肿瘤患者围手术期自异体输血对输血相关免疫调节效应影响的比较

目的:探讨肿瘤患者围手术期自体输血与异体输血对输血相关免疫调节效应的影响。方法:以孝感市中心医院2017年12月至2019年4月实施肿瘤根治术的患者60例为研究对象,随机分为观察组(围手术期采取自体输血)和对照组(围手术期采取异体输血),各30例。所有患者在术前、术后第1天、第7天采取外周静脉血标本,分别用流式细胞仪定量分析T淋巴细胞亚群百分比的变化;用酶联免疫吸附测定(ELISA)定量分析IL-2、IL-10和IFN-γ水平的变化。结果:(1)术后第1天,2组患者CD3^+、CD4^+、CD8^+细胞在T淋巴细胞中百分比与术前相比均明显减少(P<0.05);术后第7天,对照组的CD3^+、CD4^+、CD8^+细胞(外周血中极少存在双阳性T细胞)百分比仍显著少于术前(P<0.05),而观察组与术前比较,差异无统计学意义(P>0.05);且观察组CD3^+、CD4^+、CD8^+细胞百分比显著高于对照组(P<0.05)。(2)术后第1天,观察组IL-2、IFN-γ水平较术前显著性升高(P<0.05),IL-10水平与术前比较差异无统计学意义(P>0.05);对照组IL-2、IFN-γ水平与术前比较,差异无统计学意义(P>0.05),IL-10水平明显高于术前(P<0.05);术后第7天,观察组IL-2、IFN-γ、IL-10水平与术前比较,差异无统计学意义(P>0.05),而对照组IL-2、IFN-γ水平较术前显著减少(P<0.05),IL-10水平明显高于术前(P<0.05),观察组患者的IL-2、IFN-γ水平显著高于对照组患者(P<0.05),2组IL-10水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:肿瘤患者围手术期自体输血与异体输血均可显著影响输血相关免疫调节,自体输血对恶性肿瘤患者免疫功能影响较小,异体输血明显抑制患者免疫功能。

输血相关免疫调节机制研究进展

同种异体输血(allogenic blood transfusion,ABT)发挥临床治疗作用的同时,也会发生很多免疫相关的副作用,如术后感染率上升、恶性肿瘤切除复发率增加等。血制品中的同种异基因单核细胞表面的CD200分子、白细胞及储存过程中白细胞脱落的sHLA和sFasL、血清中的生物活性分子等与输血相关免疫调节(transfusion-relatedimmunomodulation,TRIM)的发生均有一定联系。临床对照试验,实验室研究及动物模型显示:克隆删除、诱导无能、免疫抑制是TRIM发生的效应机制。本文就TRIM的发生机制、诱导TRIM发生的介质的研究进展进行了综述。

输血相关性急性肺损伤患者免疫调节性T淋巴细胞表达与预后的关系

目的探讨输血相关性急性肺损伤(transfusion-related acute lung injury,TRALI)患者外周血免疫调节性T细胞(Treg)免疫活性的变化规律,并探讨其在患者不良预后中的临床意义。方法 TRALI患者(TRALI组)26例,根据临床多器官功能障碍综合征(MODS)的诊断标准,分为并发MODS组(n=8)和非MODS组(n=18),根据患者的预后情况,将其分为死亡组(n=5)和生存组(n=21);输血未发生TRALI组(非TRALI)30例,正常对照组为同期健康体检者30例。分别采集各组的外周静脉血,采用免疫磁性分离系统对外周血CD4+CD25+Treg进行分离纯化;采用流式细胞术检测CD4+CD25+Treg表面分子T淋巴细胞毒性相关抗原-4(CTLA-4)的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测Treg孵育液上清中IL-10的水平。结果 TRALI组患者CD4+CD25+Treg表面分子CTLA-4表达率[(37.65±7.33)%]及分泌IL-10水平[(45.34±4.19)pg/mL]与正常对照组[(22.12±7.23)%和(12.12±3.23)pg/mL]比较,均明显升高(P<0.05,P<0.01);MODS组患者CTLA-4表达率[(42.23±7.43)%]及分泌IL-10水平[(61.35±10.09)pg/mL]显著高于非MODS组[(30.26±5.65)%和(37.87±6.55)pg/mL](P<0.05,P<0.01);死亡组CTLA-4表达率(44.45±12.34)%及分泌IL-10水平(65.76±22.32)pg/mL显著高于生存组[(31.43±10.12)%和(43.46±10.67)pg/mL](P<0.05,P<0.01)。结论 TRALI患者外周血CD4+CD25+Treg表面分子表达及细胞因子分泌在是否并发MODS及是否生存等不同组间存在显著差异,提示TRALI可促进CD4+CD25+Treg表面分子表达,并刺激其分泌大量抑制性细胞因子发挥自身免疫作用,从而导致机体免疫功能障碍甚至免疫紊乱的发生与发展。

