过氧化物酶体增殖剂激活受体α对小鼠T、B细胞发育的影响

目的研究过氧化物酶体增殖剂激活受体α(PPARα)与小鼠免疫系统功能和发育的关系。方法喂养含过氧化物酶体增殖剂(PP)的食物后,观察野生型C57Bl/6小鼠和PPARα缺陷型小鼠胸腺、脾脏的重量及胸腺细胞、脾细胞数量的变化。用抗小鼠CD3、CD4、CD8a、CD19、IgM或CD45R/220单克隆抗体(mAb)进行细胞免疫荧光染色后,用流式细胞术分析骨髓细胞、胸腺细胞和脾细胞的表型变化。用刀豆蛋白A(ConA)和脂多糖(LPS)分别刺激小鼠的脾细胞,用3H-TdR掺入法检测淋巴细胞增殖活性的变化。用RT-PCR检测小鼠骨髓、胸腺和脾脏中PPARαmRNA的表达。结果与野生型小鼠相比较,PP对PPARα缺陷型小鼠胸腺、脾脏的重量和细胞数,以及ConA和LPS刺激对淋巴细胞增殖反应的影响很小。PP可致野生型小鼠胸腺中CD4+CD8+T细胞数,骨髓中B220+B细胞总数和原/前B细胞数明显减少,但对PPARα缺陷型小鼠的上述T、B细胞亚群无显著影响。PPARαmRNA在小鼠胸腺和脾脏中呈低表达,在骨髓中不表达。结论PPARα在PP诱导的免疫调节中起主要作用,其可通过间接途径影响T、B细胞的发育。

过氧化物酶体增殖剂PFOA对小鼠免疫系统的影响

目的:研究过氧化物酶体增殖剂(PP)全氟辛酸(PFOA)对小鼠的免疫器官和免疫细胞、免疫功能的影响。方法:喂养含PFOA的食物后,观察C57B/6雄性小鼠胸腺和脾脏的重量及胸腺细胞和脾细胞数的变化。用碘化丙啶(PI)进行细胞DNA染色,用小鼠单克隆抗体(mAb)进行细胞免疫荧光染色,流式细胞术分析胸腺和脾细胞的细胞周期和细胞表型的变化。用蛋白A噬菌斑实验和ELISA法检测小鼠抗马红细胞的抗体生成B细胞和血清中IgM和IgG滴度的变化。用刀豆蛋白A(ConA)和脂多糖(LPS)分别刺激小鼠脾细胞,用3H-TdR掺入法检测淋巴细胞增殖活性的变化。结果:强效的PP(如PFOA)能导致小鼠胸腺和脾脏严重萎缩;其脾脏中T和B细胞数减少50%,胸腺细胞数减少>90%,以成熟的CD4+CD8+细胞数的减少最显著,S和G2/M期细胞数的下降最明显。PFOA还可降低马红细胞诱导的IgM和IgG抗体生成B细胞的数量和血清中特异性IgM和IgG抗体的滴度,以及T细胞活化剂ConA和B细胞活化剂LPS刺激的淋巴细胞增殖反应强度。停止喂养含PFOA的食物后,上述指标迅速恢复正常。结论:强效的PP能对小鼠免疫系统产生明显的抑制作用。

压力负荷性大鼠肥厚心肌过氧化物酶体增殖剂活化受体α(PPARα)和肉碱棕榈酰转移酶(MCPT-I)mRNA的表达变化

目的 了解压力负荷性肥厚心肌PPARα和M CPT ImRNA的表达变化 ,探讨PPARα调控心肌线粒体脂肪酸摄取及维持能量和脂质平衡的作用。方法 观察大鼠腹主动脉缩窄术后 2、4、8、16周血流动力学参数、心室重塑指标、血清和心肌游离脂肪酸的含量及PPARα和M CPT ImRNA的表达变化。结果 随着肥厚程度的增加 ,压力负荷性大鼠血清和心肌游离脂肪酸蓄积增加 ,心肌PPARα和M CPT ImRNA的表达逐渐下调 ,而且与脂肪酸的利用下调相一致。结论 病理性肥厚心肌能量代谢底物发生改变 ,脂肪酸氧化不占主导地位 ;PPARα在转录水平上失活 ,对心肌线粒体脂肪酸摄取起重要的调控作用 ;

