变应性鼻炎的免疫学发病机制——从经典免疫失衡到辅助性T细胞2/调节性T细胞免疫失衡的转变

变应性鼻炎是常见的鼻黏膜慢性炎症反应性疾病,以喷嚏、鼻痒、鼻塞、流涕为特征性症状,其发病率随年龄增长而逐渐升高,严重影响人们的日常生活。该病发病机制十分复杂,目前主要认为辅助性T细胞(Th)1/Th2(Th1/Th2)免疫失衡并向Th2免疫反应转化最为经典,近年来也提出了调节性T细胞(Treg)、Th17等细胞反应的参与。本文主要对变应性鼻炎的免疫学发病机制进行综述。

乳酸杆菌对新生鼠和成年鼠辅助性T细胞1/辅助性T细胞2平衡及肺树突状细胞表型的影响

目的:探讨乳酸杆菌对新生鼠和成年鼠辅助性T细胞(Th)1/Th2平衡及肺树突状细胞(DC)表型的影响。方法:新生鼠从出生后连续7 d每天经口给予109 CFU/mL浓度乳酸杆菌10μL,成年鼠选取满6周的小鼠连续7 d每天经口给予109 CFU/mL浓度乳酸杆菌50μL,实验第8天进行盲肠内容物培养以确定乳酸杆菌肠道定植情况。干预3周后,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-4和IL-10水平,流式细胞仪检测肺树突状细胞亚型和成熟度。结果:(1)乳酸杆菌干预的新生鼠乳酸杆菌数量较对照组增加,而肠球菌和肠杆菌数量降低(P<0.01),乳酸杆菌干预的成年鼠肠道乳酸杆菌数量较对照组增加(P<0.01),但肠道肠球菌和肠杆菌数量没有变化。(2)乳酸杆菌干预的新生鼠IFN-γ和IL-10水平较对照组高(P<0.05),IL-4水平两组比较差异无统计学意义。乳酸杆菌干预的成年鼠IFN-γ、IL-4和IL-10水平与对照组比较差异无统计学意义。(3)乳酸杆菌干预的新生鼠肺CD11c^(+)CD8α^(-)水平为92.34%±0.94%,较对照组降低(P<0.05),干预组CD11c^(+)CD8α^(+)水平较对照组增加(P<0.05)。经过乳酸杆菌干预后,新生鼠肺部14.03%±1.14%的DC表达MHCⅡ类分子,较对照组明显增加。成年鼠乳酸杆菌干预组CD11c^(+)CD8α^(-)、CD11c^(+)CD8α^(+)和CD11c^(+)MHCⅡ+水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:乳酸杆菌干预可以促进新生鼠Th1/Th2平衡向Th1方向偏移,而对成年鼠没有影响。

基于Logistic回归分析尖锐湿疣患者复发的影响因素及与皮损局部辅助性T细胞1/辅助性T细胞2免疫失衡的相关性

目的探讨尖锐湿疣(CA)患者复发的影响因素及与皮损局部辅助性T细胞1/辅助性T细胞2(Th1/Th2)免疫失衡的相关性。方法选取2019年1月至2020年6月第四军医大学西京皮肤医院收治的224例CA患者作为研究对象。随访1年,统计复发率,并根据复发情况分为复发组和未复发组。比较两组的基线资料、Th1细胞因子[白介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]和Th2细胞因子[白介素-4(IL-4)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)]水平。构建预测复发的Logistic回归模型,分析模型及Th1/Th2细胞因子的预测价值。结果文化程度、IL-2、IFN-γ、TNF-α是复发的保护因素,饮酒、性伴侣数量、性伴侣伴有CA、经常熬夜、IL-4、IL-6、IL-10是复发的危险因素(P<0.05);Logistic回归模型预测复发的曲线下面积(AUC)为0.742;IL-2、IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-6、IL-10联合预测复发的AUC为0.890。结论文化程度、饮酒、性伴侣数量、性伴侣伴有CA、经常熬夜及皮损局部Th1/Th2免疫失衡均与CA复发有关,联合检测皮损局部Th1/Th2细胞因子有望成为量化预测CA复发的手段之一。

