T-bet重组腺病毒调节哮喘小鼠辅助性T细胞1型/2型免疫平衡

目的研究静脉注射T-bet重组腺病毒(AdT-bet)对小鼠哮喘模型过敏性气道炎症及辅助性T细胞1型/2型(Th1/Th2)免疫失衡的影响。方法随机将36只C57BL/6小鼠分为AdT-bet治疗(A)组、模型对照(B)组、正常对照(C)组。以卵蛋白、氢氧化铝免疫建立哮喘模型,A组激发前尾静脉注射1×10~8 pfu/100μL的AdT-bet,各组激发后进行肺泡灌洗分析细胞组分,分离肺T淋巴细胞测定细胞因子分泌水平,以流式细胞仪检测CD3^+、CD4^+T细胞比例及表达γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素(IL)-4、IL-5的比例,比较各组肺组织学改变。结果A组与B组相比:①明显抑制抗原激发后气道内嗜酸性粒细胞的浸润(0.004±0.003比0.221±0.067,P<0.01);②明显抑制肺T淋巴细胞产生IL-4[(22±12)pg/mL比(170±28)pg/mL]、IL-5[(16±13)pg/mL比(330±30)pg/mL],增加了IFN-γ[(2100±360)pg/mL比(60±50)pg/mL]的产生,差异均有统计学意义(P值均<0.01);③肺T淋巴细胞CD4^+IFN-γ%及IFN-γ^+/IL-4^+明显升高(P值均<0.01),而CD4^+IL-4^+%明显下降(P<0.01);④明显抑制哮喘鼠气道内及肺泡内的过敏性炎症反应。结论激发前静脉应用AdT-bet对哮喘小鼠过敏性气道炎症有明显的防治作用,其机制可能与表达的T-bet上调Th1/Th2比值,从而调整了免疫平衡有关。

不同中医证型特应性皮炎患者外周血Th1、Th2、Th17细胞及miR-155表达分析

目的:分析研究不同中医证型特应性皮炎(AD)患者外周血辅助性T细胞1(Th1)、Th2、Th17细胞及微小RNA-155(miR-155)表达。方法:回顾性选取2021年6月~2022年6月我院收治的AD患者作为AD组(n=112),根据不同中医证型将患者分为脾虚湿蕴组(n=46)、湿热内蕴组(n=37)和血虚风燥组(n=29),另选60例本院同期体检健康人群为对照组(n=60)。比较各组外周血Th1、Th2、Th17细胞百分比差异、Th1类细胞因子(IFN-γ)、Th2类细胞因子(IL-4)、Th17类细胞因子(IL-17)及miR-155表达。结果:AD组外周血Th1、IFN-γ水平低于对照组,Th2、Th17、IL-4、IL-17、miR-155表达均高于对照组(P<0.05);不同中医证型的AD患者外周血Th1、IFN-γ水平比较差异无统计学意义(P>0.05);不同中医证型的Th2、Th17、IL-4、IL-17表达水平相比,湿热内蕴组>脾虚湿蕴组>血虚风燥组(P<0.05);不同中医证型的miR-155表达水平相比,湿热内蕴组>脾虚湿蕴组>血虚风燥组(P<0.05)。结论:不同中医证型AD患者外周血Th2、Th17细胞及相关细胞因子与miR-155表达存在差异性,检测其表达水平有助于指导AD中医辨证分型和治疗。

血清中IL-33在1型糖尿病患儿中的表达情况及其与部分Th1/Th2细胞因子的相关性研究

目的 检测1型糖尿病患儿血清中白细胞介素33(IL-33)的表达水平,研究其与部分Ⅰ型T辅助细胞/Ⅱ型T辅助细胞(Th1/Th2)细胞因子的相关性。方法 选取2020年3月至2022年3月在秦皇岛市妇幼保健院内分泌科接受治疗的125例1型糖尿病患儿为研究对象,将其纳入1型糖尿病患儿组,另选取120例同期健康体检儿童作为对照组。两组研究对象血清IL-33、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素10(IL-10)表达水平通过酶联免疫吸附(ELISA)法检测;比较两组研究对象TNF-α/IL-4、TNF-α/IL-10、IL-2/IL-4、IL-2/IL-10的比值;Pearson相关性分析患儿血清IL-33的表达水平与部分Th1/Th2细胞因子平衡的相关性;采用logistic回归分析患儿发生1型糖尿病的影响因素。结果 与对照组相比,1型糖尿病患儿组总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、空腹血糖(FBG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平均升高,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平降低(P<0.05)。与对照组相比,1型糖尿病患儿组IL-33、IL-4、IL-10表达水平降低,TNF-α、IL-2表达水平及TNF-α/IL-4、TNF-α/IL-10、IL-2/IL-4、IL-2/IL-10值升高(P<0.05)。Pearson相关性分析结果发现,1型糖尿病患儿血清IL-33表达水平与TNF-α/IL-4、TNF-α/IL-10、IL-2/IL-4、IL-2/IL-10呈负相关(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,IL-33表达水平(OR=0.725,95%CI:0.571~0.921,P=0.008)、IL-4表达水平(OR=0.694,95%CI:0.533~0.904,P=0.007)、IL-10表达水平(OR=0.715,95%CI:0.559~0.915,P=0.008)是患儿发生1型糖尿病的保护因素,FBG水平(OR=1.445,95%CI:1.116~1.872,P=0.005)、TNF-α表达水平(OR=1.463,95%CI:1.145~1.869,P=0.002)、IL-2表达水平(OR=2.007,95%CI:1.322~3.047,P=0.001)是患儿发生1型糖尿病的危险因素。结论 血清IL-33水平与部分Th1/Th2细胞因子平衡状态具有相关性,且IL-33、IL-4、IL-10、FBG、TNF-α、IL-2等表达水平是儿童发生1型糖尿病的影响因素。

