名老中医曹式丽辛通畅络法治疗特发性足细胞病学术经验撷要

特发性足细胞病作为当前肾脏病学研究热点,涵盖多种临床常见慢性肾小球疾病,全球范围内发病呈明显上升趋势,临床治疗难度大,经典治疗方案疗效欠理想。寻找有效的足细胞病治疗方案已成为当前相关领域亟待解决的临床现实问题。中医药针对足细胞病防治,疗效确切,具有良好的应用前景。全国名老中医药专家曹式丽教授,对特发性足细胞病的中医治疗颇有心得,逐步形成"基于辛通畅络法治疗特发性足细胞病"的学术思想。文章就该特色学术思想,予以初步总结与阐释,为序贯开展的相关学术研究提供前期工作基础。

辛通畅络法复方肾苏Ⅱ阻抑局灶节段性肾小球硬化大鼠肾间质纤维化及转化生长因子β1表达的影响

目的观察辛通畅络法复方肾苏Ⅱ对局灶节段性肾小球硬化(FSGS)大鼠肾间质纤维化(RIF)进程及转化生长因子β_1(TGF-β_1)表达的影响。方法 48只健康雄性SD大鼠采用随机数字表法分为对照组12只和造模组36只。造模组大鼠采用阿霉素注射法诱发FSGS型阿霉素肾病模型,再采用随机数字表法均分为模型组、西药组和中药组,西药组0.33mg/100g灌服洛汀新混悬液,中药组3.5g/100g灌服肾苏Ⅱ,模型组及对照组灌服等量生理盐水,共12周。行HE染色、Masson染色观察各组肾小管-间质病理形态改变情况,测定肾小管间质损伤指数和肾小管-间质纤维化指数,并采用免疫组化SP法检测肾小管间质纤维连结蛋白(FN)和TGF-β_1相对表达水平。结果中药组FSGS大鼠肾间质纤维化进程延缓,肾小管-间质损伤指数(1.51±0.80)低于模型组(2.18±0.38)和西药组(1.79±0.24),肾小管-间质纤维化指数(2.39±0.13)低于模型组(3.11±0.25)和西药组(2.80±0.41),肾间质FN相对表达量(14.19±3.06)低于模型组(21.25±3.31)和西药组(18.51±2.29),TGF-β_1相对表达量(2.64±0.21)低于模型组(6.02±0.12)和西药组(3.79±0.46),差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论辛通畅络法复方肾苏Ⅱ可延缓FSGS大鼠肾间质纤维化进程,作用机制可能与抑制TGF-β_1表达有关。

辛通畅络法干预局灶节段性肾小球硬化大鼠细胞外基质积聚的实验研究

目的观察辛通畅络法对局灶节段性肾小球硬化(FSGS)大鼠肾小球细胞外基质(ECM)增殖的影响。方法阿霉素注射法诱发FSGS型阿霉素肾病大鼠模型,以辛通畅络法的载体中药复方肾苏Ⅱ为治疗药物,贝那普利为对照药物进行干预。于治疗第12周末,切取肾脏进行病理学观察及免疫组化检测,观察肾小球硬化、基质积聚程度及其主要成分表达。结果病理学观察及免疫组化检测显示,中、西药组均出现肾小球硬化进展减缓,基质增殖抑制,FN、LN及ColⅣ表达降低,且中药组具干预优势。结论辛通畅络法可通过抑制FSGS大鼠肾小球ECM的过度积聚,延缓其肾小球硬化进展。

曹式丽教授应用辛通畅络法论治慢性肾脏病概述

通过阐释曹式丽教授对慢性肾脏病中医病机与络病理论相关性的认识,提出慢性肾脏病以肾络病变为病机关键,倡导辛通畅络法论治慢性肾脏病的学术观点,阐述辛通畅络法之辛开通络、辛甘通络、辛咸通络、辛香通络、辛温通络、辛润通络等治法内涵及临证经验。