贮存式自体输血采血策略与免疫调节研究进展

贮存式自体输血（preoperative autologous blood donation,PABD）是指在手术数周乃至数月前预先采集患者自身血液（全血或分离成分）保存,在其需要输血治疗时进行回输保存的血液。PABD包括全血PABD和血液成分PABD,血液成分PABD又包括红细胞PABD、血浆PABD、血小板PABD和外周血造血干细胞PABD。在欧美等一些发达国家,随着人口逐渐进入老龄化,志愿献血者数量不断下降,血液来源也逐渐减少,同时伴随着手术和非手术患者的数量增多和用血量的上升，

血小板输注相关的免疫调节

血小板制剂已被广泛应用于预防和治疗因血小板减少和/或血小板功能缺陷引起的出血。尤其是随着恶性肿瘤以及白血病大剂量化疗的应用,造血干细胞移植广泛开展,血小板输注更成为重要的辅助疗法。

异源反应性NK细胞对输血相关免疫抑制作用的初步研究

目的探讨供血者KIR与受血者HLA-Ⅰ类分子不同程度匹配情况下的异源反应性NK细胞对输血相关免疫抑制的作用。方法模拟临床输血状态,采用miniMACS免疫磁珠分选方法,从外周血单个核细胞(PBMC)中得到纯化的NK细胞,体外培养并采用PCR-SSP法进行5种KIR抑制基因的分型。将已经KIR分型的NK细胞(4ml共1×106个细胞)与已知HLA分型的血液病患者骨髓移植供者的全血(20 ml)按比例(相当于60 kg体重个体输入800 ml全血)混合,不同时间点取样检测免疫指标的变化。根据KIR和HLA的不相合程度分为20组,比较不同相合程度对血液免疫功能的影响。结果从0—24 h,IL-2、IL-4、PGE2、TNF-α、TNF-β、IFN-γ、GM-CSF的浓度分别由(1.97±0.12)、(0.22±0.03)、(0.22±0.06)、(0.19±0.02)、(0.13±0.02)、(0.12±0.02)、(0.19±0.02)μg/L增加到(2.94±0.06)、(0.55±0.09)、(0.53±0.05)、(3.54±0.07)、(3.08±0.14)、(2.65±0.11)、(2.37±0.16)μg/L(P<0.05),IgA、IgM、IgG的浓度都随时间的增加而分别由(1.20±0.20)、(1.28±0.07)、(9.89±0.37)g/L减少到(0.60±0.07)、(0.72±0.06)、(6.66±0.91)g/L(P<0.05);KIR与HLA相合程度的不同与IL-2、IL-4、PGE2、IgA、IgM、IgG浓度无关(P>0.05);随KIR与HLA不相合程度的加大,TNF-α、TNF-β、IFN-γ、GM-CSF的浓度逐渐增加,分别从(0.42±0.04)、(0.37±0.04)、(0.46±0.08)、(0.43±0.02)μg/L增加到(3.54±0.07)、(3.08±0.14)、(2.65±0.11)和(2.37±0.16)μg/L(P<0.05)。结论 KIR与HLA不相合程度越高越能激发异源反应性NK细胞的免疫功能,可更好地逆转输血相关免疫抑制作用。

低剂量白细胞介素-2在免疫相关性皮肤病中的研究进展

免疫相关性皮肤病是一类因自身免疫耐受破坏导致的皮肤病,包括红斑狼疮、皮肌炎等。调节性T细胞与效应性T细胞之间失衡在免疫相关性皮肤病发病机制中起重要作用。低剂量白细胞介素-2可优先激活调节性T细胞,逆转调节性T细胞与效应性T细胞失衡,恢复免疫耐受,在免疫相关性皮肤病的治疗领域中逐渐受到关注。本文综述了低剂量白细胞介素-2的免疫调控机制及临床研究进展,为免疫相关性皮肤病的治疗提供新的思路。