基膜聚糖通过抑制1型辅助T细胞分化提高耐药性卵巢癌治疗效果

目的探讨基膜聚糖(LUM)在卵巢癌顺铂耐药中的作用机制,并初步探索其对1型辅助T(Th1)细胞分化的影响。方法通过基因表达数据集(GEO)筛选卵巢癌顺铂耐药株及敏感株中差异表达的基因,通过实时定量PCR检测其表达水平。利用小干扰RNA(siRNA)敲低人卵巢癌细胞中LUM表达,并用Western blot法验证敲低效率。通过流式细胞术检测敲低LUM对顺铂处理后的卵巢癌细胞系周期及凋亡的影响。通过蛋白质相互作用(PPI)网络筛选LUM潜在靶蛋白,并用分子对接验证其相互作用。肿瘤免疫评估资源数据库(TIMER)筛选LUM对卵巢癌系分泌细胞因子的影响,并利用ELISA与实时定量PCR验证。流式细胞术分析LUM对共培养的CD4^(+)T细胞分化的调控作用。结果GEO数据显示LUM在顺铂耐药株中显著上调,且其表达水平与患者预后相关。LUM在卵巢癌顺铂耐药细胞株中表达水平较高,且顺铂治疗能促进LUM的表达。敲低LUM增加顺铂诱导的卵巢癌细胞的凋亡和细胞周期阻滞,提高药物敏感性。靶基因筛选表明,LUM可能通过与Src同源域磷酸酶2(SHP2)相互作用调控卵巢癌细胞对顺铂的敏感性。另外,TIMER分析结果提示高表达LUM抑制Th1细胞分化,在卵巢癌耐药株中敲低LUM促进Th1细胞分化,通过调控γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素12(IL-12)分泌影响免疫细胞的肿瘤杀伤力。结论LUM在卵巢癌顺铂耐药中表达上调,可能通过调控SHP2相关信号通路降低卵巢癌细胞顺铂敏感性。LUM还通过调控卵巢癌细胞细胞因子分泌,进而抑制Th1细胞分化,促进肿瘤耐药性产生,可能是卵巢癌治疗新的潜在靶点。

成人急性髓性白血病患者血清Th1/Th2型细胞因子、PCT、CRP检测及其临床意义

目的 检测成人急性髓性白血病患者血清辅助性T细胞1/T细胞2(Th1/Th2)型细胞因子、降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)水平并探讨其临床意义。方法 选取2021年1月至2023年12月曲靖市第一人民医院收治的98例成人急性髓性白血病感染患者为研究组,按照不同感染程度分为17例脓毒症组与81普通感染组;同期选取98例成人急性髓性白血病无感染患者为非感染组;同期选择98例门诊健康体检者作为对照组。比较研究组、非感染组及对照组的血清白介素-2、干扰素-γ、白介素-4、白介素-10、PCT、CRP水平,比较脓毒症组与普通感染组患者的血清白介素-2、干扰素-γ、白介素-4、白介素-10、PCT、CRP水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析以上指标对成人急性髓性白血病感染的诊断价值。结果 研究组患者的血清白介素-2、干扰素-γ、PCT、CRP水平分别为(30.27±3.02) pg/mL、(280.16±31.59) pg/mL、(2.57±0.52) ng/mL、(89.42±10.36) mg/L,依次高于非感染组的(13.29±1.42) pg/mL、(229.47±23.15) pg/mL、(0.43±0.06) ng/mL、(13.28±1.54) mg/L和对照组的(6.09±1.26) pg/mL、(150.29±16.58) pg/mL、(0.21±0.03) ng/mL、(7.04±1.40) mg/L,差异均有统计学意义(P<0.05);研究组患者的血清白介素-4、白介素-10分别为(32.39±3.75) pg/m L、(2.96±0.45) pg/m L,依次低于非感染组的(51.03±7.28) pg/m L、(4.21±0.72) pg/m L和对照组的(78.29±10.45) pg/m L、(6.50±0.51) pg/m L,差异均有统计学意义(P<0.05);脓毒症组患者的血清白介素-2、干扰素-γ、PCT、CRP水平分别为(45.93±8.15) pg/m L、(340.17±40.21) pg/m L、(6.95±1.28) ng/m L、(134.73±12.81) mg/L,明显高于普通感染组的(26.98±2.57) pg/mL、(267.57±29.78) pg/mL、(1.65±0.36) ng/mL、(79.91±9.85) mg/L,差异均有统计学意义(P<0.05);脓毒症组患者的血清白介素-4、白介素-10水平分别为(18.87±1.65) pg/mL、(1.29±0.31) pg/mL,明显低于普通感染组的(35.88±4.19) pg/mL、(3.31±0.48) pg/mL,差异均有统计学意义(P<0.05);ROC曲线分析结果显示,白介素-2、干扰素-γ、白介素-4、白介素-10、PCT、CRP单独及联合检测对成人急性髓性白血病感染诊断的曲线下面积(AUC)分别为0.817、0.789、0.798、0.827、0.786、0.766、0.962,联合检测的AUC大于各指标单独检测。结论 成人急性白血病感染患者Th1细胞因子、PCT及CRP水平明显上升,Th2细胞因子水平明显下降,临床通过检测血清Th1/Th2细胞因子、PCT、CRP水平能够辅助成人急性髓性白血病感染的早期诊断,值得推广。