过氧化物酶体增殖剂受体与脂质代谢调控

综述了过氧化物酶体增殖剂受体在动物体内的分布、结构与转录调节机制及其对脂肪细胞分化、脂质代谢的调控。

过氧化物酶体增殖剂激活受体-γ在白藜芦醇抑制胃癌SGC-7901细胞增殖中的作用

目的:探讨过氧化物酶体增殖剂激活受体-γ(PPAR-γ)在白藜芦醇(Res)抑制人胃癌细胞SGC-7901增殖中的作用.方法:体外常规培养人胃癌细胞SGC-7901,MTT法检测Res和GW9662(PPAR-γ特异阻断剂)对SGC-7901细胞的增殖抑制作用,流式细胞仪测定对细胞周期的影响,RT-PCR方法检测PPAR-γ,Cyclin D1的mRNA表达,Western blot检测PPAR-γ蛋白的表达,免疫细胞化学检测Cyclin D1蛋白表达的改变.结果:Res以时间、浓度依赖性方式抑制胃癌细胞SGC-7901的增殖(P<0.05),使细胞周期停留在G1期;胃癌细胞SGC-7901存在PPAR-γmRNA和蛋白的表达,Res呈浓度依赖性的激活PPAR-γmRNA的转录.25,50,75,100μmol/L Res作用于胃癌细胞后,细胞中PPAR-γmRNA相对表达分别是空白对照组的122.2%,195.1%,232.9%和277.1%(P<0.05),而PPAR-γ蛋白的表达几乎没有变化;胃癌SGC-7901细胞高水平表达Cvclin D1,Res显著的抑制Cyclin D1的表达.经25,50,75,100μmol/L Res处理后,Cyclin D1 mRNA抑制率分别为11.3%,24.3%,35.4%,59.5%,而GW9662能够明显降低Res的上述作用.结论:Res在胃癌SGC-7901细胞中部分的通过激活PPAR-γ从而抑制Cyclin D1的表达,使癌细胞停留在G1期,抑制细胞的增殖.

同时激活肝X受体和过氧化物酶体增殖剂激活受体α对大鼠胆汁酸合成的影响

目的研究肝X受体(LXR)和过氧化物酶体增殖剂激活受体α(PPARα)同时被激活对大鼠胆汁酸合成的影响。方法雄性SD大鼠分为对照组、血高胆固醇组(HC组)和血高胆固醇+非诺贝特组(HC+FENO组)。测定3组大鼠的总胆汁酸水平(血清和粪胆汁酸含量之和),RT-PCR方法检测肝过氧化物酶体棕榈酰CoA氧化酶(Acox1)、LXR、胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)、D-双功能蛋白(DBP)、三羟基粪甾烷酰CoA氧化酶(Acox2)、固醇12α-羟化酶(CYP8B1)和固醇27-羟化酶(CYP27A1)mRNA的表达水平。结果HC+FENO组的总胆汁酸水平显著高于HC组(P<0.01),且两组均显著高于对照组(P<0.01);对照组和HC组的Acox1和DBP mRNA水平差异无显著性,但均低于HC+FENO组(P<0.01);HC+FENO组和HC组的LXR和CYP7A1 mRNA水平差异无显著性,但均高于对照组(P<0.01,P<0.05);3组的Acox2、CYP8B1和CYP27A1 mRNA水平差异均无显著性。结论同时激活大鼠肝LXR和PPARα可上调CYP7A1和DBP mRNA的表达,通过经典途径增加胆汁酸的合成。

过氧化物酶体增殖剂与致癌的关系

过氧化物酶体增殖剂 (PP)是使用最广泛的一种非基因毒性致癌物。自从 90年代初发现能被 PP激活的激素类受体——过氧化物酶体增殖因子受体 (PPAR)以来 ,对 PP致癌机制的研究迅速深入到细胞、分子水平。本文对 PP类物质的概念 ,PPAR的结构与功能 ,PPAR与