辛通畅络法对局灶节段性肾小球硬化大鼠肾小球毛细血管袢及血管紧张素Ⅱ表达的影响

目的:观察辛通畅络法中药复方肾络宁对局灶节段性肾小球硬化型阿霉素肾病大鼠模型肾小球毛细血管袢及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和血管紧张素Ⅱ受体Ⅰ型mRNA(AT1R mRNA)表达的影响。方法:采用左肾切除加阿霉素注射法诱发SD大鼠FSGS模型,依体质量随机分为3组,模型组、西药组和中药组(每组12只),另设对照组(12只)。西药组(按0.33 mg/100g)灌服贝那普利混悬液,中药组(按3.5 g/100g)灌服肾络宁,模型组及对照组灌服等量生理盐水,于治疗第12周末,检测血浆AngⅡ、肾组织AT1R mRNA的表达,以及肾小球毛细血管袢横截面积(μm^2)、肾小球毛细血管腔开放程度(μm)。结果:西药组、中药组血浆AngⅡ较模型组降低(P<0.05)。西药组、中药组肾组织AT1R mRNA较模型组升高(P<0.01)。中药组、西药组肾小球毛细血管袢横截面积、肾小球毛细血管腔开放程度较模型组增加(P<0.01,P<0.05)。结论:辛通畅络法复方肾络宁对局灶节段性肾小球硬化型阿霉素肾病大鼠具有减轻肾小球毛细血管袢损害的作用,其机制可能与降低AngⅡ表达相关。

辛通畅络法对系膜增生性肾炎模型大鼠IL-1、IL-6和细胞外基质的影响

目的:观察辛通畅络中药复方肾苏Ⅱ对系膜增生性肾炎(MsPGN)模型大鼠肾组织白介素1(IL-1)、白介素6(IL-6)及肾小球细胞外基质(ECM)的影响,探讨中医药防治MsPGN的有效途径。方法:采用抗Thy-1系膜增生性肾炎大鼠模型,以中药复方肾苏Ⅱ为治疗药物,贝那普利为对照药物,于治疗6周末,分别观察各组大鼠肾组织IL-1、IL-6和肾小球纤维连接蛋白(FN)、层粘连蛋白(LN)和Ⅳ型胶原(ColⅣ)表达的变化情况。结果:治疗6周末,中药组在抑制MsPGN大鼠肾组织IL-1、IL-6表达,减少肾小球FN、LN、ColⅣ表达量等方面显示疗效优势,且均明显优于西药组。结论:以辛通畅络立法的中药复方肾苏Ⅱ,具有减轻MsPGN模型大鼠肾小球ECM积聚,改善肾小球硬化的作用。

辛通畅络法对局灶节段性肾小球硬化大鼠内皮素-1及一氧化氮表达的影响

目的:观察辛通畅络法中药复方肾络宁对局灶节段性肾小球硬化(FSGS)型阿霉素肾病大鼠模型内皮素-1、一氧化氮、肾小球毛细血管袢的影响。方法:采用左肾切除加阿霉素注射法诱发SD大鼠FSGS模型,依体重随机分模型组、西药组、中药组,另设空白对照组。西药组灌服贝那普利混悬液,中药组灌服肾络宁,模型组及对照组灌服等量生理盐水,于治疗第12周末,检测血浆ET-1、血清NO,肾小球毛细血管袢横截面积和毛细血管腔开放程度、肾小球系膜基质面积。结果:西药组、中药组血浆ET-1较模型组降低(P<0.05),西药组、中药组血清NO较模型组升高(P<0.05)。中药组、西药组肾小球毛细血管袢横截面积、肾小球毛细血管腔开放程度,均较模型组增加(P<0.01、P<0.05)。中药组、西药组肾小球系膜基质面积及相对面积较模型组减轻(P<0.01)。结论:辛通畅络法复方肾络宁对局灶节段性肾小球硬化型阿霉素肾病大鼠具有降低血浆ET-1表达,增加血清NO表达,减轻肾小球系膜基质增生,改善肾小球毛细血管袢损害。

辛通畅络法对系膜增生性肾炎大鼠IL-10、IL-13和细胞外基质的影响

目的:观察辛通畅络中药复方肾苏II对系膜增生性肾炎(MsPGN)模型大鼠肾组织白介素10(IL-10)、白介素13(IL-13)及肾小球细胞外基质(ECM)的影响,探讨中医药防治MsPGN的有效途径。方法:采用抗Thy-1系膜增生性肾炎大鼠模型,以中药复方肾苏Ⅱ为治疗药物,贝那普利为对照药物,于治疗6周末,分别观察各组大鼠肾组织IL-10、IL-13和肾小球纤维连接蛋白(FN)、层粘连蛋白(LN)和IV型胶原(ColIV)表达的变化情况。结果:治疗6周末,中药组在改善MsPGN大鼠肾组织IL-10、IL-13表达,减少肾小球FN、LN、ColIV表达量等方面显示疗效优势,且与西药组之间具有显著性差异。结论:以辛通畅络立法的中药复方肾苏Ⅱ,能够减轻肾小球ECM积聚,改善肾小球硬化。