HPV DNA负荷量、辅助性T细胞17、FoxP3+调节性T细胞及炎症因子与高危型HPV感染的相关性分析

目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)DNA、辅助性T细胞17(Th17)、叉头状转录因子3阳性(FoxP3^(+))调节性T细胞(Treg)及宫颈灌洗液中炎症因子与高危型HPV感染的相关性,为高危型HPV感染防治提供新思路。方法将2020年9月至2021年2月该院收治的高危型HPV感染患者100例纳入研究作为研究组,然后将其中50例高危型HPV16/18阳性患者作为HPV16/18组,50例其他12种高危型阳性病例作为其他亚型组。另外,选取同期体检的健康女性作为对照组(n=50)。比较研究组和对照组HPV DNA负荷量、Th17、FoxP3^(+)Treg及宫颈灌洗液中炎症因子[白细胞介素(IL)-10、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-17A]水平,比较HPV16/18组和其他亚型组各项指标水平,比较不同宫颈病变患者各项指标水平。分析各项指标与高危型HPV感染、宫颈病变的相关性,以及对宫颈病变患者高危型HPV感染的诊断价值。结果研究组HPV DNA负荷量、Th17、FoxP3^(+)Treg及宫颈灌洗液中IL-10、TNF-α、IL-17A水平均高于对照组(P<0.05),HPV16/18组各项指标水平均高于其他亚型组(P<0.05)。不同宫颈病变患者各项指标水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。HPV DNA负荷量、FoxP3^(+)Treg、Th17及宫颈灌洗液中IL-10、TNF-α、IL-17A水平与高危型HPV感染分型(HPV16/18=1,其他亚型=2)均呈负相关(P<0.05),与宫颈病变(宫颈上皮内瘤变Ⅰ级=1,宫颈上皮内瘤变Ⅱ级=2,宫颈上皮内瘤变Ⅲ级=3,宫颈癌=4)均呈正相关(P<0.05)。各项指标联合诊断高危型HPV16/18阳性的曲线下面积(AUC)为0.911(95%CI:0.837~0.959),大于各指标单独诊断。结论高危型HPV感染患者HPV DNA负荷量、Th17、FoxP3^(+)Treg及炎症因子水平异常,与高危型HPV感染分型、宫颈病变密切相关,而且HPV DNA负荷量与Th17、FoxP3^(+)Treg、炎症因子相关,各项指标联合检测可为临床防治高危型HPV持续感染提供可靠依据。

Th1/Th2失衡与合并2型糖尿病慢性牙周炎患者病情严重程度的关系

目的:探讨辅助性T细胞1/辅助性T细胞2(Th1/Th2)失衡与合并2型糖尿病(T2DM)的慢性牙周炎患者病情严重程度的关系。方法:采用前瞻性研究方式选取2020年1月~2023年12月连云港市赣榆区人民医院内分泌科接诊的合并T2DM的慢性牙周炎患者88例,设置为牙周炎合并T2DM组,选取同期接诊的不合并T2DM的慢性牙周炎患者88例,设置为牙周炎组。另选取同期体检的健康受试者88例,设为健康组。比较健康组、牙周炎组、牙周炎合并T2DM组外周血Th1、Th2占比及Th1/Th2;比较不同病情严重程度牙周炎合并T2DM组患者Th1、Th2占比及Th1/Th2;采用Spearman相关性分析Th1/Th2失衡与牙周炎合并T2DM组病情严重程度的相关性;采用Logistic回归分析法分析牙周炎合并T2DM组患者病情重度的危险因素。结果:与健康组比较,牙周炎组、牙周炎合并T2DM组外周血Th1占比、Th1/Th2升高,Th2降低,差异有统计学意义(P<0.05);与牙周炎组比较,牙周炎合并T2DM组Th1占比、Th1/Th2升高,Th2降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与轻度组比较,中、重度组Th1占比、Th1/Th2升高,Th2降低,差异有统计学意义(P<0.05);与中度组比较,重度组Th1占比、Th1/Th2升高,Th2降低,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,Th1/Th2失衡与牙周炎合并T2DM组患者病情严重程度呈正相关(r=0.897,P<0.001,95%CI:0.843~0.933)。Logistic回归分析法显示,年龄大、吸烟,糖化血红蛋白(HbA1c)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、Th1/Th2高均是导致牙周炎合并T2DM组患者病情重度的危险因素(P<0.05)。结论:Th1/Th2失衡与合并T2DM的慢性牙周炎患者的病情严重程度表现为正相关,且是其病情严重程度为重度的危险因素。

