过氧化物还原酶3在子宫内膜癌组织表达及意义

目的探讨过氧化物还原酶3在子宫内膜癌中的表达及临床意义。方法选取2016年10月—2017年5月在我院接受治疗的子宫内膜癌病人共30例,采用免疫组化染色检测过氧化物还原酶3在子宫内膜癌组织中的表达,采用酶联免疫吸附试验法检测病人血清中过氧化物还原酶3的水平,并与同期入院的30例良性病变病人(对照组)进行比较。分析子宫内膜癌病人血清及癌组织中过氧化物还原酶3表达的相关性。结果过氧化物还原酶3在子宫内膜癌病人血清及癌组织中的表达均高于对照组,差异有统计学意义(t=2.198、2.819,P<0.05),但其在子宫内膜癌病人血清及癌组织中的表达无相关性。子宫内膜癌病人血清雌二醇和胰岛素水平显著高于对照组(t=2.211、2.905,P<0.05)。结论子宫内膜癌组织中过氧化物还原酶3的表达升高可能与其局部的氧化应激状态有关,其表达上调可能有助于促进肿瘤细胞的生长;而病人血清中过氧化物还原酶3水平升高,可能与其胰岛素水平升高有关。

分娩前过氧化物还原酶3水平对妊娠期糖尿病患者子代出生体质量的影响

目的探讨妊娠期糖尿病(GDM)患者分娩前过氧化物还原酶3(PRX3)水平与子代出生体质量的相关性。方法回顾性分析2019年12月至2020年12月北京市昌平区医院126例GDM初产妇的临床资料。根据子代出生体质量将患者分为巨大儿(新生儿体质量≥4 000 g)组(32例)和非巨大儿组(94例)。记录患者一般资料,测定孕12、20、28、32、36、38和39周PRX3水平。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析PRX3对GDM患者子代出生体质量的预测价值。结果两组年龄、孕前体质量指数、白细胞、血红蛋白、淋巴细胞、血小板及妊娠期贫血、胎膜早破、胎位不正、胎儿窘迫、羊水过少、前置胎盘发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。巨大儿组孕12、20、28、32、36、38、39周PRX3水平和子代出生体质量明显高于非巨大儿组[(12.25 ± 2.36) μg/L比(10.11 ± 2.25) μg/L、(13.86 ± 2.33) μg/L比(11.95 ± 2.01) μg/L、(15.02 ± 2.58) μg/L比(12.69 ± 2.32) μg/L、(17.98 ± 3.69) μg/L比(14.79 ± 3.22) μg/L、(20.25 ± 2.94) μg/L比(16.55 ± 2.84) μg/L、 (22.65 ± 3.88) μg/L比(18.06 ± 3.29) μg/L、(24.52 ± 3.59) μg/L比(19.57 ± 3.87) μg/L和(4 329.21 ± 300.58) g比(3 256.58 ± 330.47) g],差异有统计学意义(P<0.01)。根据分娩前PRX3水平将GDM患者分为高PRX3组(71例,PRX3>20 μg/L)和低PRX3组(55例,PRX3≤20 μg/L)。高PRX3组巨大儿发生率明显高于低PRX3组[30.99%(22/71)比18.18%(10/55)],差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,GDM患者子代出生体质量与PRX3水平呈正相关(r = 0.226,P = 0.001)。ROC曲线分析结果显示,PRX3预测GDM患者子代出生体质量的曲线下面积为0.865,灵敏度为86.2%,特异度为79.8%,约登指数为0.660,最佳截断值为19.35 μg/L。结论 GDM患者分娩前PRX3水平与子代出生体质量呈正相关。

