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长白山林蛙输卵管糖蛋白的分离鉴定 被引量:2
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作者 郑明珠 方丽 +2 位作者 吕萍 陈亮 刘景圣 《吉林大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期336-339,共4页
以长白山林蛙为研究对象,对其输卵管糖蛋白进行提取分离及鉴定.长白山林蛙输卵管冲洗液经饱和硫酸铵沉淀,DEAE-Cellulose 52离子交换柱,Sephadex G-100凝胶柱层析纯化,得到蛋白质和糖的重合峰,经透析、冷冻干燥得长白山林蛙输卵管糖蛋... 以长白山林蛙为研究对象,对其输卵管糖蛋白进行提取分离及鉴定.长白山林蛙输卵管冲洗液经饱和硫酸铵沉淀,DEAE-Cellulose 52离子交换柱,Sephadex G-100凝胶柱层析纯化,得到蛋白质和糖的重合峰,经透析、冷冻干燥得长白山林蛙输卵管糖蛋白纯品OGP-Ⅰ.SDS-PAGE电泳实验结果表明,OGP-Ⅰ是分子量为116 000的均一带.对其分别进行蛋白和糖染色,同一位置都出现单一条带;紫外全扫描OGP-Ⅰ有多糖特征峰和蛋白吸收峰,表明OGP-Ⅰ是糖蛋白纯品. 展开更多
关键词 长白山林蛙 输卵管糖蛋白 分离 纯化 鉴定
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山羊发情相关输卵管糖蛋白(gEGP)基因的克隆 被引量:2
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作者 徐庆勇 刘桂生 陈清轩 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期520-523,共4页
The goat estrus\|associated oviductual glycoprotein(gEGP), which is an important secretary protein in oviduct, is directly associated with the zona pellucida of the ovulated oocyte and with the preimplantation embryo ... The goat estrus\|associated oviductual glycoprotein(gEGP), which is an important secretary protein in oviduct, is directly associated with the zona pellucida of the ovulated oocyte and with the preimplantation embryo development. To elucidate the physiological function and fundamental mechanism,a goat genomic library, in which plague titer is 1\^15×10\+6 pfu/ml, was constructed. Then, with a probe derived from bovine EGP cDNA, the genomic library was screened and a 18 kb fragment containing the gEGP gene was obtained. After PCR with the primers based on the ovine EGP cDNA, two fragments of gEGP gene were obtained and then sequenced. The predicted exon sequence of gEGP gene shows 99 6%, 96 3%, 89 2%, 88 4%, 88 0%, 87 4%, 84 3%, 74 8% homology with the EGP cDNA of sheep, cow, pig, baboon, rhesus, human, hamster, mouse, respectively. Like the other members of EGP gene family, gEGP gene also has many properties of the chitinase super family, and demonstrates the phylogenetic and functional relativity of EGP family with chitinase family. 展开更多
关键词 基因克隆 山羊 发情相关输卵管糖蛋白 gEGP
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输卵管糖蛋白的研究进展 被引量:2
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作者 吕萍 刘景圣 +1 位作者 蔡丹 郑明珠 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第9期31-32,共2页
输卵管糖蛋白是由输卵管上皮细胞分泌的一类特异性蛋白质,对于配子的最后成熟和运输,受精及早期胚胎发育具有重要影响。由于输卵管糖蛋白的特殊功能,目前对其研究比较多,但大都集中在输卵管糖蛋白的检测及免疫学方面,文章仅就输卵管糖... 输卵管糖蛋白是由输卵管上皮细胞分泌的一类特异性蛋白质,对于配子的最后成熟和运输,受精及早期胚胎发育具有重要影响。由于输卵管糖蛋白的特殊功能,目前对其研究比较多,但大都集中在输卵管糖蛋白的检测及免疫学方面,文章仅就输卵管糖蛋白的性质、生物学功能及其分离纯化过程的研究进展作一综述,旨在为进一步研究输卵管糖蛋白提供理论参考。 展开更多
关键词 输卵管糖蛋白 生物学功能 分离纯化 研究进展
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长白山林蛙输卵管糖蛋白多抗制备及应用研究
