胃癌组织中Krüppel样因子4、过氧化物还原酶1的表达及与临床特征的关系

目的探讨胃癌组织中Krüppel样因子4(KLF4)、过氧化物还原酶1(PRDX1)的表达及与临床特征的关系。方法收集70例胃癌患者的临床资料,取其胃癌组织及癌旁组织,比较KLF4、PRDX1表达情况,分析KLF4、PRDX1阳性表达情况与临床特征的关系。结果胃癌组织中KLF4阳性表达率明显低于癌旁组织,PRDX1阳性表达率明显高于癌旁组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。不同临床分期、浸润程度、分化程度、淋巴结转移情况及远处转移情况胃癌患者的胃癌组织中KLF4阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05);不同肿瘤直径、临床分期、浸润程度、分化程度、淋巴结转移情况及远处转移情况胃癌患者的胃癌组织中PRDX1阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论胃癌组织中KLF4表达明显降低,PRDX1表达明显升高,其促进了胃癌的发生和发展,可作为判断早期胃癌预后的指标。

吸烟对口腔癌前病变细胞中过氧化物还原酶1表达及丝裂原活化蛋白激酶信号通路的影响

口腔癌是发生在口腔的恶性肿瘤的总称,包括舌癌、口底癌、软硬腭癌、上颌窦癌等以及发生于颜面部皮肤黏膜的癌症,是头颈部较为常见的恶性肿瘤之一。口腔白斑是口腔癌最为常见的癌前病变,发病率约为10.47%,单纯白斑的癌变率约为4%~17.5%,白斑合并上皮异常增生者癌变率约为36%。

过氧化物还原酶1在脑出血后的表达变化及作用

目的探讨过氧化物还原酶1(peroxiredoxin 1,Prdx1)在中枢神经系统中的细胞定位,以及脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)后Prdx1的表达变化和可能的作用机制。方法取5只8~10周龄SD大鼠脑组织灌注,冰冻切片,免疫荧光染色比较Prdx1在神经元、星形胶质细胞和小胶质细胞中的表达情况。35只8~10周龄SD大鼠按随机数字表法分为sham组、ICH 12 h组、ICH 1 d组、ICH 2 d组、ICH 3 d组、ICH 4 d组、ICH 5 d组(n=5),后5组采用自体血注射法建立ICH模型,sham组予以等量生理盐水作为对照。取各组大鼠脑组织,Western blot和qRT-PCR检测各组中Prdx1 mRNA和蛋白的表达。在HeLa细胞中转染Prdx1干扰质粒或空质粒载体,分为干扰组和对照组,并对两组HeLa细胞进行转录组测序(RNA sequencing,RNA-seq),对差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)进行GO分析,预测Prdx1在ICH中可能的作用。结果免疫荧光染色结果提示:在皮层,Prdx1主要分布于NeuN^+的神经元,而在纹状体中,Prdx1主要分布于GFAP^+的星形胶质细胞中。Western blot及qRT-PCR结果提示:Prdx1表达在ICH后3 d显著增高(P<0.05),随着时间延长,逐渐降低。RNA-seq及GO分析提示Prdx1引起的差异表达基因主要涉及在炎症反应、细胞凋亡、固有免疫反应、轴突发育等与ICH继发损伤相关的通路。结论 Prdx1在不同脑区有不同的细胞分布特点;ICH后,Prdx1升高明显,其在ICH中的可能作用机制与炎症、免疫反应、轴突发育等相关。

人过氧化物氧化还原酶-1在胃癌中的表达及其临床意义

目的探讨人过氧化物氧化还原酶-1(PRDX1)在胃癌中的表达情况及其与胃癌临床病理特征和预后之间的关系。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白质印迹法(Western Blot)检测21例胃癌与相应癌旁组织中PRDX1 mRNA和蛋白的表达水平,并应用免疫组化法检测105例胃癌和癌旁组织中PRDX1蛋白的表达水平,以分析其表达情况与临床病理特征及预后的关系。结果qRT-PCR和Western Blot检测发现,PRDX1在胃癌组织中的mRNA和蛋白的表达水平均高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组织化学检测结果表明,PRDX1蛋白水平在胃癌组织中高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。不同肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移情况、TNM分期间PRDX1蛋白表达水平差异有统计学意义(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,PRDX1蛋白的过表达与总生存时间及无病生存时间较短相关。COX多因素分析显示,PRDX1是胃癌独立的预后影响因子。结论胃癌组织中PRDX1蛋白的表达明显升高,PRDX1蛋白高表达可能促进了胃癌的发生和发展,可能做为胃癌的早期诊断及预后评估的新型生物学指标。

