加味宫外孕Ⅰ号方含药血清对体外培养的输卵管妊娠滋养细胞凋亡率和细胞周期的影响

目的:运用血清药理学方法,观察加味宫外孕Ⅰ号方含药血清对体外培养的输卵管妊娠滋养细胞凋亡率和细胞周期的影响。方法:根据血清药理学的方法,用SD大鼠制备中药组(加味宫外孕Ⅰ号方含药血清),西药组(甲氨蝶呤含药血清)和对照组(正常血清),分别加入体外培养的滋养细胞培养体系中。培养72 h后,流式细胞法测定3组的细胞凋亡率和细胞周期。结果:中药组与对照组相比,滋养细胞凋亡率显著上升(P<0.01),细胞周期发生阻滞,G0/G1期细胞百分比显著增多(P<0.01);中药组与西药组相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:加味宫外孕Ⅰ号方诱导滋养细胞凋亡,改变细胞周期进程可能是其发挥杀胚效应的机制之一。

化瘀消癥杀胚中药复方诱导人输卵管妊娠滋养细胞凋亡

目的探讨化瘀消癥杀胚中药复方(丹参、赤芍、桃仁、紫草和天花粉)对人输卵管妊娠滋养细胞增殖、凋亡的影响。方法采用CCK8法检测经中药复方水煎剂处理人输卵管妊娠滋养细胞的增殖情况,采用Hoechst染色法和流式细胞术检测48 h后细胞凋亡情况,设未经复方中药处理的细胞为空白对照组。结果与空白对照组相比,各剂量中药复方对人输卵管妊娠滋养细胞增殖均有明显的抑制作用,呈剂量和时间依赖性。48 h IC50为27.86 mg/mL;中药复方高、中、低剂量组中人输卵管妊娠滋养细胞呈现典型的凋亡形态学改变,其凋亡率分别为(24.57±1.08)%、(18.30±1.18)%和(14.37±2.64)%,与空白对照组(9.57±0.76)%相比明显增加(F=47.88,Ρ=0.00)。结论化瘀消癥杀胚中药复方可能通过抑制人输卵管妊娠滋养细胞增殖,促进细胞凋亡从而达到中止输卵管妊娠的目的。

化瘀消癥杀胚中药复方对人输卵管妊娠滋养细胞趋化因子受体CXCR4表达影响

目的:探讨化瘀消癓杀胚中药复方对人输卵管妊娠滋养细胞趋化因子受体CXCR4表达的影响。方法:原代培养的输卵管妊娠滋养细胞与低、中、高不同剂量中药复方共同培养48 h后,用免疫细胞化学染色法检测各组细胞中CXCR4表达情况。结果:与对照组比较,中药低、中、高剂量组滋养细胞中CXCR4的相对光密度值分别为79.3%、59.2%、29.3%,表达水平均阳性下降。低剂量组滋养细胞CXCR4的表达水平与阴性对照组比较无统计学差异(P>0.05),中剂量组滋养细胞CXCR4的表达与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),高剂量组滋养细胞CXCR4的表达与阴性对照组比较差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论:化瘀消癓杀胚中药复方可显著降低输卵管妊娠滋养细胞中CXCR4的表达。

化瘀消癥杀胚复方含药血清对体外培养输卵管妊娠滋养细胞凋亡的影响

目的:探讨化瘀消癥杀胚复方含药血清对体外培养的输卵管妊娠滋养细胞凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax的影响。方法:取化瘀消癥杀胚复方含药血清及甲氨喋呤、生理盐水组血清对体外培养的输卵管妊娠滋养细胞进行培养,通过蛋白质印迹法(Western Blot)检测与含药血清作用72h后,滋养细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达。结果:滋养细胞与含药血清共同作用72h后,可降低Bcl-2蛋白表达量,与对照组比较,差异具有显著统计学意义(P<0.01)。而Bax蛋白表达量未见有明显变化,两组含药血清与对照组比较,差异均无统计学意义。结论:化瘀消癥杀胚复方可能通过下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,降低Bcl-2/Bax比值,从而促进凋亡的途径起到治疗输卵管妊娠的作用。

加味宫外孕I号方对体外培养的输卵管妊娠滋养细胞凋亡相关基因影响的研究

目的探讨加味宫外孕I号方对体外培养的输卵管妊娠滋养细胞凋亡相关基因Bcl-2及Bax的影响,拟从细胞凋亡基因的角度阐明加味宫外孕I号方的作用机制。方法取加味宫外孕I号方含药血清对体外培养的输卵管妊娠滋养细胞进行培养,设立甲氨喋呤含药血清(西药组)及生理盐水含药血清(对照组)作为对照,通过蛋白质印迹法(Western Blot)检测与含药血清作用72h后,滋养细胞中凋亡相关基因Bcl-2和Bax的表达。结果滋养细胞与含药血清共同作用72h后,中药组与对照组比较,Bcl-2表达量下降,差异具有显著统计学意义(P<0.01);西药组与对照组比较,Bcl-2表达量下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。中药组与西药组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。而Bax表达量未见有明显变化,中药组、西药组分别与对照组相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论加味宫外孕I号方可能通过下调抗凋亡Bcl-2的表达,降低Bcl-2/Bax比值,从而促进凋亡的途径起到治疗输卵管妊娠的作用。

化瘀消癥杀胚中药复方对体外培养输卵管妊娠滋养细胞凋亡能力的影响

目的:探讨化瘀消癥杀胚中药复方对输卵管妊娠滋养细胞凋亡能力的影响。方法:①透射电镜观察化瘀消癥杀胚中药复方作用前后输卵管妊娠滋养细胞微观形态的变化;②采用Western Blot法观察化瘀消癥杀胚中药复方对输卵管妊娠滋养细胞FASL和caspase-3表达的影响。结果:高、中、低不同剂量中药复方和输卵管妊娠滋养细胞共作用48h后,可显著增加凋亡蛋白FASL和caspase-3的表达,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);中药高、中剂量组滋养细胞FASL和caspase-3表达的水平均与甲氨喋呤组无统计学差异,而中药低剂量组FASL和caspase-3的表达水平明显低于甲氨喋呤组(P<0.05)。结论:化瘀消癥杀胚中药复方中药复方可显著增加输卵管妊娠滋养细胞凋亡相关蛋白Fasl和caspase-3的表达。

化瘀消癥杀胚复方含药血清对输卵管妊娠滋养细胞ER、PR、MMPs2的影响

目的:以体外培养的输卵管妊娠滋养细胞为载体,探讨化瘀消癥杀胚复方含药血清对输卵管妊娠着床的相关调节因子雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、基质金属蛋白酶2(MMPs2)表达的影响。方法:以化瘀消癥杀胚复方含药血清、甲氨喋呤血清、0.9%氯化钠溶液血清,对培养的人输卵管妊娠滋养细胞进行干预,通过实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法检测,观察3组含药血清对培养的人输卵管妊娠滋养细胞作用72h后,滋养细胞中ER、PR、MMPs2的表达。结果:化瘀消癥杀胚中药复方组能降低ER、PR的表达,与对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01),能上调MMPs2的表达,与对照组比较,差异无统计学意义;西药组能降低ER、PR的表达,上调MMPs2的表达,与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:化瘀消癥杀胚中药复方能从受体水平拮抗雌孕激素,能加速输卵管蜕膜的溶解,导致绒毛组织变性、坏死,从而起到治疗输卵管妊娠的作用。