饲料中添加α-酮戊二酸对草鱼热休克蛋白70和过氧化物酶体增殖物激活受体γmRNA表达的影响

本试验旨在探讨饲料中添加α-酮戊二酸(AKG)对草鱼热休克蛋白70(HSP70)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)mRNA表达的影响。选取平均体重为(35.66±0.39)g的健康草鱼450尾,随机分为5组(每组3个重复,每个重复30尾鱼):对照组饲喂基础饲料,试验组分别饲喂以0.25%、0.50%、0.75%、1.00%AKG等量替换基础饲料中次粉的试验饲料。试验期为60 d,试验结束后采用实时荧光定量PCR方法检测草鱼肝胰脏、鳃、肾脏及脾脏中HSP70和PPARγmRNA的相对表达量。结果表明:HSP70和PPARγmRNA的相对表达量在不同组织中存在差异,二者均在肾脏中高度表达,HSP70 mRNA的相对表达量在肾脏、肝胰脏、脾脏、鳃中依次降低,而PPARγmRNA的相对表达量在肾脏、肝胰脏、鳃、脾脏中依次降低。饲料中添加AKG显著或极显著影响HSP70和PPARγmRNA在鳃、肾脏、脾脏中的表达以及PPARγmRNA在肝胰脏中的表达(P<0.05或P<0.01)。与对照组相比,1.00%AKG组鳃中HSP70、PPARγmRNA的相对表达量显著或极显著增加(P<0.05或P<0.01),0.75%AKG组脾脏中HSP70、PPARγmRNA的相对表达量显著或极显著增加(P<0.05或P<0.01),各AKG添加组肾脏中HSP70、PPARγmRNA的相对表达量均显著降低(P<0.05);0.25%AKG组肝胰脏中PPARγmRNA的相对表达量极显著高于其他各组(P<0.01),但肝胰脏中HSP70 mRNA的相对表达量在各组间差异不显著(P>0.05)。综合以上结果,建议草鱼(体重在35 g左右)饲料中AKG的添加量为0.75%。

沙立度胺单独及联合多柔比星对人肝癌细胞株HepG2过氧化物酶体增殖物激活受体γ、环氧合酶-2表达的影响

目的:观察沙立度胺(Thalidomide,Tha)单独及联合多柔比星(Doxorubicin)对人肝癌细胞株HepG2细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)、环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)表达的影响。方法:常规培养人肝癌细胞株HepG2并随机分成4组:空白对照组,沙立度胺组(200mg/L),多柔比星组(1.0mg/L),联合用药组(沙立度胺200mg/L+多柔比星1.0mg/L),分别作用于HepG2细胞12、24、48、72h后,应用免疫细胞化学法观察PPARγ、COX-2表达的影响。结果:沙立度胺单独及联合多柔比星可上调PPARγ,并降低COX-2表达,与对照组及多柔比星组差异有统计学意义(P<0.05)。结论:沙立度胺单独及联合多柔比星对人肝癌细胞株PPARγ、COX-2表达有明显作用,可能是沙立度胺抗肿瘤机制之一。

过氧化物酶体增殖物激活受体-γ脑缺血抗炎神经保护作用机制与中药研究新思路

缺血性脑损伤是指以脑循环血流量减少为特征的中枢神经系统疾病，脑缺血炎症反应是其重要病理机制之一。脑缺血后，缺血区产生的具有致炎作用的细胞因子诱导多种粘附分子的表达，并进一步促进白细胞的浸润，产生炎症反应，加重脑损伤。因此。干预缺血性卒中炎症反应的某些环节，有可能成为治疗脑梗死新的有效途径。新近发现，

人过氧化物酶体增殖物激活受体γ-胰高血糖素样肽-1表达载体的构建

胰岛素抵抗和胰岛素分泌缺陷在2型糖尿病发病过程中占据着重要地位。针对既能减轻胰岛素抵抗、又可增加胰岛素分泌的药物研究对于2型糖尿病及其并发症的治疗具有非常重要的意义。