过氧化物氧化还原酶蛋白1在乳腺癌组织中表达及对乳腺癌细胞生长调控机制的研究

目的探讨过氧化物氧化还原酶蛋白1(PRDX1)在乳腺癌组织中的表达及对乳腺癌细胞生长调控的机制。方法选择2017年4月至2019年2月在北大医疗鲁中医院进行手术治疗的86例乳腺癌患者为研究对象,分析PRDX1表达与乳腺癌患者临床病理特征的关系。培养MCF7乳腺癌细胞株,分组转染成空白对照组、siRNA-NC组、PRDX1-siRNA转染组。检测不同组细胞增殖抑制率及凋亡率,采用Western blot检测PI3K/AKT信号通路相关蛋白表达水平。结果①PRDX1在乳腺癌及癌旁组织中的阳性率为58.1%(50/86)、23.3%(20/86)、在正常组织中的阳性率为3.7%(3/82),PRDX1在乳腺癌癌组织中的阳性率较高,且PRDX1阳性表达与乳腺癌患者的TNM分期、病理分级有关(P<0.05)。②TT检测结果显示,在24 h、48 h、72 h时,siRNA-NC组的细胞抑制率分别为1.6%、1.7%、2.4%,PRDX1-siRNA组分别为5.6%、15.3%、38.4%,PRDX1-siRNA组的细胞抑制率高于空白组与siRNA-NC组(P<0.05)。③流式细胞检测显示,空白组、siRNA-NC组、PRDX1-siRNA组的凋亡率分别为(7.7±1.3)%、(7.4±1.5)%、(25.7±4.2)%,PRDX1-siRNA的肿瘤凋亡率最高。④Western blot检测显示,与空白组相比,siRNA-NC组的PI3K蛋白、AKT蛋白表达量无明显变化,但PRDX1-siRNA组中PI3K蛋白、AKT蛋白的表达量下降(P<0.05)。结论PRDX1在乳腺癌患者中的阳性率明显提高。在MCF7乳腺癌细胞株中,抑制PRDX1表达水平可通过降低PI3K/AKT信号通路活性,促进乳腺癌细胞凋亡。

Prdx1过表达通过Nrf2/HO-1信号通路抑制氧化应激减轻自发性高血压大鼠心肌肥厚和纤维化

目的探讨过氧化物还原酶1(Prdx1)对自发性高血压大鼠心肌肥厚和纤维化的影响,并分析其作用机制。方法45只SHR大鼠随机分为模型组(SHR组)、AAV9-NC组和AAV9-Prdx1组,每组15只。另取15只Wistar Kyoto大鼠设为对照组(Control组)。各组大鼠连续给药8周,超声心动图检测大鼠心功能指标;测定大鼠平均血压以及心肌肥厚指标;HE染色和Masson染色分别观察大鼠心肌组织形态学和纤维化情况;ELISA法检测大鼠血清中氧化应激指标;qRT-PCR法检测大鼠心肌组织中Prdx1 mRNA表达水平;Western blot法检测大鼠心肌组织中Prdx1蛋白和核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)信号通路相关蛋白表达。结果与Control组比较,SHR组大鼠心肌组织中Prdx1 mRNA和蛋白表达量、左心室射血分数(EF)、左心室缩短率(FS)降低(P<0.05),大鼠平均血压、心脏质量指数(HMI)、左心室质量指数(LVMI)升高(P<0.05),心肌组织存在明显的病理损伤和胶原纤维沉积;大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性降低,丙二醛(MDA)含量升高(P<0.05);心肌组织中Nrf2、HO-1、醌氧化还原酶1(NQO1)蛋白表达量降低(P<0.05)。与SHR组比较,AAV9-Prdx1组大鼠心肌组织中Prdx1 mRNA和蛋白表达量、EF和FS升高(P<0.05),大鼠平均血压、HMI和LVMI降低(P<0.05),心肌组织损伤和心肌纤维化有所改善;大鼠血清中SOD和GSH活性升高,MDA含量降低(P<0.05);心肌组织中Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达量升高(P<0.05)。结论Prdx1过表达可减轻SHR大鼠心肌肥厚和纤维化,改善SHR大鼠心功能,其作用机制可能与激活Nrf2/HO-1信号通路、抑制氧化应激反应有关。