辅助性T细胞1/辅助性T细胞2和辅助性T细胞17与足月新生儿感染性肺炎患儿疾病进展及治疗效果的相关性

目的分析辅助性T细胞1/辅助性T细胞2(Th1/Th2)、辅助性T细胞17(Th17)与足月新生儿感染性肺炎患儿疾病进展、治疗效果的相关性。方法选取嘉兴市第二医院于2021年6月—2023年1月期间收治的足月新生儿感染性肺炎患儿112例作为观察组,并根据感染类型分为细菌感染组、非细菌感染组,同期在院体检的健康足月新生儿80例作为对照组。使用流式细胞仪测定两组Th1、Th2、Th17细胞比例及Th1/Th2细胞比值,分析Th1/Th2细胞、Th17细胞在观察组、对照组中的表达变化及与患儿病情进展的相关性。所有患儿均行统一方案治疗,比较患儿治疗前后Th1/Th2细胞、Th17细胞表达差异,分析Th1/Th2细胞、Th17细胞与患儿治疗效果的相关性。结果观察组Th1细胞比例[(14.23±1.56)%vs.(19.87±3.24)%]、Th1/Th2[(1.56±0.34)%vs.(2.98±0.73)%]低于对照组(t=16.020、18.040,均P<0.01),Th2细胞比例[(10.56±2.13)%vs.(8.12±1.00)%]、Th17细胞比例[(12.34±1.09)%vs.(8.76±0.78)%]高于对照组(t=9.519、25.130,均P<0.01)。细菌感染组Th1细胞比例[(12.11±1.08)%vs.(16.54±2.31)%]、Th1/Th2[(1.34±0.25)%vs.(1.68±0.30)%]低于非细菌感染组(t=13.460、6.540,均P<0.01),Th2细胞比例[(11.23±1.12)%vs.(9.87±0.76)%]、Th17细胞比例[(13.11±2.13)%vs.(11.32±1.09)%]高于非细菌感染组(t=7.291、5.359,均P<0.01)。重度患儿Th1细胞比例[(11.53±2.43)%vs.(17.85±2.31)%]、Th1/Th2[(1.29±0.13)%vs.(1.89±0.24)%]低于轻度患儿(t=13.110、13.700,均P<0.01),Th2细胞比例[(12.32±2.11)%vs.(9.04±1.02)%]、Th17细胞比例[(14.24±3.42)%vs.(10.11±1.45)%]高于轻度患儿(t=11.110、9.005,均P<0.01)。治疗后新生儿感染性肺炎患儿Th1细胞比例[(21.32±2.14)%vs.(14.23±1.56)%]、Th1/Th2[(2.43±0.35)%vs.(1.56±0.34)%]高于治疗前(t=28.330、18.870,均P<0.01),Th2细胞比例[(8.78±1.09)%vs.(10.56±2.13)%]、Th17细胞比例[(9.21±0.87)%vs.(12.34±1.09)%]低于治疗前(t=7.873、23.750,均P<0.01)。治疗无效组患儿Th1细胞比例[(11.23±1.14)%vs.(20.19±2.12)%]、Th1/Th2[(1.20±0.23)%vs.(2.45±0.23)%]低于治疗有效组(t=21.970、25.470,均P<0.01),Th2细胞比例[(13.11±1.38)%vs.(8.56±1.00)%]、Th17细胞比例[(14.87±2.21)%vs.(9.30±0.21)%]高于治疗有效组(t=19.160、22.720,均P<0.01)。ROC曲线分析显示,Th1/Th2细胞、Th17细胞联合预测足月新生儿感染性肺炎患儿治疗效果的效能更优(AUC=0.940、95%CI=0.835~0.978,灵敏度为94.00%,特异度为78.98%)。Th1/Th2细胞与Th17细胞负相关(r=-0.613,P<0.05)。结论Th1/Th2细胞在足月新生儿感染性肺炎中升高,Th17细胞降低,与患儿病情进展、治疗效果有关,可作为评估患儿病情进展、治疗效果的敏感指标。

结直肠癌患者血清总蛋白、白蛋白、血红蛋白与Th1/Th2免疫平衡及调节性T细胞、辅助性T细胞17相关性分析

目的探究结直肠癌患者血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、血红蛋白(Hb)与其辅助性T细胞(Th)1/Th2免疫平衡及Treg、Th17相关性。方法使用主观全面评定量表中营养状态评分对2018年12月至2021年10月河北北方学院附属第一医院收治的结直肠癌患者500例进行营养评估,根据患者营养评估结果随机抽取其中营养状态优者162例,营养状态良者161例,营养状态差者177例。使用简单随机抽样法,选取营养状态优组(40例)、轻中度营养不良组(40例)、重度营养不良组(40例)。观察不同组别患者营养指标,Th1/Th2、Treg/Th17免疫平衡相关指标并进行相关性分析。结果营养状态优组TP、ALB、Hb、白细胞介素(IL)-2、γ-干扰素、肿瘤坏死因子-α、Th1细胞表达、Th1/Th2显著高于轻中度营养不良组及重度营养不良组(P<0.05),轻中度营养不良组显著高于重度营养不良组(P<0.05);营养状态优组运铁蛋白(TF)、IL-6、IL-10、IL-5、Th2细胞表达低于轻中度营养不良组及重度营养不良组(P<0.05),轻中度营养不良组显著低于重度营养不良组(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,TP与患者IL-2、TNF-α水平及Th1细胞表达、Th1/Th2呈正相关(r=0.500、0.471、0.413、0.332,P<0.05),与IL-6、IL-10、IL-5水平及Th2、Treg、Th17细胞表达呈负相关(r=-0.443、-0.442、-0.396、-0.213、-0.422、-0.419,P<0.05);ALB与患者IL-2、IFN-γ、TNF-α水平及Th1细胞表达、Th1/Th2呈正相关(r=0.493、0.338、0.393、0.336、0.321,P<0.05),与IL-6、IL-10、IL-5水平及Th2、Treg、Th17细胞表达呈负相关(r=-0.360、-0.313、-0.269、-0.231、-0.369、-0.306,P<0.05);TF与患者IL-6、IL-10、IL-5水平及TH2、Treg、Th17细胞表达呈正相关(r=0.577、0.490、0.345、0.394、0.507、0.490,P<0.05),与IL-2、IFN-γ、TNF-α水平及Th1细胞表达、Th1/Th2呈负相关(r=-0.665、-0.401、-0.590、-0.540、-0.432,P<0.05);Hb与患者IL-2、TNF-α水平及Th1细胞表达呈正相关(r=0.280、0.392、0.194,P<0.05),与IL-6、IL-10、IL-5水平及Th2、Treg、Th17细胞表达呈负相关(r=-0.284、-0.188、-0.308、-0.210、-0.266、-0.327,P<0.05)。结论结直肠癌患者营养学指标与其Th1/Th2免疫平衡及Treg、Th17相关性具有相关性,随着结直肠癌患者营养学指标变化会引起其Th1/Th2免疫平衡及Treg、Th17表达水平改变,营养状态较差患者Th1/Th2免疫平衡向Th2漂移,Treg、Th17升高,抗肿瘤免疫能力减弱。