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作者 陈亮 兰海楠 +1 位作者 郑鑫 刘景圣 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第23期123-127,共5页
针对长白山林蛙输卵管糖蛋白制备特异性多克隆抗体。将新鲜林蛙输卵管蛋白粗提液经SepharoseFastFlow阴离子交换柱和SephadexG-100凝胶层析柱获得纯化的输卵管糖蛋白组分。以纯化输卵管糖蛋白免疫新西兰大白兔,制备多抗血清,采用辛酸-... 针对长白山林蛙输卵管糖蛋白制备特异性多克隆抗体。将新鲜林蛙输卵管蛋白粗提液经SepharoseFastFlow阴离子交换柱和SephadexG-100凝胶层析柱获得纯化的输卵管糖蛋白组分。以纯化输卵管糖蛋白免疫新西兰大白兔,制备多抗血清,采用辛酸-饱和硫酸铵法对多抗进行纯化并鉴定。结果表明:纯化后的多抗ELISA效价为1:64000,纯化多抗具有较高的敏感性和特异性,效价较高。利用制备的多抗对长白山林蛙输卵管分泌细胞进行免疫组织化学定位,为分泌细胞培养产物中输卵管糖蛋白进行检测提供研究条件。 展开更多
关键词 长白山林蛙 输卵管糖蛋白 抗体 免疫组化
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输卵管糖蛋白:潜在的免疫避孕靶抗原 被引量:1
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作者 徐万祥 《国外医学(计划生育分册)》 1999年第3期152-155,共4页
哺乳动物输卵管上皮细胞的特异分泌物——输卵管糖蛋白(OGP),作为新的潜在的免疫避孕靶,正日益受到生殖生物学界的关注。本文依据近年来的相关文献,综述了OGP的若干分子特征、可能的促精子与透明带(ZP)或卵结合和促早胚发育功能以及它... 哺乳动物输卵管上皮细胞的特异分泌物——输卵管糖蛋白(OGP),作为新的潜在的免疫避孕靶,正日益受到生殖生物学界的关注。本文依据近年来的相关文献,综述了OGP的若干分子特征、可能的促精子与透明带(ZP)或卵结合和促早胚发育功能以及它在计划生育领域的应用前景。 展开更多
关键词 输卵管糖蛋白 精卵结合 早胚发育 免疫避孕
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沙眼衣原体感染后大鼠输卵管与植物凝集素BS-1结合的糖蛋白的变化 被引量:1
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作者 陈筠 黄静 +2 位作者 孟运莲 汪琳 王敏 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2005年第3期295-299,共5页
目的研究沙眼衣原体感染后输卵管与植物凝集素BS-1结合的糖蛋白的变化。方法取25只成熟Wistar雌性大鼠随机分为实验组和对照组,每组5只。对照组接种2SP代替沙眼衣原体,其余每组大鼠均在卵巢囊接种沙眼衣原体D型株。分别于感染后3,5,7,14... 目的研究沙眼衣原体感染后输卵管与植物凝集素BS-1结合的糖蛋白的变化。方法取25只成熟Wistar雌性大鼠随机分为实验组和对照组,每组5只。对照组接种2SP代替沙眼衣原体,其余每组大鼠均在卵巢囊接种沙眼衣原体D型株。分别于感染后3,5,7,14d处死动物,取输卵管,观察大鼠输卵管与植物凝集素BS1结合的糖蛋白在感染后不同天数发生的改变,其变化可通过荧光显微镜观察与植物凝集素BS1结合后的荧光强度来检测,并采用HPIAS1000图文分析系统进行定量分析和SPSS11.0统计软件作统计分析。结果输卵管受损部位主要在粘膜层,富含N乙酰D半乳糖胺的糖蛋白随感染的天数不同,其变化有所不同,尤其以输卵管峡部变化明显。图像分析结果显示:感染第7d时其分泌量最低,感染后第14d其分泌量逐渐恢复,且各组间差异有显著性意义(P<0.05)。结论输卵管是精子与卵子结合的地方,也是胚胎早期发育的场所。富含N乙酰D半乳糖胺的糖蛋白可通过参与精卵结合、受精卵卵裂和早期胚胎发育等方式,对受精卵及早期胚胎发挥保护作用。 展开更多
关键词 沙眼衣原体 输卵管糖蛋白 植物凝集素BS-1 大鼠
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增龄对大鼠输卵管粘膜上皮糖蛋白的影响
7
作者 谈新提 孟运莲 +1 位作者 汪琳 桂志祥 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2004年第4期517-520,共4页
目的揭示增龄对大鼠输卵管粘膜上皮糖蛋白的影响。方法分别以5只1月龄、8月龄和18月龄健康雌性SD大鼠作为性成熟前期组(IMG)、性成熟期组(MG)和更年期组(CMG)。取输卵管石蜡切片,然后进行PAS及PAS阿尔新蓝染色。结果①PAS反应显示峡部... 目的揭示增龄对大鼠输卵管粘膜上皮糖蛋白的影响。方法分别以5只1月龄、8月龄和18月龄健康雌性SD大鼠作为性成熟前期组(IMG)、性成熟期组(MG)和更年期组(CMG)。取输卵管石蜡切片,然后进行PAS及PAS阿尔新蓝染色。结果①PAS反应显示峡部粘膜上皮阳性反应明显,三组阳性产物平均光密度值相比,MG与IMG、CMG间差异有高度显著性(P<001)。②PAS阿尔新蓝染色显示峡部粘膜皱襞处上皮细胞游离面有少量淡蓝色阳性产物出现,三组间淡蓝色阳性产物未见明显差异。结论大鼠输卵管峡部粘膜上皮能合成和分泌两种蛋白质中性糖蛋白和酸性糖蛋白。增龄对大鼠输卵管峡部粘膜上皮中性糖蛋白的合成和分泌有明显的影响,对酸性糖蛋白无明显影响。 展开更多
关键词 输卵管糖蛋白 上皮细胞 大鼠
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猪输卵管特异性糖蛋白结构与功能的生物信息学分析 被引量:2
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作者 刘春英 李方正 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第8期20-25,共6页