尼古丁上调口腔鳞状细胞癌抗氧化蛋白Prx1的表达

目的:探讨口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中抗氧化蛋白Prx1与烟草诱导的氧化应激的相关性。方法:采用RT-PCR、Western Blot方法,观察尼古丁作用相同时间(48h)不同浓度(0.1、1、10、100μmol/L)及同一浓度(1μmol/L)不同时间(24、48、72h)对Tca8113细胞Prx1mRNA及蛋白表达的影响。结果:尼古丁可诱导Tca8113细胞Prx1mRNA和蛋白表达增加。结论:Prx1表达增高可能与烟草诱导的氧化应激有相关性,在烟草诱导的OSCC发生发展中可能发挥重要作用。

Prx1高表达对人PC3前列腺癌细胞氧化损伤的作用

目的:探讨过氧化物还原酶1(Prx 1)表达增加对人肿瘤细胞抗过氧化氢毒性作用的影响。方法:构建Prx 1真核表达质粒,稳定转染培养的人PC3前列腺癌细胞,用Western blot检测Prx 1在稳定转染PC3细胞中的表达,用MTT法观察细胞的存活率。结果:Western blot分析表明,Prx 1真核表达质粒稳定转染的PC3细胞表达Prx 1显著增加;MTT分析表明,在过氧化氢浓度为0.25、0.5、1和2 mmol.L-1时,Prx 1稳定转染的PC3细胞存活率显著增加。结论:Prx 1高表达显著增强人PC3前列腺癌细胞抗过氧化氢毒性作用。

脂多糖诱导气道上皮细胞过氧化物氧化还原酶1的表达

目的探讨脂多糖（LPS）作用于气道上皮细胞后对过氧化物氧化还原酶1（prdx1）表达的影响。方法培养正常人气道上皮细胞株BEAS-2B，以0、1、10mg／LLPS作用于气道上皮细胞12h和24h后，用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测prdx1 mRNA表达；以0、0．1、0．5、1、5、10mg／L LPS作用于气道上皮细胞12h后，用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测prdx1蛋白表达。结果RT—PCR结果显示：LPS作用于细胞12h内，随着LPS作用剂量的增加，prdx1 mRNA表达增高，10mg／LLPS作用12hprdx1 mRNA表达较对照组显著增加（2．014±0．197比0．644±0．178，P〈0．05）；但随着LPS作用时间的延长，24h时prdx1 mRNA表达有所回落。Western blotting结果显示，随着LPS作用剂量的增加，prdx1蛋白表达逐渐增高，5mg／L LPS作用12h时prdx1蛋白显著高于对照组（1．069±0．175比0．328±0．010，P〈0．05），10mg／LLPS作用12h时维持在高水平（0．984±0．220）。结论10mg／L的LPS作用于BEAS-2B细胞12h后可诱导prdx1的基因和蛋白表达增加。