过氧化物酶体增殖剂激活受体-δ的研究进展

过氧化物酶体增殖剂激活受体是属于核受体超家族的转录因子,包括3个亚型:过氧化物酶体增殖剂激活受体-α、过氧化物酶体增殖剂激活受体-β／δ和过氧化物酶体增殖剂激活受体-γ．可以被内源性分泌的前列腺素和脂肪酸激活,在脂质代谢和糖代谢中起重要作用。在本文中主要就过氧化物酶体增殖剂激活受体δ的生物作用及其在心血管疾病中的应用前景作一综述。

冻结肩病理改变及过氧化物酶体增殖剂激活受体-γ激动剂治疗作用的研究

背景:冻结肩是一种以肩关节疼痛和活动受限为主要特征的疾病,目前病因不明,治疗效果欠佳。目的:研究转化生长因子-β1(TGF-β1)对大鼠肩关节囊纤维化及炎症反应等病理改变的影响,以及过氧化物酶体增殖剂激活受体-γ(PPAR-γ)激动剂对大鼠冻结肩的治疗作用,为临床治疗冻结肩提供新思路。方法:利用TGF-β1诱导人皮肤成纤维细胞(HSF)异常纤维化,PPAR-γ激动剂三萜类化合物(CDDO-IM)作为治疗药物,检测细胞增殖、迁移情况及细胞外基质蛋白的表达情况。向SD大鼠的肩关节腔注射TGF-β1过表达的腺病毒构建大鼠冻结肩模型。2周后,其中一半大鼠用罗格列酮灌胃饲养2周,作为罗格列酮治疗组。检测大鼠肩关节活动度,利用ELISA检测关节腔炎症因子,HE染色和免疫组织化学法检测大鼠肩关节囊组织细胞外基质蛋白的表达情况。结果:在细胞实验中,TGF-β1组的增殖率为83.6%,TGF-β1+CDDO-IM组增殖率为19.3%(P<0.01);TGF-β1组的迁移率为84.9%,TGF-β1+CDDO-IM组迁移率为44.1%(P<0.05);TGF-β1能够诱导HSF增殖、迁移及异常纤维化。动物实验成功构建了TGF-β1诱导的大鼠冻结肩模型,免疫组织化学结果提示,罗格列酮能够抑制大鼠冻结肩的炎症形成,减少基质蛋白生成,重塑纤维组织结构。结论:冻结肩的病理改变主要是纤维细胞异常增生,炎症细胞浸润,纤维结构紊乱,而PPAR-γ激动剂可以缓解大鼠冻结肩关节僵硬,减弱炎症反应,抑制异常纤维化。

淀粉样前体蛋白/早老素1转基因小鼠脑皮质中过氧化物酶体增殖剂激活受体α的表达及意义

目的探讨淀粉样前体蛋白(APP)/早老素1(PS1)转基因小鼠脑皮质中过氧化物酶体增殖剂激活受体α(PPARα)的表达变化及意义。方法选择10只5月龄雄性APP/PS1双转基因C57BL/6J-TgN(APP/PS1)ZLFILAS小鼠为实验组,10只同遗传背景5月龄雄性C57BL/6J野生型小鼠为对照组。采用Morris水迷宫实验测定2组小鼠空间学习记忆能力,免疫组织化学法检测2组小鼠脑组织中β-淀粉样蛋白(Aβ)沉积情况,Western blot法检测2组小鼠脑皮质中PPARα、APP蛋白及肝组织中PPARα、脂酰辅酶A氧化酶1(ACOX1)及肉碱脂酰转移酶1(CPT1)蛋白表达,生物化学法检测2组小鼠血清中三酰甘油(TG)和总胆固醇(TC)水平。结果实验组小鼠不同时间点逃避潜伏期短于对照组,但2组间比较差异无统计学意义(P>0.05);实验组小鼠在目标象限游动时间短于对照组,但2组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。对照组小鼠脑组织中未见到Aβ阳性斑块,实验组小鼠脑皮质和海马区可见大量大小不等的Aβ阳性斑块。实验组小鼠脑皮质中PPARα蛋白相对表达量显著低于对照组,APP蛋白相对表达量显著高于对照组(P<0.05)。实验组小鼠肝组织中PPARα、ACOX1、CPT1蛋白相对表达量显著高于对照组(P<0.05)。实验组小鼠血清TG水平显著高于对照组(P<0.05),实验组与对照组小鼠血清TC水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论APP/PS1转基因小鼠存在脑组织和肝组织PPARα异常表达、脂质代谢紊乱,PPARα在阿尔茨海默病的发病机制中起重要作用。

