酶联免疫法联合核酸检测无偿献血标本控制输血传播疾病残余风险的效果研究

血站采集献血者的血液样本后通常会经过多道筛查和检测,以确保血液的质量和用血安全性。目前,对于血液病毒的检测包括酶联免疫法和核酸检测法。但血液样本中的病毒如果处于窗口期、变异期,其酶联免疫法的检测准确率就会非常低[1]。本研究对无偿献血标本采用酶联免疫法联合核酸检测,分析对输血传播疾病残余风险的控制效果。

血站ELISA联合核酸检测对于无偿献血标本输血传播疾病筛查结果的影响研究

目的 研究血站酶联免疫吸附测定(ELISA)与核酸检测联合应用于无偿献血标本输血传播疾病筛查中的作用。方法 选取2022年1月至2023年12月血站检验科采集的109 860份无偿献血的血液标本,其中2022年血液标本数为59 366份,而2023年血液标本数为50 494份。每份血液标本留取两份,分别用于进行ELISA检测与核酸检测。对2022年和2023年血液标本检测结果进行分析。结果 2022年59 366份血液标本中,通过ELISA检测后,共有1225份不合格,不合格率为2.06%(1225/59 366),其中乙型肝炎表面抗原(HBs Ag)不合格222份,占比0.37%(222/59 366);抗人类免疫缺陷病毒的抗体(抗-HIV)不合格66份,占比0.11%(66/59 366);丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)不合格100份,占比0.17%(100/59 366);梅毒不合格174份,占比0.29%(174/59 366);其他484份,占比0.82%(484/59 366)。58 141份ELISA检测合格标本中,核酸检测不合格28份,不合格率为0.048%(28/58 141)。2023年50 494份血液标本中,通过ELISA检测后,共有981份不合格,不合格率为1.94%(981/50 494),其中HBsAg不合格150份,占比0.30%(150/50 494);抗-HIV不合格211份,占比0.42%(211/50 494);抗-HCV不合格71份,占比0.14%(71/50 494);梅毒不合格134份,占比0.27%(134/50 494);其他335份,占比0.66%(335/50 494)。49 513份ELISA检测合格标本中,核酸检测不合格27份,不合格率为0.05%(27/49 513)。结论 血站无偿献血血液标本经ELISA结合核酸检测可行性高,能够使血液标本内病毒检出率提高,保障临床输血安全。

输血传播病毒感染致脑内多发肉芽肿性炎1例

患者男,56岁,头晕3个月,外院发现颅内占位;2年前因头顶皮肤外伤接受清创缝合术,1年前该处局部出现结节样增生伴破溃不愈。查体:头顶部6.8cm×5.7cm范围内皮肤色红,粗糙,无触痛,皮温正常。常规8种传染病组合实验室检查均为阴性。颅脑CT:双侧额叶和右顶叶见多发稍低密度影,周围见明显水肿及占位效应(图1A)。

血站ELISA联合核酸检测在无偿献血标本输血传播疾病筛查中的效果分析

目的:探究血站酶联免疫吸附性试验(ELISA)联合核酸检测在无偿献血标本输血传播疾病筛查中的效果。方法:随机抽取2021年1月—2022年12月期间本血站采集到的46664份无偿献血的血液标本,其中2021年血液标本数22538份、2022年血液标本24126份。每份血液样本均留取2管血液,一份用于ELISA检测;一份用于核酸检测。分析2021年、2022年血液标的检测结果。结果:2021年22538份无偿献血的血液标本中,经ELISA检测不合格的共256份,不合格率为1.14%(256/22538),其中HBsAg检测不合格的130份,占比0.58%(130/22538);抗-HCV检测不合格的40份,占比0.18%(40/22538);抗-HIV检测不合格的17份,占比0.08%(17/22538);梅毒检测不合格的69份,占比0.31%(69/22538)。核酸检测不合格的共24份,不合格率为0.11%(24/22538),均为HBV-DNA检测不合格的。2022年24126份无偿献血的血液标本中,经ELISA检测不合格的共250份,不合格率为1.04%(250/24126),其中HBsAg检测不合格的128份,占比0.53%(128/24126);抗-HCV检测不合格的28份,占比0.12%(28/24126);抗-HIV检测不合格的19份,占比0.08%(19/24126);梅毒检测不合格的75份,占比0.31%(75/24126)。核酸检测不合格的共32份,不合格率为0.13%(32/24126),均为HBV-DNA检测不合格的。46664份无偿献血的血液标本中出现窗口期血液标本56份,检出率为0.12%(56/46664)。相较于ELISA检测的窗口期[(35.68±4.35)天],核酸检测的窗口期[(22.31±3.86)天]更短(P<0.05)。结论:采用ELISA与核酸联合检测血站的无偿献血血液标本,有助于提升血液标本中病毒的检出率,避免漏检,而且还可缩短病毒的窗口期,保证临床输血的安全性。