镍纹蛋白样蛋白、可溶性髓样细胞触发受体-1水平与2型糖尿病患者颈动脉粥样硬化程度的相关性

目的 探究镍纹蛋白样蛋白(METRNL)、可溶性髓样细胞触发性受体1(sTREM-1)水平与2型糖尿病(T2DM)患者颈动脉粥样硬化(CAS)严重程度的关系。方法 选取2021年12月—2023年12月承德市中心医院T2DM患者235例,根据是否伴有CAS分为CAS组(126例)和对照组(109例)。将CAS组根据CAS的严重程度细分为3个亚组[内膜中层厚度(IMT)增厚组(26例)、斑块形成组(41例)、颈动脉狭窄组(59例)]。收集所有患者临床资料和实验室指标检测结果,同时检测血清METRNL、sTREM-1水平。采用Spearman相关分析评估血清METRNL、sTREM-1与CAS严重程度的相关性。采用多因素Logistic回归分析评估CAS严重程度的影响因素。结果 与对照组比较,CAS组血清METRNL水平显著降低(P<0.05),血清sTREM-1水平显著升高(P<0.05)。IMT增厚组、斑块形成组、颈动脉狭窄组血清METRNL水平依次降低(P<0.001),sTREM-1水平依次升高(P<0.001)。METRNL与CAS严重程度呈负相关性(rs=-0.422,P<0.05),sTREM-1与CAS严重程度呈正相关(rs=0.535,P<0.05)。高血压史、sTREM-1、糖化血红蛋白(Hb A1c)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)是CAS严重程度(颈动脉狭窄)的危险因素[比值比(OR)值分别为3.354、2.165、1.642、1.943,95%可信区间(CI)分别为1.580~7.119、1.296~3.618、1.238~2.177、1.188~3.178,P<0.05],METRNL是保护因素(OR=0.768,95%CI为0.640~0.922,P<0.05)。结论 T2DM伴CAS患者血清METRNL水平降低,sTREM-1水平升高,与CAS严重程度密切相关。

血清人分泌型磷脂酶A2、人可溶性髓系细胞触发受体-1、巨噬细胞炎性蛋白3α在妊娠合并获得性重症肺炎患者中的临床应用价值

目的探讨血清人分泌型磷脂酶A2(sPLA2)、人可溶性髓系细胞触发受体-1(sTREM-1)、巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP-3α)在妊娠合并获得性重症肺炎(SCAP)疾病中的临床应用价值。方法选择2019年2月至2023年1月我院收治疗80例妊娠合并SCAP患者作为研究组,同期100例妊娠合并获得性非重症肺炎患者作为对照组,比较两组血清sPLA2、sTREM-1、MIP-3α水平、急性生理学及慢性健康状况评分系统II(APACHE-II)评分及孕妇妊娠结局与新生儿结局,经Spearman分析妊娠合并SCAP患者血清sPLA2、sTREM-1、MIP-3α水平与APACHE-II评分的关系;采用多元Logistic回归分析影响妊娠合并SCAP患者新生儿结局发展的因素。结果研究组血清sPLA2、sTREM-1、MIP-3α水平及APACHE-II评分明显高于对照组,其孕产妇不良妊娠结局发生率以及新生儿出现感染、窒息、败血症、宫内窘迫、新生儿肺炎发生率均高于对照组(P<0.05);经Spearman分析发现妊娠合并SCAP患者sPLA2、sTREM-1、MIP-3α水平与APACHE-II评分存在正相关(P<0.05);多元Logistic回归分析显示高水平sPLA2、sTREM-1、MIP-3α水平及APACHE-II评分升高是妊娠合并SCAP患者新生儿不良结局的危险因素(P<0.05);ROC曲线分析提示MIP-3α、sTREM-1、sPLA2均可预测妊娠合并SCAP患者新生儿不良结局,其中sTREM-1的诊断效能最高(P<0.05)。结论血清sPLA2、sTREM-1、MIP-3α与妊娠合并SCAP患者病情发展密切相关,能有效预测新生儿结局发展,可应用于临床。

Th1/Th2、Th17/Treg型细胞因子群在稽留流产病因学中的研究进展

近年来稽留流产发病率逐年上升,然病因复杂,免疫相关因素是其病因学研究的热点。妊娠被看作是一次成功的同种异体移植,母体对胎儿形成免疫耐受,但母胎界面免疫微环境的任何失衡都可能导致妊娠失败。辅助型T细胞1(Th1)/辅助型T细胞2(Th2)、辅助型T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)细胞因子共同构成的细胞因子网络对维持母胎界面免疫微环境的平衡至关重要,该文以Th1/Th2、Th17/Treg型细胞因子群为中心,对其在稽留流产病因学领域的研究概况进行综述。

骨形态构建蛋白2型受体下调单核细胞趋化蛋白1/CC类趋化因子受体2通路对哮喘小鼠气道炎症和Th1/Th2平衡的影响

目的探究骨形态构建蛋白2型受体(BMPR2)对小鼠哮喘模型气道炎症和Th1/Th2平衡的影响及其机制。方法于2021年9月至2022年11月选用24只C57BL/6小鼠尾静脉注射BMPR2腺病毒,随后卵清蛋白(OVA)致敏和激发建立哮喘小鼠模型;采用随机数字表法分为对照组(生理盐水替代OVA造模)、OVA模型组(OVA诱导小鼠哮喘模型)、OVA+载体(Vector)组(空载慢病毒处理的OVA哮喘模型小鼠)、OVA+BMPR2组(BMPR2过表达慢病毒处理的OVA哮喘模型小鼠),每组6只。收集支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织。免疫组织化学检测肺组织BMPR2表达水平;苏木精-伊红染色观察肺组织病理学改变;瑞氏染色后计数BALF中各类炎症细胞数目;酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒检测BALF中白细胞介素(IL)-4,IL-5和IL-13炎症因子水平;蛋白质印迹法检测肺组织和气道上皮细胞16HBE中BMPR2、单核细胞趋化蛋白-1(MCP1)及其受体CC类趋化因子受体2(CCR2)蛋白表达水平。免疫共沉淀实验检测BMPR2与MCP1相互作用。结果与对照组相比,OVA模型组肺组织BMPR2(0.36±0.05比1.04±0.04)显著降低(P<0.01);小鼠肺泡破坏程度严重,肺组织有大量的淋巴细胞浸润;BALF中炎症细胞总数[(93.25±9.32)×10^(4)个/毫升比(4.79±0.41)×10^(4)个/毫升,P<0.001]、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞均升高;Th1相关炎症因子γ干扰素(IFN-γ)水平降低,Th2相关炎症因子IL-4,IL-5和IL-13水平升高。过表达BMPR2可降低肺泡破坏程度和淋巴细胞浸润程度。与OVA+Vector组相比,OVA+BMPR2组BALF中炎症细胞总数、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞均降低;ELISA结果表明,OVA+BMPR2组BALF中IFN-γ水平升高,IL-4,IL-5和IL-13水平降低,提示过表达BMPR2可上调Th1百分比,下调Th2细胞百分比。进一步研究表明,BMPR2过表达显著下调了MCP1及其受体CCR2的表达水平,且BMPR2与MCP1存在相互作用。结论BMPR2可通过下调MCP1/CCR2通路降低哮喘小鼠气道炎症,并调节Th1/Th2平衡。