青春期前邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯暴露对雌性大鼠生殖发育及过氧化物酶体增殖剂激活受体的影响

目的探讨邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)暴露对青春期前雌性大鼠性发育及生殖内分泌功能的影响及其可能机制。方法将40只健康3周龄雌性SD大鼠,随机分成对照组(玉米油)和3个实验组,每组10只。实验组按50、150、500mg/kg DEHP经口灌胃,连续染毒28天。观察阴道开口、乳房发育、第一次发情周期的日龄及体重,于末次染毒24小时后进行阴道涂片,确定动情间期,处死动物。Real-time PCR测定卵巢组织相关基因表达水平;ELISA法检测血清中卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(P4)及睾酮(T)水平;通过病理学观察卵巢组织的变化;免疫组织化学法测定卵巢组织中PPARγ的表达。结果 500mg/kg组阴道开口日龄提前,150、500mg/kg组阴道开口时体重增加(P<0.05);150、500mg/kg组芳香化酶(P450Arom)mRNA表达与对照组比较,显著下降;各剂量组与对照组相比,T水平明显下降,150、500mg/kg组FSH、E2水平明显减少,而LH水平明显升高(P<0.05);150、500mg/kg组闭锁卵泡明显增多、黄体数目明显减少;150、500mg/kg组卵泡颗粒细胞和黄体颗粒细胞中PPARγ阳性光密度相对量明显高于对照组及50mg/kg组(P<0.05)。结论青春期前DEHP暴露对雌性大鼠性发育及生殖内分泌功能产生影响,其作用机制可能与激活PPARs有关。

过氧化物酶体增殖剂活化受体α信号通路对肥厚心肌能量代谢胚胎型再演的调控作用

目的 研究压力负荷性大鼠左室肥厚心肌中链脂酰辅酶A(MCAD)、肌型肉碱棕榈酰转移酶 (M CPT I)和过氧化物酶体增殖剂活化受体α(PPARα)基因 /蛋白的表达变化 ,阐明肥厚心肌能量代谢“胚胎型再演”的分子机制和PPARα的调控作用。方法 取健康雄性Wistar大鼠行腹主动脉缩窄 (CAA)制成左室肥厚模型 ,随机分为 2周组 (CAA2W组 )、4周组 (CAA4W组 )、8周组 (CAA8W 组 )、16周组 (CAA16W组 ) ,设立假手术组作为对照 ,以上每组均为 12只 ,观察各组大鼠各项指标的变化。结果 ( 1)与假手术组比较 ,CAA各组大鼠左心室湿重 /体重、平均动脉压升高 ,4周后左室舒张末压、左室收缩压、+dp/dtmax开始升高 ,术后 8周 -dp/dtmax开始降低 ,以CAA16W组最显著 ,而CAA各组右心室湿重 /体重无明显变化 ;( 2 )CAA各组大鼠血清和心肌游离脂肪酸含量进行性增加 ;( 3)CAA各组大鼠左室心肌M CPT I、MCADmRNA的表达逐渐下降 ;( 4 )CAA各组大鼠左室心肌PPARα基因表达下调 ,术后 8周PPARα蛋白水平开始下调 ,以CAA16W组最显著。结论 ( 1)在腹主动脉缩窄所致的肥厚心肌模型中 ,血清和心肌游离脂肪酸含量增加 ,表明脂肪酸的利用减少 ,心肌能量代谢呈“胚胎型再演” ,调控脂肪酸氧化关键酶 (M CPT I和MCAD)的基因表达下调 ,可能是?