过氧化物氧化还原酶蛋白1对胃癌细胞凋亡、自噬的影响及其机制

目的探讨过氧化物氧化还原酶蛋白1(PRDX1)对人胃癌细胞株的影响及分子机制.方法采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测PRDX1在人胃癌细胞株SGC7901、AGS及正常胃黏膜细胞GES-1的表达.合成针对PRDX1的小干扰RNA(siRNA)并制备慢病毒载体LV-PRDX1-siRNA,转染AGS细胞.噻唑蓝(MTT)法检测细胞的活性;流式细胞术(FCM)检测各组细胞凋亡率及线粒体膜电位;Real-time PCR及Westem blot检测凋亡、自噬相关基因的mRNA和蛋白表达水平.结果 SGC7901、AGS细胞中PRDX1的mRNA(1.049±0.124、1.597±0.103)和蛋白(0.873 ±0.135、1.083±0.204)的相对表达水平明显高于GES-1细胞(mRNA:0.451 ±0.060、蛋白:0.305±0.022),差异有统计学意义(F=200.162、48.432,P<0.01).LV-PRDX1-siRNA转染AGS细胞后,细胞的凋亡率[48 h:(19.383 ±2.010)%,96 h:(26.875±4.337)%]明显高于空白对照组[48 h:(4.648±1.146)%、96 h:(8.849 ±1.361)%]、阴性病毒对照组[48 h:(5.539 ±0.778)%、96 h:(9.414±1.183)%,F=206.260、85.681,P<0.01],线粒体膜电位明显降低(F=29.508,P<0.01).LV-PRDX1-siRNA转染后AGS细胞的凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、生存素(Survivin)表达降低,bcl-2相关X蛋白(bax)表达增高(F =44.219、32.780、74.801,P<0.01),黑色素瘤凋亡抑制蛋白(Livin)变化不明显(F =0.250,P>0.05);转染后自噬相关蛋白Beclin-1、LC-3Ⅱ/LC-3 Ⅰ均明显增高(F=30.332、24.260,P<0.01).结论 PRDX1在胃癌细胞中表达增高,抑制PRDX1表达能够通过调控凋亡和自噬相关基因而促进细胞凋亡及自噬.

日本血吸虫中国大陆株过氧化物氧化还原酶1的表达及生物学功能研究

目的制备重组日本血吸虫过氧化物氧化还原酶1(rSj Prx1)蛋白,研究其生物学功能。方法采用RT-PCR方法,从日本血吸虫成虫cDNA中扩增编码Sj Prx1蛋白的基因片段,并亚克隆入表达载体pET28a(+),构建重组表达质粒Sj Prx1-pET28a,转化E.coli BL21,用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达rSj Prx1蛋白,通过镍柱亲和层析纯化rSj Prx1蛋白。采用生物化学方法分析rSj Prx1对底物H2O2进行还原的酶活性。用纯化的rSj Prx1蛋白免疫小鼠,酶联免疫法检测小鼠血清抗体水平,观察其免疫原性。通过Western blot观察rSj Prx1蛋白对血吸虫感染血清的免疫反应性。以纯化rSj Prx-1蛋白刺激巨噬细胞RAW264.7,通过流式分析观察RAW264.7细胞表面标志物CD16/32、CD206表达水平的变化,通过RT-PCR检测RAW264.7细胞内诱导型一氧化氮合酶与精氨酸酶表达水平的变化,采用细胞因子检测试剂盒分析巨噬细胞培养上清液中IL-12及IL-10水平的变化,以评价rSj Prx1蛋白的免疫调节功能。结果通过RT-PCR获得编码Sj Prx1蛋白的基因片段,并成功构建了重组表达质粒Sj Prx1-pET28a。含重组质粒Sj Prx1-pET28a的转化子细菌经IPTG诱导表达可溶性Sj Prx1蛋白。纯化的rSj Prx1蛋白具有氧化还原活性,可还原底物H2O2。rSj Prx1蛋白免疫小鼠可产生高效价的血清抗体,该蛋白能被日本血吸虫感染者血清、病兔及病鼠血清识别,而免疫血清同样可能识别来源于血吸虫成虫及虫卵的天然Sj Prx1蛋白。制备的rSj Prx1可诱导巨噬细胞高水平表达与M2型转化相关的IL-10、精氨酸及CD206。结论制备的rSj Prx1蛋白具有天然的酶学特性、抗原性和Th2型免疫调节功能,为进一步发展新的血吸虫病治疗药物和免疫调节方法奠定了基础。