芪倍合剂对UC小鼠模型TGF-β1/Smad2信号通路及Th17/Treg平衡、炎性细胞因子表达的影响

目的探究芪倍合剂对溃疡性结肠炎(UC)小鼠模型转化生长因子(TGF)-β1/Smad2信号通路及T辅助细胞(Th)17/调节T细胞(Treg)平衡、炎性细胞因子表达的影响。方法30只小鼠随机分为对照组、UC组和UC+芪倍合剂组,每组10只。UC组和UC+芪倍合剂组通过葡聚糖硫酸钠构建UC模型,UC+芪倍合剂组通过芪倍合剂灌肠。比较两组结肠黏膜病变情况、外周血炎性细胞因子Th17、Treg和TGF-β1/Smad2信号通路水平。结果与对照组比较,UC组干预后每日疾病活动指数(DAI)评分、结肠病变程度、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1、Th17、Treg、Th17/Treg及结肠黏膜和淋巴细胞中的TGF-β1/Smad2通路水平显著升高,IL-4水平显著降低(P<0.05)。UC+芪倍合剂组干预后DAI评分、结肠病变程度、TNF-α、IL-1、Th17、Treg、Th17/Treg及结肠黏膜和淋巴细胞中TGF-β1/Smad2通路水平显著低于UC组,IL-4水平显著高于UC组(P<0.05)。结论芪倍合剂可以通过抑制结肠黏膜和淋巴细胞中TGF-β1/Smad2通路抑制炎性反应和调节Treg/Th17细胞平衡,从而起到缓解UC的作用。

miR-487a通过靶向调控TIA1对胃癌肿瘤相关巨噬细胞M2型极化的抑制作用

目的:探讨微小RNA(miR)-487a对胃癌肿瘤相关巨噬细胞(TAMs) M2型极化的抑制作用,并阐明其对胃癌AGS细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法:分离和培养原发性胃癌患者胃癌组织TAMs及癌旁组织来源的正常巨噬细胞(NTMs),体外诱导人单核细胞THP-1分化为TAMs,将分化得到的M0、M1和M2型巨噬细胞经条件培养基(CM)刺激培养24 h,分别获取TAMs、M1-TAMs和M2-TAMs。转染TAMs,分为空白组、 inhibitor-NC组、 miR-487a inhibitor组、 miR-487a inhibitor+si-NC组和miR-487ainhibitor+si-TIA1组,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和Western blotting法验证转染效率。将M2-TAMs与AGS细胞共培养,分为AGS组、AGS+inhibitor-NC组、AGS+miR-487ainhibitor组、AGS+miR-487ainhibitor+si-NC组和AGS+miR-487ainhibitor+si-TIA1组,RT-qPCR法检测胃癌组织TAMs和癌旁组织NTMs及各组TAMs中miR-487a和T淋巴细胞胞浆内抗原-1(TIA1) mRNA表达水平,Western blotting法检测胃癌组织TAMs和癌旁组织NTMs及各组TAMs中TIA1蛋白表达水平,流式细胞术检测各组TAMs中CD206和CD163水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组TAMs培养上清中白细胞介素10(IL-10)、转化生长因子β(TGF-β)、血管内皮生长因子A(VEGF-A)和精氨酸酶1(Arg-1)水平,CCK-8法检测各组AGS细胞增殖活性,细胞划痕实验检测各组AGS细胞迁移率,Transwell实验检测各组AGS细胞侵袭细胞数。结果:RT-qPCR法,与癌旁组织NTMs比较,胃癌组织TAMs中miR-487a表达水平明显升高(P<0.01),TIA1 mRNA表达水平明显降低(P<0.01);与TAMs比较,M1-TAMs中miR-487a表达水平明显降低(P<0.01),TIA1 mRNA表达水平明显升高(P<0.01);M2-TAMs中miR-487a表达水平明显升高(P<0.01),TIA1 mRNA表达水平明显降低(P<0.01);转染后,与空白组和inhibitor-NC组比较,miR-487a inhibitor组细胞中miR-487a表达水平明显降低(P<0.01),提示细胞转染成功。Western blotting法,与癌旁组织NTMs比较,胃癌组织TAMs中TIA1蛋白表达水平明显降低(P<0.01);与TAMs比较,M1-TAMs中TIA1蛋白表达水平明显升高(P<0.01),M2-TAMs中TIA1蛋白表达水平明显降低(P<0.01);共转染后,与inhibitor-NC组比较,miR-487a inhibitor组细胞中TIA1蛋白表达水平明显升高(P<0.01);与miR-487a inhibitor+si-NC组比较,miR-487a inhibitor+si-TIA1组细胞中TIA1蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。流式细胞术,与空白组和inhibitor-NC组比较,miR-487a inhibitor组细胞中CD206和CD163水平明显降低(P<0.01);共转染后,与inhibitor-NC组比较,miR-487a inhibitor组细胞中CD206和CD163水平均明显降低(P<0.01);与miR-487a inhibitor+si-NC组比较,miR-487a inhibitor+si-TIA1组细胞中CD206和CD163水平均明显升高(P<0.01)。ELISA法,与空白组和inhibitor-NC组比较,miR-487a inhibitor组TAMs细胞培养上清中IL-10、TGF-β、VEGF-A和Arg-1水平均明显降低(P<0.01);共转染后,与inhibitor-NC组比较,miR-487a inhibitor组TAMs细胞培养上清中IL-10、TGF-β、VEGF-A和Arg-1水平均明显降低(P<0.01);与miR-487a inhibitor+si-NC组比较,miR-487a inhibitor+si-TIA1组TAMs细胞培养上清中IL-10、TGF-β、VEGF-A和Arg-1水平均明显升高(P<0.01)。CCK-8法,与AGS组比较,AGS+inhibitor-NC组细胞增殖活性明显升高(P<0.01);与AGS+inhibitor-NC组比较,AGS+miR-487a inhibitor组细胞增殖活性明显降低(P<0.01);与AGS+miR-487a inhibitor+si-NC组比较,AGS+miR-487a inhibitor+si-TIA1组细胞增殖活性明显升高(P<0.01)。细胞划痕实验,与AGS组比较,AGS+inhibitor-NC组AGS细胞迁移率明显升高(P<0.05);与AGS+inhibitor-NC组比较,AGS+miR-487a inhibitor组AGS细胞迁移率明显降低(P<0.01);与AGS+miR-487a inhibitor+si-NC组比较,AGS+miR-487a inhibitor+si-TIA1组AGS细胞迁移率明显升高(P<0.05)。Transwell实验,与AGS组比较,AGS+inhibitorNC组AGS细胞侵袭细胞数明显升高(P<0.01);与AGS+inhibitor-NC组比较,AGS+miR-487a inhibitor组AGS细胞侵袭细胞数明显降低(P<0.01);与AGS+miR-487a inhibitor+si-NC组比较,AGS+miR-487a inhibitor+si-TIA1组AGS细胞侵袭细胞数明显升高(P<0.01)。结论:沉默miR-487a表达可通过靶向上调TIA1抑制胃癌肿瘤相关巨噬细胞M2型极化,并抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭。

