阿托伐他汀钙对糖尿病大鼠肾脏肿瘤坏死因子α、过氧化物酶体激增剂激活受体γ及核因子κB表达影响的研究

目的观察糖尿病大鼠应用阿托伐他汀钙治疗后肾脏组织TNF-α、PPAR-γ、核因子κB(NF-κB)表达情况及其对肾脏的影响。方法 55只3月龄SD雄性大鼠随机选取10只作为正常对照(NC)组,余45只制备糖尿病大鼠模型。共40只符合造模标准,随机分为糖尿病未治疗(D)组、胰岛素治疗(I)组、阿托伐他汀钙治疗(A)组及胰岛素联合阿托伐他汀钙治疗(I+A)组,每组各10只。实验第4天,I、I+A组接受中效胰岛素治疗,A、I+A组予阿托伐他汀钙灌胃。14周时检测TNF-α、PPAR-γ及NF-κB表达情况。结果糖尿病大鼠造模成功率为88.8%。糖尿病大鼠肾小球及集合管TNF-α、PPAR-γ及NF-κB表达均较NC组增高。治疗14周后,各治疗组TNF-α及PPAR-γ表达未见明显变化,而NF-κB在A、I+A组肾小球及集合管中表达降低,肾脏组织病变减轻。结论阿托伐他汀钙可能通过抑制糖尿病大鼠肾脏组织中NF-κB表达发挥抗炎、保护肾脏的作用。

腹膜间皮细胞过氧化物酶体增殖物活化受体γ的表达及其配体对CD40和细胞间黏附分子1的影响

目的 观察过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPAR-γ)在大鼠腹膜间皮细胞 (RPMCs)中的表达以及脂多糖(LPS)的调节作用,并探讨PPAR-γ天然配体15d-PGJ2及人工合 成配体cightazone对RPMCs表达CD40和ICAM-1的影响。方法 分离及培养RPMCs,常规传代 及鉴定,取第2代细胞用于实验研究。LPS不同浓度(0．1、1．0、10、50及100μg／ml)、LPS(1 μg／ml)处理后不同时间点及15d-PGJ2(3 μmol／L)、ciglitazone(10μmol／L)作用细胞36h后收 集细胞。RT-PCR检测PPAR-γ、CD40以及ICAM-1 mRNA表达。免疫细胞化学检测PPAR-γ在 RPMCs中的分布。Western印迹检测PPAR-γ及ICAM-1蛋白表达。结果 (1)常规培养的RPMCs 表达一定量PPAR-γ,表达部位主要分布于RPMCs细胞核内,在细胞浆微弱表达。(2)随着LPS 浓度逐渐增大,PPAR-γ蛋白表达水平呈逐渐增高的趋势,LPS浓度为10μg／ml时其表达为最 高峰。LPS(1μg／ml)作用12 h时PPAR-γ蛋白表达最强,PPAR-γ1表达高于PPAR-γ2;之后显 著降低,持续至72 h。(3)LPS刺激后RPMCs CD40mRNA表达显著增强;15d-PGJ2、ciglitazone显著 降低CD40 mRNA表达(P均<0．01)。(4)LPS刺激后RPMCs ICAM-1蛋白表达显著增加;15d-PGJ2 增加LPS介导的ICAM-1 mRNA表达(P<0．01),但显著抑制ICAM-1蛋白表达(P<0．05)。 ciglitazone对LPS介导的ICAM-1 mRNA和蛋白表达均有显著抑制作用(P均<0．05)。结论 RPMCs结构性表达PPAR-γ。LPS调节PPAR-γ表达呈现先增强后抑制趋势。PPAR-γ配体可显著 抑制LPS介导的CD40 mRNA和ICAM-1蛋白的表达。提示RPMCs功能性表达PPAR-γ,可能通 过负性调节炎症介质分泌而参与腹腔局部防御。

