过氧化物酶体增长因子活化受体(PPARs)与microRNAs

在细胞中,过氧化物酶体增长因子活化受体(PPARs)和microRNAs相互制约和调控从而影响相关细胞、组织和器官的功能,在脂肪细胞分化与代谢、炎症、癌症和心血管疾病等生理和病理过程中发挥重要作用.本文首先简要总结了PPARs发挥作用的分子机制;并分别以PPARs家族每一个成员(PPARα、PPARβ和PPARγ)为对象,分析了PPARs调控下的microRNAs表达及功能,探讨了microRNAs调控下的PPARs表达活性变化,并归纳了PPARs与microRNAs之间的调控关系;最后对PPARs相关microRNAs的应用前景进行了简单探讨.研究PPARs与microRNAs间的网络调控关系,可以为PPARs与microRNAs在理论和实践中的深入研究和应用提供参考.

小鼠增强型绿色荧光蛋白-过氧化物酶体增长因子活化受体γ2融合表达重组腺病毒的构建及表达

目的构建小鼠增强型绿色荧光蛋白(EGFP)-过氧化物酶体增长因子活化受体(PPAR)γ2基因的腺病毒重组体,并检测其在感染病毒的小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)中的表达。方法从pcDNAflagPPARγ质粒上切取目的片段PPARγ2,克隆入pEGFP-C1和pEGFP-N1,以pEGFP-C1-PPARγ2为模板通过PCR技术获得EGFP-PPARγ2基因,酶切DC315质粒,获得DC315-EGFP-PPARγ2质粒,在脂质体介导下与腺病毒辅助大质粒pBHGlox△E1、3Cre共转染HEK293细胞,包装产生复制缺陷型重组腺病毒Ad-EGFP-PPARγ2,酶切鉴定证实构建成功。转染HEK293细胞并检测其体外表达情况,经HEK293细胞扩增后,测定病毒滴度,转染小鼠BMSC,72h后鉴定其成脂分化情况。结果将pEGFP-C1-PPARγ2和pEGFP-N1-PPARγ2通过脂质体转染入HEK293细胞后,在倒置相差显微镜下观察,前者在细胞核内有较强的绿色荧光,后者的荧光强度则极低。对重组腺病毒进行酶切和PCR鉴定,证实含小鼠EGFP-PPARγ2的Ad5腺病毒载体构建成功。在倒置相差显微镜下观察到BMSC细胞核内有绿色荧光。结论成功构建含小鼠EGFP-PPARγ2的重组Ad5腺病毒载体,为基因辅助的脂肪组织工程技术、抗肿瘤研究等提供了安全有效的转基因载体。

过氧化物酶体增殖活化因子受体γ及其激动剂在类风湿关节炎中的作用研究进展

类风湿关节炎是一种以多关节滑膜炎为主要特征的自身免疫性疾病,其发病机制尚未完全阐明。过氧化物酶体增殖活化因子受体γ(PPARγ)是一类配体激活的核转录因子超家族成员,在免疫调节、炎症控制和骨稳定中发挥重要功能。因此,研究PPARγ在类风湿关节炎中发挥的作用具有重要意义。本文就PPARγ在类风湿关节炎中的作用进行综述,并讨论基于PPARγ靶点治疗药物的发展情况,以期为抗类风湿关节炎新药研发提供思路和参考。

多囊卵巢综合征病人血清Ⅲ型纤连蛋白域蛋白5、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助激活因子-1α水平与胰岛素抵抗的关系