辅助性T细胞1/辅助性T细胞2标志性细胞因子与晚期肺腺癌化疗近远期疗效的关联性分析

目的分析辅助性T细胞(TH)1/TH2标志性细胞因子与晚期肺腺癌化疗近远期疗效的关联性。方法选取2021年1月至2023年12月江苏省徐州市中医院收治的82例晚期肺腺癌患者为研究对象,均给予培美曲塞+顺铂或卡铂治疗,21 d为1个周期,连续治疗3个周期。比较不同近期临床疗效者化疗前及化疗3个周期后血清γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-10变化及不良反应发生情况,并记录化疗后2年生存与死亡者化疗3个周期后血清IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10差异。结果82例晚期肺腺癌患者均完成3个周期的化疗,其中完全缓解(CR)1例,部分缓解(PR)34例,疾病稳定(SD)28例,疾病进展(PD)19例,晚期肺腺癌患者化疗3个周期后血清IFN-γ、IL-2均高于本组化疗前,血清IL-4、IL-10均低于本组化疗前,差异有统计学意义(P<0.05);CR+PR患者化疗后血清IFN-γ、IL-2高于SD+PD者,差异有统计学意义(P<0.05),血清IL-4、IL-10低于SD+PD者,差异有统计学意义(P<0.05)。CR+PR患者与SD+PD患者的化疗期间不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。42例获得随访终点的晚期肺腺癌患者中死亡8例(19.05%),生存34例(80.95%),化疗后2年死亡者化疗3个周期血清IFN-γ、IL-2低于生存者,差异有统计学意义(P<0.05),血清IL-4、IL-10高于生存者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论TH1/TH2平衡不仅与晚期肺腺癌患者化疗近期疗效有关,也与患者远期预后生存情况有关。

过表达M2型肿瘤相关巨噬细胞TIA1基因通过调控PI3K/AKT信号通路抑制胃癌细胞侵袭和迁移

目的:探讨过表达M2型肿瘤相关巨噬细胞(M2-TAMs)T淋巴细胞内抗原1(TIA1)基因对胃癌BGC-823细胞侵袭和迁移的影响及其机制。方法:从胃癌组织中提取原代TAMs,采用IL-4和IL-13刺激TAMs诱导分化成M2-TAMs,再将TIA1基因过表达质粒(oe-TIA1)及其空载质粒(Vector)转染至M2-TAMs中,采用qRT-PCR和Western blot检测细胞中TIA1 mRNA和蛋白表达水平;流式细胞术检测细胞中CD206和CD163表达水平;ELISA检测细胞培养上清液中IL-10、TGF-β、VEGF-A和Arg-1水平。通过Transwell共培养体系将转染后的M2-TAMs与胃癌BGC-823细胞共培养,并联用PI3K激动剂740Y-P进行干预,采用划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell实验检测细胞侵袭能力;Western blot检测细胞中PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、MMP-2和MMP-9等蛋白表达水平。结果:①与原代TAMs比较,M2-TAMs中CD206和CD163表达水平及细胞培养上清液中IL-10、TGF-β、VEGF-A和Arg-1水平均显著升高(P<0.05),而TIA1 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。TIA1基因过表达可显著降低M2-TAMs中CD206和CD163表达水平及细胞培养上清液中IL-10、TGF-β、VEGF-A和Arg-1水平(P<0.05)。②M2-TAMs中过表达TIA1基因可显著降低BGC-823细胞迁移和侵袭能力及p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、MMP-2和MMP-9等蛋白表达水平(P<0.05)。③740Y-P可显著逆转M2-TAMs中过表达TIA1基因对BGC-823细胞迁移、侵袭及PI3K/AKT信号通路的抑制作用。结论:过表达M2-TAMs中TIA1基因表达可通过阻断PI3K/AKT信号通路影响胃癌细胞侵袭和迁移。

