山葵和辣根浸提物抑菌效果比较

采用二乙胺滴定法分别对山葵和辣根乙醚浸提物中的异硫氰酸酯进行含量测定,使用滤纸片法分别测定山葵浸提物和辣根浸提物的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果表明,山葵浸提物中异硫氰酸酯含量与辣根浸提物中异硫氰酸酯含量存在差异,辣根浸提物中异硫氰酸酯含量为32.10%,山葵浸提物中异硫氰酸酯含量为26.27%。辣根浸提物与山葵浸提物对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌均有抑制作用。辣根浸提物对金黄色葡萄球菌的最小杀菌浓度为0.50%;对大肠杆菌的最小杀菌浓度为1%;对枯草芽孢杆菌的最小杀菌浓度为0.50%。山葵浸提物对金黄色葡萄球菌的最小杀菌浓度为0.50%;对大肠杆菌的最小杀菌浓度为0.50%;对枯草芽孢杆菌的最小杀菌浓度为1%。

磁性固定化辣根过氧化物酶脱除玉米赤霉烯酮的研究

本文制备了磁性Fe_(3)O_(4)-SiO_(2)-HPG-COOH复合载体作为固定化载体,共价固定辣根过氧化物酶(HRP),应用于玉米赤霉烯酮(ZEN)的降解。利用傅里叶红外光谱、X-射线衍射分析、扫描电镜等表征方法对固定化HRP进行表征,验证了HRP被成功固定在载体上。制备的纳米级载体Fe_(3)O_(4)-SiO_(2)-HPG-COOH具有均匀的尺寸和形状,良好的分散性和较强的磁性,饱和磁化值为25.80 emu/g,平均粒径为103.15 nm。与游离酶相比,固定化HRP具有更高的耐酸碱性和热稳定性,最适pH值从6.5提高到7.0,最适温度从30℃提升到35℃。将磁性固定化HRP应用于ZEN降解,利用单因素实验,探究反应温度、过氧化氢浓度、溶液pH值和反应时间与ZEN降解率的关系。结果表明:在反应温度35℃,过氧化氢浓度26 mmol/L,溶液pH 7.0,反应时间480 min条件下,ZEN的脱除效率为68%,固定化HRP具有良好的重复使用性,循环5次后相对酶活力仍保持在79.85%以上。研究表明磁性固定化HRP对ZEN具有良好的降解能力。

高山辣根菜中挥发油及多糖含量的研究

目的分析高山辣根菜中挥发油及多糖含量。方法根据2020年版《中华人民共和国药典》第四部挥发油测定方法乙法测定挥发油的含量,通过气相色谱质谱联用仪(gas chromatography and mass spectrometry,GC-MS)分析挥发油中的化学成分,并用峰面积归一化法进行定量分析,计算各成分的相对百分含量,用紫外分光光度法测定高山辣根菜中多糖的含量。结果高山辣根菜中多糖和挥发油含量分别为5.87%、0.77 g·mL^(-1);从高山辣根菜挥发油中分析、鉴定出38种化合物,其中苄基异硫氰酸酯、苯甲腈的含量较高。结论藏药高山辣根菜挥发油中苄基异硫氰酸酯的含量最多,具有很好的开发、利用价值。

辣根素对粉尘螨杀灭活性及作用机制研究

目的研究辣根素对粉尘螨的杀灭活性及体内神经、解毒代谢酶系功能的影响。方法采用熏蒸法和玻片浸渍法测试辣根素对粉尘螨的杀灭活性,以苯甲酸苄酯和邻苯二甲酸二丁酯作为阳性对照。采用生化方法对粉尘螨体内总蛋白浓度、乙酰胆碱酯酶、谷胱甘肽S-转移酶、单胺氧化酶、Ca^(2+)-ATP酶活性进行测定。结果辣根素对粉尘螨有良好的杀灭活性,当浸渍浓度达到1.6 mL/L时,72 h校正死亡率可达100%,且熏蒸效果明显优于浸渍,玻片浸渍杀螨效果明显优于阳性对照组(P<0.05)。辣根素处理后,螨体总蛋白浓度、Ca^(2+)-ATP酶、谷胱甘肽S-转移酶活性先激活后抑制,而乙酰胆碱酯酶和单胺氧化酶活性受到一定程度的抑制。螨体一系列酶活性变化,会影响神经冲动的产生与传导和物质代谢的改变,导致螨虫死亡。结论辣根素对粉尘螨具有良好的毒杀作用,可作为一种新型杀螨物质,具有一定的开发应用前景。

