PGRMC1介导的肝癌细胞自噬降低^(125)I粒子辐射敏感性

目的 探究孕激素受体膜组分1(progesterone receptor membrane component 1,PGRMC1)介导的自噬对^(125)I粒子照射肝癌细胞辐射敏感性的影响。方法 肝癌细胞Huh7和LM3分别暴露于不同剂量(0、2、4、6、8 Gy)的^(125)I粒子,利用透射电镜观察细胞自噬情况。使用自噬抑制剂氯喹(chloroquine, CQ)、激动剂雷帕霉素(rapamycin, Rapa)和PGRMC1抑制剂AG-205验证PGRMC1介导的自噬在肝癌细胞对^(125)I粒子照射敏感性中的作用。利用CCK-8、克隆形成实验、流式细胞术检测细胞增殖、集落形成及凋亡情况,Western blot检测细胞中PGRMC1、微管相关蛋白轻链3-Ⅰ(microtubule-associated protein light chain 3-Ⅰ,LC3-Ⅰ)、LC3-Ⅱ和p62相对表达量。结果 不同剂量^(125)I粒子照射后Huh7和LM3细胞增殖和克隆形成能力显著降低(P<0.05),细胞凋亡数显著增加(P<0.01),且呈剂量依赖性。与0 Gy组相比,6 Gy组Huh7和LM3细胞中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著增加(P<0.01),p62表达显著下调(P<0.01)。与6 Gy组相比,6 Gy+CQ组Huh7和LM3细胞增殖能力和克隆形成数显著下降(P<0.05),细胞凋亡显著增加(P<0.05),而6 Gy+Rapa组上述结果则相反。与6 Gy组相比,6 Gy+AG205组Huh7和LM3细胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著降低(P<0.05),p62表达显著上调(P<0.05),细胞增殖能力和克隆形成数显著降低(P<0.01),细胞凋亡显著增加(P<0.01),而6 Gy+PGRMC1组上述结果则相反。结论^(125)I粒子照射诱导的PGRMC1升高可促进细胞自噬,从而增加肝癌细胞的增殖及克隆形成能力,减少肝癌细胞的凋亡。

宫颈癌辐射敏感性差异基因的筛选及免疫相关性分析

目的通过生物信息学方法筛选影响宫颈癌辐射敏感性的差异基因并进行表达验证以及免疫相关性分析。方法从GEO数据库下载包含放疗前后宫颈癌组织、正常宫颈组织、宫颈癌组织的数据集,使用R软件筛选其中的差异基因,使用韦恩图取交集筛选宫颈癌辐射敏感性差异基因。从TCGA数据库及GTEx数据库收集宫颈癌组织样本、正常宫颈组织样本的表达数据及患者临床资料、随访数据,通过GEPIA2数据库对筛选出的宫颈癌辐射敏感性差异基因进行表达分析,验证所选差异基因是否可靠。通过GEPIA2数据库进行生存分析,筛选不同基因表达水平对患者预后有影响的差异基因为宫颈癌辐射敏感性关键差异基因;通过R软件对患者临床资料及预后情况进行单因素、多因素COX回归分析,验证筛选出的关键差异基因是否为宫颈癌患者预后的影响因素;通过HPA数据库比较筛选出的关键差异基因在宫颈癌以及正常宫颈组织中的蛋白表达。通过基因集富集分析对关键差异基因的GO功能及KEGG信号通路进行富集分析,通过TIMER数据库分析关键差异基因在宫颈癌中的表达与免疫细胞浸润水平的关系,通过TCGA数据库数据观察免疫检查点相关基因的表达情况,并对关键差异基因与宫颈癌高度相关的免疫检查点基因进行Spearman相关性分析。结果共筛选出宫颈癌辐射敏感性差异基因10个,分别为HELLS、TOP2A、KIF23、TAP1、WDR76、LMNB1、RFC4、TFRC、IFI44L、IFIT3;10个差异基因均在宫颈癌组织中高表达。生存分析结果显示,TFRC高表达的宫颈癌患者总生存率及无病生存率低于TFRC低表达的患者,故选择TFRC为宫颈癌辐射敏感性关键差异基因。单因素COX回归分析结果显示,TFRC及宫颈癌TNM分期是宫颈癌患者预后的影响因素;多因素COX回归分析结果显示,TFRC及宫颈癌TNM分期是宫颈癌患者预后的独立影响因素。通过HPA数据库验证TFRC在宫颈癌组织和正常宫颈组织中的蛋白表达,结果显示TFRC在正常宫颈组织中未检测到,在宫颈癌组织中呈高表达。GO功能分析显示,TFRC主要涉及染色体分离、RNA定位、适应性免疫反应等生物过程,染色体区、核糖前体、免疫突触等细胞成分,解旋酶活性、组蛋白结合、抗原结合等分子功能。KEGG信号通路富集分析显示,TFRC主要与RNA转运、细胞周期、同种异体移植物排斥反应等信号通路有关。TIMER数据库分析结果显示,宫颈癌中TFRC表达与细胞纯度呈正相关,与CD8^(+)T淋巴细胞呈负相关,TFRC表达影响记忆B淋巴细胞、CD8^(+)T淋巴细胞、巨噬细胞M0、静息肥大细胞的浸润程度。Spearman相关性分析显示,TFRC表达与大部分宫颈癌免疫检测点相关基因呈负相关。结论宫颈癌辐射敏感性差异基因为TFRC,其可能与适应性免疫反应、宫颈癌相关的免疫检测点相关;这提示其可在宫颈癌的放射免疫治疗中发挥作用,从而影响宫颈癌的进展和预后。