骨髓增生异常综合征红细胞输注依赖患者外周血Tfh细胞比例变化与红细胞输注指标的相关性

目的 探讨骨髓增生异常综合征(MDS)红细胞输注依赖患者外周血滤泡辅助性T(Tfh)细胞比例变化与红细胞输注指标的相关性。方法 选择MDS患者23例(MDS组)和同期健康体检者23例(对照组)。采集受试者外周血,采用流式细胞术检测Tfh细胞及其亚型ICOS^(+)Tfh、PD-1^(+)Tfh细胞比例,计算ICOS^(+)/PD-1^(+)Tfh细胞比值。通过输血管理系统提取MDS患者的输血信息,计算其红细胞输注总量、红细胞输注密度,根据过去4个月内平均每8周输注红细胞总量判断患者是否存在红细胞输注依赖,比较红细胞输注依赖与非红细胞输注依赖患者外周血Tfh、ICOS^(+)Tfh、PD-1^(+)Tfh细胞比例及ICOS^(+)/PD-1^(+)Tfh。采用Pearson相关分析法分析MDS患者外周血Tfh、ICOS^(+)Tfh、PD-1^(+)Tfh细胞比例及ICOS^(+)/PD-1^(+)Tfh与红细胞输注总量、红细胞输注密度的相关性。结果 MDS组外周血Tfh、ICOS^(+)Tfh、PD-1^(+)Tfh细胞比例高于对照组(P<0.05或<0.01),两组ICOS^(+)/PD-1^(+)Tfh比较差异无统计学意义(P>0.05)。MDS患者中,红细胞输注依赖17例、非红细胞输注依赖6例,红细胞输注依赖患者外周血PD-1^(+)Tfh细胞比例高于非红细胞输注依赖患者(P<0.05),且红细胞输注依赖患者Tfh、ICOS^(+)Tfh、PD-1^(+)Tfh细胞比例均较对照组升高(P均<0.01),ICOS^(+)/PD-1^(+)Tfh与对照组比较无统计学差异(P>0.05);非红细胞输注依赖患者上述指标与对照组比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。与非红细胞输注依赖患者比较,红细胞输注依赖患者红细胞输注总量、红细胞输注密度均升高(P均<0.01)。MDS患者外周血ICOS^(+)/PD-1^(+)Tfh与红细胞输注密度呈正相关(r=0.467,P<0.05),与红细胞输注总量无明显相关性(r=-0.398,P>0.05)。结论 MDS红细胞输注依赖患者外周血PD-1^(+)Tfh细胞比例升高,ICOS^(+)/PD-1^(+)Tfh与输血强度有关,Tfh细胞可能参与了MDS患者输血相关的免疫紊乱。

多供者同种异体输血对手术患者细胞免疫功能的影响

目的研究多供者同种异体输血(multiple allogeneic blood transfusion,MABT)对手术患者细胞免疫功能的影响。方法回顾性对比分析手术前后单供者同种异体输血(single allogeneic blood transfusion,SABT)患者(SABT组)与MABT患者(MABTⅠ组、MABTⅡ组)及对照组(未输血组)血液T淋巴细胞亚群及NK细胞的变化。结果术后2 d:各组患者CD3+、CD4+、NK细胞数均下降(P<0.05)而CD8+上升(P<0.05),但MABTⅠ组、MABTⅡ组变化更明显(P<0.01)且与SABT组、未输血组比较有统计学差异(P<0.01);术后7 d:MABTⅠ组、MABTⅡ组CD3+、CD4+、NK细胞数低于术前(P<0.05)而CD8+上升(P<0.05);术后2 d、7 d:MABTⅠ组、MABTⅡ组CD4+/CD8+均低于术前(P<0.05),MABTⅡ组CD3+、CD4+又低于MABTⅠ组(P<0.05),CD8+高于MABTⅠ组(P<0.05)。结论 MABT可通过加强细胞免疫抑制而增强输血相关免疫调节作用。

免疫调节剂合成胸腺五肽

综述免疫调节剂合成胸腺五肽在治疗免疫相关性疾病上的应用、剂量效应及给药途径。

白介素-17与类风湿关节炎的相关性研究

类风湿关节炎（RA）是以关节滑膜炎症为主要表现的自身免疫性疾病,T细胞在RA的发病和进展中起关键性作用,以CD4＋效应性T细胞尤为重要。近年来在自身免疫病和过敏原特异性反应研究中发现机体存在一种新的CD4＋T细胞亚群,其具有白介素-23（IL-23）依赖性产生IL-17,发挥重要的免疫调节作用,而IL-17是其主要效应分子。

