基于网络药理学和分子对接探讨蒙药述达格-4治疗胃食管反流病的作用机制

目的:以蒙医理论对蒙药述达格-4的认识为依据,通过网络药理学和分子对接技术探讨述达格-4治疗胃食管反流病的作用靶点及其可能的作用机制。方法:通过TCMSP数据库及文献搜集述达格-4的有效活性成分及对应的靶蛋白,通过Uniprot数据库将其转化成相应的基因名称;通过GeneCard、OMIM、DrugBank数据库中预测胃食管反流病的作用靶点;通过Venny 2.1.0获取交集靶点;STRING数据库获取蛋白质相互作用(PPI)网络后导入Cytoscape 3.9.1软件获取核心靶点;利用Metascape数据库,进行基因本体(GO)功能和京都基因与基因组百科全书(KEGG)生物通路富集分析;在微生信在线平台进行绘制GO富集分析柱状图、KEGG通路富集气泡图;Cytoscape 3.9.1软件构建“药材-活性成分-靶点”及“关键活性成分-核心靶点-通路”网络;Autodock对关键活性成分和核心靶点进行分子对接。结果:通过限制口服吸收利用度(OB)、药物相似性(DL)的数值,共筛选出23种活性成分,作用于TNF,EGFR,PTGS2,PPARG和CCND1等关键靶点。通过调节PI3K-Ak、细胞衰老等信号通路治疗胃食管反流。分子对接显示,活性成分与核心靶点具有较好的结合活性,其中谷甾醇与核心靶点结合的最好。结论:本研究初步揭示了述达格-4中的活性成分高良姜素、山奈素、谷甾醇等能作用于多个靶点和调控多条通路来抑制炎症反应,对胃食管反流可能具有治疗作用。

观察SGLT-2抑制剂达格列净治疗心力衰竭的临床效果

探究心力衰竭采用SGLT-2抑制剂达格列净的治疗效果。方法 选取我院收治的心力衰竭患者50例(2022.8—2023.8),随机分组,两组各25例,分别采用常规治疗和SGLT-2抑制剂达格列净,对比疗效。结果 两组血压、HbALc、6min步行距离在进行治疗前比较(P>0.05),治疗后观察组血压、HbALc数值较低、步行距离较长(P<0.05);LVEF、LVEDd治疗前(P>0.05),治疗后观察组LVEF高、LVEDd低(P<0.05);不良反应观察组低(P<0.05);观察组患者治疗生活质量较高(P<0.05);观察组疗效高(P<0.05)。结论 SGLT-2抑制剂达格列净的应用,治疗效果较好,促进患者疾病改善,值得临床医学应用。

蒙药述达格-4的化学成分研究

采用硅胶柱色谱法、Sephadex LH-20柱层析法、反相硅胶柱色谱法进行分离,用质谱法、核磁共振氢谱、核磁共振碳谱法鉴定其化合物结构,从蒙药述达格-4(高良姜、紫硇砂、木香、石菖蒲)中分离得到7个单体化合物,分别为:为β-谷甾醇(1)、高良姜素(2)、山奈素-4′甲醚(3)、二氢高良姜醇(4)、苯甲酸(5)、香草酸(6)、二十烷(7),二十烷为首次从该复方药材中分离得到.鉴定的7个化合物均为首次从述达格-4有效部位中分离得到,为阐释蒙药述达格-4药效物质奠定了基础.

高效液相色谱法同时测定蒙药复方述达格-4中三种黄酮类成分的含量

采用反相高效液相色谱法，色谱柱为DiamosilC18（4．6mm×250mm，5μm），以甲醇（A）-0．5％磷酸水溶液为流动相，梯度洗脱（0-20min，43％A；20～30min，43％A-61％A；30-60min，61VoA），流速1．0mL·min^-1检测波长为350nm，柱温30℃，进样量20μL，建立同时测定蒙药复方述达格-4中高良姜素、槲皮素、芦丁的高效液相色谱含量测定方法．结果表明高良姜素、槲皮素、芦丁的线性范围分别为1．06～10．6μg（r=0．9999），0．0276～0．276pg（r=0．9999），0．0264～0．264μg（r=0．9999）；平均加样回收率（72—6）分别为98．71％，97．66％，98．13％．本法准确、简便，具有良好的重复性．