含人过氧化物酶体增殖物激活受体δ基因高效真核表达载体的构建及其意义

目的构建高效表达人过氧化物酶体增殖物激活受体δ(hPPARδ)的真核表达载体,为hPPARδ受体功能和基于hPPARδ受体靶点的药物筛选提供分子研究平台。方法采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),从HepG2细胞总RNA克隆hPPARδ全长基因,与经BamHI、SalI相同双酶切的pIRES2-EGFP载体连接,构建重组质粒phPPARδ-IRES2-EGFP,经酶切及基因测序鉴定重组质粒中hPPARδ基因的完整性和忠实性;荧光显微镜观察重组质粒转染的293细胞GFP报告基因表达强度,并对转染细胞hPPARδ的表达进行荧光定量PCR和免疫细胞化学检测。结果经酶切和测序证实重组质粒构建正确,并在转染的293细胞中获得hPPAR6的高效表达。结论成功构建phPPARδ-IRES2-EGFP重组质粒。

溃疡性结肠炎患者肠黏膜内过氧化物酶体增殖物激活受体γ和环氧合酶-2的表达及意义

溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）的病因和发病机制目前尚不清楚，可能是由多种因素（如遗传、环境，尤其是肠道菌群）之间相互作用，在遗传易感宿主通过异常的黏膜免疫反应引起肠道炎性反应。过氧化物酶体增殖物激活受体（peroxisome proliferator activated receptor，PPAR）-γ属于核受体超家族成员，其在脂代谢、糖代谢、细胞增殖分化等方面发挥重要作用。近年来研究表明，PPAR-γ也参与炎性反应、免疫应答调控，在抑制炎性反应因子和炎性反应过程中起重要作用，与某些炎性反应相关疾病如炎症性肠病、动脉粥样硬化等发病机制密切相关。环氧合酶（cyclooxygenase，COX）是花生四烯酸代谢过程中的限速酶，催化花生四烯酸生成一系列炎性介质，包括前列腺素和血栓素，在炎性反应性疾病中起着重要作用。为此，本文研究了COX-2和PPAR-γ在UC中的表达及其相互之间的关系。

PPAR-γ受体与急性肺损伤

过氧化物酶体增殖物激活受体 γ(PPAR γ)作为一种核转录因子,能与其特异性配体结合,在转录水平上调控多种基因表达。研究证实PPAR γ通过抑制NF κB、AP 1和STATs等炎症信号转导途径,发挥抗炎作用。现就PPAR γ的分子结构、活性调节、抗炎作用机制以及PPAR γ配体对急性肺损伤的保护作用作一综述。

过氧化物酶体增殖物激活受体-γ激动剂在骨代谢中作用的研究进展

过氧化物酶体增殖物激活受体-γ（peroxisome proliferator-activated receptor，PPAR）是一种核激素受体，最常见的PPA聃激动剂是天然的15．脱氧前列腺素J2（15d—PGJ2）和人工合成的噻唑烷二酮类降糖药物。近年来，关于PPAR叫激动剂对骨代谢的影响报道不一。有学者认为PPAR叫激动剂会使骨髓间充质干细胞（mesenehymal stem cells，MSCs）向脂肪细胞分化，使造血干细胞（hematopoietic stem cells，HSCs）向破骨细胞前体细胞分化，而使MSCs向成骨细胞分化的方向受阻，造成骨质疏松[1]；也有学者认为PPAR-γ激动剂可抑制核因子-KB受体活化因子配体（1igand of receptor activator of NF-KB，RANKL）、肿瘤坏死因子（tumornecrosisfactor，TNF）-α、巨噬细胞集落刺激因子（macrophagecolonvstimutatingfactor，M-CSF）等介导的破骨细胞分化，很有希望被应用于治疗炎症性骨吸收疾病刚；故而，PPAR-γ激动剂对骨代谢影响，尤其是噻唑烷二酮类降糖药对骨代谢的影响备受争议，全方位地了解PPAR-γ激动剂对骨代谢的作用及其机制对于更好地防治骨质疏松具有重要的意义，为此本文将从如下几方面对其作一综述。