辛通畅络中药复方对大鼠血管平滑肌细胞迁移的影响

[目的]观察辛通畅络中药复方对血管平滑肌细胞(VSMCs)迁移的影响。[方法]以含辛通畅络中药处方不同浓度(10%、20%、30%)的大鼠血清培养VSMCs,以正常大鼠空白血清为对照,采用Boyden小室法及划痕实验观察辛通畅络中药血清对VSMCs迁移的影响;采用Western blot检测MMP-2、MMP-9蛋白表达情况。[结果]辛通畅络中药复方含药血清可以抑制VSMCs的迁移及MMP-2、MMP-9蛋白的表达,并且这种抑制效应呈浓度依赖性。[结论]辛通畅络中药复方具有抑制VSMCs迁移的作用,其作用机制可能与影响MMP-2和MMP-9的表达有关。

辛通畅络法对系膜增生性肾炎大鼠肾脏功能相关指标的影响

目的:观察辛通畅络中药复方对系膜增生性肾炎(MsPGN)大鼠肾脏功能学指标的影响,探讨中医药防治MsPGN的有效途径。方法:采用大鼠胸腺细胞抗体注射法诱发大鼠MsPGN动物模型,以中药复方肾苏Ⅱ为治疗药物,贝那普利为对照药物,于造模后及治疗3、6周末,分别观察各组动物不同时间点尿蛋白定量(TP/24h)、血尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)等肾脏功能相关指标变化情况。结果:治疗3周后,中、西药组上述指标检测结果无显著差异;治疗6周后,中药组在减少MsPGN大鼠尿蛋白排泄量,改善血清TP、ALB、CHO、TG水平,降低血清BUN、SCr等方面,显示疗效优势,且与西药组之间具有显著性差异。结论:以辛通畅络、益气和血立法的中药复方肾苏Ⅱ,具有减轻MsPGN病理损害,保护肾功能的作用。

辛通畅络法对系膜增生性肾炎模型大鼠肾组织白介素表达的调节研究

目的:观察辛通畅络法中药复方肾苏II对系膜增生性肾炎(MsPGN)模型大鼠肾组织白介素1(IL-1)、白介素6(IL-6)、白介素10(IL-10)、白介素13(IL-13)及肾小球细胞外基质(ECM)的影响,探讨中医药调节肾组织白介素表达,防治MsPGN的有效途径。方法:采用抗Thy-1系膜增生性肾炎大鼠模型,以中药复方肾苏Ⅱ为治疗药物,贝那普利为对照药物,于治疗6周末,分别观察各组大鼠肾组织IL-1、IL-6及IL-10、IL-13的表达和肾小球ECM的变化情况。结果:治疗6周末,对MsPGN模型大鼠,中药组在抑制肾组织IL-1、IL-6表达,上调IL-10、IL-13表达,减轻肾小球ECM增殖等方面显示疗效优势,与西药组、模型组之间具有显著性差异。结论:以辛通畅络立法的中药复方肾苏II对MsPGN肾组织中白介素的表达具有调节作用,能够改善肾脏自身促进和抑制系膜细胞增殖的内在平衡,减轻肾小球ECM积聚,阻抑肾小球硬化。

辛通畅络法干预系膜增生性肾炎大鼠肾小球细胞外基质积聚的实验研究

目的:观察辛通畅络法对系膜增生性肾炎(MsPGN)大鼠肾小球ECM增殖的影响。方法:胸腺细胞抗体注射法诱发大鼠MsPGN动物模型,以辛通畅络法的载体中药复方肾苏Ⅱ为治疗药物,贝那普利为对照药物进行干预。于治疗第6周末,进行免疫组化检测,观察肾小球ECM积聚程度及其主要成分表达。结果:治疗第6周末,免疫组化结果显示,中、西药组均可抑制肾小球系膜细胞及基质增殖,降低FN、LN及ColⅣ表达,且中药组干预ECM过度积聚的疗效较西药组具整体优势。结论:辛通畅络法可抑制肾小球ECM过度积聚,延缓肾小球纤维化进展。

