分析前因素对血液乙肝表面抗原检测的影响

目的探讨分析前标本处理因素对血液乙肝表面抗原(HBsAg)检测的影响。方法收集300例献血者的血液标本作为研究对象,采用ELISA法进行HBsAg检测。采用配对t检验统计分析对比离心温度为常温(18~27℃)和4℃、采集后储存0 h和8 h离心、离心后2~8℃储存2 h和2~8℃储存2 h后离心、抗凝管和促凝管、常温(18~27℃)和2~8℃储存5种因素对检测结果的影响。结果离心温度、标本采集到离心间隔、储存温度3种因素的t值分别为6.120、-5.694、3.691,对HBsAg检测结果的影响差异有统计学意义(P<0.05)。离心温度、标本采集到离心间隔、离心和储存顺序、标本管类型、储存温度5种因素复合标准差分别为0.0055、0.0045、0.0026、0.0020、0.0049,影响程度由大到小依次为离心温度、储存温度、标本采集到离心间隔、离心和储存顺序、标本管类型。结论离心温度、标本采集到离心间隔、储存温度3种因素对检测结果有显著影响。环境温度升高和全血标本长时间不分离导致标本不合格,从而对检测结果准确性产生影响,在日常工作中应采取有效措施避免上述因素。

对乙型肝炎患者检测乙肝表面抗原大蛋白和前S1抗原的区别和临床意义

[目的]检测乙肝患者血清中乙肝表面抗原大蛋白（Hepatitis B Virus Large Surface Protein,LHBs）、乙肝前S1、HBV DNA,探讨LHBs用于乙肝患者临床诊断的意义。[方法]采用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测LHBs以及乙肝前S1,采用化学发光方法检测乙肝两对半,采用荧光定量PCR方法对患者HBV DNA进行检测。[结果]（1）相同乙肝模式患者血清LHBs与HBV DNA检出率比较差异无显著性意义（P〉0.05）;（2）HBeAg阳性患者血清中LHBs与HBV DNA阳性率均明显高于HBeAg阴性患者,差异有显著性意义（P〈0.05）;（3）相同乙肝模式患者血清乙肝前S1的检出低于HBV DNA的检出,两者相比较差异有显著性意义（P〈0.05）。[结论]LHBs可以弥补由于乙肝病毒变异引起的HBeAg检测的不足,LHBs可以反映病毒复制。

对乙型肝炎患者检测乙肝表面抗原大蛋白和前S_1抗原的区别和临床意义

目的检测乙型肝炎(下称乙肝)患者血清中乙肝表面抗原大蛋白(LHBs)、乙肝前S1、HBV-DNA,探讨LHBs用于乙肝患者临床诊断的意义。方法采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测LHBs以及乙肝前S1,采用化学发光方法检测乙肝两对半,采用荧光定量PCR方法对患者HBV-DNA进行检测。结果 (1)相同乙肝模式患者血清LHBs与HBV-DNA检出率差异无统计学意义(P>0.05);(2)HBeAg阳性患者血清中LHBs与HBV-DNA阳性率均明显高于HBeAg阴性患者,差异有统计学意义(P<0.05);(3)相同乙肝模式患者血清乙肝前S1的检出低于HBV-DNA的检出,两者差异有统计学意义(P<0.05)。结论 LHBs可以弥补由于乙肝病毒变异引起的HBeAg检测的不足,并在一定程度上反映了乙肝患者肝功能状况。

酶联免疫吸附法检测乙肝表面抗原不同程度乳糜血对其的干扰分析

目的:分析不同程度乳糜血浆乙肝表面抗原(HBsAg)检测结果的干扰,探讨乳糜血浆检测结果的可靠性。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)法检测乳糜血浆中HBsAg。结果:不同乳糜指数血浆HBsAg检测结果比较,差异无统计学意义(P>0.05);不同乳糜程度血浆放置时间不同,HBsAg检测结果有区别,乳糜指数≤3的乳糜血浆5 d内检测,差异无统计学意义(P>0.05),乳糜指数为4、5、6、8及>8的乳糜血浆在第3 d检测,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:不同程度乳糜血浆HBsAg检测结果无影响,轻度乳糜血浆样本放置5 d内检测HBsAg结果无差异,中度及重度乳糜血浆样本必须3 d内完成检测。

表达含前S的乙肝病毒表面抗原重组CHO细胞株的建立和特性检测

为建立表达含前S基因乙肝病毒表面抗原的细胞株,将笔者所在实验室构建的表达含前S基因乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的真核表达质粒共转染CHO/dhfr-细胞,通过筛选,获得可表达含前S基因乙肝病毒表面抗原的重组CHO细胞,然后进行亚克隆,用氨甲喋呤(MTX)加压选择,以ELISA法检测目的蛋白表达量,筛选获得稳定表达目的蛋白的细胞株,并对其进行特性鉴定。最终获得了C10和A10两株稳定高表达含前S基因乙肝病毒表面抗原的细胞株。

输血前检查乙肝表面抗原、丙肝抗体、艾滋抗体、梅毒的临床意义

目的 对拟输血患者1839例在输血前进行乙肝表面抗原,丙肝病毒抗体,艾滋病病毒抗体,梅毒反应素等输血传染病因子进行检测.方法 采用酶联免疫法.结果 输血前患者的乙肝表面抗原阳性率为9.7%,丙肝病毒抗体阳性率为0.5%,艾滋病病毒抗体阳性率为0.1%,梅毒反应素阳性率为1.6%.结论 输血前检查能作为上述几种病原体流行的信号灯,为预防、诊断和治疗提示方向,也是鉴别是否因输血感染疾病的依据,减少输血医疗纠纷的重要措施.