外周血EETs水平与咳嗽变异性哮喘患儿Th1和Th2及其细胞因子、小气道功能的相关性分析

目的探讨外周血嗜酸性粒细胞胞外诱捕网(EETs)水平与咳嗽变异性哮喘(CVA)患儿的辅助性T淋巴细胞(Th)1和Th2及其细胞因子、小气道功能的相关性。方法选取2019年10月至2022年10月重庆市开州区人民医院收治的95例CVA患儿为CVA组,选取同期于该院儿科保健门诊体检的67例健康儿童为对照组。检测外周血中形成EETs的嗜酸性粒细胞(EOS)百分比、Th1和Th2细胞占比、Th1/Th2比值、血清Th1和Th2细胞因子[白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-6、干扰素(IFN)-γ]水平及小气道功能[25%、50%、75%肺活量的最大呼气量(FEF25%、FEF50%、FEF75%)和最大中期呼气流速(FEF25%~FEF75%)]。分析外周血形成EETs的EOS百分比与Th1和Th2及其细胞因子、小气道功能的相关性,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析外周血形成EETs的EOS百分比诊断CVA的价值。结果CVA组外周血形成EETs的EOS百分比明显高于对照组[(20.35±6.09)%vs.(6.32±1.28)%,t=18.554,P<0.05]。CVA组Th2细胞占比、血清IL-4水平、血清IL-6水平均明显高于对照组(t值分别为31.012、13.649、17.644,P<0.05);Th1细胞占比、Th1/Th2比值、血清IL-2水平、血清IFN-γ水平,以及FEF25%、FEF50%、FEF75%、FEF25%~FEF75%均明显低于对照组(t值分别为18.833、43.188、11.652、13.788、16.390、33.090、42.565、39.767,P<0.05)。CVA组外周血形成EETs的EOS百分比与Th2细胞占比、血清IL-4水平、血清IL-6水平均呈正相关(r值分别为0.532、0.421、0.395,P<0.05),与Th1细胞占比、Th1/Th2比值、血清IL-2水平、血清IFN-γ水平、FEF25%、FEF50%、FEF75%、FEF25%~FEF75%均呈负相关(r值分别为-0.253、-0.605、-0.321、-0.385、-0.421、-0.377、-0.485、-0.568,P<0.05)。ROC曲线分析显示,外周血形成EETs的EOS百分比诊断CVA的曲线下面积(AUC)为0.760(95%CI:0.687~0.824),灵敏度为78.95%,特异度为77.61%。结论外周血形成EETs的EOS百分比增高与CVA患儿Th1/Th2比值失衡、Th2细胞因子过度释放及小气道损伤有关,其有望作为CVA的潜在标志物。

基于Notch信号通路探讨芪蛭皱肺颗粒对慢性阻塞性肺疾病大鼠Th1/Th2免疫平衡的调节机制

目的探讨果蝇双翅边缘缺刻同源基因(Notch)信号通路在慢性阻塞性肺疾病(COPD)辅助性T细胞1(Helper T cells 1,Th1)和辅助性T细胞2(Helper T cells 2,Th2)失衡中的作用及芪蛭皱肺颗粒的干预机制。方法70只Wistar大鼠随机挑选10只作为空白对照组,其余大鼠均采用香烟烟雾(CS)联合气管滴注脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)法建立COPD模型,空白对照组及造模组各随机挑选3只大鼠验证造模是否成功。造模结束进行灌胃给药干预,造模组大鼠随机分为模型对照组、阳性对照组(67.5μg·kg^(-1))及芪蛭皱肺颗粒高中低剂量组(3.24、1.62、0.81 g·kg^(-1)),分别给予生理盐水、醋酸地塞米松混悬液、芪蛭皱肺高、中、低剂量混悬液进行灌胃干预,空白对照组同模型对照组,灌胃等体积生理盐水。经28天造模及28天治疗后,采用动物肺功能测试系统检测吸气峰流速(Peak Inspiratory Flow,PIF)和呼气峰流速(Peak Expiratory Flow,PEF),处死大鼠提取肺脏、脾脏、血清及支气管肺泡灌洗液(BALF),苏木素-伊红(HE)染色评价肺组织病理变化,酶联免疫吸附实验法(ELISA)测定血清及BALF中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,流式细胞仪检测脾脏Th1/Th2细胞水平,免疫组织化学法(Immunohistochemistry,IHC)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肺组织Notch1、Hes家族发状分裂相关增强子1(Hes1)、Hey家族发状分裂相关增强子1(Hey1)蛋白水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR,RT-PCR)检测肺组织Notch1、Hes1、Hey1基因表达水平。结果与空白对照组比较,模型对照组大鼠肺功能显著降低(P<0.05),肺组织出现炎性细胞浸润、支气管结构破坏等病变,血清及BALF中TNF-α含量显著升高(P<0.05),脾Th1细胞百分比显著降低(P<0.05),Th2细胞百分比显著升高(P<0.05),肺组织Notch1、Hes1、Hey1蛋白及mRNA表达显著升高(P<0.05),差异均具有统计学意义;与模型对照组比较,各给药组大鼠肺功能显著升高(P<0.05),肺组织病理损伤均有所减轻,血清及BALF中TNF-α含量显著降低(P<0.05),脾Th1细胞百分比显著升高(P<0.05),Th2细胞百分比显著降低(P<0.05),肺组织Notch1、Hes1、Hey1蛋白及mRNA表达显著降低(P<0.05),差异均具有统计学意义。结论芪蛭皱肺颗粒通过抑制Notch信号通路调节Th1/Th2平衡,从而改善COPD大鼠肺功能及病理损伤,影响其免疫功能。