维生素D与慢性肝病相关性的研究进展

维生素D是一种脂溶性维生素．作为固醇类衍生物．一定程度上起到类固醇激素的作用，包括调节钙磷代谢、维持骨稳态、免疫调节、抗炎症、抗纤维化、抗肿瘤等。肝脏在维生素D的合成、代谢以及发挥生物学效应中起重要作用。机体维生素D的状况和它的多效性使之与各种慢性肝病（Chronicliverdis—ease,v,，CLDs）的发病机制、严重程度和治疗效果相关。

TNF-α受体后效应在脑囊虫病中的作用

目的探讨脑囊虫病患者各期脑脊液中TNFα、NO、MDA和SOD的变化规律及它们在脑囊虫病中的作用机制。方法49例明确诊断并依据MRI分期,单发脑实质内囊虫的脑囊虫病患者和20名对照者,分别用ELISA法检测脑脊液中TNFα水平,用分光光度计法检测脑脊液中NO、MDA和SOD水平。结果发现于Ⅰ期TNFα、MDA水平先于NO升高而NO水平却有所降低,于Ⅱ期、Ⅲ期(整个退变死亡期)除SOD外各因子水平均升高,Ⅳ期除MDA仍显著增高外余恢复正常。TNFα与NO、MDA存在高度正相关关系。TNFα、NO和MDA均与SOD有负相关关系。SOD在Ⅳ期接近正常,其余各期含量持续显著降低。结论在单发脑实质内囊虫病中TNFα受体后效应(氮自由基、氧自由基)可能与杀伤脑囊尾蚴有密切的关系,其免疫调节与杀虫机制存在着动态平衡,参与感染控制。

围术期异体红细胞输注与术后感染相关性分析的研究进展

异体红细胞输注在纠正贫血、改善组织氧合的同时,也可能导致输血相关免疫调节,因此可能与术后感染的风险增加相关,但既往研究对此尚有争议。基础研究发现,输血相关免疫调节与输注量相关,陈旧红细胞的免疫抑制作用更为显著,而去白细胞处理有助于减轻输血对免疫系统的负面影响;但临床研究针对上述问题并未得出一致性结论。近年来,随着多中心、大样本真实世界研究不断涌现,大部分针对心脏、骨、肝脏、胰腺、胃肠道、膀胱手术的研究支持输血与术后感染的相关性,但仍存在一定局限性。未来研究可更多着眼于多种术式,延长输血与手术时间间隔的时间范围,将各种感染类型纳入结局,在保证充足样本量的情况下,尽可能准确地定义感染诊断。此方面高质量临床证据,对改善临床血液成分合理使用、改善患者术后结局具有重要意义。

从CSF1R/STING/TBK1信号调控肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)表型极化探究加味白头翁汤治疗结直肠癌的效应机制