辛通畅络中药复方对血管平滑肌细胞凋亡影响的体外研究

目的观察辛通畅络中药复方对慢性肾脏病（CKD）心血管危险因素的改善作用。方法选择sD远交系健康sPF厂vAF级雄性大鼠，体质量250—300g。以辛通畅络中药复方（柴胡12g，黄芩10g，生黄芪30g，当归10g，女贞子15g，泽兰15g，水蛭10g，细辛3g）连续灌胃大鼠10d，然后处死大鼠取动脉血，制备含10％、20％、30％含药血清培养液，体外培养血管平滑肌细胞（VSMC），以正常大鼠血清为空白对照，每组样本数为20。采用原位末端缺刻标记试验（TUNEL）和流式细胞仪分别检测各组大鼠VSMC凋亡阳性率。结果随着含中药血清浓度的增加，VSMC凋亡率逐渐增加。TUNEL法显示：含10％药物血清组VSMC凋亡率明显高于空白对照组[（9．20±0．68）％比（7．32±0．43）％，P〈0．01]，含20％药物血清组VSMC凋亡率明显高于含10％药物血清组[（10．80±0．36）％比（9．20±0．68）％，P〈0．05]，30％药物组VSMC凋亡率高于20％含药血清组，但差异无统计学意义[（11．99±0．83）％比（10．80±0．36）％，P〉0．05]。流式细胞仪检测结果显示，各含药血清组VSMC凋亡率均较空白对照组增加，且以含30％药物血清组较含10％药物血清组和含20％药物血清组增加更显著[（28．31±5．24）％比（8．30±0．66）％、（12．04±1．10）％，P〈0．05]。结论辛通畅络中药复方可以剂量依赖性地改善CKD的心血管功能，其机制可能与诱导VSMC凋亡有关。

辛通畅络法治疗慢性肾脏病述评

毒损肾络贯穿慢性肾脏病全程,辛通畅络法是中医治疗慢性肾脏病的基本法则。辛香通络、活血通络、补虚通络类药物,能散、能行,可畅达三焦,破瘀消癥,搜剔肾络,使周身气机得畅,脏腑气血阴阳得调,逐步改善慢性肾脏病患者的低蛋白血症、高凝高脂状态,减少尿蛋白,缓解乏力、水肿等症状。但目前辛通畅络法治疗慢性肾脏病的临床观察仅涉及肾病主证,未涉及其他兼证;对中医证型的判定,尚无客观标准;尚无慢性肾脏病的大样本临床对照试验研究,动物及细胞实验研究也停留在分子生物学层面,中医药治疗慢性肾脏病的蛋白组学、基因组学、代谢组学的报道较少。今后可通过大样本临床观察,利用蛋白组学、基因组学、代谢组学的方法进行补充验证,明确慢性肾脏病的发病机制,筛查关键病变基因,探寻药物作用的通路及靶点,为中医药治疗慢性肾脏病提供科学依据。

辛通畅络法对系膜增生性肾炎大鼠肾脏病理学相关指标的影响

目的:观察辛通畅络中药复方对系膜增生性肾炎(MsPGN)大鼠肾脏病理学相关指标的影响,探讨中医药防治系膜增生性肾炎的有效途径。方法:采用大鼠胸腺细胞抗体注射法诱发大鼠MsPGN动物模型,以中药复方肾苏Ⅱ为治疗药物,贝那普利为对照药物进行干预,于治疗第6周末采用光学显微镜和电子显微镜,分别观察各组大鼠肾脏病理形态及超微结构改变。结果:光镜与电镜观察结果均显示,与同期模型组比较,肾苏Ⅱ可明显减轻MsPGN大鼠肾小球系膜细胞增殖等病理损害。结论:以辛通畅络立法的中药复方肾苏Ⅱ,具有改善MsPGN大鼠肾脏病理学相关指标的作用。