骨形态构建蛋白2型受体下调单核细胞趋化蛋白1/CC类趋化因子受体2通路对哮喘小鼠气道炎症和Th1/Th2平衡的影响

目的探究骨形态构建蛋白2型受体(BMPR2)对小鼠哮喘模型气道炎症和Th1/Th2平衡的影响及其机制。方法于2021年9月至2022年11月选用24只C57BL/6小鼠尾静脉注射BMPR2腺病毒,随后卵清蛋白(OVA)致敏和激发建立哮喘小鼠模型;采用随机数字表法分为对照组(生理盐水替代OVA造模)、OVA模型组(OVA诱导小鼠哮喘模型)、OVA+载体(Vector)组(空载慢病毒处理的OVA哮喘模型小鼠)、OVA+BMPR2组(BMPR2过表达慢病毒处理的OVA哮喘模型小鼠),每组6只。收集支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织。免疫组织化学检测肺组织BMPR2表达水平;苏木精-伊红染色观察肺组织病理学改变;瑞氏染色后计数BALF中各类炎症细胞数目;酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒检测BALF中白细胞介素(IL)-4,IL-5和IL-13炎症因子水平;蛋白质印迹法检测肺组织和气道上皮细胞16HBE中BMPR2、单核细胞趋化蛋白-1(MCP1)及其受体CC类趋化因子受体2(CCR2)蛋白表达水平。免疫共沉淀实验检测BMPR2与MCP1相互作用。结果与对照组相比,OVA模型组肺组织BMPR2(0.36±0.05比1.04±0.04)显著降低(P<0.01);小鼠肺泡破坏程度严重,肺组织有大量的淋巴细胞浸润;BALF中炎症细胞总数[(93.25±9.32)×10^(4)个/毫升比(4.79±0.41)×10^(4)个/毫升,P<0.001]、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞均升高;Th1相关炎症因子γ干扰素(IFN-γ)水平降低,Th2相关炎症因子IL-4,IL-5和IL-13水平升高。过表达BMPR2可降低肺泡破坏程度和淋巴细胞浸润程度。与OVA+Vector组相比,OVA+BMPR2组BALF中炎症细胞总数、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞均降低;ELISA结果表明,OVA+BMPR2组BALF中IFN-γ水平升高,IL-4,IL-5和IL-13水平降低,提示过表达BMPR2可上调Th1百分比,下调Th2细胞百分比。进一步研究表明,BMPR2过表达显著下调了MCP1及其受体CCR2的表达水平,且BMPR2与MCP1存在相互作用。结论BMPR2可通过下调MCP1/CCR2通路降低哮喘小鼠气道炎症,并调节Th1/Th2平衡。

缺血性脑卒中患者的外周血CDC42表达水平、炎症相关Th和细胞因子水平及其与神经功能缺损、焦虑/抑郁及认知功能障碍程度的相关性

目的分析缺血性脑卒中患者的外周血细胞分裂周期蛋白42(CDC42)表达水平、炎症相关Th和细胞因子水平,并探讨上述指标与神经功能缺损、焦虑/抑郁及认知功能障碍程度的相关性。方法纳入200例缺血性脑卒中患者、200例健康体检者分别作为观察组、对照组。比较两组外周血的CDC42 mRNA表达水平及Th1、Th2、Th17、白细胞介素(IL)-6、IL-10、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。分析观察组上述指标与美国国立卫生院卒中量表(NIHSS)评分、焦虑自评量表(SAS)评分、抑郁自评量表(SDS)评分、简易智力状况检查(MMSE)量表评分的相关性。结果观察组的IL-6、TNF-α、Th1、Th17水平高于对照组,而CDC42 mRNA表达水平及Th2、IL-10水平低于对照组(P<0.05)。观察组Th1、Th17、IL-6、TNF-α水平与NIHSS评分、SAS评分、SDS评分呈正相关,与MMSE量表评分呈负相关(P<0.05),而CDC42 mRNA表达水平及IL-10、Th2水平与NIHSS评分、SAS评分、SDS评分呈负相关,与MMSE量表评分呈正相关(P<0.05)。结论缺血性脑卒中患者外周血促炎性Th(Th1、Th17)及细胞因子(IL-6、TNF-α)水平升高,而抗炎性Th(Th2)及细胞因子(IL-10)水平降低,免疫调节因子CDC42表达水平下调,上述指标可在一定程度上反映患者的神经功能缺损、焦虑/抑郁及认知功能障碍程度,有助于监测患者的病情程度及进展情况。