梅毒血清固定患者中NOD样受体蛋白3和Toll样受体4表达与Th1/Th2相关细胞因子的相关性研究

目的探究梅毒血清固定患者中NOD样受体蛋白3(NLRP3)、Toll样受体4(TLR4)表达与辅助性T细胞1/辅助性T细胞2(Th1/Th2)相关细胞因子的相关性。方法选取2021年2月至2022年4月川北医学院附属三台医院收治的197例梅毒患者作为研究对象。将进行驱梅治疗后血清转阴者纳入转阴组(n=88),未进行驱梅治疗者纳入梅毒组(n=45),接受驱梅治疗后血清固定者纳入固定组(n=64)。另选取同期进行体检的健康人作为对照组(n=53)。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测外周血单个核细胞(PBMCs)中NLRP3、TLR4 mRNA相对表达水平;采用酶联免疫吸附试验法检测Th1/Th2相关细胞因子的表达水平;采用Pearson法分析TLR4、NLRP3 mRNA与Th1/Th2相关细胞因子的相关性。结果各组PBMCs中TLR4、NLRP3 mRNA表达水平比较,梅毒组>转阴组>对照组>固定组,差异具有统计学意义(P<0.05);各组白介素(IL)-2、γ干扰素(IFN-γ)水平比较,对照组>转阴组>梅毒组>固定组,差异具有统计学意义(P<0.05);各组IL-1β、IL-4、IL-10及IL-18水平比较,对照组<转阴组<梅毒组<固定组,差异具有统计学意义(P<0.05);梅毒血清固定患者TLR4、NLRP3 mRNA表达与IFN-γ、IL-2呈正相关,与IL-1β、IL-4、IL-10、IL-18呈负相关(P<0.05)。结论梅毒血清固定患者NLRP3、TLR4 mRNA表达水平显著降低,且与Th1/Th2相关细胞因子密切相关。

新银灵颗粒对寻常型银屑病血热证患者外周血Th22细胞及其细胞因子的影响

目的观察新银灵颗粒对寻常型银屑病(PsV)血热证患者外周血辅助性T细胞22(Th22)及其细胞因子的影响。方法选取2019年12月—2020年12月在天津市中医药研究院附属医院皮肤科门诊就诊的30例PsV血热证患者为研究组,10例健康志愿者为对照组。研究组采用新银灵颗粒治疗8周,分别于治疗前后采取外周血,流式细胞术检测外周血Th22细胞比例,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测白细胞介素-22(IL-22)水平,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测IL-22 mRNA表达。结果经过新银灵颗粒治疗,研究组与治疗前比较,银屑病面积及严重程度指数(PASI)评分、中医证候评分和皮肤病生活质量指数评分(DLQI)均显著下降(均P<0.01);治疗后外周血中Th22细胞比例、IL-22及IL-22信使RNA(mRNA)表达水平均显著降低(P<0.01)。结论新银灵颗粒可能通过抑制Th22细胞活化、降低Th22细胞因子表达,从而治疗PsV血热证。

外周血Th1/Th2细胞因子与急性缺血性脑卒中患者脑功能损伤和认知功能障碍的关系

目的探讨外周血辅助性T细胞(Th)1/Th2细胞因子与急性缺血性脑卒中(AIS)患者脑功能损伤和卒中后认知功能障碍(PSCI)的关系。方法选取AIS患者125例(AIS组)和同时段65例健康人(对照组),AIS患者根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分分为轻度脑功能损伤组(33例)、中度脑功能损伤组(74例)和重度脑功能损伤组(18例),根据6个月后是否发生PSCI分为PSCI组(52例)和非PSCI组(73例)。采用流式细胞术检测外周血Th1、Th2比例,酶联免疫吸附法检测血清干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-4。通过Spearman相关性分析AIS患者外周血Th1/Th2细胞因子与NIHSS评分的相关性,单因素和多因素Logistic回归分析AIS患者PSCI的影响因素。结果AIS组外周血Th1、IFN-γ、Th1/Th2水平高于对照组,外周血Th2、IL-4水平低于对照组(P均<0.05)。轻度脑功能损伤组、中度脑功能损伤组、重度脑功能损伤组外周血Th1、IFN-γ、Th1/Th2依次升高,外周血Th2、IL-4水平依次降低(P均<0.05)。AIS患者外周血Th1、IFN-γ、Th1/Th2与NIHSS评分呈正相关,Th2、IL-4与NIHSS评分呈负相关(P均<0.05)。PSCI组年龄大于非PSCI组,NIHSS评分和Th1、IFN-γ、Th1/Th2高于非PSCI组,Th2、IL-4水平低于非PSCI组(P均<0.05)。NIHSS评分增加、Th1升高、IFN-γ升高、Th1/Th2升高为AIS患者PSCI的独立危险因素,Th2升高、IL-4升高为独立保护因素(P均<0.05)。结论外周血Th1/Th2细胞因子与AIS患者脑功能损伤加重和PSCI发生密切相关。