广州地区献血者中输血传播病毒感染情况调查

目的 :了解广州地区献血人群中的输血传播病毒 (TTV)感染状况 ,探讨TTV与丙氨酸氨基转移酶(ALT)、HBsAg及抗HCV指标的相关性。方法 :用聚合酶链反应 (PCR)方法对不同献血人群血清标本进行TTV DNA检测 ,并对所有标本进行了ALT、HBsAg、抗 HCV、抗 HIV、梅毒及抗 HAV、抗 HEV、抗 HGV筛查。结果 :献血者中的TTV DNA阳性率为 7 6 % (43/ 5 6 4 ) ,其中有偿献血者和无偿献血者中的TTV DNA阳性率分别为 9 4 %、 5 9% ;单一ALT异常无偿献血者的TTV DNA阳性率明显高于ALT正常无偿献血者 (10 6 %、 4 2 % ,P <0 0 5 ) ,HBsAg及抗 HCV阳性献血者中的TTV DNA阳性率分别为 11 1%、 8 3%。结论 :本文结果显示广州地区献血者中存在TTV感染 ,而且在有偿献血者中感染率相对较高。TTV可以单独感染也可与HBV、HCV重叠感染并与ALT密切相关。

输血传播病毒样微小病毒基因检测

目的:测定慢性肝炎患者体内输血传播病毒(TTV)样微小病毒(TLMV)的全基因序列,并研究人群中TLMV感染状况。方法:采用日本学者Shunji Mishiro提供的序列选择TLMV-CBD279和CBD-231最保守区设计引物,用慢性乙型肝炎且TTV阳性患者血清制备DNA模板,进行PCR扩增;将阳性PCR产物连接至pGEMR-T质粒,碱裂解法提取质粒DNA并纯化。以T7引物为起始全自动荧光测序仪测序。结果:获得162bp基因序列,该序列与日本株CBD231、CBD279同源性为72%,丙型肝炎患者及健康献血员感染率最高。结论:在中国慢性乙型肝炎患者体内存在TLMV感染。

2010～2011年广州地区输血传播HBV、HCV、HIV残余风险评估

目的评估广州地区输血传播HBV、HCV、HIV的残余风险,建立适合广州地区献血人群残余风险评估的数学模型。方法收集2010年1月～2011年12月551 047人次广州地区无偿献血者的基本资料及血液ELISA与核酸检测(NAT)的HBV、HCV、HIV数据,利用(WP/I)及WP/LTR模型分别评估重复献血者及初次献血者传播HBV、HCV、HIV的残余风险。结果 2010～2011年广州地区献血者HBV、HCV、HIV经ELISA后的残余风险分别为1/30 147、1/70 591、1/645 099;经NAT检测后的残余风险分别为1/46 643、1/723 526、1/1 254 770。结论广州地区重复献血者传播HBV、HCV、HIV的残余风险低于初次献血者;采用NAT检测后,献血者传播HBV、HCV、HIV的残余风险大大降低。