我院输血前乙肝表面抗原、丙肝抗体、梅毒抗体、艾滋病毒抗体检查的研究分析

目的对我院2011年1月至2011年12月期间输血的患者输血前乙肝表面抗原、丙肝抗体、梅毒抗体、艾滋病毒抗体检查结果进行分析。方法 HBSAg、和抗-HCV、HIV用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测,梅毒抗体采用甲苯胺红不加热试验初筛,如果阳性用TPPA法复检。结果HBSAg、抗-HCV、梅毒抗体的阳性率分别为:12.2%、1.6%、0.92%,HIV无阳性。

化学发光技术检测乙肝表面抗原阳性患者不同乙肝模式乙肝前S1蛋白的临床价值

目的探讨化学发光技术在乙肝表面抗原阳性患者不同乙肝模式乙肝前S1(pre-S1)蛋白检测中的临床价值。方法测定400例HBV患者乙肝两对半,并分为7个模式,比较不同模式下的pre-S1蛋白阳性率。结果不同乙肝模式下乙肝pre-S1蛋白阳性率不同,其中以HBsAg+HBeAg+HBcAb阳性模式(大三阳)最高(92.45%),HBsAg+HBsAb+HBeAb+HBcAb阳性模式最低(25.00%);HBsAg的浓度值与pre-S1阳性率呈正相关;HBeAg与pre-S1结果具有显著差异(χ2=54.55,P<0.01)。结论利用化学发光技术检测乙肝患者pre-S1蛋白能够在感染早期反映出体内病毒的复制情况,且灵敏度和准确性高。

乙肝病毒表面抗原基因在花生中的遗传转化及免疫原性检测

首次用花生半胚作为外植体,与农杆菌EHA105(含质粒p1301HBs)共培养5d,再生培养基中通过加入潮霉素进行抗性筛选,得到抗潮霉素的芽,经芽的伸长、诱导生根获得转化植株。经PCR、PCR-Southern杂交、Southern点杂交等分子检测,证实目的基因已整合到花生基因组中,ELISA检测证实了在花生中表达的HBsAg具有较好的活性。经初步定量,花生小芽的蛋白初提液中可溶性蛋白含量1.044g/L,HBsAg小蛋白的含量约占总可溶性蛋白的0.032%,每克转化植株小芽鲜重含HBsAg小蛋白约2.4×10-7g。转基因花生植株初提重组蛋白经HPLC纯化、浓缩后,注射初免一次的小鼠,有明显的特异性抗体产生。口服饲喂已免疫但抗体下降至0.025(HBsAbELISAD值)Balb/c小鼠,发现有较强的抗体回升,达3.54,表明转基因花生疫苗可以加强口服免疫。

乙肝表面抗原双试剂阳性HBV-DNA核酸检测阴性结果分析

目的通过分析献血者乙肝表面抗原检测双试剂阳性而核酸检测阴性的结果,探讨1遍血清学联合1遍核酸检测的新检测策略对血液安全的意义。方法对2017—2019年献血者标本中乙肝表面抗原血清学双试剂阳性的标本,无论核酸检测系统采取的是混样模式还是单检模式都同时进行核酸检测。阴性的标本使用原检测系统再进行重复检测。结果 2017—2019年献血者检测标本共计25.8万人份,乙肝表面抗原双试剂阳性标本共计195份,核酸HBV DNA阳性标本172份,阴性标本23份,其中核酸单检系统阴性标本8份,核酸混检系统阴性标本15份。单检系统的8份标本再次进行检测,至少有1次为阳性的标本有5份,混检系统的15份标本再次进行检测,至少有1次为阳性的标本有9份。结论无论单检核酸检测系统还是混检核酸检测系统都会出现乙肝表面抗原双试剂阳性而核酸检测阴性的结果,其中混检系统较单检系统的标本数量要多近1倍。重复检测结果为阳性标本的比例约为60%,为低浓度标本的机会性检出。因此采取1遍血清学联合1遍核酸进行乙肝检测的新检测策略,无论是核酸检测系统还是血清学检测系统都应进行系统的评估,比较与实验室原有检测策略的差异,避免漏检的发生,减低输血传播疾病的风险。

乙肝两对半定量、乙肝DNA定量与乙肝前S_1抗原94例的联合检测及意义

目的 探讨临床检测乙肝两对半定量、乙肝DNA定量与乙肝前S1抗原对乙肝患者诊断和预后的意义。方法 分别使用ELISA法、荧光定量PCR(FQ PCR)和微粒子酶免疫分析技术(MEIA) ,同时对94例乙肝患者的乙肝病毒前S1抗原(Pre S1)、乙肝病毒DNA(HBV DNA)、乙肝两对半进行定性、定量的检测。结果 94例HBsAg阳性患者中PreS1阳性5 9例,HBeAg阳性46例,HBV DNA阳性63例,PreS1阳性率与HBV DNA相似且略高于HBeAg。结论 选择乙肝两对半标志物、HBV DNA定量及PreS1检测,更能反映临床HBV感染、复制、传染性及抗病毒治疗效果的状况。

三种方法检测乙肝表面抗原的结果分析

目的探讨三种方法对乙肝表面抗原的定性和定量检测的结果并进行对比分析。方法采用临床上常用的胶体金方法、酶联免疫吸附实验法(ELISA法)、化学发光微粒子免疫分析法(CMIA法)对400例标本进行乙肝表面抗原检测,分别计算ELISA法、CMIA法、胶体金法检测结果的阳性率、灵敏度和特异度。结果 CMIA方法检测乙肝表面抗原的阳性率、灵敏度和特异度高于ELISA法和胶体金法。结论 CMIA法检测乙肝病毒标志物特异性强、灵敏度高,具有很高的临床应用价值。