利用Lasergene、Protscale、SOPMA、Mega、ScanProsite等生物信息学软件对猪输卵管特异性糖蛋白(oviduct-specif-ic glycoprotein,OGP)进行物理性质、结构及系统进化分析。结果表明,猪OGP cDNA包含1个1581bp的开放阅读框,编码527个氨基... 利用Lasergene、Protscale、SOPMA、Mega、ScanProsite等生物信息学软件对猪输卵管特异性糖蛋白(oviduct-specif-ic glycoprotein,OGP)进行物理性质、结构及系统进化分析。结果表明,猪OGP cDNA包含1个1581bp的开放阅读框,编码527个氨基酸,有信号肽,属于分泌蛋白,无明显疏水区;猪OGP蛋白二级结构主要是α-螺旋和不规则卷曲。系统进化分析结果表明,猪OGP蛋白与绵羊OGP亲缘关系最近,与牛OGP的亲缘关系较远。提示,OGP蛋白属于糖苷水解酶18(glycosylhydrdase 18family,GH18)家族,牛OGP的GH18结构与猪的差别较大。 展开更多
关键词 输卵管特异性糖蛋白 生物信息学
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大鼠输卵管特殊糖蛋白基因片段的扩增、克隆与序列分析
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作者 袁世锦 孟运莲 +4 位作者 刘俊 张玲 黎莉 程秀娟 汪琳 《武汉大学学报(医学版)》 CAS 2005年第3期329-332,共4页
目的:大鼠输卵管特殊糖蛋白核苷酸序列的扩增、克隆及序列分析。方法:在Genebank中查找到已知的小鼠、金仓鼠、猪和人的输卵管特殊糖蛋白的基因序列并运用PrimerPremier5.0软件对这些输卵管特殊糖蛋白的基因序列进行同源性分析。依据同... 目的:大鼠输卵管特殊糖蛋白核苷酸序列的扩增、克隆及序列分析。方法:在Genebank中查找到已知的小鼠、金仓鼠、猪和人的输卵管特殊糖蛋白的基因序列并运用PrimerPremier5.0软件对这些输卵管特殊糖蛋白的基因序列进行同源性分析。依据同源性较大的保守区基因序列设计一对引物,并提取大鼠输卵管总RNA作为模板进行RTPCR,得到一条cDNA片段。将产物连接到T载体中,转化、扩增重组质粒。提取大肠杆菌中的重组质粒进行DNA测序。将DNA测序所得到的基因序列和已知的小鼠、金仓鼠、牛、羊及人的输卵管特殊糖蛋白的基因序列进行同源性分析。结果:利用RTPCR的方法扩增出一条120bp的目的基因片段,测序结果发现其和小鼠、金仓鼠、牛、羊和人的输卵管特殊糖蛋白的核苷酸序列的同源性分别为90%,90%,78%,87%。结论:本实验所获得的基因序列为目前尚未见报道的大鼠输卵管糖蛋白的基因序列的一部分。 展开更多
关键词 大鼠 输卵管特殊糖蛋白 聚合酶链反应 克隆 DNA测序
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大鼠输卵管特殊糖蛋白核苷酸序列的初步测定
10
作者 袁世锦 孟运莲 汪琳 《解剖学研究》 CAS 2003年第2期150-151,共2页
关键词 大鼠 输卵管特殊糖蛋白 核苷酸序列 测定 分子生物学特性
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FSH促进牦牛输卵管上皮细胞分泌输卵管特异性糖蛋白的研究 被引量:2
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作者 杨融 潘阳阳 +3 位作者 崔燕 樊江峰 何俊峰 余四九 《兽类学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期190-195,共6页
为在胚胎共培养过程中添加相关激素提高哺乳动物胚胎发育的研究提供理论依据,本研究探讨了促卵泡生成素(FSH)对牦牛输卵管上皮细胞分泌特异性糖蛋白的影响。体外分离培养牦牛输卵管上皮细胞,并在细胞中添加不同浓度的FSH,作用6 h后运用... 为在胚胎共培养过程中添加相关激素提高哺乳动物胚胎发育的研究提供理论依据,本研究探讨了促卵泡生成素(FSH)对牦牛输卵管上皮细胞分泌特异性糖蛋白的影响。体外分离培养牦牛输卵管上皮细胞,并在细胞中添加不同浓度的FSH,作用6 h后运用荧光定量PCR分析输卵管特异性糖蛋白mRNA的表达水平,并用细胞免疫标记对其分泌输卵管蛋白的部位进行分析。结果显示,FSH的浓度为0.5-5.0μg/m L时,输卵管蛋白的表达量随着FSH浓度的上升而增加,在5.0μg/m L的FSH作用后,输卵管蛋白的mRNA表达量最高;浓度超过10.0μg/m L时,输卵管蛋白基因的表达量降低。结果表明,FSH具有促进输卵管上皮细胞分泌输卵管特异性糖蛋白的作用,且具有剂量依赖性,其最佳作用浓度为5.0μg/m L,输卵管蛋白主要由细胞质分泌。 展开更多
关键词 输卵管 促卵泡激素 输卵管特异性糖蛋白
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牛输卵管上皮对小鼠胚胎发育的影响 被引量:4
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作者 方昌阁 苗向阳 杨文胜 《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第5期75-77,共3页
模拟发情期(0-6 d)母牛外周血雌激素和孕酮浓度的变化,添加17β-雌二醇和孕酮至TCM-199中,体外培养间情期牛输卵管上皮细胞(BOECs),同时观察了BOECs分泌蛋白(BOEP)、发情期母牛输卵管冲洗蛋白(BOP)和小牛输卵管冲洗蛋白(COP)... 模拟发情期(0-6 d)母牛外周血雌激素和孕酮浓度的变化,添加17β-雌二醇和孕酮至TCM-199中,体外培养间情期牛输卵管上皮细胞(BOECs),同时观察了BOECs分泌蛋白(BOEP)、发情期母牛输卵管冲洗蛋白(BOP)和小牛输卵管冲洗蛋白(COP)对小鼠胚胎发育的影响。结果表明:①类固醇激素可以调节和启动体外培养的间情期牛输卵管上皮细胞的分泌活动;②BOEP比BOP和COP能极显著地促进胚胎的分裂和发育(P〈0.001);③与对照组(未添加外源蛋白质,只添加胎牛血清)相比,BOEP的囊胚形成率极显著低于对照组(P〈0.01),可能是缺乏某些分子量低于10 kD蛋白因子的协同作用,同时30~56kD分泌蛋白的存在,也可能参与了抑制和阻碍胚胎分裂和发育的过程。 展开更多