广州地区HBsAg阴性无偿献血血液输血传播HBV残余风险评估

目的了解广州地区无偿献血血液经血清学筛查后的输血传播乙型肝炎病毒(HBV)残余风险及HBsAg阴性HBV NAT阳性献血者的乙肝血清学标志物状况,为采供血机构制定血液安全保障措施提供参考依据。方法以283 428份无偿献血者血液标本为研究对象,使用ELISA方法检测HBsAg,阴性标本应用核酸检测技术进行HBV NAT检测,收集HBsAg阴性HBV NAT阳性献血者标本进行乙肝血清学标志物检测及HBV DNA实时荧光PCR定量分析,设200份经常规血液筛查合格标本为对照组同步检测乙肝血清学标志物,并对献血者进行随访追踪。结果 283 428份无偿献血者血液标本,共检出172份HBsAg阴性HBV NAT阳性标本,广州地区ELISA筛检HBsAg后输血传播HBV残余风险为0.061%(172/283 428),街头流动或固定点献血者检出率(0.071%)高于来自于单位团体组织献血者(0.047%)。172份标本抗-HBe、抗-HBc检出率(32.56%、79.1%)均高于对照组(17.5%、51.0%),乙肝血清学抗体以抗-HBs、抗-HBc阳性及单纯抗-HBc阳性两种模式为主,HBV DNA浓度均低于200 copies/mL。共检出11份HBV窗口期标本,通过对31例献血者随访追踪,确定23例献血者原始标本为OBI标本。结论广州地区可能有较高ELISA筛检HBsAg后输血传播HBV残余风险,应用HBV NAT技术筛检常规酶免血液筛查HBsAg阴性标本,能检出部分处于OBI的血液,缩短HBV检测窗口期,能将现阶段输血传播HBV风险进一步降低,对保障血液安全预防输血感染HBV具有重要意义。

上海地区部分人群输血传播病毒(TTV)感染的研究

目的 调查上海地区输血传播病毒 (TTV)在不同人群中的感染情况 ,探索TTV的高危人群和传播途径。方法 应用半巢式PCR方法检测TTVDNA ,并抽取部分阳性标本的PCR产物 (2 49bp)测定核苷酸序列。结果 检测有关人群 8组计 473例 ,其中非甲～非庚型肝炎病人 60例 ,甲～庚型肝炎病人 10 2例 ,血液透析病人 5 5例 ,血液病儿童 38例 ,健康人群 68例 ,以及性病病人、静脉吸毒人群、肝癌病人各 5 0例。TTVDNA总阳性率 2 8 33% (134 /4 73)。阳性率波动在 17 64%～5 0 %。 8组人群中静脉吸毒人群阳性率高达 5 0 % (2 5 /5 0 ) ,性病组阳性率 36% (18/5 0 ) ,该 2组人群TTV感染率与健康人群 (17 64% )相比均有显著性差异 (χ2 =14 0 1P <0 0 0 1,χ2 =5 12P <0 0 5 )。其余各组群阳性率差异比较无统计学意义。将肠道传播途径的组群 (甲、戊肝 )与血液传播途径的组群 (静脉吸毒者、血液病疾患、血液病人及乙、丙肝病人 )比较分析 ,其阳性率分别为 2 5 49%、32 17%。二者无显著性差异 (χ2 =0 46,P >0 0 5 )。 2 0份阳性标本扩增产物测序结果 ,核苷酸序列与日本株 (N2 2 )同源性在 85 %以上的有 15例 ,在 <85 %的有 5例。结论 研究证实上海地区存在较广泛的TTV感染 ,其中静脉毒瘾者与性病患者为高危人群 ,传?