PPAR-γ在兔动脉粥样硬化模型中的表达及替米沙坦的干预作用

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(peroxisome proliferator-activated receptor-γ,PPAR-γ)在兔动脉粥样硬化模型中的表达,以及替米沙坦的干预作用。方法32只雄性日本大耳白兔随机分为高脂饮食组(A组)、高脂饮食+替米沙坦组(B组)、高脂饮食+氯沙坦(C组)和正常饮食组(D组)四组,每组8只。各组分别在喂养16周末时处死,称重,免疫组化法检测PPAR-γ,全自动生化分析仪检测血脂的表达水平。结果PPAR-γ的表达水平A、B组分别与C、D有显著差异(P<0.01)。B组PPAR-γ表达与A组无显著差异(P>0.05)。B组总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)和甘油三酯(TG)水平与A、C、D组差异显著(P<0.01);C组和A组差异无显著性(P>0.05)。体重B、D组分别与A、C组有显著差异(P<0.01)。结论PPAR-γ在动脉粥样硬化模型中表达增高受多因素调节;替米沙坦具有较氯沙坦更强的抗动脉粥样硬化作用,可能和上调PPAR-γ表达的作用有关。

温阳补心汤对慢性心衰大鼠心肌线粒体能量代谢及MAPK/PPAR-γ信号通路的影响

目的观察温阳补心汤基于p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)/过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)信号通路对慢性心衰(CHF)大鼠心肌线粒体能量代谢的影响。方法在48只大鼠中随机抽取12只作为假手术组,其余运用腹主动脉缩窄法建立CHF模型,取造模成功36只大鼠,随机分为模型组、温阳补心汤组、琥珀酸美托洛尔组。温阳补心汤组和琥珀酸美托洛尔组给予相应药物,假手术组、模型组给予等量的去离子水10 mL/(kg·d),各组均每日灌胃1次。给药后8周,观察CHF大鼠各项指标变化情况。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠外周血中三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)、氨基末端B型钠尿肽原(NT-proBNP)的含量;采用彩色多普勒超声检测大鼠心室功能;采用蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测大鼠心肌组织中p38MAPK、p-p38MAPK、PPAR-γ的蛋白表达量。结果与假手术组比较,模型组大鼠ATP含量显著下降,ADP、NT-proBNP含量显著升高(P <0.01);与模型组比较,温阳补心汤组、琥珀酸美托洛尔组大鼠ATP表达升高,ADP、NT-proBNP表达下降(P <0.05)。与假手术组比较,模型组p38MAPK、p-p38MAPK蛋白表达水平明显升高(P <0.05),PPAR-γ蛋白表达水平明显下降(P <0.05);与模型组比较,温阳补心汤组、琥珀酸美托洛尔组p38MAPK、p-p38MAPK蛋白表达水平下降(P <0.05),PPAR-γ蛋白表达水平升高(P <0.05)。琥珀酸美托洛尔组与温阳补心汤组的心室功能相关指标[左心室舒末内径(LVDD)、左心室缩末内径(LVDS)、左心室射血分数(LVEF)、左心室舒张末期后壁厚度(LVPWD)、左心室收缩末期后壁厚度(LVPWS)],与模型组比较差异具有统计学意义(P <0.05)。结论温阳补心汤能改善心衰,延缓病情进展,其机制可能与p38MAPK通路被抑制及PPAR-γ通路被激活,促进线粒体合成有关。

GST-PPARγC1原核表达载体的构建、表达及抗GST-PPARγC1多克隆抗体的制备

目的在大肠杆菌中表达过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1(PPARγC1)与谷胱甘肽-S转移酶(GST)的融合蛋白,并制备抗PPARγC1的多克隆抗体。方法从肝癌细胞系HepG2提取总RNA,用RT-PCR扩增出PPARγC1cDNA的编码序列,克隆入表达载体pGEX-4T-1中,重组载体在酶切鉴定后,在大肠杆菌中经IPTG诱导表达获得GST-PPARγC1蛋白,SDS-PAGE分析表达产物。通过亲和层吸法纯化表达的GST-PPARγC1融合蛋白,并以此为抗原制备多克隆抗体。Westernblotting检测重组抗原的免疫活性。结果经测序、酶切鉴定证明,PPARγC1基因已正确插入到pGEX-4T-1中,经IPTG诱导后,表达出相对分子量为44000的融合蛋白。Westernblotting鉴定所制备的多克隆抗体可以与PPARγC1特异性结合。结论PPARγC1片段在大肠杆菌中的成功表达及制备得到的多克隆抗体,为检测PPARγC1及其在其他组织中的表达提供了一种检测途径。

