miR-769-5p在急性中长波紫外线旁观者效应中的作用

目的 探讨miR-769-5p在急性中长波紫外线旁观者效应中的作用。方法 用miR-769-5p mimics转染人真皮成纤维细胞,培养24 h后取培养上清孵育旁观者细胞,培养48 h后检测细胞增殖率、凋亡率及氧化损伤水平。预先用miR-769-5p inhibitor下调细胞中miR-769-5p的表达,24 h后与辐射条件培养基共孵育,48 h后检测细胞的增殖率、凋亡率及氧化损伤水平。结果 miR-769-5p mimics可上调细胞中miR-769-5p的表达,过表达的miR-769-5p可通过上清在细胞间转移,且旁观者细胞的增殖水平明显降低,凋亡率和氧化损伤水平明显升高。使用miR-769-5p inhibitor下调细胞中miR-769-5p的表达,可以观察到急性中长波紫外线旁观者效应的减弱,即接受辐射条件培养基共孵育后,inhibitor预处理组的增殖水平明显高于对照组,凋亡率和氧化损伤水平明显降低。结论 过表达的miR-769-5p能够被旁观者细胞摄取,并介导紫外线旁观者效应。

AHR抑制剂CH223191提高辐照小鼠骨髓移植效果

目的探究骨髓移植过程中辐射诱导的旁观者效应对供体骨髓细胞的影响以及芳香烃受体(AHR)抑制剂CH223191对供体骨髓细胞的保护作用。方法将小鼠分为9 Gy辐照组和12 Gy辐照组,不同辐照剂量辐射后移植相同数量供体骨髓细胞,流式细胞术检测外周血细胞总数、外周血供体细胞嵌合率及数量;ELISA检测未辐照小鼠和辐照小鼠血清活性氧(ROS)水平;将供体骨髓细胞分为对照组、9 Gy辐照组和12 Gy辐照组体外培养,分别加入未辐照小鼠血清、9 Gy和12 Gy辐照小鼠血清处理,ATP活力测定法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,RT-qPCR检测Cyp1a1与Cyp1b1的mRNA表达;将辐照血清处理后的骨髓细胞分为CH223191治疗组与对照组,加入CH223191处理后,比较细胞活力、细胞凋亡、细胞内ROS水平,RT-qPCR检测Cyp1a1与Cyp1b1的mRNA表达;将骨髓移植小鼠分为CH223191治疗组和对照组,治疗组腹腔注射CH223191,记录小鼠体质量、外周血供体细胞嵌合率及数量、骨髓内供体细胞嵌合率及数量。结果小鼠经9 Gy或12 Gy辐照后,12 Gy辐照组外周血细胞总数少于9Gy辐照组(P<0.05),而骨髓移植后外周血供体细胞嵌合率无明显差异,并且12 Gy辐照组外周血供体细胞数明显少于9Gy辐照组(P<0.05);小鼠经辐照后,血清内ROS水平上升(P<0.01);经辐照小鼠血清处理的供体骨髓细胞活力降低,凋亡比例升高(均P<0.01),辐照小鼠血清处理的供体骨髓细胞中Cyp1a1与Cyp1b1 mRNA均升高(P<0.05);辐照小鼠血清处理的供体骨髓细胞加入CH223191后,Cyp1a1与Cyp1b1 mRNA水平降低(P<0.05),细胞活力升高,细胞内ROS水平降低,细胞凋亡比例减少(均P<0.01);骨髓移植后,CH223191治疗组小鼠体质量相对于对照组减轻较少,外周血供体细胞嵌合率与细胞数高于对照组,骨髓内供体细胞比例与数量均高于对照组(均P<0.05)。结论CH223191通过抑制AHR激活,减少辐射诱导的旁观者效应对移植骨髓细胞的损伤,提升小鼠骨髓移植效果。

低剂量辐射超敏感性的分子机制及临床应用进展

全文对近年来低剂量辐射超敏感性(low dose hyper-radiosensitivity,HRS)的体内及体外实验,从细胞周期调控、细胞凋亡、DNA损伤修复、辐射诱导的旁观者效应等四个方面的分子机制进行探讨,并对HRS临床意义进行阐述和展望,以期为临床研究提供参考。