老年特应性皮炎患者外周血Th1、Th2、Th17细胞与鳞状上皮细胞癌抗原水平的变化及意义

目的探究外周血辅助性T细胞Th1、Th2、Th17和鳞状细胞癌抗原(SCCA)水平在老年特应性皮炎患者中的变化及其意义。方法以2022年3月—2022年7月于四川省人民医院皮肤科就诊的25例老年特应性皮炎患者(老年特应性皮炎组)及同期33例健康体检者(健康对照组)为研究对象。采取流式细胞术测定外周血Th1、Th2和Th17细胞占CD4+T细胞的比例;检测老年特应性皮炎患者的外周血嗜酸性粒细胞(EOS)计数、总免疫球蛋白E(IgE)及血清SCCA水平;采用Spearman法进行相关性分析。结果老年特应性皮炎患者皮损严重且分布广泛,主要表现为四肢伸侧及背部苔藓样湿疹,部分患者有1种或多种系统性疾病。老年特应性皮炎组的外周血EOS计数较健康对照组明显增加(P<0.05)。老年特应性皮炎组外周血中Th2和Th17细胞比例均高于健康对照组(P<0.05),而Th1细胞比例与健康对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。老年特应性皮炎组外周血EOS计数与Th2细胞比例、SCCA水平有相关性(rs=-0.399和0.607,均P<0.05)。老年特应性皮炎患者的SCCA水平与SCORAD评分呈正相关(rs=0.416,P<0.05)。结论老年特应性皮炎患者具有特有的临床特征,以Th2和Th17型炎症为主。老年特应性皮炎患者血清SCCA水平可在一定程度上反映其疾病的严重程度。

苦参碱对心肌梗死大鼠辅助性T细胞1/辅助性T细胞2平衡及钾通道Kv2.1和KIR2.1的影响

目的探讨苦参碱对心肌梗死大鼠辅助性T细胞1(Th1)/辅助性T细胞2(Th2)平衡及钾通道Kv2.1、KIR2.1的影响。方法制备心肌梗死大鼠模型60只,随机分为模型组、低剂量苦参碱组(50 mg/kg)、中剂量苦参碱组(100 mg/kg)、高剂量苦参碱组(200 mg/kg)、硫氮卓酮组(2.61 mg/kg),每组各12只,药物处理组大鼠于建模成功后每天灌胃治疗,持续7 d,另取12只大鼠作为假手术组。末次给药24 h后处死大鼠检测心肌梗死面积,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-10水平,流式细胞术检测外周血Th1/Th2比值,蛋白质印迹法(Western blot)检测心肌组织钾通道Kv2.1、KIR2.1蛋白水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠心肌梗死面积比例、血清CK-MB、cTnI、IFN-γ、IL-2水平、外周血Th1/Th2比值升高,血清IL-4、IL-10、心肌组织钾通道Kv2.1及KIR2.1蛋白水平降低(P<0.05);与模型组比较,各药物处理组大鼠心肌梗死面积比例、血清CK-MB、cTnI、IFN-γ、IL-2水平、外周血Th1/Th2比值降低,血清IL-4、IL-10水平、心肌组织钾通道Kv2.1及KIR2.1蛋白水平升高且各苦参碱组呈剂量依赖性(P<0.05);高剂量苦参碱组和硫氮卓酮组大鼠上述指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论苦参碱可恢复心肌梗死大鼠Th1/Th2平衡,上调心肌组织钾通道Kv2.1和KIR2.1蛋白的表达,降低心肌梗死面积,起心肌保护作用。

兔椎间盘生理屏障损伤后髓核组织辅助性T细胞1／辅助性T细胞2平衡漂移状态的研究

目的探讨兔椎间盘生理屏障损伤后辅助性T细胞1（Thl）／辅助性T细胞2（Th2）平衡漂移状态。方法采用纤维环穿刺构建兔椎间盘退变的动物模型，在术后1、3d、1、3周采集外周静脉血，采用双抗夹心酶联免疫吸附测定（ELISA）方法，分别检测血清中Th1、Th2型细胞因子水平[肿瘤坏死因子（TNF）-α、干扰素（IFN）-1、白细胞介素（IL）-10及IL-4]。结果造模后的1、3d、1、3周兔血清中TNF-α含量分别为（150．531±56．74）、（83．833±37．434）、（90．990±3．554）、（87．950±13．289）ng／L；IFN-γ含量分别为（99．263±18．421）、（125．427±9．156）、（180．368±18．293）、（165．531±12．548）ng/L，明显高于造模前（P〈0．05），术后各个时间点模型组血清中TNF-α与IFN-γ含量高于假手术组与正常组（P〈0．05）。造模后的1、3d、1、3周兔血清中IL-10含量分别为（33．947±3．164）、（27．928±0．493）、（29．992±4．33）、（30．0254-2．339）ng/L；IL4含量分别为（34．517±3．032）、（35．056±1．882）、（35．983±2．369）、（32．549±5．086）ng／L，与术前比较未见明显增高（P〉0．05）。术后各个时间点模型组血清中IL-10与IL-4含量与假手术组及正常组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论生理屏障损伤后椎间盘发生退变的机制与Th1优势状态有关。

