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过表达OsCatC基因水稻的获得及其耐盐性机理分析
被引量:
5
1
作者
邓勇
刘聪
+3 位作者
田野
刘聪美
刘选明
林建中
《西北植物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第1期1-8,共8页
过氧化氢酶C(Catalase C,CatC)作为重要的抗氧化酶,在水稻发育和胁迫响应方面起重要作用。为了探究CatC在盐胁迫响应中的功能及其作用机制,该研究构建了OsCatC过表达转基因水稻,并比较了其耐盐性和相关抗逆生理指标的变化。结果表明:(1...
过氧化氢酶C(Catalase C,CatC)作为重要的抗氧化酶,在水稻发育和胁迫响应方面起重要作用。为了探究CatC在盐胁迫响应中的功能及其作用机制,该研究构建了OsCatC过表达转基因水稻,并比较了其耐盐性和相关抗逆生理指标的变化。结果表明:(1)成功构建过量表达载体pCUbi1390-OsCatC-Flag,并经农杆菌介导的愈伤组织转化获得了30个独立转基因株系(T0),Western blot鉴定T1代幼苗共获得2个OsCatC过表达株系(OE-10、OE-18);qRT-PCR分析发现,OE-10和OE-18株系的OsCatC转录水平显著高于野生型(WT),证明OsCatC基因已成功过表达于转基因株系(OE-10、OE-18)中,且能正常翻译为融合蛋白CatC-Flag。(2)正常水培条件下,OE-10和OE-18与WT的水稻幼苗长势无明显差异,200 mmol·L-1 NaCl处理7 d后再恢复水培10 d时,OE-10和OE-18幼苗的存活率为20%~25%,而WT幼苗绝大部分则干枯死亡,存活率仅为5%左右。(3)与WT相比,OsCatC过表达水稻(OE-10和OE-18)幼苗的耐盐性显著增强,其盐胁迫下的相对电导率、丙二醛和H_(2)O_(2)含量显著降低,过氧化氢酶活性显著升高;4μmol·L^(-1)甲基紫精(MV)处理7 d后,OE-10和OE-18生长受抑制程度显著小于WT,且幼苗的长度均显著大于WT,表现出较强的氧化胁迫耐受性。研究发现,CatC主要通过降解盐胁迫下过量积累的H_(2)O_(2),减轻氧化损伤,从而提高水稻的耐盐性,证明过表达OsCatC能显著提高水稻对盐胁迫的耐受性,且OsCatC是一个非常好的水稻耐盐候选基因。
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关键词
水稻
过氧化氢酶c
盐胁迫
氧化
胁迫
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职称材料
沙眼衣原体Ahpc蛋白的原核表达、纯化及活性分析
被引量:
1
2
作者
李冉辉
杨晓春
+1 位作者
游晓星
李忠玉
《基因组学与应用生物学》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第9期3795-3800,共6页
本研究根据Ct Ahpc基因序列设计特异性引物,以Ct DNA为模版PCR扩增Ahpc基因到大小为585 bp,将其连接到p ET28a获得重组质粒p ET28a-Ahpc,将该质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)获得重组菌BL/p ET28a-Ahpc,利用IPTG诱导重组Ahpc蛋白表达,目的...
本研究根据Ct Ahpc基因序列设计特异性引物,以Ct DNA为模版PCR扩增Ahpc基因到大小为585 bp,将其连接到p ET28a获得重组质粒p ET28a-Ahpc,将该质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)获得重组菌BL/p ET28a-Ahpc,利用IPTG诱导重组Ahpc蛋白表达,目的蛋白分子量大小约为26 k D。利用Ni-NAT亲和层析法纯化得到的重组Ahpc蛋白。氧化铁二甲酚橙法检测发现Ahpc蛋白能够分解双氧水和叔丁基过氧化氢,具有分解过氧化合物的活性。测定重组大肠杆菌在百草枯所致氧化胁迫下的生长曲线,发现表达Ahpc蛋白的重组菌的生长情况比对照好。本研究成功表达和纯化得到沙眼衣原体Ahpc蛋白并测定其活性,为解析沙眼衣原体的抗氧化机制提供实验证据。
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关键词
沙眼衣原体
烷基
过氧化氢
换原
酶
c
蛋白
基因克隆
原核表达
原文传递
题名
过表达OsCatC基因水稻的获得及其耐盐性机理分析
被引量:
5
1
作者
邓勇
刘聪
田野
刘聪美
刘选明
林建中
机构
湖南大学生物学院植物功能基因组学和发育调控湖南省重点实验室
出处
《西北植物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第1期1-8,共8页
基金
国家自然科学基金(31571635,31871595)
湖南省科技重大专项(2018NK1010)
+3 种基金
