达乌里芯芭化学成分的研究

目的研究达乌里芯芭Cymbaria dahurica L.的化学成分。方法达乌里芯芭70%乙醇提取物采用大孔树脂、Sephadex LH-20、硅胶、聚酰胺、半制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到33个化合物,分别鉴定为梓醇(1)、京尼平-1-O-β-D-龙胆双糖苷(2)、栀子苷(3)、龙胆苦苷(4)、桃叶珊瑚苷(5)、cis-eurostoside(6)、eurostoside(7)、玉叶金花苷酸(8)、8-表马钱子苷酸(9)、小麦黄素(10)、木犀草素(11)、金圣草素(12)、芹菜素(13)、5,7-二羟基-3′,4′,5′-三甲氧基黄酮(14)、槲皮素(15)、反式咖啡酸(16)、咖啡酸乙酯(17)、trans-p-hydroxycinamic acid(18)、cis-p-hydroxycinnamic acid(19)、原儿茶酸(20)、对羟基苯甲酸(21)、香草酸(22)、丁香酸(23)、没食子酸(24)、3,4,5-三甲氧基苯甲酸(25)、acteoside(26)、isocrenatoside(27)、酪氨酸(28)、N,N,N-三甲基甘氨酸内盐(29)、β-谷甾醇(30)、胡萝卜苷(31)、stigmastanol-3β-p-glyceroxydihydrocoumaroate(32)、β-谷甾醇棕榈酸酯(33)。结论化合物6、19、27~29、32为首次从芯芭属植物中分离得到。通过2D NMR及X射线单晶衍射首次确切归属了化合物9的8、9位碳氢信号的顺序。

达乌里芯芭质量综合评价方法研究

目的:建立达乌里芯芭质量综合评价体系。方法:按照2020版中国药典杂质检查项下要求,实施了重金属、砷盐、灰分、水分及浸出物等检查项目。利用TLC法对达乌里芯芭中益母草苷、梓醇和8-表番木鳖酸进行色谱鉴别。采用HPLC法对不同来源达乌里芯芭进行定量分析,其条件为色谱柱:Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm);流动相:乙腈(A)-水(B);梯度洗脱,A:0~13 min, 15%~25%;13~20 min, 25%~45%。结果:益母草苷和梓醇的展开剂为三氯甲烷-甲醇-甲酸(14∶6∶1),8-表番木鳖的展开剂为三氯甲烷-甲醇-甲酸(14∶7∶1)时,益母草苷、梓醇和8-表番木鳖的斑点清晰、Rf值合理和分离度好。12批达乌里芯芭中重金属、砷盐、水分均符合中国药典标准。达乌里芯芭的灰分、酸不溶灰分、水溶性浸出物和醇溶性浸出物的量变化分别在8.36%~13.10%、1.16%~9.01%、24.50%~41.18%、19.56%~35.25%。达乌里芯芭中被检测成分梓醇、桃叶珊瑚阿苷和益母草苷在较宽的浓度范围内表现出良好的线性关系,梓醇、桃叶珊瑚阿苷和益母草苷在不同批次芯芭中相对含量变化分别为(10.32±0.13)~(11.81±0.16)、(4.03±0.05)~(4.91±0.07)、(2.54±0.03)~(2.93±0.05)mg/g。结论:建立准确、可靠、稳定的达乌里芯芭质量综合评价体系,为该药材的质量控制提供了有力依据。

HPLC法同时测定蒙药达乌里芯芭中梓醇和益母草苷的含量

目的:建立同时测定蒙药达乌里芯芭中梓醇和益母草苷含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为XSelect HSS T3 C18,流动相为乙腈-1.0%磷酸水溶液(梯度洗脱),流速为1 m L/min,柱温为40℃,检测波长为203 nm,进样量为10μL。采用建立的方法测定7批达乌里芯芭样品中梓醇和益母草苷的含量。结果:梓醇、益母草苷进样量检测线性范围分别为0.17~3.4、0.25~5.0μg(r均≥0.999 5),检测限分别为3.57、4.72 ng,定量限分别为12.24、41.98 ng,精密度、稳定性(24 h)、重复性试验的RSD均<2.0%(n=6),加样回收率分别为93.0%~97.3%、92.1%~97.9%(RSD分别为1.9%、2.4%,n=6)。7批样品中梓醇、益母草苷的含量分别为0.53~0.81、0.79~1.25 mg/g。结论:建立的方法快速简便、稳定可靠,可用于达乌里芯芭中梓醇和益母草苷含量的同时测定。

蒙药达乌里芯芭组织培养快速繁育技术

以达乌里芯芭种子为外植体建立无菌材料,采用正交试验设计研究不同植物生长调节剂(6-BA、IAA和KT)组合对达乌里芯芭增殖培养的影响,以及NAA、IAA对组培苗生根诱导的影响。结果表明,达乌里芯芭种子消毒以0.1%HgCl_2溶液浸泡8 min后剥除种皮处理效果最佳;适宜增殖培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA+0.2 mg/L KT,30 d增殖系数为20.5;最适生根培养基为1/2MS+1.0 mg/L IAA,生根率93.33%;生根苗炼苗后移栽沙床上,成活率为98%。

离心分配色谱法对达乌里芯芭中毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷的分离纯化

目的:建立一种分离纯化达乌里芯芭中毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷的方法。方法:以70%乙醇加热回流提取达乌里芯芭全草,依次采用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取后,经高效液相色谱法确认毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷主要存在于正丁醇部位。采用离心分配色谱法,以乙酸乙酯∶正丁醇∶水(4∶1∶5)为溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,流速为3 mL/min,转速为1500 r/min,降相模式运行,对正丁醇部位中的毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷进行分离。结论:离心分配色谱法可以高效、快速地分离纯化达乌里芯芭中的毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷。

达乌里芯芭全草挥发油成分气相色谱-质谱联用分析

目的对达乌里芯芭全草挥发油的化学成分进行分析。方法采用水蒸汽蒸馏法从达乌里芯芭中提取挥发油,利用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)鉴定达乌里芯芭挥发油中的化学成分,并运用气相色谱峰面积归一化法确定挥发油成分的相对含量。结果从达乌里芯芭全草挥发油中鉴定出31个化学成分,占挥发油总量的80. 94%。结论达乌里芯芭挥发油主要成分为6,10,14-三甲基-2-十五烷酮(16. 12%)、5-十二烷基-2(3H)-呋喃酮(5. 02%)、1-辛烯-3-醇(4. 99%)。