辣根素水乳剂对连作韭黄生长及土壤酶活性的影响试验

通过用25%辣根素水乳剂进行土壤消毒,分析辣根素对连作土壤酶活性及新植韭菜生长的影响。结果显示,施加辣根素水乳剂改善了土壤酶活性,有效提升了连作韭黄的生长活力,提高了韭黄分蘖力、产量。

基于衍生化3-氨基-2-恶唑烷酮的夹心酶联免疫分析

建立一种3-氨基-2-恶唑烷酮(3-amino-2-oxazolidinone,AOZ)夹心免疫检测方法。通过1,6-己二醇连接2-硝基-4-羧基苯甲醛和生物素合成针对AOZ的新型衍生试剂。在样品前处理时加入衍生试剂可对AOZ进行衍生,衍生产率为89%。在酶标板上包被抗AOZ单克隆抗体并以辣根过氧化物酶标记的亲和素或抗生物素抗体作为第二结合物可实现AOZ的夹心酶联免疫吸附检测(enzyme-linked immunosorbnent assay,ELISA)。从实际应用的角度,得到双抗夹心和抗体-亲和素夹心模式下两个表位的极限距离,分别为12Å和13Å,理想距离分别为16Å和17Å。在双抗夹心和抗体-亲和素夹心模式下的检出限分别达到1.8 pg/mL和0.8 pg/mL(以AOZ质量浓度计),相对于竞争ELISA,其灵敏度最高提高了25倍。平均回收率为73%~85%,平均相对标准偏差为9.0%。

过氧化物酶在食品分子及其胶体体系修饰中的应用进展

过氧化物酶是一类大量存在于自然界及生物体内的氧化还原酶。其家族成员众多,但都可以催化以过氧化氢(H_(2)O_(2))作为底物的氧化反应。现有研究表明可以通过利用过氧化物酶的氧化特性,来提高功能食品的质量属性和营养特性。而辣根过氧化物酶作为过氧化物酶家族的一员,近些年来被大量研究。尤其是在食品研究开发中,有很多研究通过使用辣根过氧化物酶去催化蛋白质或淀粉等食品分子来改善食品本身的性质或获得更合适的食品胶体,因此值得更深层次的挖掘其应用价值及市场。本文在介绍过氧化物酶的结构、催化机制及影响其催化的关键因素基础上,分析了过氧化物酶催化对食品分子结构和性质的影响,综述了近年来过氧化物酶在食品分子及其胶体体系修饰中的一些应用,以期为今后过氧化物酶的研究提供一定的理论参考和新思路。

辣根挥发油化学成分的研究

对辣根中硫代葡萄糖甙（简称硫甙，辣根挥发油的前体物质）的水解条件进行了研究，提出了硫甙水解的最佳条件：65℃、120min、pH=4.0、抗坏血酸的添加理为2mg/g。并利用气相色谱/质谱联用技术鉴定了辣根的辛辣成分，十八种成分被分析，其占挥发油总量的95.15%。发现我国辣根的辛辣成分中烯丙基异硫氰酸酯占31.83%、4-戊烯基异硫氰酸酯占26.24%，3-丁烯基异硫氰酸酯、苯基异硫氰酸酯和苄基异硫氰酸酯是我国辣根的特有成分。

辣根硫代葡萄糖苷水解工艺比较及其水解产物的结构鉴定

以辣根为原料,筛选不同的水解工艺,研究硫代葡萄糖苷水解为异硫氰酸酯(ITCs)的转化率。结果表明,在温度40℃、pH值7、料液比1∶20(g∶mL)的条件下,水中加入Vc0.2%(以辣根粉计),水解2h,水蒸气蒸馏法得到的异硫氰酸酯质量分数最高(88.71%),经GC-MS、IR、1H NMR、13C NMR和MS鉴定为苯乙基异硫氰酸酯,经检索该化合物在辣根中首次分离鉴定。而采用二氯甲烷和水为1∶2的体积比的水解液水解辣根粉得到的异硫氰酸酯为苯乙基异硫氰酸酯(54.89%)和烯丙基异硫氰酸酯(5.18%)。采用黑芥子酶酶解硫代葡萄糖苷法,水解产物中苯乙基异硫氰酸酯含量最低(10.67%)。