线粒体氧化应激相关蛋白酶PRDX3在主动脉夹层中的表达及其意义

目的探讨主动脉夹层(AD)患者体内过氧化还原酶3的表达及其意义。方法选取2018年8月~2019年4月于武汉大学人民医院确诊为StanfordⅠ型主动脉夹层患者为AD组,另选接受心脏移植患者作为对照组。通过Western blot法和免疫组化染色检测主动脉夹层患者与正常对照组主动脉组织中PRDX3的表达差异;构建人主动脉血管平滑肌细胞(HASMC)氧化应激模型,提取细胞蛋白后使用Western blot法检测实验组与对照组的PRDX3表达差异;用0.3%β-异氨基丙腈酯(BAPN)构建SD大鼠主动脉夹层动物模型,取两组大鼠主动脉组织做石蜡包埋,标本切片后处理步骤及检测指标同人体标本。结果人体标本中Western blot法与免疫组化染色均发现,AD组PRDX3的表达较对照组正常主动脉明显增高;动物实验中免疫组化染色发现,AD组大鼠主动脉组织表达PRDX3显著增高;细胞实验中Western blot法结果显示随着H_(2)O_(2)浓度的升高PRDX3的表达也随之升高。结论PRDX3与线粒体氧化应激水平升高密切相关,PRDX3的升高说明在主动脉夹层中线粒体氧化应激水平升高。PRDX3表达的上调可能与夹层的发生、发展密切相关,给主动脉夹层的治疗提供新的靶点。

miR-383和PRDX3在结肠癌组织中的表达水平及意义

目的检测微小RNA-383(miR-383)和硫氧还蛋白依赖的过氧化物还原酶3(PRDX3)在结肠癌组织中的表达情况,探讨二者的表达关系及临床意义。方法选择2016年5月至2018年6月在该院确诊为结肠癌患者的结肠癌标本85份,另选取同期88例行肠镜检查者的正常结肠黏膜组织标本作为对照。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测结肠癌组织与正常结肠黏膜组织miR-383、PRDX3信使核糖核酸(mRNA)表达水平,采用免疫组织化学染色检测PRDX3蛋白表达情况,采用Pearson相关分析结肠癌组织中miR-383表达水平与PRDX3 mRNA的相关性,分析二者与结肠癌临床病理特征及患者生存情况的关系,Cox回归模型分析影响结肠癌患者预后的危险因素。结果与正常结肠黏膜组织比较,结肠癌组织中miR-383表达水平显著降低,PRDX3 mRNA表达水平显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05);PRDX3蛋白主要定位于细胞膜与细胞质,结肠癌组织中PRDX3蛋白阳性表达率显著高于正常结肠黏膜组织,差异有统计学意义(P<0.05);结肠癌组织中miR-383和PRDX3 mRNA表达水平呈负相关(P<0.05);miR-383和PRDX3表达与肿瘤分化程度、TNM分期和淋巴结转移有关(P<0.05);miR-383高表达组结肠癌患者3年累积生存率显著高于miR-383低表达组,PRDX3高表达组结肠癌患者3年累积生存率显著低于PRDX3低表达组,差异有统计学意义(P<0.05);结肠癌低分化、淋巴结转移、miR-383低表达、PRDX3高表达是影响结肠癌患者不良预后的独立危险因素(P<0.05)。结论结肠癌组织中miR-383低表达、PRDX3高表达,且与患者生存率有关,可能作为结肠癌患者潜在的预后标志物。

PRDX3在前列腺癌组织中表达的临床意义

目的研究硫氧还蛋白依赖的过氧化物还原酶(PRDX3)在前列腺癌组织中的表达情况及其临床意义。方法应用过氧化氢标记的链霉素抗生物素蛋白-过氧化氢酶法(SP法)检测147例前列腺癌组织和28例良性前列腺增生组织中PRDX3的表达情况,并对PRDX3与前列腺癌临床关系进行统计分析。结果 PRDX3在前列腺癌中呈高表达,在良性前列腺增生症和前列腺癌中的表达有差异(P<0.001)。结论 PRDX3在前列腺癌组织中的表达比良性前列腺增生组织中高,有可能成为一种鉴别前列腺癌与良性前列腺增生的新的肿瘤标记物。