血清PRDX1、HMGB1水平与急性胰腺炎患者病情严重程度及肠道屏障损伤的关系

目的探讨血清过氧化物氧还原酶1(PRDX1)、高速移率族蛋白B1(HMGB1)水平与急性胰腺炎(AP)患者病情严重程度及肠道屏障损伤的关系。方法选取197例AP患者,根据病情严重程度将患者分为轻症组(54例)、中度重症组(56例)、重症组(87例),根据肠道屏障损伤情况将患者分为肠道屏障损伤组57例、非肠道屏障损伤组140例。收集AP患者相关资料,用酶联免疫吸附试验检测血清PRDX1、HMGB1。用多因素Logistic回归分析血清PRDX1、HMGB1对AP患者肠道屏障损伤的影响;用受试者工作特征曲线分析血清PRDX1、HMGB1水平对AP患者肠道屏障损伤的评估价值。结果中度重症组、重症组血清PRDX1、HMGB1水平高于轻症组,重症组血清PRDX1、HMGB1水平高于中度重症组,比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。肠道屏障损伤组病情严重程度和降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)、PRDX1、HMGB1水平高于非肠道屏障损伤组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,中度重症AP、重症AP及PCT、CRP、PRDX1、HMGB1升高为AP患者肠道屏障损伤的独立危险因素(P均<0.05)。血清PRDX1、HMGB1联合评估AP患者肠道屏障损伤的曲线下面积为0.868,大于PRDX1、HMGB1单独评估的0.787、0.790(P均<0.05)。结论AP患者血清PRDX1、HMGB1水平升高与病情加重有关,是肠道屏障损伤的独立危险因素,二者联合检测对AP患者肠道屏障损伤有较高的评估价值。

多囊卵巢综合征患者血清HMGA1和PRDX1表达水平及临床意义

目的探究多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清高迁移率组蛋白A1(HMGA1)及过氧化物氧化还原酶蛋白1(PRDX1)的表达及其临床意义。方法选取2023年8月—2024年6月于徐州医科大学附属医院就诊的164例PCOS患者作为研究组,同时选取同一时间段内正常体检的187例健康女性作为对照组。根据体重指数(BMI)将研究组进一步细分为肥胖组(BMI≥28 kg/m^(2),n=70)和非肥胖组(BMI<28 kg/m^(2),n=94)。另选取研究组中BMI≥24 kg/m^(2)的104例患者作为减重组,减重组给予体重管理2个月后再次评估。采用酶联免疫吸附试验测定血清HMGA1及PRDX1水平,分析其与临床资料的相关性。通过受试者操作特征(ROC)曲线分析,评估血清HMGA1及PRDX1水平对PCOS的诊断价值。结果研究组血清HMGA1水平低于对照组,PRDX1水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。肥胖组血清HMGA1水平低于非肥胖组,PRDX1水平高于非肥胖组,差异有统计学意义(P<0.001)。减重组减重2个月后HMGA1表达水平高于减重前,PRDX1表达水平低于减重前,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,研究组中PRDX1水平与BMI、抗米勒管激素(AMH)、黄体生成素(LH)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和甘油三酯(TG)正相关(r>0,P<0.05),HMGA1水平与BMI、AMH、LH、HOMA-IR和睾酮(T)呈负相关(r<0,P<0.05)。ROC曲线结果显示,血清HMGA1和PRDX1单独检测的曲线下面积(AUC)分别为0.78和0.79,联合检测的AUC为0.82,联合检测高于单独检测(P<0.001)。结论PCOS患者血清中HMGA1水平下降,PRDX1水平升高,两者与糖脂代谢指标等相关。HMGA1及PRDX1联合检测对PCOS具有更高的诊断价值。