目的探究多囊卵巢综合征(PCOS)病人血清Ⅲ型纤连蛋白域蛋白5(FNDC5)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助激活因子-1α(PGC-1α)表达水平与胰岛素抵抗的关系。方法选取2017年1月至2021年12月在重庆松山医院接受治疗的118例PCOS病人为PCOS组,另选取与PCOS病人年龄、身体质量指数(BMI)、腰臀比相匹配的同期健康体检者94例作为对照组。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测两组血清FNDC5、PGC-1α表达水平;全自动生化分析仪检测空腹胰岛素(FINS)、空腹血糖(FBG)水平,并计算胰岛素抵抗相关指标胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);Pearson相关性分析研究病人血清FNDC5、PGC-1α水平与胰岛素抵抗相关指标之间的关系。结果与对照组相比,PCOS组FBG、FINS、三酰甘油(TG)、HOMA-β、HOMA-IR显著升高(P<0.05);与对照组相比,PCOS组FNDC5[(18.46±2.76)μg/L比(30.25±5.87)μg/L]、PGC-1α[(1.87±0.45)μg/L比(4.91±1.34)μg/L]表达水平显著降低(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,PCOS病人血清FNDC5、PGC-1α水平均与FBG、FINS、HOMA-β、HOMA-IR呈显著负相关(P<0.05)。结论PCOS病人血清FNDC5、PGC-1α表达水平降低,与胰岛素抵抗存在负相关。

