柯诺辛碱对创伤性脑损伤大鼠线粒体自噬的影响

目的:探究柯诺辛碱(Cor)对创伤性脑损伤(TBI)大鼠的治疗作用及其对线粒体自噬的影响。方法:将80只大鼠随机分为假手术组(n=10)、造模组(n=70)。假手术组大鼠仅切开皮肤,不进行造模;造模组大鼠建立TBI大鼠模型。将58只造模成功大鼠随机分为模型组(n=12)、低剂量组(n=12)、中剂量组(n=12)、高剂量组(n=11)、抑制剂组(n=11)。低、中、高剂量组大鼠分别予低[5 mg/(kg·d)]、中[10 mg/(kg·d)]、高[20 mg/(kg·d)]剂量柯诺辛碱治疗,抑制剂组大鼠予柯诺辛碱[20 mg/(kg·d)]和自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)[15 mg/(kg·d)]治疗。给药14 d后,采用改良神经功能缺损评分法进行神经功能评分,采用Morris水迷宫实验评价认知功能,采用蔗糖偏好实验和旷场实验评价行为学。通过苏木素-伊红(HE)染色和TUNEL染色评价脑组织损伤和神经元凋亡。检测脑组织含水量、脑组织氧化应激指标[超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)]水平。采用Western blotting检测脑组织Bax、Bcl-2、cleaved Caspase-3、LC3B、p62和Beclin-1蛋白表达。结果:低、中、高剂量组大鼠的神经功能评分、逃避潜伏期、脑组织含水量、TUNEL阳性率、MDA水平,以及Bax、cleaved Caspase-3、p62蛋白表达水平均低于模型组(P<0.05);低、中、高剂量组大鼠穿越平台次数、蔗糖偏好率、水平活动分数、垂直活动分数,SOD、CAT和GSH-Px水平,以及Bcl-2、LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ、Beclin-1蛋白表达水平均高于模型组(P<0.05)。抑制剂组大鼠的神经功能评分、逃避潜伏期、脑组织含水量、TUNEL阳性率、MDA水平,以及Bax、cleaved Caspase-3、p62蛋白表达水平均高于高剂量组(P<0.05);抑制剂组大鼠穿越平台次数、蔗糖偏好率、水平活动分数、垂直活动分数,SOD、CAT和GSH-Px水平,以及Bcl-2、LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ、Beclin-1蛋白表达水平均低于高剂量组(P<0.05)。结论:柯诺辛碱可有效减轻TBI后的继发性损伤,抑制神经元凋亡和氧化应激,其机制可能与激活线粒体自噬有关。

大叶钩藤中柯诺辛碱对照品的制备及鉴定

目的:建立从大叶钩藤(Uncaria macrophylla Wall.)中制备柯诺辛碱对照品的方法。方法 :采用萃取、硅胶柱层析和重结晶方法对氨水碱后的大叶钩藤二氯甲烷提取物进行分离纯化,通过MS、IR、1H-NMR和13C-NMR进行结构鉴定,通过TLC法和HPLC法对对照品进行纯度检测。结果 :从大叶钩藤中分离纯化出柯诺辛碱对照品,质量分数>98.0%。结论:该方法制备的柯诺辛碱对照品符合中药化学对照品的相关要求,可作为钩藤药材及其制剂质量控制用的化学对照品。

大叶钩藤中柯诺辛碱的含量测定

目的高效液相色谱法测定大叶钩藤中柯诺辛碱的含量,为建立大叶钩藤的质量标准提供参考。方法采用Dis-covery C18柱(25 cm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇:0.02%三乙胺水溶液=70∶30(V/V),流速为1.0 ml/min,检测波长242 nm。结果测得大叶钩藤中柯诺辛碱的含量平均值为0.2240%,柯诺辛碱的平均回收率为99.7%,RSD=1.84%(n=3)。结论大叶钩藤中柯诺辛碱的含量为0.224 0%;该方法简便可行,重复性好,可为大叶钩藤药材的质量控制提供参考。

大叶钩藤中柯诺辛碱B及柯诺辛碱的含量测定及分析

为建立大叶钩藤Uncaria macrophylla Wall.中柯诺辛碱B(Corynoxine B)及柯诺辛碱(Corynoxine)的含量测定方法,采用高效液相色谱法测定在不同采收月份大叶钩藤及不同药用部位中柯诺辛碱B及柯诺辛碱的含量。测定条件:Inertsil ODS-3 C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-0.02%三乙胺(68∶32),流速1 mL/min,检测波长246 nm,柱温25℃。实验结果表明:柯诺辛碱B进样量为0.130-1.950μg,柯诺辛碱进样量为0.296-4.440μg,与峰面积呈良好的线性关系,相关系数r均为1.0000(n=5);柯诺辛碱B和柯诺辛碱的平均回收率(n=6)分别为99.47%和100.06%,RSD分别为1.56%和0.98%。本法简便易行,重现性好,可为钩藤药材的质量控制提供科学依据。