不同光温背景下镧对辣根生态生理学效应(Ⅰ):对辣根光合作用影响

采用土培法培养试验,研究在不同光照(1.5、3.0、5.0、8.0、12.0、20.0klx)和温度(10、15、20、25、30、40℃)条件下稀土镧(La)对辣根光合作用的影响。结果表明,辣根适宜生长温度为15～25℃,适宜浓度稀土La(Ⅲ)能明显提高辣根的叶绿素(Chl)含量、净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、胞间CO2浓度(Ci),其中以20mg·L-1效果最佳;高、低温下喷施La(Ⅲ)不利于辣根的光合。在较低光照幅度下,La(Ⅲ)仍能有效促进辣根光合作用,呈“低促高抑”现象。且在较低的光照幅度范围内,对较低光照幅度下的促进作用优于较高光照幅度。

二乙胺滴定法测定辣根及芥末制品中异硫氰酸酯含量的研究

本文报道了测定辣根及芥末制品中异硫氰酸酯含量的一种新方法--二乙胺滴定法。异硫氰酸酯与二乙胺在丙酮溶液中发生均相反应,生成相应的硫脲,过量的二乙胺用标准盐酸滴定,从而计算出异硫氰酸酯的含量。通过与哌啶法、吗啉法的对比实验,表明该法准确可靠、简便易行。

辣根素的生物活性研究进展

本文从医用和农用角度综述了辣根素的生物活性研究进展,尤其在农业领域的进展,主要概述了辣根素对仓储害虫、病原微生物、根结线虫以及杂草种子的生物活性。辣根素的农用活性具有广阔的市场前景,同时辣根素的主要成分烯丙基异硫氰酸酯的复配制剂是一个值得深入发掘的区域,其对有害生物熏蒸作用机理的深入研究,将为农业应用提供理论依据和技术支撑。

酶促中药-壳聚糖复合水果保鲜膜研制

辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP)有催化聚合活性强、效率高等优良特性。HRP催化的中药-壳聚糖复配膜应用于水果保鲜可减弱呼吸作用,有低失重率、高VC和可滴定酸保持率,且HRP浓度在750 U/mL时对沙糖桔保鲜效果最佳,该复配膜的施用还能影响沙糖桔可溶性蛋白和可溶性糖的含量、抗氧化性以及糖代谢不同途径。电镜表征结果提示HRP酶促聚合增强中药-壳聚糖复配物的均一性、减少了杂质。这种酶促中药-壳聚糖复配物对比普通保鲜材料具有更佳保鲜效果。

固定化辣根过氧化物酶催化去除五氯酚

采用辣根过氧化物酶催化去除模拟废水中的五氯酚,使其形成沉淀;并探讨了影响反应的因素如溶液酸度、酶浓度、五氯酚起始浓度、过氧化氢起始浓度以及温度等.结果表明辣根过氧化物酶去除五氯酚的最佳pH为5～6;去除率随酶浓度增加而增加,在所采用的最高酶浓度0.05u/mL,五氯酚初始浓度为12.6mg/L的情况下,去除率可达70%左右;五氯酚起始浓度对去除率也有一定影响,起始浓度为13.0mg/L时,去除率可达73.7%,而当起始浓度为0.7mg/L时,去除率只有35.7%;过氧化氢与五氯酚反应的摩尔数之比为1:2.此外还采用化学键合法将辣根过氧化物酶固定在聚丙烯酰胺载体上,发现酶活性可保持较长时间,并可反复用于催化去除五氯酚.固定酶去除五氯酚最适pH值与自由酶类似,并且在pH＝5.15条件下,1h内将五氯酚从13.4mg/L去除到4.9mg/L并达到平衡;将固定酶装入反应柱制成酶柱,可多次反复催化五氯酚的反应.