Roux—en—Y胃转流术对代谢综合征大鼠糖脂代谢及过氧化物酶体增长因子活化受体γ表达的影响

目的探讨Roux-ell-Y胃转流术对代谢综合征大鼠肥胖相关指标、糖脂代谢指标、器官脂肪组织过氧化物酶体增长因子活化受体γ（PPAR-en-γ）蛋白表达的影响。方法40只健康雄性7。8周龄sD大鼠，适应性喂养1周后，选取30只，予高糖高脂高盐饲料配合20％蔗糖水喂养12周，筛选出24只符合标准的代谢综合征模型大鼠，按完全随机区段分组法分为假手术组（11只）和手术组（13只）。假手术组行胃窦十二指肠离断原位吻合术，手术组行Roux-en-Y胃转流术。其余10只健康SD大鼠予标准饮食喂养设为正常组。术后5周处死大鼠，立即取肠系膜、双肾周及双侧附睾旁脂肪组织，采用Westernblot法检测大鼠器官脂肪组织PPAR-γ蛋白含量。观察指标包括：（1）肥胖相关指标：术前及术后5周进食量、体质量、腹围、Lee＇s指数，术后5周器官脂肪质量、器官脂肪系数。（2）糖脂代谢指标：术前及术后5周空腹血糖、血清胰岛素、稳态胰岛素评价指数（HOMA-IR）、TC、TG、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、血清游离脂肪酸。（3）术后5周器官脂肪组织PPAR-1蛋白含量。正态分布的计量资料以面±s表示，多组间比较采用方差分析，两组间比较采用LSD．t检验，重复测量数据采用重复测量方差分析。结果手术组大鼠术后1周死亡3只，死亡率为3／13；其余各组无大鼠死亡。正常组大鼠进食量、体质量、腹围、Lee＇s指数术前分别为（26．9±1．5）g、（499±46）g、（18．2±0．4）cm、309±9，术后5周分别为（27．7±2．1）g、（547±43）g、（18．6±0．5）em、312±8；假手术组大鼠上述指标术前分别为（26．1±1．8）g、（584±42）g、（19．3±0．6）em、（317±13），术后5周分别为（28．8±1．7）g、（677±39）g、（20．6±0．7）cm、334±11；手术组大鼠上述指标术前分别为（25．9±2．1）g、（579±47）g、（19．4±0．5）cm、311±5，术后5周分别为（17．5±0．8）g、（470±40）g、（18．1±0．4）cm、302±4；上述指标术前3组比较，差异均无统计学意义（F=0．821，0．784，0．813，0．642，P〉0．05）；上述指标术前至术后5周变化趋势，3组比较，差异均有统计学意义（F=4．650，3．852，4．362，4．042，P〈0．05）。正常组大鼠术后5周器官脂肪质量、器官脂肪系数分别为（34±6）g、6．2％±0．5％，假手术组分别为（55±6）g,8．2％±0．6％，手术组分别为（28±6）g、6．1％±0．5％；3组大鼠上述2个指标比较，差异均有统计学意义（F=16．750，14．686，P〈0．05）。术后5周器官脂肪质量正常组与假手术组比较，差异有统计学意义（t=4．287，P〈0．05）；正常组与手术组比较，差异无统计学意义（t=1．225，P〉0．05）；假手术组与手术组比较，差异有统计学意义（t=5．511，P〈0．05）。术后5周器官脂肪系数正常组与假手术组比较，差异有统计学意义（t=4．435，P〈0．05）；正常组与手术组比较，差异无统计学意义（t=0．245，P〉0．05）；假手术组与手术组比较，差异有统计学意义（t=4．657，P〈0．05）。正常组大鼠空腹血糖、血清胰岛素、HOMA-IR、TC、TG、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、血清游离脂肪酸术前分别为（4．3±0．9）mmol／L、（15．1±4．9）Ixmol／L、2．19±1．43、（1．12±0．13）mmol／L、（1．3±0．5）mmol／L、（1．32±0．19）mmol／L、（0．9±0．4）mmol／L、（131±17）mmol／L，术后5周分别为（4．3±1．2）mmol／L、（14．8±5．3）μmol／L、2．29±1．37、（1．07±0．16）mmol／L、（1．2±0．7）mmol／L、（1．28±0．22）mmol／L、（0．8±0．5）mmol／L、（134±19）mmol／L；假手术组大鼠上述指标术前分别为（6．1±0．7）mmol／L、（30．1±1．8）μmol／L、7．86±1．56、（3．32±0．14）mmol／L、（2．5±0．6）mmol／L、（0．81±0．21）mmol／L、（2．8±0．7）mmol／L、（178±18）mmol／L，术后5周分别为（6．1±0．7）mmol／L、（31．6±2．1）μmol／L、8．50±1．66、 （3．43±0．12）mmo]／L、（2．7±0．5）mmol／L、（0．84±0．24）mmol／L、（3．1±0．5）mmoL／L、（182±19）mmol／L；手术组大鼠上述指标术前分别为（6．2±0．6）mmol／L、（29.6±2．7）／xmol／L、7．43±1．03、（3．36±0．15）mmol／L、（2．6±0．5）mmol／L、（0．79±0．17）mmol／L、（2．9±0．6）mmol／L、（180±17）mmol／L，术后5周分另0为（4．5±0．8）mmol／L、（19．5±1．0）μmol／L、5．17±0．25、（1．46±0．08）mmol／L、（1．5±0．4）mmol／L、（1．09±0．18）mmol／L、（1．2±0．3）mmol／L、（146±16）mmol／L；上述指标术前3组比较，差异均无统计学意义（F=0．625，0．746，0．813，0．649，0．754，0．823，0．587，0．648，P〉0．05）；术前至术后5周变化趋势，3组比较，差异均有统计学意义（F=4．714，14．921，18．971，20．544，5．731，6．143，10．276，6．607，P〈0．05）。正常组、假手术组、手术组大鼠术后5周器官脂肪组织PPAR-γ蛋白含量分别为0．79±0．26、0．22±0．17、1．18±0．37，3组比较，差异有统计学意义（F=8．988，P〈0．05）；正常组与假手术组比较，差异有统计学意义（t=3．178，P〈0．05）；正常组与手术组比较，差异无统计学意义（t=1．494，P〉0．05）；假手术组与手术组比较，差异有统计学意义（t=4．084，P〈0．05）。结论Roux-en-Y胃转流术可减少代谢综合征大鼠器官脂肪堆积，改善糖脂代谢和胰岛素抵抗，上调器官脂肪组织PPAR-γ表达。

