水稀释法与辛酸法提取鸡卵黄抗体的比较

通过选取两种常用的分离蛋黄抗体的方法,比较分离的效果,找到分离效果最佳的方法。结果表明,两种方法提取所得的有效抗体(IgY)含量及得率差异均不显著(P>0.05),均能满足要求,但水稀释法在提取量、抗体损耗率两个主要指标上优于辛酸法。

苦辛酸法治疗胰腺癌肝转移

1 病历摘要 曹某某，男，69岁。1996年1月31日初诊。

辛酸-硫酸铵法纯化细胞培养上清中单克隆抗体的条件优化

常用的单克隆抗体（monoclonal antibody, mAb）纯化方法有辛酸硫酸铵沉淀法、 离子交换色谱法、 免疫亲和色谱法、 蛋白A亲和层析法等, 以此纯化小鼠IgG类或IgM类mAb。其中辛酸硫酸铵沉淀法简单易行, 无需复杂的仪器及设备, 实验中所用试剂均为普通试剂, 容易获得, 比其他纯化方法更值得推广。本文探讨辛酸-硫酸铵法纯化细胞培养上清中IgG类型的mAb优化条件, 目的在于更好的回收细胞培养上清中的mAb, 减少mAb制备过程中的大量抗体丢失, 为mAb的进一步开发利用提供实验条件。

甲钴胺联合硫辛酸、法舒地尔治疗糖尿病周围神经病变的疗效观察

目的:观察甲钴胺联合硫辛酸、法舒地尔治疗糖尿病周围神经病变(DPN)的临床疗效。方法:将108例糖尿病周围神经病变患者随机分为两组。对照组54例单用甲钴胺治疗,观察组54例采用甲钴胺联合硫辛酸、法舒地尔治疗,疗程4周,采用美国Nicolet肌电-诱发电位仪,在患者治疗前、治疗后2周、4周分别进行上肢正中神经、下肢胫神经的F波检测,记载平均F波的波幅,结合测定正中神经,腓肠神经传导速度进行评价,观察两组患者症状改善情况。结果:观察组临床症状、体征、神经电图改善情况均明显优于对照组,观察组和对照组的总有效率分别为85.2%和57.4%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:甲钴胺联合硫辛酸、法舒地尔治疗可有效改善DPN患者的临床症状,疗效显著。

辛酸-硫酸铵法在纯化血清旋毛虫特异性IgG抗体中的应用

目的从旋毛虫感染的大鼠和兔血清中纯化抗旋毛虫IgG抗体。方法分别用辛酸-硫酸铵法(CA-AS)、硫酸铵沉淀法(AS)纯化旋毛虫感染的大鼠和兔血清中抗旋毛虫IgG抗体。结果IgG抗体纯化率CA-AS法为80.05%～83.22%,AS法为67.00%～71.08%;得率CA-AS法为7.85～8.79mg/ml,AS法为12.04～12.12mg/ml;回收率CA-AS法为52.55%～55.03%,AS法为61.36%～64.87%。CA-AS法得率和回收率均低于AS法,但纯化率高于AS法。ELISA法测定CA-AS法和AS法纯化的抗体效价不变。结论CA-AS法是一种简便?快速?有效的纯化血清IgG抗体的方法,可用于大鼠和兔血清抗旋毛虫IgG抗体的纯化。

苦辛酸复法治疗溃疡性结肠炎

时某某，女，45岁，江苏高邮人。2008年1月31日初诊。罹患慢性溃疡性结肠炎十八载，先后8次肠镜检查确诊。经常反复发作，发时便下脓血，夹有黄色黏液及鲜红色血便，粪质稀烂，

用辛酸──硫酸铵法快速提纯鸡IgG

鸡ＩｇＧ目前广泛应用于鸡病诊断、免疫检测、治疗、及抗独特型抗体苗制备等［１］。然而，在提纯鸡ＩｇＧ过程中，不但要保证除去绝大多数杂蛋白和白蛋白，保留大多数免疫球蛋白（Ｉｇ），包括各种ＩｇＧ亚类，而且又要不影响ＩｇＧ生物活性。这就需要一种好的提纯方法，...