用CFU-GM Do值推断人体辐射敏感性

本文研究了动物与人体CFU-GM辐射敏感性与整体辐射敏感性的关系。结果表明,给小鼠全身1次照射不同剂量后取骨髓培养CFU-GM,与体外直接照射骨髓细胞的结果相比较,它们的D_O值分别为1.33Gy和1.23Gy,二者十分相近。通过对小鼠与人体各个个体CFU-GM辐射敏感性的测定,它们的D_O值差异很大,最大值与最低值相差2倍多。在慢性粒细胞白血病病人经全身^(60)Coγ—射线照射治疗的经过中,以及在骨髓移植的病例中,都观察到CFU-GM D_0值的大小能反映出全身照射后的辐射效应。

白杨不同倍性花粉的辐射敏感性及其应用

通过对白杨二倍性未减数花粉和单倍性花粉萌发率和萌发进程的观察统计，证明不同 倍性花粉对（６０）ＣＯγ射线辐射的敏感性不同，其中单倍性花粉的敏感性约为二倍性花粉的 ２倍。 为克服二倍性花粉在参与受精过程中萌发迟缓、竞争能力较差的问题，可利用这种花粉倍性 对辐射的敏感性差异，施加一定剂量的辐射以刺激二倍性花粉萌发，同时抑制或杀死部分单 倍性花粉，从而在一定程度上相对提高柱头上萌发和萌发较快的二倍性花粉比率。三倍体育 种结果亦证明了花粉辐射在提高三倍体得率方面应用的有效性，其中在银腺杨×毛新杨组 合中，以 １４７０ｒａｄ处理最佳，三倍体得率达３．８％，对照未检出三倍体；而在施加 １６８０ｒａｄ的银 腺杨×毛新杨杂交组合中，则获得了高达 １２．９％的三倍体。

高羊茅辐射敏感性和辐照处理对其成熟种子愈伤诱导的影响

无菌培养条件下发芽率、成苗率、苗高和根长的测定结果表明 ,4个高羊茅品种的辐射敏感性差异很大 ,美洲虎 3号和可奇思对辐射比较敏感 ,半致死剂量大约在 1 5 0Gy左右 ,凌志和猎狗 5号的辐射敏感性分别中等和较弱。用低剂量γ射线处理可促进高羊茅成熟种子的愈伤形成 ,而且诱导愈伤中胚性愈伤的比例有一定提高。因此 ,成熟种子辐照处理可作为提高高羊茅组培效率的一种辅助手段。