基于TCGA数据库分析Prx1在头颈部鳞状细胞癌患者组织中的表达及临床意义

目的 通过TCGA数据库在线分析工具,分析过氧化物还原酶1(peroxiredoxin1, Prx1)在头颈部鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma, HNSCC)患者组织中的表达及临床意义。方法 基于TCGA数据库,利用UALCAN分析HNSCC中Prx1的表达水平及其与患者的性别、年龄、临床分期、肿瘤病理分级及淋巴结转移之间的关系。利用UCSC Xena分析Prx1表达与HNSCC患者吸烟相关性。利用PROGgeneV2对HNSCC患者组织中Prx1表达与总生存率的相关性进行分析。结果 Prx1在HNSCC患者组织中的表达高于正常组织,Prx1高表达与HNSCC患者临床分期、肿瘤病理分级及较差预后相关,与性别、年龄、淋巴结转移无显著相关性,Prx1高表达与患者吸烟密切相关。结论 Prx1在烟草相关HNSCC的发生发展中发挥重要作用,Prx1可能是防治HNSCC的潜在生物学靶点。

Peroxiredoxin 1与EMT相关蛋白在胰腺癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨过氧化物还原酶1(Prx1)与上皮细胞间质转化(EMT)相关蛋白在胰腺癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化法分别检测Prx1、E-钙黏素(Ecadherin)、波形蛋白(Vimentin)在66例胰腺癌组织和11例正常胰腺组织中的表达,并分析三者之间的关系及与临床病理因素间的关系。结果 Prx1、E-cadherin和Vimentin分别在66例胰腺癌组织中的阳性表达率为69.70%(46/66)、40.91%(27/66)、56.06%(37/66);Prx1、E-cadherin和Vimentin分别在11例正常胰腺组织中的阳性表达率为18.18%(2/11)、90.90%(10/11)、18.18%(2/11)。Prx1、E-cadherin和Vimentin在胰腺癌组织中的表达均与TNM分期、淋巴结转移和肿瘤分化程度显著相关(P<0.05),而与性别、年龄、肿瘤大小、病变部位均无关;Prx1与神经侵犯显著相关(P<0.05),而E-cadherin和Vimentin与神经侵犯无关。Prx1的表达与Vimentin表达呈正相关(P<0.05),Prx1和Vimentin的表达均与E-cadherin表达呈负相关(P<0.05)。结论Prx1与EMT相关蛋白在胰腺癌组织中的表达呈显著相关性,并与其侵袭转移能力相关,提示Prx1的高表达可能为预测胰腺癌患者预后不良的辅助指标之一。

miR-581对结直肠癌细胞增殖与侵袭的影响及机制

目的探究miR-581对结直肠癌细胞增殖与侵袭的影响及机制。方法取处于对数生长期的结肠癌细胞株SW620、LOVO、HT29和正常结直肠细胞株FHC,将细胞分为实验组和对照组,实验组加入miR-581 mimics,对照组加入vector;采用qRT-PCR法检测不同结直肠癌细胞株SW620、LOVO、HT29和正常结直肠细胞株FHC中miR-581的表达;CCK-8、Transwell侵袭实验分别检测miR-581 mimics组和对照组结直肠癌细胞SW620增殖和侵袭能力的变化;荧光素酶报告基因验证miR-581与过氧化物氧化还原酶蛋白1(PRDX1)的相互作用关系;Western blotting法检测miR-581对SW620细胞中PRDX1表达的影响。将SW620细胞分为两组,miR-581 mimics组转染miR-581mimics,miR-581+PRDX组将PRDX1质粒与miR-581 mimics共转染,CCK-8、Transwell侵袭实验检测PRDX1干预后miR-581对SW620增殖和侵袭能力的影响。结果与结直肠癌细胞株LOVO、HT29相比,miR-581在高侵袭性细胞株SW620中表达最低;SW620细胞转染miR-581 mimics后,实验组细胞增殖能力和侵袭能力低于对照组(P均<0.05)。miR-581能与PRDX1 3'UTR特异性结合,抑制PRDX1蛋白表达;miR-581+PRDX1组细胞的增殖和侵袭能力低于miR-581 mimics组(P均<0.05)。结论 miR-581可抑制结直肠癌细胞的增殖和侵袭,其机制可能与靶向调控PRDX1有关。

