超高压结合酶法消减南美白对虾蛋白过敏原研究

以南美白对虾为研究对象,提取水溶性虾蛋白,采用超高压法、超高压处理后再用木瓜蛋白酶水解、超高压下直接酶解等方法消减其过敏原蛋白,用间接酶联免疫吸附法检测过敏原消减效果,确定消减过敏原的条件。结果表明:采用超高压法处理,其最佳条件为压力150MPa、温度45℃、保压时间35min,产物抗原抗体反应的OD4 92 nm值为0.1997;高压结合木瓜蛋白酶水解法最佳条件为:350MPa、温度45℃、保压时间20min,产物抗原抗体反应的OD492 nm值为0.0492;超高压下直接用木瓜蛋白酶处理,其最佳条件为:压力300MPa、温度45℃、保压时间35min,产物抗原抗体反应的OD4 92 nm值为0.05。由此可见,高压对过敏原蛋白有消减作用,先高压再水解和超高压下直接酶处理对过敏原的消减效果更好。

超高压结合酶法消减南美白对虾虾肉中的过敏原

以虾肉为原料,研究超高压对酶法消减南美白对虾虾肉过敏原的强化作用。将南美白对虾去头、去尾、去壳、去肠线后用匀浆机匀浆,制成虾肉酱,分别采用超高压法、超高压处理后再用木瓜蛋白酶水解、超高压条件下直接酶解的方法消减其过敏原,用间接酶联免疫吸附法检测过敏原消减效果,确定消减过敏原的条件。结果表明:采用超高压法处理,其最佳条件为:压力200MPa、温度40℃、保压时间35min,此条件下产物与抗体反应的OD4 92 nm值为0.1986;先超高压处理再用木瓜蛋白酶水解,其水解的最佳条件为:底物质量浓度10g/100mL、温度60℃、酶与底物质量比1:200,此条件下产物与抗体反应的OD492nm值为0.0487;超高压条件下直接用木瓜蛋白酶处理,其最佳条件为:压力300MPa、温度40℃、保压时间35min,产物与抗体反应的OD492 nm值为0.0516。由此可见,超高压处理对南美白对虾过敏原有消减作用,先超高压处理再用木瓜蛋白酶水解和超高压条件下直接酶处理对过敏原的消减效果更好。

凡纳滨对虾主要过敏原鉴定及酶法消减技术的研究

以凡纳滨对虾为研究对象,用免疫印迹法检测其主要过敏原蛋白组分;用胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶对凡纳滨对虾水溶性蛋白水解,消减过敏原。并且通过间接酶联免疫吸附实验和致敏豚鼠全身免疫实验对过敏原消减情况进行检测,确定酶法消减过敏原条件。结果表明,凡纳滨对虾的主要过敏原为99、33、19kD以及14kD的蛋白质组分。胰蛋白酶最佳水解条件为:pH8.0,酶与底物比1:100(m/m,下同),45℃,底物质量浓度3g/100mL,水解时间3h;木瓜蛋白酶最佳水解条件为pH6.5,酶与底物比1:100,60℃,底物质量浓度3g/100mL,水解时间3h;菠萝蛋白酶最佳水解条件:pH7.5,酶与底物比1:100,55℃,底物质量浓度5g/100mL,水解时间3h。并且胰蛋白酶水解产物和木瓜蛋白酶水解产物对致敏豚鼠的全身免疫实验安全性很好。

凡纳滨对虾过敏原酶法消减技术的研究

以凡纳滨对虾为研究对象,用胰蛋白酶、木瓜蛋白酶对凡纳滨对虾虾肉水解,消减其过敏原。通过间接酶联免疫吸附实验对过敏原消减情况进行检测,以492nm波长处的OD值为指标确定最佳水解条件。结果表明:胰蛋白酶最佳水解条件为:pH8.0、酶与底物质量比1:100、水解温度45℃、底物质量浓度5g/100mL、水解时间3h,水解物OD值为0.085;木瓜蛋白酶最佳水解条件为pH6.5,酶与底物质量比1:100、水解温度为60℃、底物质量浓度5g/100mL、水解时间3h,水解物OD值为0.049。

高压结合酶法消减南美白对虾虾仁致敏性

以南美白对虾虾仁为原料,研究高压结合酶法对虾仁过敏原致敏性的消减作用。将南美白对虾去头去尾去壳去肠线后,采用超高压法和高压结合酶法消减其致敏性,用间接酶联免疫吸附法检测致敏性消减效果,确定消减条件。结果表明:采用超高压法处理,在压力100 MPa、温度25℃、保压时间15 min的条件下,虾仁过敏原的致敏性降低了67.09%,且与处理过程中蛋白溶出量有关;采用高压结合酶法处理,在盐水质量浓度1 g/100 mL、酶与虾仁质量比1∶130、压力450 MPa、温度40℃、保压时间55 min的条件下,虾仁过敏原的致敏性降低了86.58%。由此可见,高压处理对虾仁过敏原的致敏性有消减作用,高压结合酶法的消减效果更好。

超高压处理对消减乳源酪蛋白抗原性影响的体外模拟研究

目的:研究超高压结合不同模拟胃肠消化对于消减乳源酪蛋白抗原性的影响。方法:以乳源酪蛋白为研究对象,采用不同的压力、温度、保压时间、超高压次数来处理酪蛋白,并对处理后的酪蛋白进行模拟成人、婴儿胃肠消化,用间接酶联免疫吸附法来检测经过处理后酪蛋白过敏原消减效果,并且使用正交设计确定消减酪蛋白过敏原最优处理条件组合。结果:在相同超高压处理条件下,对酪蛋白进行模拟成人、婴儿胃肠消化环境,其结果显示成人比婴儿胃肠消化后酪蛋白过敏原消减的效果更好;高压结合模拟成人胃肠消化的最佳条件组合是:350 MPa、温度30℃、保压时间15 min、高压3次,抑制率为22.67%;高压结合模拟婴儿胃肠消化的最佳条件组合是:350 MPa、温度30℃、保压时间20 min、高压1次,抑制率为39.95%。结论:高压结合不同胃肠消化后都可以消减酪蛋白过敏反应,而且结合成人胃肠消化比结合婴儿胃肠消化对过敏原的消减效果更好。