IER5基因对HeLa细胞辐射敏感性的影响

为寻找放射敏感性基因,采用基因芯片技术筛选出辐射可诱导表达mRNA上调的基因,其中就有IER5.为探索IER5基因的生物学功能及其在宫颈癌放疗中的作用,采用RNA干扰技术构建IER5基因表达抑制的质粒载体并构建IER5-siRNA-HeLa细胞系.对该细胞系与HeLa细胞进行辐射,旨在了解IER5-siRNA-HeLa的细胞生长曲线、细胞周期等实验参数的变化,揭示了IER5基因在辐射诱导中的生物学功能.实验发现,IER5基因表达抑制可提高细胞分裂进入S期与G2-M期的比例,促进细胞分裂,促进细胞生长,提高细胞对辐射的拮抗性,同时发现IER5-siRNA-HeLa细胞在尺寸上大于HeLa细胞.研究表明,IER5基因表达抑制可促使细胞受辐射后发生S期与G2-M期的阻滞,IER5参与辐射细胞周期的调控,对临床宫颈癌放疗有一定的潜在应用价值.

抑制LRP16基因表达增加了肿瘤细胞辐射敏感性

目的:探索抑制LRP16基因表达对肿瘤细胞辐射治疗敏感性的影响。方法:采用逆转录病毒介导的小干扰RNA策略,建立了LRP16基因表达被稳定抑制的MCF7及HeLa细胞系,采用电离辐射及紫外线(UV)分别照射LRP16基因被稳定抑制表达的MCF7和HeLa细胞,于照射后不同的时间点进行Hoechst33342染色以检测细胞凋亡率,并进行DNA片段化分析;胎盘蓝染色检测不同时间点的细胞死亡率。结果:照射后2～10h之间,LRP16基因表达抑制组细胞的凋亡率明显高于对照组(P<0.05);照射后10h胎盘蓝方法计数死活细胞,发现LRP16基因抑制组细胞的死亡率>40%,而对照组的死亡率在15%～20%之间;24h计数细胞死亡率发现LRP16基因抑制组细胞与对照组细胞差别不明显(P>0.05)。结论:抑制LRP16基因在肿瘤细胞中的表达增加了瘤细胞的辐射治疗敏感性,其机制可能是通过抑制LRP16基因表达干预了辐射诱导DNA损伤反应的早期信号途径。

玉米自交系对^(60)Co-γ射线的辐射敏感性研究

用150、200、250Gy3种不同剂量的60Co-γ射线对6个玉米骨干自交系进行辐射诱变处理,研究其对成苗率、成株率、畸变率和苗高的影响,探讨不同自交系的辐射敏感性和适宜辐射剂量。结果表明,本研究的6个自交系中R08对辐射最敏感;其次为K305、K169、698-3和郑58;对辐射最不敏感的是48-2。以苗高降低30%作为指标,R08、K169、K305和698-3的适宜剂量为160～175Gy;郑58和48-2分别为180～190Gy及200～210Gy。

蔬菜种子的辐射敏感性与超弱发光动力学分析

对几种蔬菜种子的辐射诱导生物化学发光 (ICL)的动力学参数进行研究与分析 ,结果表明 :种子的ICL与辐射剂量成正相关 ,两者符合Y =Y0 eKD 的关系 ,K值越大 ,种子在电离辐射的作用下发光就越强 ,不同种子之间K值达到了显著水平 ;