目的:观察加味白头翁汤对结直肠癌MC38细胞荷瘤小鼠瘤体生长及肿瘤组织中肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)浸润数量的影响,探析加味白头翁汤是否介导TAMs表型重塑以发挥抗肿瘤免疫调节效应。方法:首先构建鼠源MC38细胞株C57BL/6小鼠皮下移植瘤模型,设立模型组、阳性药奥沙利铂组(3 mg·kg^(-1))及加味白头翁汤高、低剂量组23.43、46.86 g·kg^(-1),每组各10只,另设立10只健康小鼠为空白组,观察各组小鼠体质量、瘤体体积及生存状态变化,摘取肿瘤组织、脾脏及外周血,计算瘤体体积变化、抑瘤率及脾脏质量;苏木素-伊红(HE)染色观察肿瘤组织病理形态学变化,免疫荧光实验检测荷瘤小鼠肿瘤组织中CD4、CD8、CD206表达水平,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测荷瘤小鼠外周血清中细胞因子转化生长因子(TGF)-β、白细胞介素(IL)-6、趋化因子配体2(CCL2)的分泌水平;其次,使用MC38细胞株与鼠源单核巨噬细胞系RAW264.7细胞在体外构建IL-4诱导的共培养模型,细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测加味白头翁汤含药血清的细胞增殖抑制作用,Transwell实验检测IL-4诱导的M2型巨噬细胞对MC38细胞侵袭能力的影响,流式细胞术检测加味白头翁汤含药血清对IL-4诱导的M2型巨噬细胞干预后膜上CD86的表达变化,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测加味白头翁汤含药血清对共培养后M1型巨噬细胞相关极化因子CD86、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、IL-12及M2型巨噬细胞相关极化因子CD206、CD163、IL-10 mRNA表达水平的影响;最后,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测荷瘤小鼠肿瘤组织中集落刺激因子1受体(CSF1R)、干扰素基因刺激蛋白(STING)、TANK结合激酶1(TBK1)蛋白表达水平。结果:体内实验结果表明,与模型组比较,加味白头翁汤能明显抑制荷瘤小鼠瘤体的生长。免疫荧光实验结果表明加味白头翁汤能增加荷瘤小鼠肿瘤组织中CD8+T细胞浸润数量,降低CD206+TAMs浸润数量,且能下调荷瘤小鼠外周血清中细胞因子IL-6、TGF-β、CCL2的分泌水平;在体外实验结果中,加味白头翁汤含药血清无明显的细胞增殖抑制作用,但与RAW264.7细胞共孵育后的细胞上清液却能抑制MC38细胞的增殖活性,且IL-4诱导的M2型巨噬细胞能增强MC38细胞的侵袭能力,这一效应却能被加味白头翁汤含药血清呈浓度依赖性抑制。同时,Real-time PCR检测结果发现加味白头翁汤含药血清能上调M1型巨噬细胞相关极化因子CD86、iNOS、IL-12 mRNA表达水平,下调M2型巨噬细胞相关极化因子CD206、CD163、IL-10 mRNA表达水平,流式细胞术结果也证实了加味白头翁汤含药血清能增加CD86+M1型巨噬细胞复极化数量,这表明加味白头翁汤能诱导M2型巨噬细胞向M1型巨噬细胞复极化以发挥抗肿瘤生长作用。最后,Western blot检测结果表明加味白头翁汤能下调荷瘤小鼠肿瘤组织中CSF1R蛋白表达,上调STING、TBK1蛋白表达。结论:加味白头翁汤能下调CD206+TAMs浸润数量,增加CD8+T细胞浸润,从而发挥对结直肠癌生长抑制的抗肿瘤免疫调节效应,这可能与其调节CSF1R信号,进而活化STING/TBK1信号通路,诱导TAMs表型重塑有关。

输注储存血液对黑色素瘤荷瘤小鼠辅助性T细胞1和2平衡的影响

目的探究输血对黑色素瘤荷瘤小鼠TH1/TH2平衡及其细胞因子表达的影响。方法构建黑色素瘤小鼠肿瘤模型,设新鲜血组与储存血组(30只/组):经小鼠尾静脉分别输注新鲜全血(0 d)或储存血(15 d)0.2 mL,分别在输血后15、30 min与1、4、8 h收集小鼠全血,用微量标本多指标流式蛋白定量技术(CBA)检测各时间点血浆中细胞因子TNF-α、INF-γ、IL-2、IL-4、IL-10的表达水平;另设未输血组(6只/组)为对照组。结果 1)新鲜血组与对照组比较,输血后4 hTNF-α分泌水平(pg/mL)分别为9.14±0.83 vs 1.72±0.90(P<0.01);储存血组与对照组比较,输血后4 h IL-4和IL-10表达水平(pg/mL)分别为1.55±0.17 vs 0.29±0.08和5.4±1.39 vs 0.2±0.08(P<0.01)。2)储存血组与新鲜血组比较,输血后1 hTNF-α和INF-γ表达水平(pg/mL)分别为3.67±1.76 vs 7.64±1.04(P<0.05)和0.27±0.16 vs 0.49±0.18(P<0.05);输血后4 hIL-2的表达水平(pg/mL)分别为0.29±0.08 vs 0.89±0.21(P<0.01);输血后4 h IL-10的表达水平(pg/mL)分别为5.40±1.39 vs 2.38±0.54(P<0.01)。结论输血可促进小鼠体内TH1和TH2细胞因子的表达,而相对于输注新鲜血,输注储存血组小鼠体内TH1细胞因子表达有所降低,而TH2细胞因子表达得到进一步促进,致TH1/TH2失衡,平衡向TH2方向偏移。

危重患者医院获得性肺炎与输血的关系及机制探讨

ICU内患者普遍存在贫血情况，宽松、不合理的输血治疗不但不能纠正患者缺氧状态，反而增加院内肺部感染的风险，恶化病情，加重医疗负担。这个过程主要是通过输血相关性免疫调节介导。在临床实践中，对危重患者进行个体化治疗，避免过度、过量输血，以预防感染并发症的发生。