口腔癌前病变细胞中尼古丁诱导α3nAChR、α7nAChR表达及与Prx1相互作用研究

目的研究口腔癌前病变细胞中尼古丁诱导α3n AChR和α7nAChR表达及与Prx1的相互作用,探讨尼古丁在口腔癌前病变中的作用机制。方法利用Discovery Studio 2016软件预测α3nAChR和α7n AChR与Prx1是否存在直接结合,在体外培养的口腔癌前病变DOK细胞中进行验证。细胞分为尼古丁组(1μmol/L尼古丁处理7 d)和对照组(无任何处理),利用Co-IP和Western Blot检测细胞中Prx1与α3nAChR或α7nAChR的结合。采用α-BTX阻断α7nAChR受体,Western Blot检测尼古丁诱导Prx1结合蛋白GTPBP4和DIRAS2的表达。结果尼古丁可诱导DOK细胞α3nAChR、α7nAChR、Prx1及其结合蛋白GTPBP4和DIRAS2表达增高。软件预测α3nAChR和α7nAChR均可能通过氢键和疏水键与Prx1直接结合,但是在DOK细胞中未检测到Prx1与α3nAChR或α7nAChR的结合。α-BTX特异性阻断α7n AChR对DOK细胞中GTPBP4和DIRAS2的蛋白水平无明显影响(P>0.05)。结论尼古丁可诱导口腔癌前病变细胞α3nAChR、α7n AChR、Prx1及其结合蛋白GTPBP4和DIRAS2表达增高;α7nAChR对Prx1的调控并非通过两者直接结合发挥作用,且亦非通过GTPBP4、DIRAS2介导完成。

Prdx1、Prdx3蛋白在卵巢浆液性肿瘤中的表达及临床意义

目的探讨过氧化物氧化还原酶蛋白1(Prdx1)、过氧化物氧化还原酶蛋白3(Prdx3)蛋白在卵巢浆液性肿瘤中的表达情况及其与临床病理特征的关系。方法选取安阳市人民医院2018年7月至2021年5月确诊的卵巢浆液性腺癌患者64例、交界性浆液性肿瘤56例、浆液性囊腺瘤80例为研究对象,通过免疫组织化学(IHC)和蛋白质印迹法(WB)检测三组标本中的Prdx1、Prdx3蛋白表达情况并分析其与卵巢浆液性腺癌患者临床病理学特征的关系。结果卵巢浆液性腺癌的Prdx1、Prdx3蛋白表达阳性率及相对表达量高于交界性卵巢浆液性肿瘤和浆液性囊腺瘤,差异有统计学意义(P<0.05),交界性卵巢浆液性肿瘤的Prdx1、Prdx3蛋白表达阳性率及相对表达量高于浆液性囊腺瘤,差异有统计学意义(P<0.05)。不同临床分期及有无淋巴结转移的浆液性腺癌患者Prdx1、Prdx3蛋白阳性表达率差异有统计学意义(P<0.05)。结论Prdx1、Prdx3蛋白在卵巢浆液性腺癌中呈现高表达,并且与其发生及进展密切相关,对于卵巢浆液性腺癌的诊疗具有一定的临床价值。

GDM合并妊娠期高血压疾病患者血清PRDX1、AOPP水平与胰岛素抵抗关系

目的:探讨妊娠期糖尿病(GDM)合并妊娠期高血压疾病患者血清过氧化物氧化还原酶1(PRDX1)、晚期氧化蛋白产物(AOPP)水平与胰岛素抵抗(IR)关系。方法:选择2020年3月-2022年3月本院妇产科治疗的GDM合并妊娠期高血压疾病孕妇103例作为合并症组,单纯GDM孕妇110例作为GDM组,血压血糖均正常孕妇118例作为对照组。酶联免疫吸附法检测血清PRDX1、AOPP水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)。采用Pearson相关分析GDM合并妊娠期高血压疾病患者血清PRDX1、AOPP与IR关系,受试者工作特性曲线(ROC)评估血清PRDX1、AOPP对GDM合并妊娠期高血压疾病的预测价值。结果:对照组、GDM组、合并症组血清PRDX1、AOPP、FPG、FINS、HOMA-IR水平依次升高,HOMA-β依次降低(均P<0.05)。Pearson相关分析,GDM合并妊娠期高血压疾病孕妇血清PRDX1、AOPP与HOMA-IR均呈正相关,与HOMA-β均呈负相关(均P<0.05)。ROC曲线分析,预测GDM合并妊娠期高血压疾病,血清PRDX1的曲线下面积(AUC)为0.778,截断值36.25ng/L,敏感度92.6%、特异度56.5%;血清AOPP AUC为0.862,截断值13.24g/L,敏感度92.6%、特异度66.2%,二者联合的AUC为0.901,敏感度87.7%、特异度86.5%。结论:GDM合并妊娠期高血压疾病患者血清PRDX1、AOPP水平异常升高,二者水平与IR相关,且可作为预测GDM孕妇合并妊娠期高血压疾病的有效指标。

