侵染花生的辣椒褪绿病毒S RNA全序列分析

番茄斑萎病毒属（Tospovirus）是布尼亚病毒科（Bunyaviridae）植物病毒组成的一个属，病毒粒子为球状，直径80～110nm，粒体外层由一层脂质包裹。基因组属于负单链RNA，由三个片段组成，分别被称为LRNA、MRNA、和SRNA。LRNA为负链、含单个开放阅读框架（ORF），MRNA和SRNA均为双义RNA，有2个ORF，反向相连。SRNA大小约3kb，编码分子量为54kDa的非结构蛋白（NSs）和分子量为29kDa的核衣壳蛋白（N）。目前该属已正式定名的病毒有16种，分布在世界各地。Chen等根据病毒N基因氨基酸序列同源性，将16种病毒划分为TSwV、WSMoV、IYSV3个主要血清组和INSV、PYSV、PCFV、MYSV单一病毒构成的4个血清型。其中，属于WSMoV血清组的有西瓜银色斑驳病毒（Watermelon silver mottle virus,WSMoV）、花生芽坏死病毒（Peanut bud necrosis virus,PBNV）、辣椒褪绿病毒（Capsicum chlorosis virus，CaCV）、西瓜芽坏死病毒（Watermelon bud necrosis virus,WBNV）和兰花褪绿斑病毒（Calla lily chlorotic spotvirus，CCSV）.

侵染广东顺德2种兰花的辣椒褪绿病毒分子鉴定

[目的]对侵染蝴蝶兰和文心兰的辣椒褪绿病毒进行田间调查,并进行分子鉴定,为广东顺德花卉顺利出口提供技术支持和把关服务。[方法]根据辣椒褪绿病毒的一对特异性引物核壳体(nucleocapsid,N)基因,应用RT-PCR检测方法对2种兰花疑似感染病毒的植株进行分子鉴定。[结果]蝴蝶兰(样品编号2、3、5和10)和文心兰(样品编号6)感染辣椒褪绿病毒,系统进化树表明2种兰花感染的辣椒褪绿病毒与该病毒泰国分离物以较高的后验概率聚为同一类群。[结论]辣椒褪绿病毒已在广东顺德的蝴蝶兰和文心兰上发生危害,且文心兰感染辣椒褪绿病毒为国内首次报道,出口企业需加强检疫监控工作。

烟粉虱MEAM1和MED成虫在辣椒上传播番茄褪绿病毒的特性

【目的】分析与比较烟粉虱Bemisia tabaci MEAM1和MED成虫在辣椒Capsicum annuum植株上对番茄褪绿病毒(tomato chlorosis virus, ToCV)的传播差异,解析媒介昆虫-病毒-寄主植物间的互作关系,为田间辣椒上ToCV防治提供参考。【方法】利用烟粉虱MEAM1和MED成虫及ToCV cDNA侵染性克隆,对烟粉虱MEAM1和MED成虫在辣椒植株上获取和传播ToCV的能力进行比较,同时比较烟粉虱MEAM1和MED成虫在健康和携带ToCV辣椒植株上的取食偏好。【结果】在感染ToCV的辣椒植株上接虫后96 h内,烟粉虱MEAM1和MED成虫体内病毒积累量逐渐增加,MED成虫获毒速度和病毒积累量均大于MEAM1成虫的,MED成虫获毒量是MEAM1成虫的1.74倍;MED成虫在辣椒植株上的传毒量明显高于MEAM1成虫,传毒量平均相差9倍,且MED成虫传毒率比MEAM1成虫高29%。MEAM1和MED成虫对健康和感染ToCV的辣椒植株的取食偏好相似,都明显倾向于取食被ToCV侵染的辣椒植株。【结论】烟粉虱MED成虫在辣椒植株上获取、传播ToCV的能力均高于烟粉虱MEAM1成虫,这也是ToCV在我国大面积发生的一个重要原因。