运动对高脂饮食诱导肥胖大鼠过氧化物酶体增长因子活化受体-δ表达和胰岛素抵抗的影响

研究运动对高脂饮食诱导的肥胖大鼠肌肉和脂肪组织中过氧化物酶体增长因子活化受体-δ（PPAR-δ）表达的影响,并探讨其改善胰岛素抵抗的可能机制.方法 取体质量135～150 g的9周龄雄性Wistar大鼠80只,随机数字表法取其中60只6周时间饲以高脂饲料用于制作肥胖大鼠模型,另20只饲以普通饲料.将54只造模成功肥胖大鼠随机分为高脂饮食组（HFD）、高脂饮食同时运动组（E-HFD）、高脂饮食后运动组（HFD-E）,每组18只,同时从普通饲料饲养大鼠中随机选择16只作为正常饮食组（RD）.按文献标准对各组大鼠进行6周运动训练.检测比较各组游泳运动训练后体质量、肿瘤坏死因子（TNF）-α、瘦素、白细胞介素（IL）-1的水平以及空腹血糖、空腹胰岛素并计算胰岛素敏感指数（ISI）,采用实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测肌肉和脂肪组织中PPAR-δ、葡萄糖转运蛋白（GLUT）-4、磷酸肌醇3激酶（PI3K）mRNA的表达,并采用Western blot法检测肌肉和脂肪组织中PPAR-δ蛋白的表达水平.组间数据比较采用双侧t检验.结果 HFD组ISI为1.13±0.21,相比HFD组,E-HFD组和HFD-E组的IS1分别提高了 71.1%和45.7%（分别为2.09±0.32和1.80±0.34）,而HFD-E组低于E-HFD组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）.HFD组TNF-α水平为（101±24）ng/L,相比HFD组,E-HFD组和HFD-E组则分别下降了20.0%和9.2%[分别为（81±16）和（92±19）ng/L],差异均有统计学意义（P＜0.05）.与HFD组相比,E-HFD组和HFD-E组瘦素和IL-I水平均有显著下降（均P＜0.05）.与HFD组相比,E-HFD组和HFD-E组骨骼肌和脂肪中PPAR-δ、GLUT-4、PI3K mRNA的表达均显著升高,差异均有统计学意义（均P＜0.05）,且在E-HFD组变化尤为显著（均P＜0.01）.与HFD组相比,E-HFD组骨骼肌和脂肪组织中PPAR-δ蛋白表达分别升高了388.4%和203.2%（均P＜0.05）;HFD-E组骨骼肌和脂肪组织中PPAR-δ蛋白的表达则分别升高了272.9%和117.9%（均P＜0.05）.结论 运动降低了高脂饮食诱导的肥胖大鼠的血清脂肪因子瘦素、TNF-α和IL-1水平,改善了胰岛素抵抗,可能是通过上调肌肉和脂肪组织中PPAR-δ的表达发挥作用.

过氧化物酶体增长因子活化受体γ与维甲酸类X受体在胆管癌中的表达及其对预后的影响

目的 探讨胆管癌组织中过氧化物酶体增长因子活化受体γ（PPARγ）和维甲酸类X受体（RXRα）蛋白的表达与胆管癌临床病理特征的关系及其对预后的影响.方法 采用免疫组化法检测69例胆管癌以及12例非肿瘤胆管黏膜上皮组织中PPARγ与RXRα的表达情况,并分析其与临床病理参数及预后的关系.结果 69例胆管癌组织、12例非肿瘤胆管黏膜上皮组织中PPARγ表达阳性率分别为59.4%、0;69例胆管癌组织、12非肿瘤胆管黏膜上皮组织中RxRα表达阳性率分别为78.3%、20%,差异有统计学意义.PPARγ蛋白的阳性表达与胆管癌TNM分期、淋巴结转移密切相关,PPARγ蛋白阳性表达组胆管癌病人的预后差.PPARγ与RXRα存在明显的正相关关系.结论 PPARγ表达与胆管癌临床病理特征密切相关.PPARγ和RXRα两者可能参与了胆管上皮癌变过程.