先天性心脏病相关性肺动脉高压患者外周血中辅助性T细胞和调节性T细胞的表达水平研究

目的探讨先天性心脏病相关性肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension associated with congenital heart disease,CHD-PAH)患者外周血中1型辅助性T细胞(Th1)、2型辅助性T细胞(Th2)、17型辅助性T细胞(Th17)和调节性T(Treg)细胞表达水平变化及其临床意义。方法选取昆明医科大学附属延安医院心血管内科2017年5月至2019年12月收治的先天性心脏病患者69例,根据肺动脉平均压(mean pulmonary artery pressure,mPAP)值将其分为3组:正常组(B组,27例),轻度组(C组,20例)和中重度组(D组,22例),同时选取健康成人对照组(A组,14例)。收集患者外周血,通过流式细胞术检测外周血中Th1、Th2、Th17、Treg细胞的表达水平,计算Th1/Th2、Th17/Treg值,并分析各细胞表达水平与mPAP的相关性。结果与A组相比,CHD各组患者血清的Th1、Th17水平、Th1/Th2比值均呈升高趋势,Th2、Treg水平呈降低趋势,差异无统计学意义(P>0.05);与A组相比,B组、C组、D组的Th17/Treg比值升高,差异有统计学意义[0.13(0.07,0.45)比1.68(0.15,4.02)比1.51(0.18,4.19)比1.39(0.19,2.47),P<0.05];与A组相比,B组患者的Treg细胞水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);与B组相比,C组Th1、Th2水平、Th17/Treg值呈下降趋势,Th17、Treg水平、Th1/Th2值呈上升趋势,差异无统计学意义(P>0.05),D组的Th1、Th2、Th17、Treg水平、Th1/Th2值均呈升高趋势,Th17/Treg值呈下降趋势,差异无统计学意义(P>0.05);与C组相比,D组的Th1、Th2、Th17水平、Th1/Th2值呈上升趋势,Treg水平、Th17/Treg比值呈下降趋势,差异无统计学意义(P>0.05);B组、C组、D组患者的Th17细胞的表达水平与mPAP呈正相关(R=0.272,P<0.05)。结论CHD-PAH患者外周血中存在Th17/Treg失衡,Th17/Treg失衡可能在CHD-PAH的发生发展中起着重要的作用。

淋巴血浆置换治疗重症皮肌炎的临床疗效及对患者血清辅助性T细胞与T细胞亚群平衡的影响

目的分析淋巴血浆置换治疗重症皮肌炎(DM)疗效及对患者血清辅助性T细胞(Th)与T细胞亚群平衡的影响。方法选取2020年12月至2021年12月萍乡市人民医院收治的116例重症DM患者作为研究对象,采用随机数字表法分为对照组与观察组,每组58例。对照组采用静脉注射免疫球蛋白(IVIG)治疗,观察组采用淋巴血浆置换治疗,比较两组临床疗效、实验室指标[红细胞沉降率(ESR)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)]、Th及T细胞亚群水平、不良反应发生情况、血常规与肾功能[血肌酐(SCr)、WBC、血红蛋白(Hb)、血小板计数(PLT)]。结果观察组治疗总有效率为89.66%,高于对照组的74.14%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组ESR及CK、LDH、AST水平均低于治疗前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组Th1水平、Th1/Th2均低于治疗前,Th2、Th17、CD4^(+)、CD8^(+)水平均高于治疗前,且观察组Th1水平、Th1/Th2均低于对照组,Th2、Th17、CD4^(+)、CD8^(+)水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应发生率比较差异无统计学意义。两组治疗前后组间及组内WBC、PLT及SCr、Hb水平比较差异无统计学意义。结论淋巴血浆置换治疗重症DM疗效确切,可纠正患者外周血Th1/Th2失衡情况,调节Th、T细胞亚群平衡,且不良反应少,值得临床推广应用。

慢性牙周炎患者外周血辅助性T细胞及牙周组织白细胞介素-17和干扰素-γ表达与感染机制的相关性研究

目的探讨慢性牙周炎患者外周血辅助性T细胞1(Th1)、辅助性T细胞2(Th2)、辅助性T细胞17(Th17)及牙周组织白细胞介素-17(IL-17)、干扰素-γ(IFN-γ)表达与感染机制的相关性。方法选取2019年10月至2021年1月本院收治的慢性牙周炎患者110例作为观察组,按照慢性牙周炎的严重程度分为重度组(n=49)与轻中度组(n=61),选取同期60名牙周健康者作为健康组,比较3组外周血Th1、Th2、Th17水平,分析牙周组织HE染色检测结果,比较观察组与健康组IL-17、IFN-γ细胞H-score评分。结果重度组、轻中度组外周血Th1、Th2、Th17水平均高于健康组,且重度组Th1、Th17水平高于轻中度组,差异有统计学意义(P<0.05)。轻度牙周炎患者淋巴细胞数目少于中、重度牙周炎患者,且中度牙周炎患者少于重度牙周炎患者,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组牙周组织IL-17、IFN-γ细胞的H-score评分均高于健康组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论慢性牙周炎患者外周血Th1、Th2、Th17及牙周组织IL-17、IFN-γ表达升高,与感染相关。