过氧化物酶体增殖物激活受体-γ与非酒精性脂肪肝及2型糖尿病

非酒精性脂肪肝(NAFLD)和2型糖尿病已成为危害人类健康的重要问题。胰岛素抵抗可能是2型糖尿病与NAFLD的共同机制。过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)-γ是联系两者的桥梁。本文主要讨论PPAR-γ与NAFLD和2型糖尿病的关系以及选择性PPAR-γ调节剂(SPPARM)的临床研究进展。

辛润苦泄法对胰岛素抵抗大鼠TNF-α和PPAR-γ表达的影响

目的:研究辛润苦泄法对胰岛素抵抗大鼠肝脏和脂肪组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)表达的影响。方法:采用高糖高脂饲料喂养制作胰岛素抵抗大鼠模型,将成功造模的30只大鼠随机分为模型组、唐旨宁组和文迪雅组,每组10只。药物干预6周后,用ELISA方法定量测定血清中TNF-α水平;免疫组织化学方法检测肝脏和脂肪组织中PPAR-γ蛋白表达;RT-PCR法检测肝脏和脂肪组织中TNF-αmRNA及PPAR-γmRNA的表达。结果:高糖高脂饲料喂养6周后,模型组大鼠空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和血清胰岛素(FIN)s均明显高于对照组(P<0.01),胰岛素敏感性指数(ISI)明显低于对照组(P<0.01);药物干预6周后,与模型组比较,唐旨宁组和文迪雅组大鼠血清TNF-α显著降低(P<0.01),肝脏和脂肪组织中PPAR-γ蛋白的表达均显著增高(P<0.01,P<0.05),TNF-αmRNA表达明显减少(P<0.05,P<0.01),PPAR-γmRNA表达显著增加(P<0.01)。结论:唐旨宁能明显改善胰岛素抵抗大鼠的糖脂毒性,其作用机制可能是通过下调TNF-α、上调PPAR-γ的表达而实现的。

罗格列酮对裸小鼠移植瘤PPAR-γ表达的影响

目的探讨罗格列酮(RGZ)对裸小鼠移植瘤过氧化物酶体增殖物激素受体-γ(PPAR-γ)表达的影响。方法采用不同浓度和剂量的RGZ对荷瘤裸小鼠进行灌胃干预3周后,RT-PCR实时荧光定量检测PPAR-γ的△Ct值和表达拷贝数,测量各组瘤体体积(TV)和重量(TW),计算相对肿瘤体积(RTV)和相对肿瘤增值率(T/C%)。结果胆管癌移植瘤随RGZ剂量增高PPAR-γ的表达升高,而相对肿瘤增值率T/C%减少;高剂量组与对照组比较差异显著(P<0.001)。结论在裸小鼠移植瘤内RGZ能呈剂量依赖性地上调PPAR-γ表达。

顺9,反11-共轭亚油酸对离体培养猪肝细胞和结肠粘膜上皮细胞的影响

本试验旨在探讨顺9,反11-共轭亚油酸对离体培养猪肝细胞、结肠粘膜上皮细胞增殖、PGE2分泌和PPAR-γ基因表达的影响。试验分5个处理,对照组为DMEM/F12培养液,其他处理分别在对照组的基础上添加100μmol/L亚油酸、25、50、100μmol/L顺9,反11-共轭亚油酸;每个处理设6个重复(PPAR-γmRNA定量测定4个重复)。细胞用血清培养24h后处理,继续培养72h。检测上清PGE2分泌、细胞增殖和细胞PPAR-γmRNA拷贝数。结果表明培养液中添加顺9,反11-共轭亚油酸对肝细胞增殖和PGE2分泌都有促进作用(P<0.05),但对PPAR-γ基因表达没有影响;培养液中添加顺9,反11-共轭亚油酸对结肠粘膜上皮细胞增殖影响不显著(P>0.05),对PGE2分泌有显著的促进作用(P<0.05),25μmol/L顺9,反11-共轭亚油酸组PPAR-γmRNA拷贝数显著高于对照组(P<0.05),100μmol/L顺9,反11-共轭亚油酸组极显著高于对照组(P<0.01)。可见,在离体培养条件下,顺9,反11-共轭亚油酸对猪肝细胞和结肠粘膜上皮细胞PGE2分泌都有促进作用,只对结肠粘膜上皮细胞PPAR-γ基因表达有促进作用,这显示顺9,反11-共轭亚油酸对PPAR-γ基因表达的调控可能具有细胞类型的特异性。