辛通畅络法对膜性肾病小鼠基质金属蛋白酶-9及肿瘤坏死因子-ɑ 的影响

目的:观察辛通畅络法中药复方肾络宁对膜性肾病(MN)模型小鼠基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法:实验Balb/c小鼠采用阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)诱导膜性肾病模型,分为模型组、肾络宁组和MMP-9基因敲除组,另设空白对照组,其中基因敲除组于造模前行MMP-9基因敲除。实验以以中药复方肾络宁为治疗药物,于实验第0周、第6周末检测各组小鼠尿蛋白,血清MMP-9、TNF-α的变化情况。结果:治疗6周后,模型组和肾络宁组、基因敲除组小鼠均出现不同程度的尿蛋白排泄量增加,其中肾络宁组、基因敲除组较模型组小鼠尿蛋白排泄量减少;MMP-9基因敲除组小鼠MMP-9表达显著降低,肾络宁组和模型组有不同程度升高,其中肾络宁组MMP-9表达较模型组降低;模型组、肾络宁组、基因敲除组TNF-α表达均匀不同程度升高,肾络宁组、基因敲除组低于模型组。结论:辛通畅络法中药复方肾络宁对MN模型小鼠具有减少尿蛋白排泄的作用,其机制可能与调节TNF-α及MMP-9的表达相关。

辛通畅络法对膜性肾病小鼠肾功能指标和基质金属蛋白酶-9的影响

膜性肾病(MN)是临床肾病综合征中常见病理类型,以肾小球基底膜的增厚为典型病理表现。基质金属蛋白酶(MMP)是具有降解细胞外基质作用的酶类,其中MMP-9主要降解Ⅳ型胶原蛋白,而肾小球基底膜中的主要成分是Ⅳ型胶原蛋白。本实验应用MMP-9基因敲除小鼠,建立阳离子化牛血清白蛋白诱导膜性肾病模型,观察辛通畅络中药复方肾络宁的疗效,并探讨其作用机理。

辛通畅络法对系膜增生性肾炎大鼠血清和肾组织IL-1、IL-6的影响

目的:观察辛通畅络中药复方肾络宁对系膜增生性肾炎(MsPGN)模型大鼠血清和肾组织白介素1(IL-1)、白介素6(IL-6)及肾小球细胞外基质(ECM)的影响,探讨中医药防治MsPGN的有效途径。方法:采用抗Thy-1系膜增生性肾炎大鼠模型,以中药复方肾络宁为治疗药物,贝那普利为对照药物,于治疗6周末,分别检测各组大鼠血清、肾组织IL-1和IL-6及肾小球ECM的变化情况。结果:治疗6周末,中药组在抑制MsPGN大鼠血清、肾组织IL-1和IL-6表达,减少肾小球ECM增生等,与西药组具有统计学差异。结论:以辛通畅络立法的中药复方肾络宁,具有调节血清和肾组织IL-1、IL-6的表达,减轻肾小球ECM积聚,改善肾小球硬化的作用。

曹式丽运用辛通畅络法治疗膜性肾病经验

总结曹式丽应用辛通畅络法治疗膜性肾病的经验。认为膜性肾病的病位在肾络,病机关键为肾络郁滞,强调肾络郁滞贯穿膜性肾病全程,从络论治是治疗膜性肾病的重要原则,提出辛通畅络法治疗膜性肾病,临床应用祛风通络法、祛湿通络法、祛瘀通络法辨证论治膜性肾病。

辛通畅络疏利祛浊法治疗大鼠局灶性节段性肾小球硬化的研究

目的观察以辛通畅络、疏利祛浊法中药对大鼠局灶性节段性肾小球硬化的治疗作用及作用机制。方法采用2次阿奇霉素尾静脉注射方法复制局灶性节段性肾小球硬化模型,按体重均衡后随机分为正常组、模型组、治疗组(西药组、中药组),每组15只。各组动物于造模第9周末开始给药,西药组予贝那普利,中药组予辛通畅络疏利袪浊方药,连续8周。于实验的第1、4、8周末测大鼠24 h尿蛋白,血清白蛋白、肌酐、尿素氮含量,并进行光镜、电镜等观察。结果治疗组各项指标较模型组均有显著性差异,病理学观察也显示治疗组肾小球损伤均轻于模型组。结论中药组能够明显保护大鼠的肾功能,明显减轻模型组大鼠细胞外基质沉积,减轻肾小球硬化,延缓慢性肾脏病的进展。