过氧乙酸-TAE缓冲液对硫修饰DNA切割条件的优化

用乙酸和过氧化氢反应生成的过氧乙酸(PAA)辅配三羟甲基氨基甲烷-乙酸-EDTA(TAE,pH7.5)对硫修饰DNA的切割条件进行了优化.用6 mmol/L的PAA-TAE处理硫修饰基因组和质粒DNA,30 min可使降解程度达到最大饱和.用60 mmol/L的PAA-TAE经20 h处理低熔点琼脂糖包埋的菌丝体DNA,得到最佳切割效果.用PAA-TAE验证了一株在脉冲场凝胶电泳过程中基因组DNA降解的Salmonella菌株的Dnd表型;同时验证其质粒激活降解与已经验证的Streptomyces lividans质粒激活降解一样为位点专化性硫修饰.

三羟甲基氨基甲烷-乙二胺四乙酸缓冲液联合胰蛋白酶溶解草酸钙结石的研究

目的 探讨三羟甲基氨基甲烷-乙二胺四乙酸（TE）缓冲液联合胰蛋白酶溶解草酸钙结石的有效性与安全性.方法 收集10例患者结石成分主要为草酸钙的结石、溶石剂乙二胺四乙酸（EDTA）、TE溶液或EDTA、TE溶液联合胰蛋白酶分别溶解草酸钙结石,应用原子光谱吸收法检测溶液中钙离子浓度,电子天平称量结石溶解质量,扫描电镜观察结石表面结构变化,膀胱灌注1周观察溶石剂对黏膜的损伤程度.结果 TE缓冲液联合胰蛋白酶组钙离子浓度[（667.96±46.24） μg/L]明显高于其他组[（414.95 ±50.04）、（503.42±57.16）、（439.48±57.21） μg/L],差异有统计学意义（P＜0.05）,电镜下结石晶体结构间距最大,基质溶解多.光镜下TE缓冲液或胰蛋白酶均对黏膜无损伤.结论 TE缓冲液联合胰蛋白酶溶解草酸钙结石效果较好,对组织无损伤,有望进入临床试验,使化学溶石联合手术治疗成为可行性治疗选择.