两种不同方法纯化抗血清IgG的效果比较

为寻找一种操作简便、效率高、纯度好的纯化抗体的方法，比较了辛酸法和离子交换葡聚糖凝胶法，通过纯化兔抗ＨＣＧ抗血清和羊抗ＨＢＳＡｇ抗血清，结果显示辛酸法纯化血清中ＩｇＧ有以下优点：纯度高，用ＰＡＧＥ方法鉴定可显示两条带。收率高，辛酸法纯化兔抗ＨＣＧＩｇＧ，每毫升抗血清最高可得２５．５６ｍｇＩｇＧ。效率高，辛酸法纯化血清中ＩｇＧ的整个过程可在１ｄ内完成。操作方法简便，不需上柱，不需昂贵仪器和试剂。适于大批量纯化，适于基层实验室推广使用。

一种简单、快速提纯腹水单克隆抗体(IgG)的方法

利用辛酸首先沉淀掉非 IgG 类蛋白,再用硫酸铵沉淀出 IgG.此法提纯的 IgG 纯度与 DEAE-32柱层析、Pro-tein A 亲和层析纯化的结果相似.抗体提纯前、后的效价不变,抗体收获量达90%以上。该法可广泛应用于鸡、猪、绵羊血清 lgG 的纯化,适用于从大批量样品中提纯lgG.

鸭IgG纯化方法比较试验

用辛酸-硫酸铵法提取鸭IgG并与硫酸铵法和DEAE纤维素层析法进行比较,结果表明,辛酸-硫酸铵法与DEAE纤维素层析法提取的IgG纯度较高,且辛酸-硫酸铵法简便、快速、节约试剂,所获IgG活性较DEAE纤维素层析法高,适于从大批量样品中提纯IgG。

鸭IgG提取方法的比较试验

用辛酸 硫酸铵法提取鸭IgG并与传统提取方法硫酸钠、硫酸铵法进行比较。结果表明 ,3种方法回收的IgG依次为 12 .35、8.36和 10 .14mg/mL ,而且辛酸 硫酸铵法回收IgG纯度高 ,可用于免疫标记技术 ,比色谱层析快速、操作简单、价格低廉。用该法以鸭卵黄提取IgG ,回收的IgG为 13 .5 8mg/mL ,氯仿法为 8.5 5mg/mL ,PEG不能回收 ;辛酸 硫酸铵法从鸭卵黄得到的IgG活性最高。

两种方法纯化兔抗绵羊肺炎支原体IgG的比较

目的:比较两种方法纯化兔抗绵羊肺炎支原体IgG的效果。方法:采用饱和硫酸铵和辛酸-硫酸铵两种方法分离纯化兔抗绵羊肺炎支原体抗体,并用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、分光光度计和琼脂扩散(AGP)试验对纯化产物进行相对分子质量、蛋白质含量及免疫活性进行鉴定。结果:纯化后抗体的蛋白含量基本相同;产物纯度和效价以辛酸-硫酸铵法较高。结论:辛酸硫酸铵法是一种简便、快速、高效的抗体纯化方法。

两种纯化兔抗酸性红73免疫球蛋白G方法的比较研究

分别采用饱和硫酸铵法和辛酸—硫酸铵法纯化兔抗酸性红73(acid red 73,AR73)免疫球蛋白G(IgG)。通过二喹啉甲酸(BCA)法、十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)试验、间接ELISA法分别测定IgG的浓度、纯度及效价。结果显示,饱和硫酸铵法所提IgG浓度为36.44mg/mL,最高效价达1.6×105;辛酸—硫酸铵法所提IgG浓度为15.79mg/mL,最高效价达3.2×105。提示,辛酸—硫酸铵法IgG纯度优于饱和硫酸铵法。