过氧化物酶体增殖剂激活受体-γ对实验性胰腺炎大鼠核转录因子-κB表达的影响

近年来，随着对急性胰腺炎（AP）发病机制认识的不断深入，与细胞因子表达直接相关的核转录因子-κB（NF—κB）在AP发病机制中的作用日益引起人们的重视。研究发现，过氧化物酶体增殖剂激活受体-γ（PPAR-γ）是一个细胞增殖和炎症反应的调节剂，可调节炎症相关基因的表达，参与机体的炎症反应过程，可能通过抑制NF-κB的活化表达发挥其抗炎作用。

腺病毒介导的小鼠过氧化物酶体增殖剂活化受体γ基因过度表达对Raw264.7细胞小窝蛋白-1基因和蛋白表达影响的实验研究

目的比较腺病毒介导的小鼠过氧化物酶体增殖剂活化受体γ(PPARγ)基因过度表达与配体活化对小鼠Raw264.7巨噬细胞小窝蛋白-1(CAV-1)基因和蛋白表达的影响,探讨PPARγ基因对巨噬细胞CAV-1的调控作用及机制。方法首先构建表达小鼠PPARγ1基因的复制缺陷型腺病毒表达载体;将Raw264.7细胞随机分成对照组、PPARγ基因过度表达组、PPARγ活化剂曲格列酮干预组以及PPARγ基因过度表达和曲格列酮共刺激组进行干预;观察各组Raw264.7细胞PPARγ和CAV-1基因和蛋白的表达变化。结果RT-PCR检测对照组Raw264.7细胞有CAV-1基因的表达,免疫印迹法未发现CAV-1蛋白表达,但免疫细胞化学证实胞膜和核膜上均有少量CAV-1表达;经RT-PCR、免疫细胞化学和免疫印迹检测发现PPARγ基因过度表达组、曲格列酮干预组和二者共刺激组Raw264.7细胞CAV-1基因和蛋白表达明显增加(且共刺激组>PPARγ基因过度表达组>曲格列酮干预组,P<0.05)。对照组Raw264.7胞浆内PPARγ表达量较低,而PPARγ基因过度表达组和共刺激组PPARγ表达均明显增加(P<0.05),而曲格列酮干预组无明显变化。结论PPARγ基因活化或过度表达均能上调Raw264.7细胞CAV-1基因和蛋白表达。曲格列酮活化PPARγ基因,增加CAV-1基因和蛋白表达,但不增加PPARγ基因和蛋白表达水平。与单一作用比较,同时活化和过度表达PPARγ基因对CAV-1基因和蛋白的表达有累积效应,说明PPARγ的这一作用在配体活化下增强。推测曲格列酮上调CAV-1表达依赖于PPARγ,非本身药理特性所致。