华南地区猪输血传播病毒流行病学调查与分析

为了解华南地区规模化猪场猪输血传播病毒(TTV)感染状况,采用PCR方法对2005-2007年间来自广东、江西、湖南、福建和广西五省44个规模化猪场193份病料进行检测。结果显示,TTV1型阳性率为41.5%,TTV2型阳性率为21.8%,TTV1型和TTV2型共同感染阳性率为13.0%。TTV1型阳性猪场占72.7%,TTV2型阳性猪场占63.6%,TTV1型和TTV2型共同感猪场占43.1%,TTV阴性猪场占11.4%。研究表明,我国华南地区规模化猪场广泛存在TTV流行,各地区TTV1型阳性率为33.3%～57.1%,TTV2型阳性率为5%～25.7%,除湖南外,其他地区均存在TTV1和TTV2混合感染情况。

输血传播病毒(TTV)基因变异的临床意义

目的 :研究TTV基因变异与其致病性的关系。方法 :采用巢式多聚酶链式反应 (PCR)扩增TTVDNA ,收集TTVDNA阳性病例 5 2例 ,其中献血员 4例 ,乙型肝炎病毒携带者 5例 ,慢性乙型肝炎患者 11例 ,慢性重型乙型肝炎患者 32例 ,采用单链构象多态性 (SSCP)方法进行TTV基因变异检测。结果 :献血员、乙型肝炎病毒携带者、慢性乙型肝炎、慢性重型乙型肝炎患者中 ,SSCP电泳条带数分别为 1.2 5± 0 .5 0 ,1.6 0± 0 .5 5 ,3.36± 1.36 ,4 .5 9± 1.83;慢性乙型肝炎和慢性重型乙型肝炎患者组中SSCP电泳条带数显著多于其他组 (P <0 .0 5 ) ;慢性重型乙型肝炎患者中SSCP电泳条带数显著多于慢性乙型肝炎患者 (P <0 .0 5 )。结论 :TTV存在基因变异 。

猪输血传播病毒(TTV)与猪圆环病毒混合感染的检测及TTV遗传变异分析

为了解我国猪群中猪输血传播病毒(TTV)与猪圆环病毒(PCV)混合感染情况,本研究采用PCR方法对采自14个省280份病料样品进行检测,结果显示,TTV1和TTV2阳性检出率分别为51.8%和28.2%,TTV1与TTV2混合感染率为18.2%;PCV1和PCV2阳性率分别为41.1%和37.5%,PCV1与PCV2混合感染率为19.6%;PCV2阳性样品中TTV1和TTV2混合感染率达75.0%。此外,对2株TTV1基因组进行测序,与GenBank中登录的6个TTV1序列比对,相似性结果为67.3%～95.1%;对4株TTV2基因组测序,与GenBank登录的4条TTV2序列比对,相似性为84.7%～90.4%;将TTV1与TTV2进行序列比对,相似性仅为44.0%。TTV1和TTV2基因高变区分别位于520 nt～2 594 nt和720 nt～2 170 nt;TTV1基因保守区位于1 nt～520 nt和2 595 nt～2 800 nt;而TTV2基因保守区位于1 nt～719 nt和2 171 nt～2 800 nt。以上结果表明,我国猪群中存在TTV与PCV2的混合感染,并且两种病毒混合感染引起的相关疾病可能存在协同致病性;TTV1和TTV2基因型差异较大,具有遗传变异多样性的特点。

2009年我国部分猪群输血传播病毒感染情况调查

为调查输血传播病毒(TTV)在我国猪群中的感染状况,本研究对2009年采自29个省市的1 990份猪血清样品进行了TTV1、TTV2的双重PCR方法检测,并对结果进行了统计分析。结果表明,我国猪群中TTV总的感染率为63.37%(1261/1990),其中TTV1感染率为55.88%(1 112/1 990),TTV2为32.91%(655/1 990),TTV1和TTV2双重感染率为25.43%(506/1 990)。进而对样品的地区性分布特征、样品来源等影响因素进行分析,表明我国猪群中TTV感染率以东北地区最高,西北地区最低。样品来源不是影响感染率的关键因素。