过氧化物酶体增殖物激活受体-γ通过调节炎症治疗肿瘤的研究进展

过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARs)是一组核受体和配体激活的细胞内转录因子,在细胞代谢、增殖、分化、组织重塑、炎症和动脉粥样硬化等生理过程中发挥着关键作用。PPARs还充当着肿瘤抑制因子的角色。PPAR-γ是PPAR家族中最著名的一种,可在结肠癌、乳腺癌、膀胱癌、肺癌和前列腺癌中高表达。PPAR-γ的配体通过PPAR-γ依赖性和独立途径发挥作用,还能调节全身炎症和肿瘤微环境中的不同炎症介质和转录因子。通过激活PPAR-γ的合成配体和天然配体都能通过调节炎症途径抑制肿瘤细胞的生长和繁殖。恶性肿瘤和炎症是相互关联的过程,可通过降低癌细胞带来的风险和负担来抑制肿瘤。因此,PPAR-γ可以作为一个有前途的靶点,用于开发抑制癌细胞增殖的临床药物分子。本文旨在综述强调PPAR-γ作为药物开发的潜在靶点,旨在抗炎从而抑制肿瘤的研究进展。

过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子-1α对奶牛脂肪肝的调节作用及机制

随着畜牧业发展对畜禽养殖和畜产品品质要求的提高,营养代谢疾病在动物群体中的发病率也呈逐渐增加趋势。脂肪肝作为营养代谢性疾病的一种,常发生在围产期高产奶牛群体中,长期处于能量负平衡状态的高产奶牛,过量的动员体脂造成肝脏甘油三酯堆积,从而形成脂肪肝。患有脂肪肝的奶牛不仅会导致其产奶量降低,产犊间隔延长,还会诱发其他疾病的发生,对奶牛的生产性能和畜牧业的发展产生巨大的负面作用。核转录辅激活因子过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子-1α(PGC-1α)参与多种核受体及转录因子相互作用,从而调控相关靶基因的表达。PGC-1α与奶牛脂肪肝、酮病和乳腺炎等疾病有着密切的关系,有可能成为新的疾病治疗靶点。本文综述了PGC-1α调控的各种分子途径,将调控脂质代谢、线粒体功能障碍、氧化应激、胰岛素抵抗和炎症反应联系起来,进一步阐明PGC-1α在奶牛脂肪肝中发挥调节作用的最新研究进展。

姜黄素激活过氧化物酶体增殖因子活化受体γ信号对大鼠肝星状细胞基质金属蛋白酶2、9活性和胞核核因子-κBp65表达的影响

目的研究姜黄素激活过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPARγ)信号对大鼠肝星状细胞(HSC)活化、基质金属蛋白酶(MMPs)活性和胞核核因子-κBp65(RelA)表达的影响。方法采用肝脏原位灌流酶消化、Nycodenz密度梯度离心法分离大鼠HSC。药物处理后收集裂解细胞,Western blot检测PPARγ、α平滑肌肌动蛋白(αSMA)、Ⅰ型胶原、RelA。收集细胞培养上清,明胶酶谱法检测MMP2、9的活性。结果随着HSC活化程度增加PPARγ表达水平不断下降,姜黄素上调其表达水平(P<0·01),拮抗剂GW9662显著阻断这种作用(P<0·01)。姜黄素抑制αSMA的表达、I型胶原的生成以及胞核内活化RelA的表达(P<0·01),显著升高MMP2、9的活性(P<0·01)。结论姜黄素激活PPARγ信号途径抑制HSC活化,升高MMP2、9活性,抑制/干扰NFκB的核转位。

血过氧化物酶体增殖因子活化受体γ、胱抑素C与老年动脉粥样硬化的相关性

目的测定健康成年人及老年动脉粥样硬化(AS)患者的血过氧化物酶体增殖因子活化受体(PPAR)γ基因表达及胱抑素C含量,探讨该两项指标与AS程度的相关性。方法选取健康体检成年人40例为健康对照组。选取老年2型糖尿病患者共80例,彩超检查均提示有颈动脉内膜增厚伴斑块形成。测定肱-踝动脉脉搏波速度(ba PWV)及踝肱指数(ABI),左右两侧均满足1 200 cm/s<ba PWV<2 000 cm/s且0.8<ABI<1.0者为轻度AS组,均满足ba PWV≥2 000 cm/s且ABI≤0.8者为重度AS组,每组各40例。检测三组患者血浆PPARγ基因表达及血清胱抑素C含量。结果健康对照组、轻度AS组、重度AS组的PPARγ基因表达灰度分别为(37 361.11±12 742.51)、(50 619.15±17 782.41)、(80 349.33±21 003.19),胱抑素C浓度分别为(0.83±0.15)mg/L、(0.88±0.26)mg/L、(0.94±0.33)mg/L;三组PPARγ差异显著(P<0.01),胱抑素C含量无统计学差异(P>0.05);PPARγ基因灰度与AS严重度呈明显正相关(r=0.61,P<0.01)。结论 PPARγ与AS有密切关系,其血浆水平可能是反映AS严重程度的指标。