大孔聚合物整体柱吸管的制备及其从人血清和尿液中固相萃取柯诺辛碱的应用

以甲基丙烯酸和甲基丙烯酸丁酯为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,超高分子量的多分散二醋酸纤维素作为致孔剂,在1000μL移液器吸管中制备聚合物整体柱,并将其应用于从人血清和尿液中萃取柯诺辛碱。整体柱截面的扫描电子显微图显示,柱体内存在大的微米级通孔,从图上测量最大的接近10μm。大的通孔确保了整体柱具有良好流通性,该整体柱吸管可以安装于移液器上,通过手动操作,快速完成对生理体液样品的固相萃取操作。将整体柱吸管与高效液相色谱联合,成功应用于检测人血清和尿液中的柯诺辛碱。结果表明血清样品在5.44～152μg/m L范围内线性关系良好,R2为0.9993,血清质控样品检测的RSD%在2.4%～10%之间,相对回收率为92.5%～105%,绝对回收率为81.5%～91.1%;尿液样品在5.21～130.9μg/m L范围内线性关系良好,R2为0.9991,质控样品检测RSD%为1.3%～6.3%,相对回收率为86.0%～110%,绝对回收率为90.3～101%。本方法可以简单、快速、准确的检测人血清和尿液中的柯诺辛碱含量。

雷公藤碱丁和碱辛的结构

前已报道雷公藤(Tripterygium wilfordii Hook.f.)中雷公藤碱(wilfordine,1)、次碱(wilforine,2)、碱乙(wilforgine,3)、碱戊、碱己和碱庚的分离和结构。本文报道雷公藤碱丁(wilfortrine,4)和碱辛(neowilforine,5)的结构测定。5是一新生物碱。 4和5的红外光谱均显示1745和1240cm^(-1)内酯吸收。4的质谱与1类同。

四川轮环藤根中两种新双苄基异喹啉生物碱的分离鉴定

从中国特有植物四川轮环藤(Cyclea sutchuenensis Gagnep.)根中除分得已知的轮环藤碱(Ⅰ)和异粒枝碱(Ⅱ)外,还分离得到两种新双苄基异喹啉生物碱,分别命名为异轮环藤碱(Ⅲ)和四川轮环藤辛碱(Ⅳ)。经物理常数和波谱数据分析鉴定,证明Ⅲ为轮环藤碱的差向异构体,Ⅳ系一种新型的8-12′,12-7′首尾双氧桥双苄基异喹啉生物碱。

大叶钩藤生物碱类化学成分研究

目的:研究大叶钩藤生物碱部分的化学成分。方法:用氯仿提取及柱色谱等方法进行分离,波谱法鉴定结构。结果:从大叶钩藤生物碱部分分离并鉴定了6个生物碱类化合物,其结构分别为柯诺辛碱(1)、柯诺辛碱B(2)、异去氢钩藤碱(3)、异钩藤碱(4)、去氢钩藤碱(5)、钩藤碱(6)。结论:柯诺辛碱为大叶钩藤生物碱部分的主要化学成分;异去氢钩藤碱、去氢钩藤碱为首次从该植物中分离得到。

大叶钩藤叶子化学成分研究

目的:对茜草科钩藤属植物大叶钩藤(Uncaria macrophylla Wall.)的叶子进行化学成分研究。方法:用甲醇提取及柱色谱等方法进行分离,薄层色谱跟踪检测,波谱法鉴定结构。结果:从该植物叶子中共分离鉴定出6个化合物,分别是柯诺辛碱(1)、、异钩藤碱(2)、钩藤碱(3)、熊果酸(4)、表儿茶素(5)、山奈酚(6)。结论:该实验首次报道了大叶钩藤叶子的非挥发性化学成分。

海南粗榧总碱中化学成分研究

目的研究海南粗榧Cephalotaxus hainanensis的生物碱类成分。方法采用硅胶、Sephadex LH-20和ODS等多种柱色谱技术进行分离纯化,根据化合物理化性质及波谱数据鉴定化合物结构。结果从海南粗榧总碱中分离得到13个化合物,分别鉴定为三尖杉碱(1)、异三尖杉酮碱(2)、三尖杉酮碱(3)、三尖杉胺G(4)、(2R,3S,4S,5S)-2,3-二羟基三尖杉碱(5)、乙酰三尖杉碱(6)、脱氧三尖杉酯碱(7)、(R)-丽江三尖杉碱(8)、(S)-丽江三尖杉碱(9)、3-表里哈灭里辛碱异构体(10)、1,4-N-二异丙胺蒽醌(11)、苯甲酸(2-乙基)-正己酯(12)和β-谷甾醇(13)。结论化合物3~6和10~13为首次从海南粗榧中分离得到。

钩藤碱及其同分异构体对神经系统作用的研究进展

钩藤是我国常用的中药之一,具有清热平肝,息风定惊之功效。生物碱类物质是钩藤的主要活性物质,现代实验药理学研究表明钩藤及其生物碱类物质对神经系统具有广泛的生物学效应,其中钩藤碱是钩藤中含量最高、研究最多的生物碱。本文就钩藤碱及其同分异构体(异钩藤碱、柯诺辛碱和柯诺辛碱B)对神经系统的作用及机制进行综述,为其应用拓展和深入研究提供参考。

蓬莱葛枝叶的生物碱类成分研究

目的研究蓬莱葛Gardneria multiflora枝叶的化学成分。方法采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20和HPLC等色谱方法进行分离纯化,并根据化合物的理化性质及波谱学数据鉴定其化学结构。结果从蓬莱葛枝叶中分离得到13个生物碱类化合物,分别鉴定为antirhine 4α-oxide (1)、geissoschizol (2)、melosline E (3)、土波台文碱(4)、tubotaiwine N-oxide(5)、pyridinium (6)、melosline B (7)、N-甲基巴婆碱(8)、venoterpine (9)、肉桂酰胺(10)、lyaloside (11)、异长春花苷内酰胺(12)、柯诺辛碱(13)。结论化合物1~13均为首次从该植物中分离得到。