MRSA-PBP2a单克隆抗体乳胶凝集检测法的建立

【目的】应用抗PBP2a单克隆抗体,以化学交联法致敏羧化聚苯乙烯乳胶,建立快速检测MRSA-PBP2a的乳胶凝集法。【方法】以辛酸-硫酸铵法纯化PBP2a单克隆抗体,将纯化后单克隆抗体和羧化乳胶经碳化二亚胺(EDC)共价偶联,并对偶联条件(偶联抗体浓度、乳胶浓度、偶联时间和偶联缓冲液)进行探索和优化,建立检测PBP2a的乳胶凝集法。【结果】140mg/L的抗体浓度与15g/L的羧化聚苯乙烯乳胶,在pH 5.8缓冲液中偶联8h后有较好的凝集效果和偶联效率,所建立的乳胶凝集法敏感性和特异性良好。【结论】初步建立了检测PBP2a的胶乳凝集法,为研制MRSA快速鉴定试剂盒奠定了良好的基础。

两种方法提纯的抗-HBe单克隆抗体及其酶结合物的比较

抗－ＨＢｅ单克隆抗体（ＭＡｂ）腹水分别经辛酸－硫酸铵法和单纯硫酸铵法提纯，前法蛋白获得量虽仅为后法的１／４，但蛋白纯度高于后法。两法所提ＭＡｂ经辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记后，前法提纯ＭＡｂ酶结合物的比活性和可生产的试剂盒的数量分别为后法提纯ＭＡｂ酶结合物的１０．９倍和２．６７倍，且标记前法提纯ＭＡｂ的ＨＲＰ用量仅为标记后法提纯ＭＡｂ的１／６。两种酶结合物与相应试剂配套后组成检测ＨＢｅＡｇ和抗－ＨＢｅ试剂盒，质量均达国家标准．所以，用辛酸－硫酸铵法提纯抗－ＨＢｅＭＡｂ用于生产，质量可靠，且经济实惠．

不同纯化兔抗苏丹红ⅠIgG方法的比较

采用辛酸-硫酸铵法和亲和层析法两种方法纯化兔抗苏丹红I IgG。纯化产物通过BCA法、琼脂双向扩散、SDS-PAGE凝胶电泳试验进行蛋白浓度、效价及纯度的验证。实验结果表明,利用辛酸硫酸铵纯化的产物蛋白质浓度高于亲和层析法,但经亲和层析纯化的产物纯度和效价均优于饱和硫酸铵。因此亲和层析法是一种快速高效的纯化方法,纯化产物可适用于免疫学检测方法的研究,为今后食品中苏丹红添加剂的快速检测奠定了良好的基础。

抗哈氏弧菌卵黄抗体不同提取方法比较研究

比较了苯酚法、冷乙醇法、硫酸铵法和辛酸-硫酸铵法4种方法分离提取抗哈氏弧菌卵黄抗体的效果。通过紫外分光光度计法测定蛋白质含量、SDS-PAGE电泳检测抗体纯度、间接ELISA检测抗体效价。结果显示,辛酸-硫酸铵方法比单独使用硫酸铵方法得到的鸡卵黄抗体IgY纯度高、而效价一样。实验优化了卵黄抗体的分离纯化技术,得到纯度高、特异性强的IgY。

鸭血清IgG的提纯方法比较

本文对鸭血清分别采用了硫酸钠法、辛酸-硫酸铵法、硫酸铵法进行了鸭IgG的提取。提取后的鸭IgG样品用纯度和蛋白含量两个指标来衡量。用辛酸-硫酸铵法提取的鸭IgG样品蛋白含量为9.45mg/ml,纯度能达到用于免疫标记技术的要求,而且操作简单、价格低廉,适于从大批量样品中提纯鸭IgG;用硫酸钠法提取的鸭IgG样品蛋白含量为9.14mg/ml,相对较高,但纯度较低;用硫酸铵法提取的鸭IgG样品蛋白含量、浓度都较低。

介绍一种快速提取免疫球蛋白G的方法

介绍一种快速提取免疫球蛋白Ｇ的方法吴健敏，袁书智，贺荣莲广西区兽医研究所５３０００１目前，提取免疫球蛋白Ｇ（ＩｇＧ）常用的方法有饱和硫酸按盐析法、离子交换层析法、凝胶过滤法、亲和层析法等，这些方法往往操作繁琐、费时费力，对ＩｇＧ活性影响较大。现介绍一...