线粒体功能异常与腺苷酸活化蛋白激酶/过氧化物酶体增殖活化受体γ共激活因子1α信号途径在糖尿病周围神经病变机制中的作用

糖尿病周围神经病变(DPN)是一种由长期高血糖引起的神经系统变性疾病。其病理过程如周围神经元丢失、神经脱髓鞘、轴索变性、神经再生修复障碍等可能与线粒体功能异常有关。线粒体超微结构改变、线粒体蛋白质组学异常、线粒体电子传递链及线粒体功能障碍等可能为发生DPN的原因,这些因素均与腺苷酸活化蛋白激酶/过氧化物酶体增殖活化受体γ共激活因子1α信号途径缺陷相关。针对该通路的药物可能具有神经保护或减缓DPN进展的作用,具有一定的临床应用前景。

老年糖尿病肾病患者血清内转化生长因子-β1和过氧化物酶体增殖物活化受体-γ表达水平

目的通过检测糖尿病肾病(DN)患者血清转化生长因子(TGF)-β1和过氧化物酶体增殖物活化受体(PPAR)-γ的蛋白含量及mRNA变化水平,探讨二者是否参与DN的发病进程。方法 DN患者50例作为DN组,同期体检健康老年人50例作为对照组。两组均清晨空腹取血,采用酶联免疫吸附(ELISA)实验和实时聚合酶链反应(RT-PCR)法检测血清中TGF-β1和PPAR-γ的蛋白及mRNA水平。结果与对照组比较,DN组血清中TGF-β1的蛋白含量及mRNA水平明显升高(P<0.01)、PPAR-γ的蛋白含量及mRNA水平明显降低(P<0.01),且TGF-β1和PPAR-γ具有负相关性(r=-0.689,P=0.042;r=-0.711,P=0.036)。结论 TGF-β1水平的上调和PPAR-γ水平的下调及二者具有明显负相关性,说明可能参与了DN的发病进程。

过氧化物酶体增殖因子活化受体γ在大鼠慢性阻塞性肺疾病模型中的表达及意义

目的研究过氧化物酶体增殖因子活化受体(PPAR)γ在大鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型中的表达及意义。方法 SD大鼠24只,随机分为对照组(A组)和实验5 w组(B组)和实验10 w组(C组),每组8只。实验组采用气管内注入胰蛋白酶和熏香烟的方法,建立大鼠COPD模型。从开始实验起,实验第5周处死实验B组;第10周处死C组。应用病理学及肺功能检查评价COPD动物模型,免疫组化RT-PCR和Western印迹方法检测大鼠肺组织PPARγmRNA及蛋白的表达水平。结果 B组与A组比较,炎症反应明显,已形成慢性阻塞性肺气肿,并于第10周形成明显的肺气肿。PPARγ在正常肺组织与患慢性阻塞性肺气肿的肺组织均有表达,主要定位在炎性浸润细胞的核和核周围区,比较大鼠肺组织PPARγ在COPD中的表达(吸光度值A值):A组为0.497±0.078,B组PPARγ在肺组织中表达减弱(0.329±0.024),C组PPARγ在肺组织中表达明显减弱(0.216±0.049),差异均有统计学意义(P<0.01)。PPARγmRNA表达随着COPD病程的进展逐渐降低,A组光密度比值为(1.06±0.10);B组为(0.50±0.02);C组为(0.27±0.02),与A组比较,B、C组差异有统计学意义(均P<0.01)。Western印迹也表明COPD模型B组和C组比A组PPARγ蛋白表达降低,且B组蛋白表达降低的更为明显。结论 PPARγ在COPD的发生及进展中起重要作用,并且随着病程的发展,蛋白表达降低更为显著,因此该蛋白有望成为未来COPD治疗的新靶点。