PPAR-γ2单核苷酸多态性与糖化血红蛋白水平的交互作用和糖尿病性牙周炎易感性的关系

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体-γ2基因(PPAR-γ2)单核苷酸多态性(SNP)与糖化血红蛋白(HbA1c)水平的交互作用和糖尿病性牙周炎(DP)易感性的关系。方法选择2017年8月至2020年4月于保定市第一中心医院就诊的DP患者259例,其中男性138例,女性121例;年龄28~55岁,平均年龄42.98岁;体质量指数(BMI)22.42~32.13 kg/m^(2),平均BMI 27.25 kg/m^(2);吸烟64例,高血压史78例。2型糖尿病(T2DM)患者257例,其中男性124例,女性133例;年龄31~59岁,平均年龄43.31岁;BMI 22.74~29.88 kg/m^(2),平均BMI 25.87 kg/m^(2);吸烟56例,高血压史85例。选择同期接受健康体检者180例作为对照组,其中男性94例,女性86例;年龄28~60岁,平均年龄43.30岁;BMI 21.13~27.03 kg/m^(2),平均BMI 22.57 kg/m^(2);吸烟30例,高血压史69例。采用全自动生化仪检测T2DM患者HbA1c水平;采用双脱氧末端终止法检测PPAR-γ2 Pro12Ala SNP;采用多因素Logistic回归模型分析DP发生的危险因素,估算PPAR-γ2Pro12Ala SNP和HbA1c水平与DP发病风险的调整比值比(OR)和95%可信区间(95%CI);分析Pro12Ala SNP与HbA1c水平的交互作用。结果对照组、T2DM组及DP组患者HbA1c水平分别为5.12%±0.97%、7.95%±1.21%和9.12%±1.35%,组间比较差异具有统计学意义(P <0.05)。基因分型后可得纯合子Pro/Pro(P/P)型片段为224 bp、43 bp,杂合突变Pro/Ala(P/A)型片段为276 bp、224 bp、43 bp,纯合突变Ala/Ala(A/A)型片段为267 bp。Pro12Ala(PA)、Pro12Ala(AA)基因型T2DM患者患DP的风险均增加(OR=2.529,95%CI为1.637~3.498;OR=2.594,95%CI为1.645~3.856)。6.0%≤HbA1c <8.0%和HbA1c≥8.0%的T2DM患者患DP的风险明显增加(OR=2.046,95%CI为1.358~2.952;OR=3.105,95%CI为2.049~4.861),且HbA1c≥8.0%的T2DM患者患DP的风险又明显高于6.0%≤HbA1c <8.0%的T2DM患者(χ^(2)=6.087,P <0.01);HbA1c水平与Pro12Ala(PA)、Pro12Ala(AA)均存在正向交互作用(γ> 1)。结论携带Pro12Ala(PA)、Pro12Ala(AA)基因型的个体属DP高危人群,这些基因型与HbA1c水平的交互作用促进了DP的发生、发展,应当采取控制HbA1c水平或调控基因表达的措施以达到预防DP的目的。

中枢神经系统PPAR-γ在调节能量平衡中的作用

过氧化物酶体增殖物激活受体-γ（PPAR-γ）是一种核受体，可被脂质激活，诱导参与脂质和葡萄糖代谢旧关基因的表达，因此它是可将营养成分信号启动代谢程序的中介。PPAR-γ是噻唑烷二酮（TZD）类胰岛素噌敏药物的作用靶点，这种药物广泛用于治疗2型糖尿病。TZDs的一种常见副作用是体重增加。之前，

15-脱氧-△^12，14-前列腺素J2对兔耳增生性瘢痕结缔组织生长因子及胶原表达的影响

核转录因子过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPAR-γ）作为负调节信号，在组织和器官纤维化中发挥抗纤维化作用，但在增生性瘢痕中的作用尚不清楚。我们采用兔耳增生性瘢痕模型，观察PPAR-γ的配体15-脱氧-△^12,14-前列腺素J2（15d-PGJ2）对增生性瘢痕结缔组织生长因子（CTGF）及胶原表达的影响，