蒙药复方述达格-4抗实验性胃溃疡的作用研究

目的:观察蒙药复方述达格-4对水应激所致小鼠胃溃疡模型的保护作用。方法:采用水应激法诱导小鼠急性胃黏膜损伤,灌胃给予述达格-4(9mg/20g、3mg/20g、1mg/20g),每天一次,连续5d,以溃疡指数、溃疡抑制率作为观察指标,探讨述达格-4与西咪替丁和胃康灵相比对水应激所致小鼠胃黏膜损伤的影响。结果:述达格-4三个剂量组与模型对照组比较均对水应激性所致小鼠急性胃溃疡损伤有保护作用(P<0.05),且中剂量效果最佳,其保护作用与西咪替丁和胃康灵相似。结论:述达格-4可显著减轻水应激所致的小鼠胃黏膜损伤。

高效液相色谱法测定蒙药复方述达格-4有效部位中山奈素和高良姜素的含量

目的:建立同时测定蒙药复方述达格-4有效部位中高良姜素、山奈素的高效液相色谱含量测定方法。方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Diamosil C18(4.6mm×250mm,5μm),以乙腈(A)-0.5%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱(0～20min,34%A→37%A;20～60min,37%A),流速1.0mL/min检测波长为286nm,柱温30℃,进样量20μL。结果:高良姜素、山奈素的线性范围分别为0.04～0.4μg(r=0.9999),0.01656～0.1656μg(r=0.9999);平均加样回收率(n=6)分别为99.92%、98.92%;RSD为2.09、2.33。结论:本法准确、简便,具有良好的重复性,可为蒙药复方述达格-4质量控制提供依据。

紫外可见分光光度法测定蒙药复方述达格-4中总内酯的含量

目的:建立蒙药复方述达格-4中总内酯的含量测定方法。方法:以异土木香内酯为对照品,以盐酸、三氯化铁为显色剂,采用紫外可见分光光度法测定述达格-4中总内酯的含量。结果:异土木香内酯在0.842~5.052mg范围内与吸光度呈良好的线性关系Y=0.1493X+0.1399(r=0.9995),平均加样回收率为98.43%,RSD=1.69%(n=6)。结论:该方法简便、灵敏、准确,可用于述达格-4中总内酯含量的测定。

紫外可见分光光度法测定蒙药述达格-4中总黄酮的含量

目的：建立述达格-4中总黄酮含量的方法。方法：采用紫外可见分光光度法测定,检测波长为525nm。结果：高良姜素在浓度192.8~771.2μg/mL范围内呈良好线性关系。回归方程Y=0.7454X＋0.0145（r=0.9998）。线性关系良好,加样回收率为98.24%,RSD为2.17%。结论：该方法简便、灵敏、准确,可用于述达格-4中总黄酮的含量测定。

紫外可见分光光度法测定蒙药复方述达格-4血清中总黄酮的含量

建立蒙药复方述达格-4血清中总黄酮含量测定的方法 .采用紫外可见分光光度法,以高良姜素为对照品,盐酸镁粉显色,在489nm波长处测定吸光度,计算蒙药复方述达格-4血清中总黄酮含量,结果显示高良姜素在0.02548~0.2548mg/mL范围内线性关系良好,回归方程Y=3.9439 X-0.0174(r=0.9995),加样回收率为97.74%,RSD为1.10%.说明该方法稳定、可靠,可以作为测定述达格-4血清中总黄酮含量的方法.

蒙药复方述达格-4对小鼠的抗炎镇痛作用研究

目的:研究蒙药复方述达格-4对小鼠抗炎镇痛的作用。方法:采用肉芽肿实验法、涂二甲苯至小鼠耳廓使耳朵肿胀法观察抗炎作用,采用腹腔注射醋酸致小鼠扭体法观察镇痛作用。结果:各剂量组与模型组比较,得出蒙药复方述达格-4(150 mg/kg)组能抑制棉球致小鼠肉芽肿的生长,肉芽肿的重量为16.8±0.77mg;抑制二甲苯致小鼠耳肿胀,抑制率26.23%;抑制冰醋酸引起的小鼠扭体反应,抑制率31.45%。结论:蒙药复方述达格-4对小鼠有显著的抗炎镇痛作用。

紫外可见分光光度法测定蒙药述达格-4中苯丙素的含量

采用紫外可见分光光度法在262nm波长处测定蒙药述达格-4中苯丙素的含量,得出α-细辛醚在10.16-60.96μg范围内呈良好线性关系.回归方程y=12.303x+0.018(r=0.9997)线性关系良好,加样回收率为101.97%,RSD为1.98%.结果显示该方法简便、灵敏、准确,可用于述达格-4中苯丙素的含量测定.