新疆静脉注射毒品者输血传播病毒的检测及部分核苷酸序列分析

目的 :调查新疆维吾尔自治区 (新疆 )静脉注射毒品者中输血传播病毒 (TTV)的感染状况及基因型别。方法 :采用巢式PCR技术检测 10 2例汉族、维吾尔族、回族静脉注射毒品者血清中TTVDNA ,以 38例正常体检者为对照 ,比较静脉注射毒品者中TTVDNA阳性率是否与共用注射器有关。将一例维吾尔族TTV阳性扩增产物插入pGEM -TEasy载体 ,测序并序列分析。结果 :静脉注射毒品者TTVDNA阳性率为 32 35 % ,显著高于正常体检者 (5 2 6 % ) ,P <0 0 5。静脉注射毒品者中汉族、维吾尔族、回族TTVDNA阳性率分别为 32 6 1% (15 4 6 )、35 14 % (13 37) %、2 6 32 % (5 19) ,各民族之间差异无显著性 (P >0 0 5 )。静脉注射毒品者TTVDNA阳性率与共用注射器有关 (P <0 0 5 )。一例维吾尔族TTVDNA部分核苷酸测序 ,与日本株 (AB0 0 8394 )比较同源性为 98% ,属于G1a型。结论 :静脉注射毒品者是TTV感染的高危人群。一例维吾尔族TTV核酸序列与日本株 (AB0 0 8394 )相比有高度同源性 。

慢性肾衰血透患者输血传播病毒感染分析

目的 观察输血传播病毒 (TTV)和肝炎病毒在慢性肾衰 (CRF)血液透析 (HD)患者中的流行情况和感染相关因素 .方法 应用巢式 -聚合酶链反应 (Nest- PCR)方法和双抗体夹心 EL ISA法 ,检测 90例 CRF血透患者和 2 0 8例西安地区职业献血员及 12 8例对照组血清 TTV- DNA,HBV五项 ,并分析 TTV与输血次数、HD时间、肝功能损害及其与各型肝炎病毒感染的关系 .结果 190例 CRF血透患者和 2 0 8例职业献血员中 TTV- DNA阳性率 ,分别是 46 .6 %和 16 .8% ,明显高于对照组 (P<0 .0 1) ;2 TTV- DNA阳性率与输血次数、HD时间呈显著的正相关 (r=0 .5 86 ,P<0 .0 1,r=0 .486 ,P<0 .0 1) ,而与年龄、性别、手术史均无显著相关 ;390例 HD患者中 ,检出肝炎病毒标志物阳性者 6 6例 (感染率 73.3% ) ,明显高于对照组 (P<0 . 0 1) ,其中以 HCV阳性 (感染率6 8.1% )最突出 ,HBV阳性 (感染率 18.1% )次之 ,HBV,HCV双重阳性者亦较明显 (感染率 13.6 % ) ;2 0 8例职业献血员中 ,检出肝炎病毒标志物阳性者 14例 (感染率 6 .7% ) ,与对照组(感染率 5 .4% )比较无明显差异 (P>0 .0 5 ) ;480例 TTV阳性患者中 5例合并 HBV感染 ,与 TTV阴性组相当 ,但合并HCV感染及 HCV、HBV双重感染差别显著 (P<0 .0 5 )(16 .0 % vs11.0 %及 6 .0 %

输血传播病毒TTV致病性的探讨

目的 通过病例对比 ,进一步研究 TTV是否有致病性 ;对 1例西安地区非甲 -非戊型肝炎但血清 TTV阳性患者套式 PCR终产物纯化测序 ,在验证我们 TTV DNA检测正确性的同时初步研究西安地区 TTV流行株部分分子生物学特点 .方法 在 TTV ORF1区参照文献 [1]设计一套套式 PCR引物 ,并建立稳定的套式 PCR检测法 ,对西安地区 119例非甲 -非戊型肝炎患者及 16 2例健康有偿献血员进行 TTV对比检测和统计学处理 ;对 1例患者套式 PCR终产物纯化测序 ,用 DNAsis软件在计算机上与中国 1株做同源性比较阳性 .结果 119例非甲 -非戊型肝炎患者中 37例 TTV DNA阳性 ,阳性率 31.1% ;16 2例健康有偿献血员中 TTV DNA阳性 30例 ,阳性率 18.5 % ;两组有明显的统计学差异 (P<0 .0 5 ,χ2 =5 .2 5 1) .对 1例非甲 -非戊型肝炎患者血清 TTV套式 PCR终产物纯化直接测序 ,测得 143bp序列 ,经计算机比较 ,其与中国 1株同源性为 6 5 .0 % ,差异率为 35 .0 % (>30 .0 % ) .其中6 2 bp序列同源性高达 75 .8% .结论 TTV可能有致病性 ;西安地区可能存在新的