胃癌组织中过氧化物酶增殖因子活化受体与VEGF mRNA表达的相关性和意义

目的研究过氧化物酶增殖因子活化受体γ(PPARγ)和血管内皮生长因子(VEGF)在胃癌组织中表达的相关性及其意义。方法采用RT-PCR方法检测36例胃癌手术标本中PPARγ和VEGF mRNA的表达,同时选取相应的肿瘤以远正常胃黏膜作为对照。结果PPARγ mRNA在胃癌中的表达阳性率和量均高于正常胃黏膜(χ2=8.574,P=0.002;t=46.54,P=0.000);VEGF mRNA在胃癌中的表达阳性率和量也均高于正常胃黏膜(χ2=8.229,P=0.004;t=45.32,P=0.000)。PPARγmRNA表达与VEGFmRNA表达呈正相关关系(r=0.429,P=0.009);PPARγ mRNA表达与胃癌淋巴结转移有关(P=0.002),与临床病理TNM分期有关(P=0.042);VEGF mRNA表达也与胃癌淋巴结转移有关(P=0.037),与临床病理TNM分期有关(P=0.045)。结论PPARγ和VEGF在胃癌进展和转移过程中可能发挥重要作用,联合检测PPARγ和VEGF表达对胃癌患者病情判断和预后评价有一定的临床意义。

多器官功能障碍综合征患者外周血中过氧化物酶增殖激活受体-γ与血小板活化因子的相互关系研究

目的研究监测多器官功能障碍综合征(MODS)患者中过氧化物酶增殖激活受体-γ(PPAR-γ)与血小板活化因子(PAF)的临床意义及其相互关系。方法13例MODS患者分别于第1、3、5、7、14天抽血检查PPAR-γ与PAF并与正常组进行比较。结果MODS患者外周血单核细胞中的PPAR-γ与血清中的PAF较正常对照组有明显升高(P<0.01),并具有负相关关系(r= -0.553)。结论PPAR-γ与PAF参与MODS的发生、发展,可以作为MODS早期诊断与判断病情发展的指标。PPAR-γ有可能成为MODS治疗的潜在靶点。

脂多糖对小鼠肾脏炎症因子、过氧化物酶体增殖物活化受体γ及其辅调节因子表达的影响

目的:观察腹腔注射脂多糖(LPS)对小鼠肾脏单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPAR-γ)及其辅调节因子表达的影响。方法:雄性云南昆明小白鼠[(20±2)g]随机分成两组:LPS组,腹腔注射LPS(5mg/kg);对照组,腹腔注射等体积磷酸盐缓冲液。分别于0～72h后处死小鼠,检测血清尿素氮和肌酐变化;留取肾脏,EMSA法检测NF-κB及PPAR-γ的DNA结合活性;Real-time PCR法检测肾组织MCP-1、iNOS、PPAR-γ及其辅激活因子1(PGC-1)、类固醇受体辅激活因子1(SRC-1)、SRC-2、SRC-3及核辅抑制因子(NCoR)mRNA的表达;ELISA检测肾组织MCP-1蛋白表达,Western Blot检测肾组织核蛋白PPAR-γ表达;HE染色观察病理改变,免疫组织化学法观察肾组织巨噬细胞的浸润情况。结果:小鼠腹腔注射LPS后血清尿素氮升高明显(P<0.05),但血肌酐无明显变化。肾组织NF-κB的DNA结合活性在0.5h后即明显增高,而PPAR-γ的DNA结合活性早期增强,8h后开始减弱。与同时间点对照组及基础值相比,小鼠腹腔注射LPS后6h,12h及24h,肾组织MCP-1 mRNA及蛋白表达均显著增加(P<0.01);而iNOS mRNA表达在6h及12h后显著增加(P<0.01)。PPAR-γ及PGC-1 mRNA表达则显著下调(P<0.01),核内PPAR-γ蛋白含量早期升高,24h时显著下降(P<0.01)。SRC-1、SRC-2、SRC-3及NCoR mRNA的表达与对照组相比无显著差异。LPS作用后肾组织HE染色未见显著改变,免疫组化可见肾组织巨噬细胞浸润,最初主要分布在髓质肾小管周围,在48h及72h浸润更为明显,皮质肾小球周围也可见巨噬细胞浸润。结论:小鼠腹腔注射LPS后肾组织中NF-κB活性及相关炎症因子MCP-1和iNOS表达上调,肾组织内有明显的巨噬细胞浸润,表明处于炎症状态,而PPAR-γ及其辅激活因子PGC-1的表达下调可能与炎症发展相关。

