核受体辅激活蛋白5在肝细胞癌患者中的表达及其临床意义

目的:探讨核受体辅激活蛋白5(NCOA5)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)癌组织、癌旁组织中的表达及其与临床病理特征之间的关系。方法:采用蛋白质免疫印迹技术(Western blot)检测64例肝细胞癌患者癌组织、癌旁组织中NCOA5蛋白表达水平,并与临床病理资料进行统计学分析。结果:Western blot分析结果显示NCOA5蛋白在肝细胞癌组织的表达水平(0.27±0.10)明显低于癌旁组织(0.68±0.06)(P<0.05);NCOA5蛋白在肝细胞癌组织中的表达与肿瘤直径、门静脉癌栓、复发转移及分化程度等因素有关(P<0.05)。结论:肝细胞癌患者癌组织中NCOA5蛋白表达水平明显低于癌旁组织,提示NCOA5的低表达与肝癌的发生发展密切相关,且其可能在肝细胞癌的恶性转化、侵袭和转移过程中发挥重要的作用。

胃癌组织核受体辅激活蛋白5的表达变化及其临床意义

目的探讨核受体辅激活蛋白5(NCOA5)在胃癌发生、发展中的作用。方法选择胃癌患者72例,取其手术切除的胃癌组织及其配对的癌旁正常组织,采用FQ-PCR、Western blotting法检测NCOA5 mRNA和蛋白表达,分析NCOA5表达与患者临床病理参数的关系。结果胃癌组织及癌旁正常组织NCOA5 mRNA表达下调率分别为80.6%(58/72)、16.7%(12/72);NCOA5蛋白表达缺失率分别为75.0%(54/72)、13.9%(10/72),二者比较P均<0.05。胃癌组织NCOA5 mRNA表达下调及NCOA5蛋白表达缺失与患者性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤直径、远处转移均无关(P均>0.05),与肿瘤组织分化程度、TNM分期均有关(P均<0.05);胃癌组织NCOA5 mRNA表达下调与淋巴结转移有关(P<0.05),而NCOA5蛋白表达缺失与淋巴结转移无关(P>0.05)。结论 NCOA5低表达可能促进胃癌的发生、发展。

鸡核受体辅激活蛋白1基因的荧光定量PCR检测

鸡核受体辅激活蛋白1基因(NCOA1)mRNA的表达对性腺的发育、成熟均起关键作用,并且与繁殖性状相关。为了建立荧光定量PCR技术检测鸡NCOA1表达量的方法,根据GenBank中NCOA1基因序列设计合成了引物,以β-action基因为内参基因,对荧光定量PCR方法进行了评估。结果表明:构建的标准曲线线性关系良好,建立的NCOA1基因荧光定量PCR检测方法灵敏度高、特异性强,准确可靠。建立的SYBR Green I实时荧光定量PCR方法可以测定鸡NCOA1mRNA表达水平的相对含量。

甲状腺癌组织中核受体辅激活蛋白5表达情况及其与临床病理特征的关系

目的探究甲状腺癌组织中核受体辅激活蛋白5(NCOA5)表达情况及其与临床病理特征的关系。方法随机选取2018年2月至2019年2月在我院行手术治疗的78例甲状腺癌患者作为研究对象,使用免疫组化法检测甲状腺癌组织、癌旁正常组织的NCOA5蛋白表达情况,并分析其与临床病理特征的关系。结果 NCOA5蛋白在甲状腺癌组织中阳性表达率低于癌旁正常组织,差异具有统计学意义(P<0.05)。NCOA5蛋白在肿瘤分化程度低、临床分期Ⅲ+Ⅵ期、淋巴结转移组织中阳性表达率低于肿瘤分化程度高+中临床分期Ⅰ+Ⅱ期、非淋巴结转移组织中的阳性表达率,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 NCOA5蛋白在甲状腺癌组织中低表达,并与临床病理特征关系密切,可作为甲状腺癌诊疗的参考依据。