miR-383靶向PRDX3对肝癌HepG2细胞增殖、侵袭的影响

目的探讨微小RNA-383(miR-383)靶向调控人过氧化物还原酶-3(PRDX3)的表达对肝癌HepG2细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法体外培养肝癌HepG2细胞,应用实时定量聚合酶链式反应法(qRT-PCR)检测HepG2细胞中miR-383表达水平;将HepG2细胞分为空白(NG)组、miR-383阴性对照(NC)组、miR-383过表达(miR-383 mimics)组,转染48 h后,MTT法检测细胞增殖情况,Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力;应用TargetScan数据库预测miR-383的靶基因并用双荧光素酶报告基因实验加以验证,应用蛋白免疫印记(Western blotting)法检测对PRDX3、Ki-67、MMP-2、MMP-9蛋白表达的影响。结果与NG组、NC组比较,miR-383 mimics组HepG2细胞中miR-383表达水平显著升高(P<0.05);HepG2细胞增殖抑制率明显升高,侵袭、迁移细胞数明显减少(P<0.05)。TargetScan数据库预测显示PRDX3是miR-383潜在靶基因,双荧光素酶报告基因实验证实二者存在靶向关系。Western blotting结果显示,miR-383过表达后,PRDX3、Ki-67、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平均显著下调。结论miR-383可能通过下调PRDX3表达抑制人肝癌HepG2细胞增殖、迁移和侵袭。

Prdx1、Prdx3蛋白在卵巢浆液性肿瘤中的表达及临床意义

目的探讨过氧化物氧化还原酶蛋白1(Prdx1)、过氧化物氧化还原酶蛋白3(Prdx3)蛋白在卵巢浆液性肿瘤中的表达情况及其与临床病理特征的关系。方法选取安阳市人民医院2018年7月至2021年5月确诊的卵巢浆液性腺癌患者64例、交界性浆液性肿瘤56例、浆液性囊腺瘤80例为研究对象,通过免疫组织化学(IHC)和蛋白质印迹法(WB)检测三组标本中的Prdx1、Prdx3蛋白表达情况并分析其与卵巢浆液性腺癌患者临床病理学特征的关系。结果卵巢浆液性腺癌的Prdx1、Prdx3蛋白表达阳性率及相对表达量高于交界性卵巢浆液性肿瘤和浆液性囊腺瘤,差异有统计学意义(P<0.05),交界性卵巢浆液性肿瘤的Prdx1、Prdx3蛋白表达阳性率及相对表达量高于浆液性囊腺瘤,差异有统计学意义(P<0.05)。不同临床分期及有无淋巴结转移的浆液性腺癌患者Prdx1、Prdx3蛋白阳性表达率差异有统计学意义(P<0.05)。结论Prdx1、Prdx3蛋白在卵巢浆液性腺癌中呈现高表达,并且与其发生及进展密切相关,对于卵巢浆液性腺癌的诊疗具有一定的临床价值。

PRDX3真核表达载体构建及亚细胞定位

目的构建带FLAG标签的过氧化物还原酶3(peroxiredoxin3,PRDX3,PRX3)的真核表达载体,并对其在人舌癌SCC15细胞中的定位进行检测。方法以乳腺文库为模板,PCR扩增带有FLAG标签的PRDX3基因片段,并将扩增产物插入到PCDH空载体中,构建成PCDH-FLAG-PRDX3,质粒测序正确后瞬时转染入人胚肾293T细胞,Western免疫印迹检测克隆载体的表达情况,细胞免疫荧光实验检测PRDX3的亚细胞定位。结果双酶切和测序结果表明,PCDH-FLAG-PRDX3真核表达载体构建成功,转染293T细胞后成功表达了FLAG-PRDX3融合蛋白;细胞免疫荧光显示FLAG-PRDX3蛋白定位于舌癌SCC15细胞的细胞质中,不存在于细胞核内。结论成功构建了带FLAG标签的PRDX3真核表达载体,并检测其定位于舌癌SCC15细胞质中,为进一步明确PRDX3在舌癌发生发展中的功能及分子机制奠定基础。