基于NLRP3及Th1、Th2平衡探讨针灸辅助治疗慢性阻塞性肺疾病的临床价值

目的:研究基于NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)及辅助性T细胞1(Th1)、辅助性T细胞2(Th2)平衡探讨针灸辅助治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)的临床价值。方法:选取2020年1月—2022年9月贵州医科大学附属医院收治的251例COPD患者,通过病历号数表抽签法将其随机分为对照组(n=125)、研究组(n=126)。对照组参照《慢性阻塞性肺疾病诊治指南(2013年修订版)》采取对症治疗;研究组在对照组基础上给予针灸治疗。观察两组治疗前后血液及痰液中NLRP3 mRNA表达水平、白细胞介素1-β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)、Th1[γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]细胞因子水平、Th2[白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-5(IL-5)]细胞因子水平、肺功能、生活质量及治疗期间安全性、随访3个月后再入院率。结果:治疗前,两组痰液及血清NLRP3 mRNA、IL-1、IL-18、IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-5水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组痰液及血清NLRP3 mRNA、IL-1、IL-18、IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-5水平均低于治疗前,且研究组NLRP3 mRNA、IL-1、IL-18、IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-5水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FEV_(1))、FEV_(1)占预计值百分比(FEV_(1)%pred)、FEV_(1)/FVC%水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组FVC、FEV_(1)、FEV_(1)%pred、FEV_(1)/FVC%均高于治疗前,且研究组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组慢阻肺评估测试问卷(CAT)评分、改良英国医学研究委员会呼吸困难量表(mMRC)评分比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组CAT评分、MRC评分低于治疗前,且研究组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗期间并未出现疼痛、包块、局部血肿及感染等不良反应。研究组3个月再入院率为1.59%,低于对照组的10.40%,差异有统计学意义(χ^(2)=8.673,P=0.003)。结论:针灸可改善COPD患者肺功能,调节NLRP3及Th1、Th2细胞因子水平,改善生活质量及呼吸程度,降低再入院风险,安全性高。

妊娠糖尿病患者血清中FPR2的表达情况与Th1/Th2细胞平衡的相关性研究

目的探讨妊娠糖尿病(GDM)患者血清中甲酰肽受体2(FPR2)的表达情况与辅助性T细胞1(Th1)/辅助性T细胞2(Th2)平衡的相关性。方法采用回顾性研究,将2020年1月至2022年1月于北京市顺义区妇幼保健院进行产检并住院分娩的52例GDM孕妇设为研究组,并选择同期在北京市顺义区妇幼保健院产检和分娩的健康孕妇60名作为对照组。采用实时荧光定量PCR检测两组孕妇血清中FPR2的相对表达水平;采用流式细胞术检测两组孕妇血清中Th1/Th2细胞比例;采用酶联免疫吸附试验检测两组孕妇血清中干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-10水平;采用Pearson法分析GDM患者血清中FPR2的表达水平与Th1/Th2细胞比例之间的相关性。结果研究组患者血清中FPR2、Th1表达水平分别为1.59±0.41、(9.59±2.56)%,均明显高于对照组[0.97±0.25、(8.61±2.02)%],Th2表达水平为(2.06±0.51)%,明显低于对照组[(3.28±0.88)%],且Th1/Th2细胞比例为5.11±1.02,高于对照组(3.20±0.79),差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组患者血清中IFN-γ、IL-2水平分别为(27.96±5.21)、(16.69±4.02)pg/mL,均明显高于对照组[(20.19±4.59)、(14.12±3.86)pg/mL],而IL-4、IL-10水平分别为(11.46±2.36)、(31.52±6.24)pg/mL,均明显低于对照组[(13.09±3.01)、(38.81±7.16)pg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson法分析结果显示,GDM患者血清中FPR2的表达与Th1/Th2细胞比例之间呈正相关(r=0.373,P<0.05)。结论GDM患者血清中FPR2高表达、Th1/Th2细胞比例升高,两者呈正相关,FPR2可能通过调节Th1/Th2细胞比例影响GDM的发生。