肝细胞癌组织核受体辅激活蛋白5表达临床意义探讨

目的探讨核受体辅激活蛋白5(nuclear receptorco-activator 5,NCOA5)mRNA及其蛋白在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织和癌旁组织中的表达及其与临床病理特征之间的关系。方法选取郑州大学第一附属医院2012-02-01-2013-02-01手术切除的64例肝癌组织标本及癌旁组织(距离癌组织≥2cm),采用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)和免疫组织化学方法(immunohisochemistry,IHC),检测64例肝细胞癌患者癌组织、癌旁组织中NCOA5mRNA和蛋白表达水平,并与临床病理资料进行统计学分析。结果 RT-PCR结果显示,NCOA5mRNA在肝癌组织和癌旁组织中的阳性表达率分别为15.6%(10/64)和65.6%(42/64),差异有统计学意义,χ2=33.166,P<0.001;IHC结果显示,NCOA5蛋白在肝癌组织和癌旁组织中的阳性表达率分别为12.5%(8/64)和57.8%(37/64),差异有统计学意义,χ2=28.821,P<0.001。临床病理资料分析结果显示,NCOA5mRNA在门静脉癌栓组和无门静脉癌栓组的阳性表达率分别为36.4%(4/11)和11.3%(6/53),差异有统计学意义,χ2=4.333,P<0.05;NCOA5mRNA在术后复发转移组和无复发转移组的阳性表达率分别为35.3%(6/17)和8.5%(4/47),差异有统计学意义,χ2=6.793,P<0.05;NCOA5蛋白在门静脉癌栓组和无门静脉癌栓组的阳性表达率分别为36.4%(4/11)和7.5%(4/53),差异有统计学意义,χ2=6.916,P<0.05;NCOA5蛋白在术后复发转移组和无复发转移组的阳性表达率分别为29.4%(5/17)和6.4%(3/47),差异有统计学意义,χ2=6.053,P<0.05;提示NCOA5在HCC组织中的表达与有无门静脉癌栓及有无术后复发转移等因素有关。结论肝癌组织中NCOA5 mRNA和蛋白的表达一致,NCOA5在肝癌组织中为低表达,在癌旁组织中为高表达,提示NCOA5的低表达可能与肝癌的发生发展密切相关。

核受体辅激活蛋白5在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的 探讨核受体辅激活蛋白5（NCOA5） mRNA及蛋白在结直肠癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）和Western blot法检测74例结直肠癌患者癌组织中NCOA5mRNA和蛋白表达水平,并与临床病理特征进行统计学分析.结果 结直肠癌患者的癌组织中NCOA5 mRNA （74.3％）和蛋白（83.8％）的表达水平低于癌旁组织.结直肠癌组织中NCOA5mRNA和蛋白的表达与性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤Dukes分期及淋巴结转移无明显相关,而与肝脏转移和分化程度显著相关（P＜0.05）.结论 NCOA5的低表达可能参与结直肠癌的发生和转移.

肌钙蛋白I2辅助活化多种核受体的反式作用

为深入研究乳腺癌中孤儿受体ERRα1参与基因表达调控的详细机理,特别是核受体辅激活蛋白在其中的作用,以ERRα1的LBD为诱饵,用酵母双杂交系统筛选人乳腺组织cDNA文库得到了与其有明显相互作用的快速骨骼肌型肌钙蛋白I(TNNI2).应用酵母双杂交技术研究表明,TNNI2与多种核受体存在相互作用,且这种作用依赖于功能性的核受体AF2结构域.在哺乳细胞瞬时共转染实验中,TNNI2显示了对多种核受体反式激活功能的辅助活化作用.研究证明,TNNI2与许多辅激活蛋白类似,以配体依赖(对类固醇激素受体而言)或非依赖(对孤儿受体而言)的方式与核受体功能性AF2结构域相互作用,并增强多种核受体介导的反式作用.