关键词 输卵管特异性糖蛋白 早期胚胎 体外培养
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Characterization of an Estrus-Associated Glycoprotein in Oviductal Fluid of Sheep 被引量:2
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作者 陈清轩 ColinNancarrow 《Developmental and Reproductive Biology》 1995年第2期1-6,共6页
Estrus-associated glycoprotein (EGP) is a special protein in oviductal fluid which appears before ovulation and fertilization and disappears after the embryo passes into the uterus. One-and two dimensional SDS-PAGE an... Estrus-associated glycoprotein (EGP) is a special protein in oviductal fluid which appears before ovulation and fertilization and disappears after the embryo passes into the uterus. One-and two dimensional SDS-PAGE and Western blotting with monoclonal antibody or peanut agglutinin were used to characterize the glycoprotein,The specificity of the marking agents enabled the study to proceed without purification. EGP was found to include two proteins: one is acidic with a pH of 4.5 while the other is basic with a pH of 8.0 The molecular weights of their subunits are the same, that is 110 kD. This study may shed light on the mechanism of reproductive Process and be helpful to the development of a more cffective culture medium for in vitro culture of early embryo. 展开更多
关键词 Estrus-Associated glycoprotein 2D SDS-PAGE Western blot
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Detection and Analysis of an Estrous-associated Oviductal Glycoprotein DNA Fragment from Primates by PCR
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作者 陈清轩 ClaytonE.Walton 《Developmental and Reproductive Biology》 1995年第1期1-5,共5页
DNA was extracted from lymphocytes of primates and PCR was used to amplify the estrous-associated glycoprotein DNA fragment. 537 kb DNA fragments from crab eating macaque were detected. Sequences from chimpanzee, ora... DNA was extracted from lymphocytes of primates and PCR was used to amplify the estrous-associated glycoprotein DNA fragment. 537 kb DNA fragments from crab eating macaque were detected. Sequences from chimpanzee, orangutan and human were also amplified, but they were shorter than predicted. We were unable to amplify sequences from spider monkey, salmon, several rodents, bandicoot, sheep and pig . Analysis of the restriction map revealed several conserved RE sites in the amplified sequences of the primates. The results support the view that monkey has more close relationship with human than any other species at molecular level. 展开更多
关键词 DNA amplification PCR PRIMATES Restriction map
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