输血传播疾病标志物快速检测与职业暴露

目的增强医护人员职业防护意识,探讨可能的防护方法,减少职业暴露的发生。方法对7089份急诊患者血清进行HBsAg、抗HCV、人类免疫缺陷病毒抗体(抗HIV)、梅毒螺旋体特异性抗体(抗TP)快速和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测。结果7089份急诊手术患者血清中,HBsAg、抗HCV、抗HIV和抗TP快速检现特异性分别为99.67%,99.55%,99.79%和99.76%;灵敏度分别为68.97%,62.74%,88.89%和70.37%;检测效率分别为97.59%,98.74%,99.76%和99.65%。结论临床医护人员,尤其是麻醉手术科和外科医护人员,容易遭受输血传播疾病的暴露,具有很高的传播疾病的危险性。因此,应采取针对性的防护安全教育,预防事故发生。

输血传播病毒(TTV)重叠感染在慢性乙型肝炎病毒感染患者中的临床意义

目的 :研究乙型肝炎病毒感染患者TTV重叠感染情况及初步探讨TTV的致病性。方法 :在ORF1区设计特异性引物建立巢式多聚酶链式反应 (PCR) ,检测乙型肝炎病毒感染患者血清中TTVDNA ,对PCR产物进行分子克隆和测序。结果 :献血员、慢性乙型肝炎病毒携带者、慢性乙型肝炎和慢性重型乙型肝炎患者TTVDNA阳性率分别为 10 %、11%、2 7%、4 8%。其中前两者与后两者比较均有显著差异 ,慢性乙型肝炎和慢性重型乙型肝炎患者相比也有显著差异 (P <0 .0 5 ) ,乙型肝炎病毒感染者中其HBV感染复制指标的阳性率在TTVDNA阳性与TTVDNA阴性组之间无明显差异 (P >0 .0 5 )。慢性乙型肝炎和慢性重型乙型肝炎患者的ALT和TBIL在TTVDNA阳性病人组与TTVDNA阴性病人组之间比较有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,TTVDNA阳性病人组明显高于TTVDNA阴性病人组。结论 :献血员中存在TTV感染 ,乙型肝炎病毒感染患者重叠感染TTV较常见。慢性乙型肝炎和慢性重型乙型肝炎患者TTVDNA阳性率明显高于献血员和慢性乙型肝炎病毒携带者的阳性率 ,提示TTV的重叠感染可能是HBV感染病情加重因素之一 ,TTV重叠感染对HBV的复制可能不存在相互作用。

PCR-ELISA法检测输血传播病毒在输血感染调查中的应用

目的:利用PCR-ELISA法调查广西南宁市不同人群输血传播病毒(TTV)感染状况。方法:检查正常人群和特殊人群(包括血透患者、性病患者、静脉毒瘾者、受血者和非甲～庚型肝炎患者)的血清TTV感染指标,用PCR-ELISA法检测TTV-DNA。结果:1540例正常人群的TTV-DNA阳性率为12.8%(197/1540),各年龄组人群都能检出TTV-DNA阳性者,以26～35岁组最高,为15.8%(61/385),与18～25岁组TTV-DNA阳性率比较差异有显著性(P<0.01)。调查258例血透患者、304例性病患者、106例静脉毒瘾者、235例受血者和197例非甲～庚肝炎患者TTV-DNA阳性率分别为23.6%(61/258)、21.1%(64/304)、37.7%(40/106)、34.9%(82/235)和36.0%(71/197),均显著高于正常人群(P<0.01)。结论:静脉毒瘾者、受血者和非甲～庚型肝炎患者TTV感染率较高。PCR-ELISA法可用于TTV感染的检测。