基于生物信息学及动物实验对芪黄固肾通络方治疗糖尿病肾病的研究

目的:探讨芪黄固肾通络方治疗糖尿病肾病(DKD)的作用机制。方法:通过人类基因数据库(GeneCards)、治疗靶点数据库(TTD)、人类疾病相关基因和突变基因数据库(DisGeNET)、综合性药物数据库(DrugBank)等数据库查找芪黄固肾通络方的活性成分、作用靶点、DKD相关的靶点。将药物目标点与病变靶点进行映射,将所获得的交集目标点构造蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络与活性组分-联合目标网络,并进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。通过动物实验对网络药理学结果中芪黄固肾通络方治疗糖尿病肾病核心靶点中富集节点较多的前3靶点进行验证。选取C57BL/6J小鼠为研究对象,链脲佐菌素(STZ)连续2次腹腔注射制备动物模型,8周后测小鼠24 h尿蛋白定量,分为正常组、模型组、模型+芪黄固肾通络方组,干预8周后,测胰岛素、C肽、尿素氮、24 h尿蛋白定量,qPCR及蛋白质印迹法(Western Blotting)检测小鼠肾脏CTNNB1、JUN、NCOA1表达。结果:GO与KEGG富集分析显示芪黄固肾通络方治疗DKD的有效靶点主要涉及晚期糖基化终末产物-晚期糖基化终末产物受体(AGE-RAGE)信号通路、血脂和动脉粥样硬化、流体剪切应力与动脉粥样硬化、神经活性配体-受体交互作用等;动物实验表明,芪黄固肾通络方能够降低DKD小鼠肾组织中连环蛋白β1(CTNNB1)、JUN、核受体辅激活蛋白1(NCOA1)的信使核糖核酸(mRNA)及蛋白表达,改善肾脏损伤。结论:通过网络药理学和实验验证,发现芪黄固肾通络方可能通过降低CTNNB1、JUN、NCOA1蛋白的表达水平干预AGE-RAGE等通路治疗DKD。

石斛提取物通过调控miR-223-3p/CARM1轴改善糖尿病视网膜病变进程

目的探讨石斛提取物通过miR-223-3p/辅激活蛋白关联精氨酸甲基转移酶(CARM)1轴对糖尿病视网膜病变(DR)的影响。方法高糖诱导人视网膜色素上皮细胞系ARPE-19建立DR体外模型细胞,随后使用石斛提取物进行干预处理,观察干预后DR细胞的活性及miR-223-3p/CARM1表达。另构建过表达、抑制miR-223-3p或CARM1相关序列,转染至DR细胞中,检测其生物学行为变化。使用双荧光素报告酶实验验证miR-223-3p与CARM1的关系,拯救实验验证石斛提取物是否通过调控miR-223-3p/CARM1轴影响DR。结果高糖诱导后,ARPE-19细胞活性明显降低,凋亡率明显升高(P<0.05);在石斛提取物干预后,细胞活性显著升高,凋亡被明显抑制(P<0.05);细胞中miR-223-3p表达明显升高,CARM1蛋白表达明显降低(P<0.05)。生物学行为检测结果显示,升高miR-223-3p与抑制CARM1均可明显激活DR细胞的活性,并明显抑制凋亡(P<0.05)。双荧光素报告酶实验显示,升高miR-223-3p后CARM1-WT的荧光活性被明显抑制,且DR细胞中CARM1蛋白表达显著降低,抑制miR-223-3p反之(P<0.05)。拯救实验显示,抑制miR-223-3p后对DR细胞产生的影响被抑制CARM1或石斛提取物完全逆转,而抑制CARM1可以与石斛提取物共同使用进一步提升DR细胞的活性。结论石斛提取物通过调控miR-223-3p/CARM1轴激活DR细胞的活性,抑制凋亡,改善DR的病情发展。