大鼠过氧化物酶体增生因子活化受体α基因重组腺病毒载体及在乳鼠心肌细胞中的表达

背景:过氧化物酶体增生因子活化受体α是调节心脏脂肪酸氧化的重要核转录因子,利用基因工程技术构建其重组腺病毒载体对研究心脏能量代谢障碍机制具有重要意义。目的:构建大鼠过氧化物酶体增生因子活化受体α基因重组腺病毒载体,评价其在原代培养的乳鼠心肌细胞中的表达效率。方法:采用RT-PCR法自SD大鼠肝脏扩增过氧化物酶体增生因子活化受体α基因,将其克隆至带有增强型绿色荧光蛋白的穿梭质粒载体pAd-Track-CMV。线性化重组穿梭质粒载体并转化入含有腺病毒骨架质粒pAd-Easy-1的感受态大肠杆菌BJ5183构建重组腺病毒载体质粒。用脂质体将线性化的重组腺病毒载体质粒转染于人胚肾293细胞以包装、扩增,纯化病毒后计算滴度。用纯化的重组腺病毒转染心肌细胞,荧光显微镜观察转染效率;荧光定量PCR、免疫印迹法检测细胞过氧化物酶体增生因子活化受体αmRNA、蛋白表达。结果与结论:成功构建携带大鼠过氧化物酶体增生因子活化受体α基因的重组腺病毒载体,病毒滴度为3.5×1011pfu/L。重组腺病毒转染心肌细胞的效率达90%以上,被转染细胞目的基因mRNA、蛋白表达显著增高。该载体的成功构建为研究过氧化物酶体增生因子活化受体α基因在心肌能量代谢障碍中的作用奠定基础。

过氧化物酶体增殖因子活化受体γ在垂体腺瘤中的表达及其意义

目的:观察过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPARγ)在垂体腺瘤组织中的表达情况,分析PPARγ与垂体腺瘤激素免疫分型等之间的关系。方法:选取2002年1月—2005年5月38例手术切除的垂体腺瘤,利用RT-PCR和Western Blot技术分析PPARγ在垂体腺瘤中的表达情况及其与垂体腺瘤激素免疫分型等之间的关系。结果:所有肿瘤均发现有PPARγ的表达。按照垂体腺瘤激素免疫分型各组肿瘤表达的PPARγ mRNA和PPARγ蛋白表达水平均无显著差异。结论:人类垂体腺瘤中有PPARγ的表达。

过氧化物酶体增殖因子活化受体γ在大肠癌中的表达及意义

目的:分析过氧化物酶体增殖因子活化受体(PPAR-γ)的表达与大肠癌临床病理特征之间的关系,并探讨PPAR-γ对大肠癌细胞增殖活性的影响。方法:采用免疫组织化学法,检测56例带有癌旁正常黏膜的大肠癌组织中PPAR-γ与增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。结果:PPAR-γ在大肠癌组织中的表达显著高于癌旁正常黏膜组织(P<0.001)。PPAR-γ的表达与肿瘤分化程度、浸润深度、Dukes分期以及淋巴结转移有密切关系(P<0.05)。PPAR-γ的表达程度与PCNA显著相关(P<0.001)。结论:PPAR-γ的表达与大肠癌的分化程度、浸润深度和Dukes分期及淋巴结转移有关;PPAR-γ可促进大肠癌细胞的增殖。