重组杜氏利什曼原虫Pxn1、TryP、假定蛋白CAJ07026和GDPMP蛋白刺激BALB/c小鼠的免疫应答状态

目的观察重组杜氏利什曼原虫(Leishmania donovani)过氧化物还原酶1(peroxidoxin-1,Pxn1)、锥虫氧化还原过氧化物酶(tryparedoxin peroxidase,Try P)、假定蛋白CAJ07026(hypothetical protein CAJ07026.1,Hyp07026)和甘露糖-1-磷酸胍氨酸转移酶(GDP-mannose pyrophosphorylase,GDPMP)蛋白刺激BALB/c小鼠免疫应答状况。方法逆转录PCR(RT-PCR)分别扩增杜氏利什曼原虫Pxn1、Try P、Hyp07026和GDPMP编码基因,克隆入质粒p QE30,构建重组质粒p QE30-Pxn1、p QE30-Try P、p QE30-Hyp07026和p QE30-GDPMP,转化至大肠埃希菌,以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。采用NTA-Ni盐凝胶层析柱,自然条件方式纯化重组蛋白rPxn1和rTry P,变性条件方式纯化重组蛋白rHyp07026和rGDPMP。25只BALB/c小鼠随机均分成5组,即rPxn1、rTry P、rHyp07026、rGDPMP免疫组及PBS对照组,免疫组小鼠分别以相应重组蛋白进行免疫,第1周免疫组小鼠皮下注射100μg相应的重组蛋白,隔周以50μg相应的重组蛋白加强免疫3次,对照组小鼠注射等量PBS。第3次加强免疫后1周,将各组小鼠脱颈处死,制备单个脾细胞,提取抗原刺激后小鼠脾细胞总RNA,用q RT-PCR微阵列检测抗原刺激后小鼠脾细胞内反映免疫应答的细胞因子转录水平表达谱。结果Pxn1、Try P、Hyp07026和GDPMP编码基因经PCR扩增,其产物大小分别为570、610、1 040和1 200 bp;经测序证实,与Gen Bank中的相关序列一致。重组质粒p QE30-Pxn1、p QE30-Try P、p QE30-Hyp07026和p QE30-GDPMP经IPTG诱导后均可在大肠埃希菌内高效表达,rGDPMP、rPXNT1、rTXNT和rHyp07026蛋白相对分子质量(Mr)分别为45 000、22 000、23 000和38 000。rGDPMP、rPXNT1、rTXNT和rHyp07026免疫小鼠的脾细胞内84个细胞因子基因的m RNA表达中,与PBS对照小鼠脾细胞比较,高水平表达的IL-1f6分别是对照组的96.22、271.54、108.51和250.15倍,IL-17f分别是对照组的105.54、35.71、53.38和53.57倍,IL-10分别是对照组的21.68、27.51、24.45和2.91倍。低水平表达的IL-4分别是对照组的5.74、2.43、1.59和0.71倍,IL-12β分别是对照组的0.05、0.26、0.10和0.50倍,IL-18分别是对照组的0.12、0.21、0.13和0.04倍,IFN-γ分别是对照组的3.59、0.39、0.29和0.63倍。结论杜氏利什曼原虫重组蛋白rPxn1、rTry P、rHyp07026和rGDPMP可刺激小鼠炎症反应及诱导免疫抑制。