母猪繁殖性能相关5个候选基因的PCR-RFLP多态性研究

为了比较ESR、NCOA1、ADAMTS1、FUT1和RBP4基因对猪繁殖性能的效应大小,采用PCR-RFLP技术,分别检测了杜洛克、长白和大白群体内5个基因的基因型频率和等位基因频率,并分析不同基因型与3个猪群体的总产仔数(TNB)、产活仔数(NBA)和出生窝重(BLW)相关性。结果表明:对猪繁殖性能影响效应最大的是NCOA1和RBP4基因,其次是FUT1和ADAMTS1基因,最小的是ESR基因。NCOA1基因在杜洛克和大白群体内AA型的NBA比BB型的分别高1.11和1.92头,AA型的TNB比BB型的分别高1.18头和0.53头。RBP4基因在3个猪群体内AA型的TNB比BB型的高0.53—0.86,在杜洛克和大白群体内AA型的NBA比BB型的分别高1.1头和1.29头。FUT1在杜洛克和大白群体内AA型的TNB比CBB型的分别高0.47和0.56),AA型的NBA比BB型的分别高0.76头和1.06头。ADAMTS1基因在3个猪群体内AB型的TNB比AA型的高0.67—0.88,AB型的NBA比AA型的高0.54—0.86。在大白群体内ESR基因的BB型的TNB、NBA比AA型的分别高0.36头和0.41头。5个基因的不同基因型对3个猪群体BLW影响不显著。

NCOA7在缺氧条件下通过AhR调控OSCC细胞糖酵解过程

目的:研究核受体辅激活蛋白7(NCOA7)在缺氧条件下对口腔鳞癌细胞糖酵解过程的调节作用。方法:采用免疫荧光双染的方法检测口腔鳞癌组织中NCOA7和芳香烃受体(AhR)的表达。用氯化钴构建人舌鳞癌细胞株(SCC9)的缺氧模型。通过siRNA转染、RT-PCR和蛋白印迹等方法分析NCOA7与AhR的相互调节作用及对细胞糖酵解水平的影响。结果:NCOA7和AhR在口腔鳞癌组织细胞核中表达均高于癌旁组织(P<0.0001)。在缺氧条件下,NCOA7的沉默增强了SCC9细胞的糖酵解水平(P<0.05),而激活AhR可以部分逆转这一过程(P<0.05)。结论:NCOA7在缺氧条件下可通过AhR干预口腔鳞癌的糖酵解水平。

NCOA1基因mRNA表达及多态性与黔北麻羊产羔性状关联性分析

为了研究核受体辅激活蛋白1(NCOA1)对黔北麻羊繁殖性能的影响,试验采用DNA测序技术,利用SeqMan软件分析测序结果初步筛选SNP位点,根据筛选出的SNP位点应用RNA在线二级结构预测软件中的RNA secondary structure prediction、ProtScale、DNAStar软件中的EditSeq分析NCOA1基因突变位点的二级结构、理化性质、亲疏水性、结构域,运用SPSS 20.0软件分析NCOA1基因型与产羔数的关联性;再应用实时荧光定量PCR方法检测NCOA1基因在黔北麻羊子宫、输卵管、垂体、下丘脑、卵巢5个器官中mRNA的表达水平。结果表明:在外显子7处发现2个SNP位点,命名为G144A和G155A,其中G144A属于同义突变,编码的氨基酸未发生改变,G155A属于错义突变,编码的精氨酸突变为赖氨酸,导致外显子7所编码的氨基酸自由能升高,稳定性降低,分子质量变大,等电点升高,疏水性增强,但未发现保守结构域和特殊结构域,即NCOA1基因外显子7编码的蛋白无特异结构和独立功能;对G155A位点进行基因分型,发现GG基因型个体产羔数分别比GA、AA基因型个体多0.249只(P>0.05)和0.377只(P<0.05);NOCA1基因mRNA在黔北麻羊5个器官中均有表达,在下丘脑中的表达量最高,在输卵管中的表达量最低,且卵巢、下丘脑中的表达量极显著高于输卵管、子宫(P<0.01),垂体中的表达量显著高于子宫和输卵管(P<0.05)。说明NCOA1基因对黔北麻羊繁殖性能有一定影响,有G155A突变位点的GG基因型也对黔北麻羊高产有一定影响,可作为筛选黔北麻羊高繁殖力品系的一个潜在指标。

