针刺足三里和关元穴对衰老小鼠睾丸组织抗氧化作用和超微结构的影响

目的:通过对衰老小鼠足三里和关元穴进行针刺,观察针刺对睾丸抗氧化功能的影响。方法:实验于2003-06/08在黑龙江中医药大学实验中心(省级重点实验室)完成。①实验动物:选用雄性清洁级昆明种小鼠50只,其中青年组40只,2月龄,老年组10只,20～24月龄。将青年小鼠数字表法随机分为4组,空白组、模型组、生理盐水组、针刺组,每组10只。设10只老年小鼠为老年对照组。各组小鼠常规喂养1周后,模型组:每天颈背部皮注射5g/LD-半乳糖0.5mL/只,持续6周。针刺组:每天颈背部皮注射5g/LD-半乳糖0.5mL/只,每天清晨手持小鼠,使其处于仰卧位,用0.5寸长毫针(1cm),在小鼠的关元穴进针3～5mm,双侧足三里穴进针5～7mm,采用补法,留针15min,持续6周。生理盐水组:每天颈背部皮下注射0.5mL生理盐水/只,持续6周。②空白组和老年对照组再常规喂养6周。③针刺结束24h后脱颈椎处死小鼠,取出睾丸组织,按照由南京建成生物工程研究所提供的相应试剂盒操作,通过测量各样品吸光度(A值)计算小鼠睾丸一氧化氮,一氧化氮合酶,超氧化物歧化酶,过氧化氢酶,过氧化脂质,丙二醛各项指标含量。结果:昆明种青年小鼠40只和老年小鼠10只均进入结果分析。①干预42d后,各组小鼠睾丸组织中一氧化氮,一氧化氮合酶,超氧化物歧化酶,过氧化氢酶活性比较:模型组、老年对照组明显低于空白组、生理盐水组、针刺组(P<0.01);针刺组与空白组、生理盐水组比较差异无显著性意义(P>0.05)。②干预42d后,过氧化脂质、丙二醛含量比较:模型组和老年对照组相比差异无显著性意义(P>0.05);针刺组明显低于模型组、老年对照组(P<0.01);模型组、老年对照组明显高于针刺组、空白组、生理盐水组(P<0.01)。③干预42d后睾丸超微结构电镜结果:模型组支持细胞间隙增宽,核周隙增大,并且出现细胞内外水肿的现象。老年对照组中出现支持细胞连接消失,细胞水肿的现象。空白组小鼠的支持细胞的缝隙连接紧密。生理盐水组和空白组、针刺组之间未见差别。结论:针刺足三里和关元穴能提高致衰小鼠睾丸组织中一氧化氮、一氧化氮合酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶的活性,降低过氧化脂质、丙二醛的含量;并能明显改善小鼠睾丸组织的超微结构,从而延缓睾丸的衰老进程。

高氧预适应后大鼠抗氧化酶活性及肺组织的变化(英文)

背景:连续高浓度吸氧可以提高大鼠抗氧化酶,同时对肺产生损伤作用。目的:观察间断、高浓度吸氧对大鼠抗氧化酶活性及肺组织的影响。设计:完全随机设计,对照实验。单位:解放军总医院老年心内科和生化科。材料:实验于2002-01/2002-05在海军总医院高压氧科和解放军总医院生化科内完成。选用健康Wister大鼠10只,体质量200～250g,雌雄不拘。随机将大鼠分为2组,每组5只。方法:对照组大鼠在室内环境喂养7d。高氧预适应组动物放入高压氧仓内,每日吸80%～85%的氧气(101.325kPa)6h,连续7d。实验结束后取大鼠肺称肺湿重。并取肺组织0.4g,在冰浴上制成匀浆,取上清液采用化学发光法分别测定超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶活性。将肺组织采用30g/L戊二醛固定,制成切片后电镜下观察肺脏超微结构。主要观察指标:①两组大鼠肺湿重及肺组织超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶活性比较。②肺组织超微结构改变。结果:大鼠10只均进入结果分析。①肺组织超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶活性:高氧预适应组均明显高于对照组[(185.10±1.92)%/g,(90.50±4.17)nkat/g,(4.38±0.18K/g;(95.15±1.43)%/g,(20.17±2.17)nkat/g,(1.10±0.19)K/g,t=-84.016,-33.488,-28.023,P<0.01]。②大鼠肺湿重:高氧预适应组与对照组相近[(1.32±0.07),(1.30±0.03)g,P>0.05],说明高氧预适应组肺内液体没有增加。③肺组织超微结构:高氧预适应组肺组织基膜完整、厚度均匀一致,血管内皮细胞完整,Ι型上皮细胞无破坏。结论:间断、高浓度吸氧能提高大鼠肺内抗氧化酶活性,对大鼠肺无明显的损伤作用。