HPLC法测定蒙药复方述达格-4中1-苯基-7-(3-甲氧基-4-羟基)苯基-5-醇-3-庚酮的含量

建立测定蒙药复方述达格-4药材中1-苯基-7-（3-甲氧基-4-羟基）苯基-5-醇-3-庚酮含量的方法.色谱柱为InertsilODS-3（4.6mm×250mm,5μm）,以乙腈（B）-0.5%磷酸水溶液（A）为流动相,梯度洗脱（0-20min,0%B→45%B;20-25min,45%B→55%B;25-40min,55%B→100%B）,流速1.0ml·min^-1,检测波长为210nm,柱温30℃,进样量20μL.结果表明蒙药复方述达格-4药材中1-苯基-7-（3-甲氧基-4-羟基）苯基-5-醇-3-庚酮在0.102-1.02μg（r=0.99999）质量范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系,精密度、稳定性、重复性试验的RSD≤2%,平均加样回收率（n=6）为99.63%（RSD=1.77%）.本法简便、快速、准确,可为蒙药复方述达格-4的质量控制提供依据.

蒙药复方述达格-4不同配伍对总黄酮和高良姜素含量的影响

采用紫外-可见分光光度法和RP-HPLC法分别测定复方有效部位中总黄酮和高良姜素的含量,并对结果进行统计学分析.研究蒙药复方述达格-4不同药味组合中总黄酮和高良姜素含量的关系.结果:全方组有效部位中总黄酮、高良姜素含量最高;高紫石组有效部位中总黄酮和高良姜素含量最低(p<0.05).蒙药复方述达格-4不同配伍总黄酮和高良姜素含量具有显著性差异(p<0.05).

蒙药复方述达格-4特征图谱初步分析

目的:分析蒙药复方述达格-4的特征图谱。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Agilent Extend C18,流动相为0.4%乙酸溶液-甲醇(梯度洗脱),流速为0.6 m L/min,检测波长为286 nm,柱温为30℃,进样量为20μL。分别对复方述达格-4全方及各单味药体内外特征图谱进行分析和对比。结果:复方述达格-4全方体外特征图谱有47个峰;其体内特征图谱有24个峰,其中峰1、4、7～9、12、14、18～20、22、25、38～41、44、46对应的18个成分为体外直接入血成分;各单味药体内特征图谱中峰1、4、7、8、12、14、18～22、25、40、46来源于高良姜药材;峰14、18、19、22、44来源于木香药材;峰1、4、7～9、12、14、18、19、22来源于石菖蒲药材。结论:直接入血成分及代谢产物可能为复方述达格-4在体内发挥作用的有效成分;该方法可用于其特征图谱的分析。

HPLC法同时测定蒙药复方述达格-4中四个黄酮类成分的含量

建立同时测定蒙药复方述达格-4中山奈酚、高良姜素、山奈素、高良姜素-3-甲醚含量的方法.采用HPLC法,色谱柱为AgilentC18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相乙腈-0.2%乙酸水溶液(梯度洗脱),流速0.6mL·min-1,检测波长254nm,柱温30℃,进样量为10μL.得出山奈酚、高良姜素、山奈素和高良姜素-3-甲醚线性范围分别为0.00067-0.00670μg(r=0.9999)、0.5240-5.2400μg(r=0.9999)、0.1484-1.4840μg(r=0.9999)、0.0996-0.9960μg(r=0.9999);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2%;平均加样回收率分别为96.79%(RSD=1.70%,n=6)、97.38%(RSD=1.59%,n=6)、100.96%(RSD=1.49%,n=6)、97.01%(RSD=1.50%,n=6).结果表明该方法操作简便、稳定、重复性好,可用于蒙药复方述达格-4中4个黄酮成分含量的测定.本研究可为蒙药复方述达格-4资源开发利用提供理论依据.