甲状腺乳头状癌组织NCOA5表达及临床意义

甲状腺癌是30岁以下中国年轻女性最高发的恶性肿瘤[1]。甲状腺乳头状癌是甲状腺恶性肿瘤中最常见的病理类型,占甲状腺癌所有病理类型的85%左右[2]。术前诊断主要依靠B超、CT和细针穿刺等,但仍有近1/3的病例难以明确诊断[3]。核受体共激活因子5(nuclear receptor coactivator 5,NCOA5)是最近发现的一种由多个氨基酸组成在肿瘤组织中广泛表达的核受体辅助调节因子[4],其表达程度与多种肿瘤发生发展密切相关,是分子肿瘤学研究的热点。

NCOA5在80例甲状腺乳头状癌组织中的表达及临床意义

研究NCOA5在甲状腺乳头状癌(PTC)中的表达及其临床意义。方法 回顾性分析浙江中医药大学附属湖州中医院于2017年3月至 2020年3月甲状腺乳头状癌手术患者80例,采用免疫组化方法(SP法)检测甲状腺乳头状癌手术标本中癌组织与癌旁组织中NCOA5的表达状况。结果 NCOA5在甲状腺乳头状癌组织中阳性表达率为76.25%(61/80),癌旁组织中为21.25%(17/80),差异有统计学意义(P0.01); NCOA5 蛋白的表达与患者的性别、年龄无相关性(P>0.0 5),与肿瘤的大小、有无侵犯包膜、淋巴结转移以及肿瘤分期有相关性。肿瘤>4cm、伴有包膜侵犯、淋巴结阳性、肿瘤分期越高者核受体共激活因子5蛋白的表达越高(P0.05)。结论 NCOA5 在甲状腺组织中表达程度对PTC的诊疗和判断预后具有指导意义 。

CARM1在恶性肿瘤中的作用及靶向治疗研究进展

辅激活蛋白关联精氨酸甲基转移酶1(coactivator-associated arginine methyltransferase 1,CARM1)是一种Ⅰ型蛋白质精氨酸甲基转移酶,可以催化组蛋白和非组蛋白底物的精氨酸残基不对称二甲基化。越来越多的研究发现CARM1在多种类型的恶性肿瘤中表达水平升高并发挥促癌作用。高表达的CARM1可通过多种机制促进肿瘤的发生及进展,例如影响肿瘤免疫、肿瘤代谢、自噬等。因此,CARM1被认为是一个极具潜力的抗肿瘤靶点,已有研究尝试开发靶向CARM1的小分子抑制剂治疗恶性肿瘤。尽管目前利用CARM1抑制剂治疗恶性肿瘤还处于临床前研究阶段,但在体内外试验中已展现出很好的治疗前景。针对CARM1的靶点干预可能为肿瘤治疗提供新策略。全文主要对CARM1的分子结构、肿瘤生物学功能、分子机制以及CARM1特异性抑制剂进行综述。