低剂量超辐射敏感与诱导辐射抗性的研究进展

低剂量超辐射敏感(HRS)和诱导辐射抗性(IRR)是辐射生物学的两个重要现象,研究这两个现象发生的机理对于辐射保护、控制肿瘤发生、研制新的功能材料具有重要的意义。辐射产生的DNA双链断裂(DNA double-strand breaks,DSBs)是辐射诱导细胞失活的主要损伤形式。对DSBs不能进行修复或者不能进行正确的重新连接是引起细胞死亡的主要原因。与DNA合成前期(first gap phase,G1期)和DNA合成期(synthetic phase,S期)相比,HRS在DNA合成后期(second gap phase,G2期)的表现非常明显。HRS和IRR之间相互转换调控的机制可能是G2期细胞中的一部分存在一个激活过程的发生。DNA损伤修复机制在HRS/IRR过程中发挥了重要作用。在低于20cGy的剂量条件下,细胞产生效率较低的损伤效应,细胞死亡迅速增加,低剂量超辐射敏感现象(HRS)出现;在高于20cGy的条件下,辐射造成DNA双链断裂,这些DSB本身或者由辐射引起的DNA变化激活了ATM(ataxia telangiectasia mutated),G2期专有的检测点被激活,细胞周期在G2期停顿下来,激活的G2期专有的检测点促进对DNA进行修复,提高了细胞的存活率,此时,诱导辐射抗性(IRR)出现。尽管这些结果使人们对HRS/IRR有了一个比较清晰地了解,目前仍然存在着一些关键问题有待解决。例如,为什么有些细胞系表现HRS/IRR现象,而有些细胞系不表现HRS/IRR现象;细胞中是否存在针对单一剂量的突变的HRS/IRR等。这些问题可能是将来重要的研究方向。

不同类型栽培大麦的辐射敏感性

用0—40krad^137Cs γ射线照射47个不同类型栽培大麦。结果表明,裸麦的辐射敏感性极显著大于皮麦。不同类型栽培大麦辐射敏感性的次序是:四棱裸大麦>六棱裸大麦>二棱裸大麦>四棱皮大麦>六棱皮大麦>二棱皮大麦。供试品种的敏感性可分为5个类型,即极迟钝型,迟钝型、中间型、敏感型和极敏感型。试验还表明,不同基因型大麦的细胞核体积与辐射敏感性无明显的相关关系,核体积的剂量效应曲线在30krad时出现一个峰值。

离体培养条件对百合鳞片辐射敏感性的影响

研究了辐射处理主因素及其与培养基成分、外植体类型的交互作用对东方百合鳞片辐射敏感性的影响。结果表明:在试验辐射剂量范围内,离体培养约6d的百合鳞片经60Coγ射线辐照后存活率随剂量增大而呈现下降趋势;辐射处理对百合鳞片的出芽率和出芽数有强烈的抑制作用。在芽诱导阶段,培养基成分在一定程度上影响鳞片的辐射敏感性;鳞片辐射敏感性随培养时间增加而减弱;外部鳞片与中部鳞片表现的辐射敏感性基本一致。

大肠癌细胞辐射敏感相关基因的筛选

应用基因芯片技术初步筛选人大肠癌细胞辐射敏感相关基因。培养2种不同辐射敏感性的人大肠癌细胞LOVO和SW480,收集细胞至少达到107数量级,提取细胞总RNA,采用人全基因组表达谱芯片获得该两株细胞的基因表达谱,分析比较两者之间基因表达的差异。1、LOVO细胞组检出基因16882个,SW480细胞组检出基因17114个。2、在2倍以上差异表达基因中筛选出上调基因908个,下调基因1312个。上调基因中包括Fas基因、NFkB基因等,下调基因中包括Caspas6基因、RAD21基因等,已有研究证明与辐射敏感相关。3、LOVO细胞中高表达的基因主要有CEACAM5、THBS1、SERPINE2、ARL7、HPGD,提示与辐射敏感相关;SW480细胞中高表达的基因主要有SCD、NQ01、LYZ、KRT20、ATP1B1,提示与辐射抵抗有关。1、大肠癌辐射敏感性的预测可以从基因水平来体现。2、表达谱基因芯片技术能快速、灵敏地预测大肠癌辐射敏感性,筛选大肠癌辐射敏感性相关基因。

混响室条件下辐射敏感度表征方法研究

为确定混响室条件下辐射敏感度的表征方法,分别对混响室步进模式和连续模式下的电磁环境特征进行分析,得出可能的几种表征方法.再将某型电子设备分别在两种工作模式下进行电磁辐射敏感度测试,利用几种可能的表征方法分别得出其测试结果,并对各个表征方法进行分析.基于贝塞尔公式对各个可能的表征方法进行重复性及不确定检测.结果表明,为了获得良好的测试可重复性及不同模式的测试结果相关性,混响室步进模式时,可采用多个步进位置的平均值作为辐射敏感度的测试结果;混响室工作于连续模式时,应当选择适当的统计平均时间参数对测试结果进行表征.