蒙药复方述达格-4中总黄酮在大鼠体内药动学研究

对蒙药复方述达格-4中总黄酮在正常大鼠与胃溃疡模型大鼠体内的血药浓度进行比较.紫外可见分光光度法测定蒙药复方述达格-4在大鼠血清中总黄酮吸光度,波长为458nm,计算蒙药复方述达格-4中总黄酮在大鼠体内的血药浓度,用DAS2.0软件进行智能化分析,求得其主要药代动力学参数.结果表明蒙药复方述达格-4中总黄酮在大鼠体内的含量在0.02024~0.2024mg范围内线性关系良好(r=0.9997),胃溃疡大鼠的Cmax、AUC(0-480)、AUC(0-∞)均低于正常大鼠.该方法较便捷,可以应用于测定蒙药复方述达格-4中总黄酮的血药浓度.

蒙药述达格-4抗氧化活性研究

通过建立蒙药述达格-4体外抗氧化活性测定方法,明确述达格-4的抗氧化作用。采用DPPH自由基清除率、FRAP法对Fe3+的还原能力、TEAC法对ABTS自由基的清除率及总抗氧化能力(T-AOC)试剂盒等综合评价述达格-4的抗氧化能力。结果显示,述达格-4浓度为0.32mg/mL时,DPPH自由基清除率为77.08%,IC50值为0.08982mg/mL;浓度为2.383mg/mL时,对Fe3+的还原能力最高,吸光度达到最大值0.734;浓度为0.321mg/mL时,对ABTS自由基清除率可达到99.77%,IC50值为0.1050mg/mL;200μL浓度为2.798mg/mL的述达格-4总抗氧化能力相当于0.8448mmol的Trolox。说明建立的方法适用于蒙药述达格-4体外抗氧化活性测定,且抗氧化活性能力大于黑枸杞,述达格-4有较强的抗氧化活性。

高效液相色谱法测定蒙药复方述达格-4有效部位中山奈素和高良姜素的含量

目的探析蒙药复方述达格-4有效部位高良姜素2与中山奈素应用高效液相色谱法检测的方法。方法应用高效液相反相色谱法,流动相为乙腈(A)-0.5%磷酸水溶液,检测波长286 nm,梯度洗脱(0 min^20 min,34%A→37%A;20 min^60 min,37%A),流速1.0 mL/min,色谱柱为Diamosil C18(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温30°C,进样量20μL。结果山柰素的线性范围为0.01656μg^0.1656μg(γ=0.9999),高良姜素线性范围为0.04μg^0.40μg(γ=0.9999)。重复性试验中,山柰素、高良姜素的平均含量分别为0.43%、1.21%;RSD分别为1.43%、0.94%;加样回收率试验评估中,山柰素、高良姜素的回收率平均值分别为98.92%、99.92%,RSD为2.33%、2.09%。结论高效液相色谱检测法的重复性较佳,简便准确,可为蒙药复方述达格-4质量控制提供依据。

涅比特达格石油战略联盟

近年来,中亚地区丰富的油气资源,吸引了众多国际石油公司来此参与油气勘探开发活动。为了共筹资金,分担风险,增强技术、经济竞争实力,一些油气公司正在建立石油战略联盟。如表1所列。表中所列的石油战略联盟中,以莫比尔和标志公司所建立的涅比特达格石油战略联盟最为活跃。该联盟于1996年8月7日建立。它的建立被认为是土库曼斯坦石油工业未来光明前景的极重要机遇。

蒙药述达格-4原药材和提取物中金属元素含量分析

原子吸收分光光度法广泛用于微量元素含量测定,在中药学研究中,多用于重金属含量的测定,是控制药品质量的方法之一.采用原子吸收分光光度法测定蒙药述达格-4与其原药材中Pb、Cu、Mn、Fe、K、Mg元素含量,检测其中重金属含量和营养元素含量.其中成药提取物中重金属元素含量低于单味药材中重金属元素含量,成药提取物中营养元素的含量与原药材相比具有一定变化.这为后期药效学研究提供基础.