侵染贵州番茄的辣椒褪绿病毒分子鉴定与分析

辣椒褪绿病毒(Capiscum chlorosis virus, CaCV)是正番茄斑萎病毒属(Orthotospovirus)的重要成员,能够侵染辣椒、番茄等作物并造成严重危害。为明确贵州番茄CaCV分离物基因组分子结构特征及其进化起源,本研究通过RT-PCR技术扩增和测定了CaCV的N、NSs和NSm基因的全长片段,分别获得长度约828bp、1 320bp和927bp的目标条带。经过序列比对和进化树构建等方法进行遗传进化分析发现,贵州番茄CaCV分离物的N、NSs和NSm基因与CaCV其他分离物核苷酸的相似性分别在85.5%~99.4%、82.7%~98.9%和83.1%~98.7%之间。根据系统发育树结果,贵州番茄CaCV分离物N基因和NSs基因与中国云南分离物的亲缘关系较近,NSm基因与中国海南和广州分离物的亲缘关系近,推测贵州CaCV可能是由于番茄、辣椒的品种引进,及蓟马带毒传播进入。这是贵州省CaCV侵染番茄的首次报道,对监测CaCV在我国的扩散具有重要意义。

莴苣褪绿心腐病综合防控技术

2005年国内首次报道的莴苣褪绿心腐病是由黑额二叉叶蝉等媒介昆虫传播的一种植原体病害,通过适当推迟播种期、远离辣椒地育苗、防虫网覆盖育苗,及时拔除病株、悬挂黄板诱杀和适时喷药防治虫媒等系列治虫防病的综合防控措施可以有效地控制该病害的发生为害。

辣椒褪绿病毒SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的建立

辣椒褪绿病毒(Capsicum chlorosis virus, CaCV)可引起辣椒(Capsicum annuum L.)、蝴蝶兰(Phalaenopsis sp.)等重要作物严重病害.根据CaCV核衣壳蛋白基因保守序列设计引物,建立了CaCV SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法.结果表明,以含有CaCV目的基因片段的重组质粒为标准品构建的标准曲线,其循环阈值与模板浓度有良好的线性关系.所建立的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR方法具有特异性、重复性和灵敏性等优点,可用于田间样品中CaCV的定量检测.

朱顶红褪绿环斑病毒侵染辣椒幼苗的miRNA差异表达分析

为分析朱顶红褪绿环斑病毒(Hippeastrum chlorotic ringspot virus,HCRV)侵染的辣椒幼苗与对照健康辣椒幼苗的miRNA差异表达数据,以探索miRNA在HCRV与寄主互作中的机制。本研究采用人工摩擦接种方法接种病毒,1 dpi采样,提取总RNA,利用高通量测序技术检测HCRV侵染样品和对照健康样品的miRNA并进行差异表达分析。使用Patmatch_v1.2软件对表达差异显著的miRNA进行靶基因预测并对靶基因进行聚类分析,最后随机选取4个差异表达miRNA进行RT-qPCR检测以验证测序结果。结果发现,与对照健康样品相比,HCRV侵染辣椒样品有89种miRNA差异表达,其中56种miRNA上调表达,33种miRNA下调表达。差异表达miRNA靶基因参与了细胞代谢等生物学过程,其分子功能主要为催化及结合等,4个差异表达miRNA的RT-qPCR验证结果与高通量测序结果一致。这为进一步阐释HCRV与寄主的互作机制,全面防治该病毒提供了有效的数据。

辣椒叶片发黄应对症下药

在辣椒种植过程中,时常出现叶片发黄的情况,其发黄的原因较多,应对症下药。1.病毒病。在高温干旱的情况下,病毒病往往发生较重,具体症状是在顶部的叶片上出现明脉轻微褪绿,或者出现浓、淡绿相间的斑驳,重症的还会引起病叶明显的变黄,出现落叶现象。2.叶霉病。通常是在下部叶片开始,逐步往上部叶片发展,特别是在果实的膨大期发生较重。发病初呈浅黄色不规则褪绿斑,叶背病部初生白色霉层,不久变为灰褐色至黑褐色绒状霉。随着病情的发展,叶片由下向上逐渐变成花斑,严重时变黄干枯,植株长势衰弱,果实变小、畸形,影响产量。