加味六安煎对咳嗽变异性哮喘豚鼠肺组织病理及辅助性T细胞1、2类细胞因子的影响

目的:观察加味六安煎对咳嗽变异性哮喘豚鼠肺组织病理及辅助性T细胞1、2类细胞因子水平的影响,探讨免疫相关作用机制。方法:将30只雄性豚鼠随机分为对照组、模型组、孟鲁司特钠组、中药低中高剂量组。除对照组外均腹腔注射卵蛋白及氢氧化铝致敏后用卵蛋白雾化激发,建立咳嗽变异性哮喘(CVA)模型,相应给药处理。观察肺组织病理形态变化,检测CVA豚鼠肺泡灌洗液中白细胞介素-12(IL-12)、白细胞介素-13(IL-3)。结果:光镜:CVA模型豚鼠较正常组支气管平滑肌增生肥厚,肺组织充血水肿,体积增大,周围炎症细胞浸润,杯状细胞及黏液栓增多,肺泡扩张、塌陷;观察组较模型组肺组织充血水肿、平滑肌增生肥厚及黏液栓等情况均不同程度减轻。透射电镜:模型组较正常组肺泡壁增厚、肺间质充血明显,Ⅱ型肺泡上皮绒毛脱落,线粒体数量减少,部分肿胀。观察组较模型组肺泡壁增厚、肺泡上皮绒毛脱落程度轻,胞质内线粒体数量多。肺泡灌洗液(BALF):模型组较正常组IL-12降低,IL-13升高,IL-12/IL-13下降但不显著;观察组较模型组IL-12均上升,其中中药中、高剂量组上升显著;IL-13降低但不显著,IL-12/IL-13均上升,中药中、高剂量组升高明显。结论:加味六安煎能减少CVA豚鼠炎症细胞浸润,减轻肺组织充血水肿及平滑肌增生肥厚,其作用机制可能与改善IL-12及IL-13水平,调控辅助性T细胞1、2免疫失衡有关。

哮喘患者全血在尘螨主要过敏原刺激下辅助性T淋巴细胞1/辅助性T淋巴细胞2细胞内细胞因子的表达与偏移

目的对尘螨过敏的哮喘儿童外周全血体外持续给予尘螨主要过敏原Der p和Der f刺激,观察辅助性T淋巴细胞(Th)内细胞因子的表达,探讨过敏原暴露对Th1/Th2偏移的影响。方法选择尘螨皮试阳性的哮喘患者23例,采集全血,体外与尘螨主要过敏原Der p、Der f共同孵育培养8h,以单克隆抗体对T淋巴细胞表面抗原、细胞内白介素(IL)-4,干扰素(IFN)-γ进行标记,应用流式细胞技术检测Th细胞内细胞因子的表达。结果哮喘患者全血体外Der p、Der f持续暴露后(过敏原暴露组),Th0、Th1、Th2表达率分别为(0.83±0.45)%、(10.70±4.42)%、(2.16±1.17)%,非过敏原暴露组Th0、Th1、Th2表达率分别为(0.93±0.52)%、(9.19±3.75)%、(1.67±0.82)%。过敏原暴露组Th2表达率显著高于非过敏原暴露组(P<0.05),而两组Th0、Th1表达率的差异无显著性(P>0.05)。过敏原暴露组因Th2增高,Th1/Th2比例降低,Th1/Th2平衡向Th2偏移,与非过敏原暴露组的差异有显著性(P<0.01)。结论Der p、Der f对Th细胞有明显的选择性,过敏原的持续暴露促进Th2优势表达,Th1/Th2平衡向Th2转化,可能是引起哮喘症状反复和加重的机制之一。因此,过敏原的回避和特异性的脱敏治疗也是哮喘治疗的措施之一,应予以必要的重视。

克拉霉素对铜绿假单胞菌慢性肺部感染小鼠辅助性T淋巴细胞1型/辅助性T淋巴细胞2型免疫平衡的调节作用

目的探讨克拉霉素对铜绿假单胞菌(PA)慢性肺部感染小鼠肺组织辅助型T淋巴细胞(Th)1/Th2免疫平衡的调节作用。方法将54只小鼠随机分入克拉霉素组、0.9%氯化钠溶液组和对照组。克拉霉素组和0.9%氯化钠溶液组通过小鼠气道接种由包裹PA的琼脂糖珠方法建立的PA慢性肺部感染模型,自建模后第7天起分别给予克拉霉素和0.9%氯化钠溶液治疗,对照组小鼠经气道接种无菌琼脂糖珠给予0.9%氯化钠溶液。分别于建模后第7、10、14天处死小鼠。标本进行肺组织细菌培养、病理学检查、支气管肺泡灌洗液(BALF)中γ-干扰素(IFN-γ)/白细胞介素(IL)-4水平测定和肺组织转录因子T-betmRNA/GATA-3mRNA表达水平分析。结果克拉霉素组小鼠在治疗后慢性肺部感染的症状明显改善。经气道接种后第7天,0.9%氯化钠溶液组和克拉霉素组BALF中IFN-γ、IL-4水平均显著高于对照组(P值均<0.05)。气道接种后第14天,克拉霉素组的IFN-γ水平显著低于0.9%氯化钠溶液组(P<0.05)。气道接种后第10、14天,克拉霉素组BALF中IL-4水平均显著高于0.9%氯化钠溶液组和对照组同时间点(P值均<0.05),而IFN-γ/IL-4比值均显著低于0.9%氯化钠溶液组同时间点(P值均<0.05)。气道接种后第7、10天,克拉霉素组与0.9%氯化钠溶液组的Th1、Th2细胞转录因子T-betmRNA、GATA-3mRNA表达水平相近,均显著高于对照组(P值均<0.05)。气道接种后第14天,克拉霉素组T-betmRNA表达水平、T-betmRNA/GATA-3mRNA比值均显著低于0.9%氯化钠溶液组(P值均<0.05)。结论在PA慢性肺部感染初期采用克拉霉素治疗可使小鼠肺组织的Th1/Th2平衡向Th2偏移,有利于缓解气道炎症。