脂肪酸辅酶A连接酶4抑制剂对HepG2细胞增殖和凋亡的影响

[目的]探讨脂肪酸辅酶A连接酶4(fatty acid CoA ligase 4,FACL4)抑制剂TriacsinC对HepG2细胞增殖和凋亡的影响。[方法]应用免疫细胞化学SP染色法检测FACL4在HepG2细胞中的表达情况;应用不同浓度的FACL4抑制剂TriacsinC处理HepG2细胞,利用MTT比色法、生长曲线测定观察TriacsinC对HepG2细胞增殖的影响;利用HE染色、流式细胞仪观察细胞凋亡。[结果]FACL4阳性表达主要位于胞浆。TriacsinC对HepG2细胞具有明显的生长抑制作用,不同浓度的TriacsinC(500、1000、1500、2000μg/L)处理HepG2细胞72h的抑制率分别为49.99%、54.21%、61.39%和68.07%。TriacsinC能诱导HepG2细胞凋亡。不同浓度(500、1000、1500、2000μg/L)处理HepG2细胞48h后,其凋亡率分别为19.47%、20.4%、20.9%、24.67%,明显高于对照组的1.93%。[结论]FACL4在HepG2细胞中呈高表达;Triac-sinC以时间、剂量依赖方式抑制细胞增殖;TriacsinC以剂量依赖方式诱导细胞凋亡。

小分子干扰RNA沉默ACS5基因对结肠癌细胞表达及增殖的影响

目的探讨小分子干扰RNA（siRNA）沉默脂酰辅酶A合成酶5（ACS5）基因对结肠癌细胞表达及增殖的影响。方法采用免疫组化检测30例结肠癌及癌旁组织ACS5的表达。设计合成siRNA．ACS5，用Lipofectamine2000TM搭载转染人结肠癌细胞HT-29、SW480，实时定量PCR检测ACS5mRNA表达量，四唑氮化合物（MTS）法检测转染后结肠癌细胞增殖情况。结果免疫组化显示结肠癌组织ACS5阳性率83．3％（25／30）明显高于癌旁组织30％（9／30）。结肠癌细胞HT-29siRNA—ACS5干扰组的mRNA的表达量（0．18±0．03）显著低于空白对照组（2．48±0．12）和NCsiRNA阴性对照组（2．55±0．31），抑制率92．96％（F=146．9，P〈0．01）。结肠癌细胞SW480siRNA—ACS5干扰组的mRNA的表达量（0．14±0．01）显著低于空白对照组（1±0．03）和NcsiRNA阴性对照组（1．21±0．05），抑制率88．5％（F=826．59，P〈0．01）。siRNA—ACs5干扰组在48、72h的增殖能力明显低于两个对照组（P〈0．05）；而两个对照组在各时间点比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论ACS在结肠癌组织中高表达，沉默ACS基因可下调结肠癌细胞ACS表达并抑制其增殖。