子痫前期胎盘组织中过氧化物酶体增殖剂激活受体-α表达水平及其启动子甲基化的临床意义

目的探讨子痫前期胎盘组织中过氧化物酶体增殖剂激活受体-α(PPAR-α)表达水平及其启动子甲基化的临床意义,为子痫前期的治疗以及发病机制的探讨提供理论及临床依据。方法选取甘肃省妇幼保健院子痫前期孕妇60例为观察组,其中子痫前期轻度30例、子痫前期重度30例,同期选择该院健康孕妇30例为对照组,实时荧光逆转录法测定观察组及对照组PPAR-αmRNA水平,酶联免疫吸附法(ELISA)及免疫组化(SP)方法测定PPAR-α蛋白水平,甲基化特异性PCR检测PPAR-α启动子甲基化水平。结果子痫前期轻度、子痫前期重度组PPAR-αmRNA高于对照组,差异有统计学意义(t=12.341、15.602,均P<0.05),而随着子痫前期严重程度的增加,PPAR-αmRNA表达水平逐渐升高,差异有统计学意义(t=14.091,P<0.05);子痫前期轻度、子痫前期重度组PPAR-α蛋白高于对照组,差异有统计学意义(t=16.013、19.764,均P<0.05),而随着子痫前期严重程度的增加,PPAR-α蛋白表达水平逐渐升高,差异有统计学意义(t=15.876,P<0.05);观察组PPAR-α启动子区域甲基化水平低于对照组,非甲基化水平高于对照组,差异有统计学意义(χ2=6.756,P<0.05);PPAR-α启动子区域甲基化水平与PPAR-αmRNA、蛋白负相关关系明显(r=-0.691、-0.613,均P<0.05);子痫前期严重程度与PPAR-αmRNA、蛋白正相关关系明显(r=0.597、0.517,均P<0.05)。结论子痫前期患者胎盘组织中PPAR-αmRNA、蛋白表达水平升高,其与子痫前期的严重程度相关明显;子痫前期胎盘组织中PPAR-α启动子去甲基化诱导了PPAR-αmRNA、蛋白的活化和表达。

过氧化物酶体增殖剂活化受体γ激动剂在支气管哮喘和呼吸道合胞病毒感染中的作用研究

过氧化物酶体增殖剂活化受体γ（PPARγ）是一个由配体激活的核转录因子，属于核激素受体（nuclear hormone receptor）超家族成员。被激活后，该受体除参与脂质和脂蛋白代谢，还涉及上皮细胞分化，单核／巨噬细胞等炎症细胞的活化，血管舒缩以及动脉粥样硬化形成，甚至肿瘤增殖等。本文对现有的PPAR7激动剂在支气管哮喘和呼吸道合胞病毒感染中的作用作一综述。

马来酸罗格列酮增强过氧化物酶体增殖剂活化受体γ1基因转染抗ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的作用

目的探讨过氧化物酶体增殖剂活化受体(PPAR)γ活化剂马来酸罗格列酮能否增强腺病毒介导的 mPPARγ1基因转染抗 ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的作用。方法将20周龄ApoE-/-小鼠高脂饲养20周后随机分成4组(每组 n=10),即 AdPPARγ1组、AdPPARγ1+RO 组(病毒干预前1周予罗格列酮4 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃)、AdGFP 组和 PBS 组。转染2周后比较各组小鼠主动脉根部斑块面积均值。Movat 5色套染法和油红 O 染色分析主动脉根部斑块成分变化。检测斑块内 PPARγ、血管平滑肌细胞(SM-actin)、巨噬细胞(MOMA-2)、MMP-9/TIMP-1、CD40/CD40L 和组织因子(TF)等抗原的免疫活性。结果 PBS 组与 AdGFP 组比较,各项指标差异均无统计学意义。与AdGFP 组比较,AdPPARγ1组和 AdPPARγ1+RO 组 ApoE-/-小鼠主动脉根部斑块面积和脂质含量减少(P<0.05)[AdGFP 组、AdPPARγ1组和 AdPPARγ1+RO 组病变面积均值分别为(0.98±0.17)、(0.86±0.12)、(0.79±0.15)mm^2,油红 O 染色阳性面积分别为(270±49)×10~3、(150±35)×10~3、(80±21)×10~3μm^2]。Movat 染色法显示 PBS 组和 AdGFP 组小鼠主动脉根部斑块成分差异不显著,而 AdPPARγ1组和 AdPPARγ1+RO 组纤维帽较厚、弹性纤维、胶原和蛋白聚糖含量增加。与 AdGFP组比较,AdPPARγ1组和 AdPPARγ+RO 组主动脉根部斑块 PPARγ、SM-actin、TIMP-1抗原免疫活性增强,而 MOMA-2、MMP-9、CD40/CD40L 和 TF 抗原免疫活性减弱,其中 AdPPARγ1+RO 组作用最显著。结论腺病毒介导的 mPPARγ1基因转染遏制 ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化进程,促进动脉粥样硬化斑块向稳定表型转换,PPARγ活化剂马来酸罗格列酮增强上述作用。