湖南省自然科学基金(2020JJ4004)
长沙市科技计划(kq1801001)
杂交水稻国家重点实验室(湖南杂交水稻研究中心)开放课题(2019KF02)
广西水稻遗传育种重点实验室开放课题(2018-05-Z06-KF05)。
文摘
过氧化氢酶C(Catalase C,CatC)作为重要的抗氧化酶,在水稻发育和胁迫响应方面起重要作用。为了探究CatC在盐胁迫响应中的功能及其作用机制,该研究构建了OsCatC过表达转基因水稻,并比较了其耐盐性和相关抗逆生理指标的变化。结果表明:(1)成功构建过量表达载体pCUbi1390-OsCatC-Flag,并经农杆菌介导的愈伤组织转化获得了30个独立转基因株系(T0),Western blot鉴定T1代幼苗共获得2个OsCatC过表达株系(OE-10、OE-18);qRT-PCR分析发现,OE-10和OE-18株系的OsCatC转录水平显著高于野生型(WT),证明OsCatC基因已成功过表达于转基因株系(OE-10、OE-18)中,且能正常翻译为融合蛋白CatC-Flag。(2)正常水培条件下,OE-10和OE-18与WT的水稻幼苗长势无明显差异,200 mmol·L-1 NaCl处理7 d后再恢复水培10 d时,OE-10和OE-18幼苗的存活率为20%~25%,而WT幼苗绝大部分则干枯死亡,存活率仅为5%左右。(3)与WT相比,OsCatC过表达水稻(OE-10和OE-18)幼苗的耐盐性显著增强,其盐胁迫下的相对电导率、丙二醛和H_(2)O_(2)含量显著降低,过氧化氢酶活性显著升高;4μmol·L^(-1)甲基紫精(MV)处理7 d后,OE-10和OE-18生长受抑制程度显著小于WT,且幼苗的长度均显著大于WT,表现出较强的氧化胁迫耐受性。研究发现,CatC主要通过降解盐胁迫下过量积累的H_(2)O_(2),减轻氧化损伤,从而提高水稻的耐盐性,证明过表达OsCatC能显著提高水稻对盐胁迫的耐受性,且OsCatC是一个非常好的水稻耐盐候选基因。
关键词
水稻
过氧化氢酶c
盐胁迫
氧化
胁迫
Keywords
Oryza sativa L.
c
atalase
c
(
c
at
c
)
salt stress
oxidative stress
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
沙眼衣原体Ahpc蛋白的原核表达、纯化及活性分析
被引量:
1
2
作者
李冉辉
杨晓春
游晓星
李忠玉
机构
南华大学病原生物学研究所
湖南省分子靶标新药研究协同创新中心
邵阳学院附属医院检验科
出处
《基因组学与应用生物学》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第9期3795-3800,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(81102230
31470277)
+3 种基金
特殊病原体防控湖南省重点实验室资助项目(湘科计字[2014]5号)
湖南省高校创新平台开放基金(No.13K081)
湖南省科技计划项目(No.2015JC3087)
衡阳市科技局项目(2015KS11)共同资助
文摘
本研究根据Ct Ahpc基因序列设计特异性引物,以Ct DNA为模版PCR扩增Ahpc基因到大小为585 bp,将其连接到p ET28a获得重组质粒p ET28a-Ahpc,将该质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)获得重组菌BL/p ET28a-Ahpc,利用IPTG诱导重组Ahpc蛋白表达,目的蛋白分子量大小约为26 k D。利用Ni-NAT亲和层析法纯化得到的重组Ahpc蛋白。氧化铁二甲酚橙法检测发现Ahpc蛋白能够分解双氧水和叔丁基过氧化氢,具有分解过氧化合物的活性。测定重组大肠杆菌在百草枯所致氧化胁迫下的生长曲线,发现表达Ahpc蛋白的重组菌的生长情况比对照好。本研究成功表达和纯化得到沙眼衣原体Ahpc蛋白并测定其活性,为解析沙眼衣原体的抗氧化机制提供实验证据。
关键词
沙眼衣原体
烷基
过氧化氢
换原
酶
c
蛋白
基因克隆
原核表达
Keywords
c
hlamydia tra
c
homatis
Alkyl hydroperoxide redu
c
tase subunit
c
protein
Gene
c
lone
Prokaryoti
c
expression
分类号
R374.1 [医药卫生—病原生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
过表达OsCatC基因水稻的获得及其耐盐性机理分析
邓勇
刘聪
田野
刘聪美
刘选明
林建中
《西北植物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021
5
下载PDF
职称材料
2
沙眼衣原体Ahpc蛋白的原核表达、纯化及活性分析
李冉辉
杨晓春
游晓星
李忠玉
《基因组学与应用生物学》
CAS
CSCD
北大核心
2017
1
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