阿托伐他汀对内皮前体细胞过氧化损伤的保护作用

目的:观察阿托伐他汀对体外培养猪内皮前体细胞过氧化损伤的保护作用。方法:体外培养猪内皮前体细胞,将细胞分为3组,组1为对照组(培养液常规培养,不加处理因素),组2为过氧化氢组(培养液加入浓度为100μmol/L过氧化氢),组3为阿托伐他汀组(预先给予阿托伐他汀1μmol/L,后加入浓度为100μmol/L过氧化氢),测定细胞增殖活力(MTT法)、乳酸脱氢酶(LDH)活性、丙二醛(MDA)含量及细胞凋亡率。结果:100μmol/L过氧化氢使细胞增殖活力下降,使LDH、MDA含量增加,细胞凋亡率上升,1μmol/L阿托伐他汀可减弱上述改变。结论:过氧化氢可引起内皮前体细胞过氧化损伤,阿托伐他汀对内皮前体细胞过氧化损伤具有保护作用。

针刺足三里和关元穴对老年大鼠脑心肾组织中一氧化氮合酶和抗氧化系统的影响

目的:观察针刺足三里、关元穴对老年大鼠脑心肾组织中一氧化氮合酶、抗氧化系统中谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶以及脂褐质变化的影响,探讨针刺的抗氧化作用。方法:实验于2002-06/08在为黑龙江中医药大学实验中心完成。①选用雄性清洁级Wistar老年大鼠20只,20月龄;青年大鼠雄性10只,10月龄。将老年大鼠随机分为2组:老年针刺组和老年对照组,每组10只。设10只青年大鼠为青年对照组。老年针刺组:四肢捆绑,固定在固定架上。采用多能脉冲电疗仪每日针刺双侧足三里穴,通电留针15min,采用连续波,频率3次/s,强度以针柄颤动,但能使动物不挣扎嘶叫,保持安静为度。关元穴留针15min。②老年对照组和青年对照组:只做相同捆绑处理15min。3组连续干预28d。③于最后一次针刺24h后处死大鼠。迅速取出脑、心、肾组织,制成组织匀浆,按照由南京建成生物工程研究所提供的相应试剂盒操作,通过测量各样品吸光度(A值)计算脑、心、肾组织中一氧化氮合酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶以及脂褐质各项指标含量。④计量资料差异比较采用t检验和方差分析。结果:Wistar老年大鼠20只和青年大鼠10只均进入结果分析。①一氧化氮合酶活性:干预28d后,各年龄组大鼠心组织中最高,其次为脑、肾。老年针刺组脑、心、肾组织中明显高于老年对照组(P<0.01),老年对照组、老年针刺组脑、心、肾组织中明显低于青年对照组(P<0.01)。②谷胱甘肽过氧化物酶活性:干预28d后,老年针刺组脑、心、肾组织中明显高于老年对照组(P<0.01);老年对照组、老年针刺组脑、心、肾组织中明显低于青年对照组(P<0.01)。③过氧化氢酶活性活性:干预28d后,各组脑组织中最高,其次心、肾。老年针刺组脑、心、肾组织中明显高于老年对照组(P<0.01);老年对照组、老年针刺组脑、心、肾组织中明显低于青年对照组(P<0.01)。④脂褐质含量:干预28d后,老年针刺组脑、心、肾组织明显低于老年对照组(P<0.01);老年对照组、老年针刺组脑、心、肾组织明显高于青年对照组(P<0.01)。结论:针刺足三里和关元穴能提高脑、心、肾组织中一氧化氮合酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶的活性,降低脂褐质的含量,能起到抗氧化作用。

Cloning and Differential Gene Expression of Two Catalases in Suaeda salsa in Response to Salt Stress

Two different cDNA clones (Sscat1 and Sscat2) encoding catalase, the primary important H2O2-scavenging enzyme, were isolated from a AZap-cDNA library constructed from a 400 mmol/L NaCl-treated library of Suaeda salsa ( L.) Pall aerial tissue. Sscat1 (1.7 kb) contains a full open reading frame of 492 amino acids and Sscat2 (1.1 kb) is a partial clone. BLAST analysis indicates that the two clones share 71.9% identity in nucleotide sequence and 75% identity in deduced amino acid sequence within the last 287 amino acid residues of Sscat1. Southern blotting analysis showed that Sscat1 is multicopy in S. salsa genome, while Sscat2 is a single copy gene. Northern blotting analysis showed a rapid increase in the steady-level of both genes in roots after 48 It salt treatment, but only Sscat1 was induced in salinity treated leaves. Time-course analysis carried out in leaves confirmed that Sscat1 was induced by salt stress, in contrast to Sscat2. These implied that the expression of Sscat1 and Sscat2 genes are differentially regulated in S. salsa. The activity of total catalase is dramatically increased in response to salt stress.