗效。

苦参碱对心肌梗死大鼠辅助性T细胞1/辅助性T细胞2平衡及钾通道Kv2.1和KIR2.1的影响

目的探讨苦参碱对心肌梗死大鼠辅助性T细胞1(Th1)/辅助性T细胞2(Th2)平衡及钾通道Kv2.1、KIR2.1的影响。方法制备心肌梗死大鼠模型60只,随机分为模型组、低剂量苦参碱组(50 mg/kg)、中剂量苦参碱组(100 mg/kg)、高剂量苦参碱组(200 mg/kg)、硫氮卓酮组(2.61 mg/kg),每组各12只,药物处理组大鼠于建模成功后每天灌胃治疗,持续7 d,另取12只大鼠作为假手术组。末次给药24 h后处死大鼠检测心肌梗死面积,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-10水平,流式细胞术检测外周血Th1/Th2比值,蛋白质印迹法(Western blot)检测心肌组织钾通道Kv2.1、KIR2.1蛋白水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠心肌梗死面积比例、血清CK-MB、cTnI、IFN-γ、IL-2水平、外周血Th1/Th2比值升高,血清IL-4、IL-10、心肌组织钾通道Kv2.1及KIR2.1蛋白水平降低(P<0.05);与模型组比较,各药物处理组大鼠心肌梗死面积比例、血清CK-MB、cTnI、IFN-γ、IL-2水平、外周血Th1/Th2比值降低,血清IL-4、IL-10水平、心肌组织钾通道Kv2.1及KIR2.1蛋白水平升高且各苦参碱组呈剂量依赖性(P<0.05);高剂量苦参碱组和硫氮卓酮组大鼠上述指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论苦参碱可恢复心肌梗死大鼠Th1/Th2平衡,上调心肌组织钾通道Kv2.1和KIR2.1蛋白的表达,降低心肌梗死面积,起心肌保护作用。