用HPRT基因突变及CBMN研究AT细胞高辐射敏感性

研究了毛细血管扩张性共济失调症(Ataxia?telangiectasia,AT)患者皮肤的成纤维细胞系AT5BIVA(AT细胞)的高辐射敏感性。以源于正常人皮肤的成纤维细胞系GM0639(GM细胞)为对照,利用次黄嘌呤磷酸核糖转移酶基因(Hypoxanthinephospho?ribosyltransferase,hprt)位点突变分析技术及胞质分裂阻滞微核法(Cytokinesis?Blockmicronucleusmethod,CBMN),在AT细胞和GM细胞经Coγ射线0、1、2、3、4Gy60照射后,观察比较AT细胞和GM细胞之间hprt基因位点突变频率(hprtMF)、微核率(MNF)及微核细胞率(MNCF)的差异,并分别进行曲线拟合。在各剂量点,AT细胞hprt基因突变频率、微核率及微核细胞率均明显高于GM细胞,其差别具有显著性统计意义(p<0.01);AT和GM细胞hprt基因突变频率、微核率及微核细胞率均与照射剂量呈正相关,可拟合成剂量效应直线方程y=a+bx。结果表明,毛细血管扩张性共济失调症患者AT细胞辐射敏感性显著高于GM细胞,具有高辐射敏感性。

中国北方主要牧草品种的辐射敏感性与辐射育种适宜剂量的探讨

选用我国西北的主要牧草苜蓿、沙打旺、草木樨、三叶草、小冠花及偃麦草等９６个品种，用６０Ｃｏγ射线照射干种子，测定出苗率。辐照剂量与出苗率的相关关系分析表明，出苗率与剂量之间呈显著、极显著的负相关，出苗率随辐照剂量的增加而降低。计算出各品种的半致死剂量，并按辐射敏感性将牧草品种划分为敏感型、中间型和迟钝型三类。其中敏感型品种１４个（含禾本科牧草品种１０个），占总数的１４．５９％；迟钝型品种１１个（含小冠花品种８个），占总数的１１．４６％；中间型品种７１个，包括２５个苜蓿、７个三叶草、７个草木樨和５个沙打旺等主要豆科牧草品种，占总数的７３．９５％。

汽车线束等效模型及其在电磁辐射敏感度仿真中的应用

线束是导致汽车设备或系统不能满足电磁兼容限值的主要原因之一,建立计算简便且能准确反映电磁特性的线束模型是汽车电磁兼容建模的要点。文中建立了用于电磁辐射敏感度计算的线束等效模型。首先提出了等效波阻抗的定义并导出了计算方法;根据原始导线终端阻抗与等效波阻抗的大小关系将其分成最多四组等效导线,从而使复杂的线束得以简化。给出了多导体传输线单位长度电容矩阵和电感矩阵的计算方法,推导了等效导线的电感矩阵和电容矩阵。验证了基于有限元方法的电磁场仿真软件HFSS计算导线感应电流的有效性。对9根导线组成的线束等效处理及其共模电流的仿真结果表明,文中的等效方法是正确的。该等效模型能有效降低线束建模的复杂度,可用于研究汽车线束高频条件下的电磁辐射敏感度问题。

槲皮素对乳腺癌MCF-7细胞电离辐射敏感性的影响

目的:探讨槲皮素对乳腺癌MCF-7细胞辐射敏感性的影响。方法:对体外培养的乳腺癌MCF-7细胞,随机分为A、B两组,A组42℃热休克处理2 h,诱导热休克蛋白表达,B组热处理前1 h加入终浓度为50、100、150μmol/L的槲皮素,然后42℃热休克处理2 h。4 h后分别用X射线0、2、4、6、8、10、15 Gy辐照后继续培养。MTT比色法检测细胞增殖变化,克隆形成实验观察细胞存活率。取经A、B组(150μmol/L)处理条件处理后的MCF-7细胞,采用流式细胞术Annexin V/PI双标法来测定细胞凋亡。结果:终浓度为50、100、150μmol/L的槲皮素可以抑制MCF-7细胞增殖,对2～10 Gy照射剂量起到增敏作用。细胞克隆形成实验表明在实验浓度范围内,槲皮素可以降低细胞存活率,对X射线增敏作用有一定的浓度依赖关系,浓度越大,对X射线的增敏作用越强。流式细胞术Annexin V/PI双标法测定结果显示,槲皮素可以诱导MCF-7细胞凋亡增加。结论:槲皮素能够抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖和克隆的形成,诱导细胞凋亡。