结直肠癌患者血清总蛋白、白蛋白、血红蛋白与Th1/Th2免疫平衡及调节性T细胞、辅助性T细胞17相关性分析

目的探究结直肠癌患者血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、血红蛋白(Hb)与其辅助性T细胞(Th)1/Th2免疫平衡及Treg、Th17相关性。方法使用主观全面评定量表中营养状态评分对2018年12月至2021年10月河北北方学院附属第一医院收治的结直肠癌患者500例进行营养评估,根据患者营养评估结果随机抽取其中营养状态优者162例,营养状态良者161例,营养状态差者177例。使用简单随机抽样法,选取营养状态优组(40例)、轻中度营养不良组(40例)、重度营养不良组(40例)。观察不同组别患者营养指标,Th1/Th2、Treg/Th17免疫平衡相关指标并进行相关性分析。结果营养状态优组TP、ALB、Hb、白细胞介素(IL)-2、γ-干扰素、肿瘤坏死因子-α、Th1细胞表达、Th1/Th2显著高于轻中度营养不良组及重度营养不良组(P<0.05),轻中度营养不良组显著高于重度营养不良组(P<0.05);营养状态优组运铁蛋白(TF)、IL-6、IL-10、IL-5、Th2细胞表达低于轻中度营养不良组及重度营养不良组(P<0.05),轻中度营养不良组显著低于重度营养不良组(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,TP与患者IL-2、TNF-α水平及Th1细胞表达、Th1/Th2呈正相关(r=0.500、0.471、0.413、0.332,P<0.05),与IL-6、IL-10、IL-5水平及Th2、Treg、Th17细胞表达呈负相关(r=-0.443、-0.442、-0.396、-0.213、-0.422、-0.419,P<0.05);ALB与患者IL-2、IFN-γ、TNF-α水平及Th1细胞表达、Th1/Th2呈正相关(r=0.493、0.338、0.393、0.336、0.321,P<0.05),与IL-6、IL-10、IL-5水平及Th2、Treg、Th17细胞表达呈负相关(r=-0.360、-0.313、-0.269、-0.231、-0.369、-0.306,P<0.05);TF与患者IL-6、IL-10、IL-5水平及TH2、Treg、Th17细胞表达呈正相关(r=0.577、0.490、0.345、0.394、0.507、0.490,P<0.05),与IL-2、IFN-γ、TNF-α水平及Th1细胞表达、Th1/Th2呈负相关(r=-0.665、-0.401、-0.590、-0.540、-0.432,P<0.05);Hb与患者IL-2、TNF-α水平及Th1细胞表达呈正相关(r=0.280、0.392、0.194,P<0.05),与IL-6、IL-10、IL-5水平及Th2、Treg、Th17细胞表达呈负相关(r=-0.284、-0.188、-0.308、-0.210、-0.266、-0.327,P<0.05)。结论结直肠癌患者营养学指标与其Th1/Th2免疫平衡及Treg、Th17相关性具有相关性,随着结直肠癌患者营养学指标变化会引起其Th1/Th2免疫平衡及Treg、Th17表达水平改变,营养状态较差患者Th1/Th2免疫平衡向Th2漂移,Treg、Th17升高,抗肿瘤免疫能力减弱。

克拉霉素对铜绿假单胞菌慢性肺部感染小鼠辅助性T淋巴细胞1型/辅助性T淋巴细胞2型免疫平衡的调节作用

目的探讨克拉霉素对铜绿假单胞菌(PA)慢性肺部感染小鼠肺组织辅助型T淋巴细胞(Th)1/Th2免疫平衡的调节作用。方法将54只小鼠随机分入克拉霉素组、0.9%氯化钠溶液组和对照组。克拉霉素组和0.9%氯化钠溶液组通过小鼠气道接种由包裹PA的琼脂糖珠方法建立的PA慢性肺部感染模型,自建模后第7天起分别给予克拉霉素和0.9%氯化钠溶液治疗,对照组小鼠经气道接种无菌琼脂糖珠给予0.9%氯化钠溶液。分别于建模后第7、10、14天处死小鼠。标本进行肺组织细菌培养、病理学检查、支气管肺泡灌洗液(BALF)中γ-干扰素(IFN-γ)/白细胞介素(IL)-4水平测定和肺组织转录因子T-betmRNA/GATA-3mRNA表达水平分析。结果克拉霉素组小鼠在治疗后慢性肺部感染的症状明显改善。经气道接种后第7天,0.9%氯化钠溶液组和克拉霉素组BALF中IFN-γ、IL-4水平均显著高于对照组(P值均<0.05)。气道接种后第14天,克拉霉素组的IFN-γ水平显著低于0.9%氯化钠溶液组(P<0.05)。气道接种后第10、14天,克拉霉素组BALF中IL-4水平均显著高于0.9%氯化钠溶液组和对照组同时间点(P值均<0.05),而IFN-γ/IL-4比值均显著低于0.9%氯化钠溶液组同时间点(P值均<0.05)。气道接种后第7、10天,克拉霉素组与0.9%氯化钠溶液组的Th1、Th2细胞转录因子T-betmRNA、GATA-3mRNA表达水平相近,均显著高于对照组(P值均<0.05)。气道接种后第14天,克拉霉素组T-betmRNA表达水平、T-betmRNA/GATA-3mRNA比值均显著低于0.9%氯化钠溶液组(P值均<0.05)。结论在PA慢性肺部感染初期采用克拉霉素治疗可使小鼠肺组织的Th1/Th2平衡向Th2偏移,有利于缓解气道炎症。