miR-335通过调控铁死亡对大鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用及机制研究

目的探究miR-335通过调控铁死亡对大鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用及机制。方法本实验时间为2022年3—9月。将180只成年雄性Sprague Dawley大鼠随机分为假手术组、模型组、miR-335模拟物组、miR-335模拟物对照组、miR-335抑制物组、miR-335抑制物对照组,每组30只。假手术组大鼠仅暴露右侧大脑中动脉并缝合。模型组大鼠制备大脑中动脉闭塞/再灌注(MCAO/R)损伤模型。miR-335模拟物组大鼠在大脑中动脉脑立体定位注射miR-335模拟物腺相关病毒2μl,7 d后制备MCAO/R损伤模型。miR-335模拟物对照组大鼠在大脑中动脉脑立体定位注射miR-335模拟物空载体,7 d后制备MCAO/R损伤模型。miR-335抑制物组大鼠在大脑中动脉脑立体定位注射miR-335抑制物腺相关病毒2μl,7 d后制备MCAO/R损伤模型。miR-335抑制物对照组大鼠在大脑中动脉脑立体定位注射miR-335抑制物空载体,7 d后制备MCAO/R损伤模型。模型制备后12、24、72 h,分别在各组随机选取10只大鼠并将其处死,取缺血半暗带区脑组织以进行后续实验。采用Zea Longa评分评估各组大鼠神经功能缺损程度,采用qRT-PCR检测各组大鼠脑组织miR-335、F-box和富含亮氨酸的重复蛋白5(FBXL5)mRNA、核受体共激活因子4(NCOA4)mRNA相对表达量,采用Western blot法检测各组大鼠脑组织FBXL5、NCOA4蛋白相对表达量。结果本研究大鼠均建模成功。假手术组大鼠Zea Longa评分为0分。模型制备后12、24、72 h,miR-335模拟物组大鼠Zea Longa评分低于miR-335模拟物对照组,miR-335抑制物组大鼠Zea Longa评分高于miR-335抑制物对照组(P<0.05)。模型制备后12、24、72 h,模型组大鼠脑组织miR-335相对表达量低于假手术组,miR-335模拟物组大鼠脑组织miR-335相对表达量高于miR-335模拟物对照组,miR-335抑制物组大鼠脑组织miR-335相对表达量低于miR-335抑制物对照组(P<0.05)。模型制备后12、24、72 h,模型组大鼠脑组织FBXL5 mRNA、蛋白相对表达量低于假手术组,miR-335模拟物组大鼠脑组织FBXL5 mRNA、蛋白相对表达量高于miR-335模拟物对照组,miR-335抑制物组大鼠脑组织FBXL5 mRNA、蛋白相对表达量低于miR-335抑制物对照组(P<0.05);模型制备后12、24、72 h,模型组大鼠脑组织NCOA4 mRNA、蛋白相对表达量高于假手术组,miR-335模拟物组大鼠脑组织NCOA4 mRNA、蛋白相对表达量低于miR-335模拟物对照组,miR-335抑制物组大鼠脑组织NCOA4 mRNA、蛋白相对表达量高于miR-335抑制物对照组(P<0.05)。结论上调miR-335表达可有效减轻MCAO/R损伤模型大鼠神经功能缺损程度,其机制可能与miR-335促进FBXL5表达、抑制NCOA4表达,调控铁自噬与铁代谢,进而影响铁死亡有关。

AMPK在胆汁酸代谢中的调节作用

腺苷酸活化蛋白激酶的激活可以抑制胆固醇、脂肪的合成，最近研究表明，腺苷酸活化蛋白激酶的激活也可抑制胆汁酸合成及促进胆盐输出泵的生成，说明腺苷酸活化蛋白激酶在调节胆汁酸代谢中起着重要作用。本文将从腺苷酸活化蛋白激酶激活途径、胆汁酸代谢、腺苷酸活化蛋白激酶活性对胆汁酸合成及转运等方面进行综述。

转录中介因子2

转录中介因子2(transcriptional intermediary factor 2,TIF2)也称糖皮质激素受体相互作用蛋白质1(glucocorticoid receptor interacting protein 1,GRIP1),作为类固醇受体辅激活蛋白(SRC)/p160家族(steroid receptor co-activator/p160 family)成员之一,通过与其他的核受体超家族成员相互作用发挥其功能。它是一种蛋白质共活化因子,可以辅助多种转录因子进而在转录水平上调多种基因的表达。上游的配体、信号通路和转录因子类型决定TIF2的作用,并在不同的组织细胞中表现出一定的特异性及复杂性。而对TIF2的研究有利于更深入地了解机体相关基因转录的精细调节和相关性疾病的可能机制,并为分子靶向治疗提供新的靶点。本文从TIF2蛋白的结构、染色质修饰及其在相关疾病中的作用等方面对近年来的最新进展予以综述。