器官剂量调制技术在头颈CTA中对辐射敏感器官的照射强度和图像质量的影响

目的探讨器官剂量调制(ODM)技术在头颈CT血管造影(CTA)中对辐射敏感器官的照射强度和图像质量的影响。方法对仿真体模进行开启和关闭ODM技术的头颅CTA扫描,记录并比较体模各个方向上的管电流强度、辐射剂量以及各个感兴趣区(眼晶体层面的左右眼玻璃体、脑干及颈部甲状腺区域)的CT值和图像噪声(SD)。采用前瞻性研究方法,选取2017年12月至2018年8月在首都医科大学附属北京友谊医院临床诊断或怀疑为头颈部动脉疾病需要行头颈部CTA检查的患者80例,采用随机表法,将患者随机分为A、B两组,每组各40例。A组扫描时使用ODM技术,B组不使用ODM技术。分别比较两组患者眼晶体和甲状腺层面上各个方向的管电流强度,测量并比较各个感兴趣区(眼晶体层面的左右眼玻璃体、脑干和颈部甲状腺层面上的双侧胸锁乳突肌区域)的CT值与SD值。结果体模研究显示,开启ODM技术时,体模前方管电流降低(眼晶体层面为198 m A vs. 282 m A,甲状腺层面为325 m A vs. 464m A),总体平均管电流降低(335 m A vs. 383 m A),体模感兴趣区CT值无显著变化(P> 0. 05),各个感兴趣区SD值均有升高(P <0. 05),整体扫描辐射剂量降低[(157. 2±0. 3) m Gy×cm vs.(173. 9±0. 1) m Gy×cm,P <0. 05]。临床研究中,在眼晶体层面,A组患者前方管电流明显低于B组[(370. 6±52. 5) m A vs.(479. 0±56. 7) m A,P <0. 05)],其他方向上的管电流两组差异无统计学意义(P> 0. 05)。两组患者各个感兴趣区SD值均有升高(P <0. 05),分别为眼晶体层面右侧玻璃体(12. 0±1. 2) HU vs.(10. 9±1. 5) HU,左侧玻璃体(11. 9±1. 2) HU vs.(10. 7±1. 3) HU,脑干(15. 4±1. 7) HU vs.(14. 1±2. 2) HU。在甲状腺层面,所有患者管电流均达上限,自动管电流调制失效,感兴趣区SD值两组患者差异无统计学意义(P> 0. 05)。A组患者整体辐射剂量低于B组[(267. 0±25. 5) m Gy×cm vs.(303. 2±31. 8) m Gy×cm,P <0. 05]。所有患者图像均满足临床诊断要求,两组患者主观评分差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论 ODM技术可以降低头颈CTA中对辐射敏感器官的照射强度,同时保持可接受的图像质量水平,建议在临床推广应用。

医用诊断X射线工作者对辐射敏感指标的观察

目的 通过对两级医院医用诊断X射线工作者多项健康检查指标的比较 ,找出对辐射相对敏感的指标 ,初步探讨X射线对人体的剂量效应关系 ,为指导我区放射防护工作提供科学依据。结果 两级医院医用诊断X射线工作者平均年受照剂量及对辐射敏感指标异常发生率差异有显著性 ,即二等乙级医院医用诊断X射线工作者平均年受照剂量及对辐射敏感指样异常发生率如神经衰弱综合症、脱发、眼晶状体混浊、白细胞计数下降等高于三等甲级医院者。结论 长期小剂量照射可出现神经衰弱综合症、脱发、眼晶状体混浊、白细胞计数下降 ,上述指标应作为观察长期小剂量照射效应的首选指标。目前我区应将辐射防护工作重点放在二等乙级以下的基层医院。