微波处理及QuEchERS-气相色谱法测定辣根中多类农药残留

建立了含硫蔬菜辣根中多类农药残留的简单、快速检测方法。采用家用微波炉处理辣根60 s,使其中的酶失去活性,避免产生干扰的硫化物,再将一种新的样品处理方法(QuEChERS)进行了改进后,结合气相色谱法对辣根中15种有机磷类农药及6种菊酯类农药同时进行检测,取得了满意结果。添加样品的回收率81.3%～115.1%,相对标准偏差1.7%～10.2%,方法最低检出限0.001～0.005 mg/kg。

基于辣根过氧化物酶/纳米金/辣根过氧化物酶/多壁纳米碳管修饰的过氧化氢生物传感器的研究

以固定在玻碳电极上的多壁纳米碳管为基底吸附辣根过氧化物酶,再固定纳米金,然后再结合一层辣根过氧化物酶,利用多壁纳米碳管对辣根过氧化物酶的直接电化学催化特性及纳米金对蛋白质的强吸附能力及强的电子传导特性制备了无电子媒介体的过氧化氢生物传感器.采用循环伏安法,在无电子媒介体时,该传感器对H2O2仍能具有良好的催化活性,放大了电信号,提高了该酶传感器的灵敏度及稳定性.实验证明,该传感器在H2O2浓度为1.0×10-6～1.0×10-3mol?L-1范围内有线性响应,线性相关系数r2=0.9964.并探讨了电极的稳定性、寿命及重现性.

紫外分光光度法测定辣根及芥末制品中异硫氰酸酯含量的研究

研究了溶剂、pH对异硫氰酸酯吸收光谱的影响,并报道了测定辣根及芥末制品中异硫氰酸酯含量的一种新方法。异硫氰酸酯在正己烷溶剂中的λmax=249nm,εmax=1041L/mol·cm。在249nm处测定样品正己烷提取液的吸光度,根据标准工作曲线,计算出样品的异硫氰酸酯含量。该法简便省时,灵敏度高,并通过与哌啶法对比实验,证明该法的准确性。

辣根过氧化物酶处理酚和氯酚的催化特性研究

为了研究辣根过氧化物酶处理酚和氯酚的动力学过程，采用人工配水试验，测定了ｐＨ对酶催化反应的影响、Ｈ２Ｏ２抑制酶催化反应的动力学参数和不同底物的酶催化反应动力学参数．结果表明，在试验的ｐＨ范围内，ｐＨ为９时过氧化物酶对苯酚和对氯苯酚的去除效率最高，分别达到９９．５％和９５％．在较低浓度时污染物去除效率随Ｈ２Ｏ２浓度的升高而增加，较高浓度Ｈ２Ｏ２对酶催化反应有一定的抑制效应，但这种抑制作用对酶促反应的影响不大．对氯苯酚、苯酚和间氯苯酚的酶催化反应米氏常数Ｋｍ依次增加，对酶的亲和性逐渐降低，间氯苯酚最难去除．根据酶反应动力学特征判定，辣根过氧化物酶催化酚形成自由基的氧化反应属于乒乓双双反应机制．

基于聚硫堇和纳米金固定辣根过氧化物酶的生物传感器

用电化学聚合法在铂丝电极上制备聚硫堇，将其作为电子媒介体并且用于化学吸附纳米金，然后通过纳米金来固定辣根过氧化物酶，最后用聚乙烯缩丁醛包埋修饰好的电极，从而制得了新型过氧化氢生物传感器．该传感器还原峰峰电流与H2O2的浓度在2．15×10^-4～1.43×10^-2mol／L范围内呈良好的线性关系，检出限为2．00×10^-7mol／L，相关系数为0．998．实验结果表明，此方法具有较好的灵敏度和抗干扰能力，同时具有良好的稳定性和重现性。

陆地棉86-1(G.hirsutum L.)与辣根棉(G. armourianum Kearn.)种间杂种及其利用的研究

陆地棉品种86-1 G.hirsutum L.×辣根棉C.armourianum Kearn.F_1染色体2n=3x=39,平均染色体构型为14.051+12.45Ⅱ+0.01Ⅲ。F_1直接与陆地棉回交,得到的BC_1F_1是一株混倍体(mixploid),其染色体为54—67个,其中2n=65的整倍体(euploid)只占15.7％,非整倍体(aneuploid)占82.8％,平均2n=61,平均染色体构型为7.741+25.83Ⅱ+0.45Ⅲ+0.06Ⅳ+0V+0.01Ⅵ。又以BC_1F_1为母本,与陆地棉二次回交,BC_2F_1苗期夭折;而以陆地棉为母本、BC_1F_1为父本回交的BC_2F_1生长健壮,有些辣根棉性状继续传递。通过多年选育已获得一些结铃性强、中长绒纤维高品质、高衣分的新材料。