PPARγ激动剂罗格列酮对心肌缺血再灌注损伤的影响

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂罗格列酮对心肌缺血再灌注损伤的影响及机制。方法42只SD大鼠随机分为假手术组(14只)、I/R组(14只)和I/R+Ros组(14只)。应用结扎左冠状动脉60min,再灌注60min的方法制作心肌缺血再灌注模型;用NBT染色法判断心肌梗死面积;用放射免疫法测定血浆及心肌血管紧张素Ⅱ和醛固酮等指标。结果与I/R组相比,I/R+Ros组降低心肌缺血再灌注后心肌梗死面积23.9%(P<0.05);显著减轻心肌肿胀度(P<0.05);明显抑制心肌血管紧张素Ⅱ、醛固酮及血浆血管紧张素Ⅱ水平(P<0.05)。结论PPARγ激动剂罗格列酮对心肌缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能与抑制心肌局部肾素-血管紧张素系统有关。

PPAR γ-ACAT1途径在肺炎衣原体诱导巨噬细胞泡沫化中的作用

目的:观察过氧化物酶体增殖活化受体γ(PPARγ)和酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)在肺炎衣原体(C.pn)诱导巨噬细胞泡沫化中的作用。方法:给予C.pn(1×105-1×106IFU)感染和/或PPARγ的配体罗格列酮(1-20μmol/L)孵育THP-1源性巨噬细胞48h。运用油红O染色观察细胞浆内脂滴的变化,酶荧光学法检测细胞内胆固醇酯含量的变化。分别运用RT-PCR和Western blotting检测ACAT1、PPARγ mRNA和蛋白表达。结果:高浓度的C.pn(5×105和1×106IFU)感染使THP-1源性巨噬细胞内脂滴明显增多,胆固醇酯与总胆固醇的比值明显增加(>50%)。C.pn感染呈浓度依赖性上调ACAT1 mRNA和蛋白表达,并且浓度依赖性地下调PPARγ mRNA和蛋白表达(P<0.05)。高浓度的罗格列酮(10、20μmol/L)明显抑制C.pn诱导的细胞内脂质滴的增多和胆固醇酯含量的增加,同时罗格列酮呈浓度依赖性抑制C.pn诱导的ACAT1 mRNA和蛋白表达的上调(P<0.05)。结论:C.pn经PPARγ途径上调ACAT1表达,进而诱导巨噬细胞泡沫化,这为进一步阐明C.pn感染促进动脉粥样硬化发生发展提供一个新的理论依据。

PPARγ激活剂rosiglitazone对大鼠慢性阻塞性肺疾患的防治作用

目的:评价高亲和力过氧化物酶体增生物激活的受体γ(PPARγ)激动剂rosiglitazone对大鼠慢性阻塞性肺疾患(COPD)的防治作用。方法:在第1和14d每只大鼠气管内滴入大肠杆菌脂多糖(LPS)200μg(0.2mL),第2-28d(第14d除外)每天烟熏40min,每只经食管灌入rosiglitazone0.02mg。第29d处死大鼠,取肺组织检查形态学改变;取血清测血糖、血脂变化;取脾细胞测对LPS的反应。结果:模型组大鼠肺泡明显扩张、有的肺泡融合形成较大囊腔。Rosiglitazone处理的大鼠肺体积较小,显微镜下可见肺泡扩张不明显,肺泡间隔较完整,肺泡直径为(134.997±17.568)×10-3μm,低于模型组大鼠(308.362±111.913)×10-3μm,高于正常对照大鼠(5.116±1.673)×10-3μm(P<0.01)。血糖、甘油三酯、胆固醇和低密度脂蛋白含量均无明显变化。Rosiglitazone抑制正常大鼠、模型大鼠和rosiglitazone处理的大鼠脾细胞对LPS的增殖反应。结论:Rosiglitazone可减轻熏烟和气管内滴入LPS诱导的肺气肿。

替米沙坦对肝脏和骨骼肌细胞脂蛋白脂肪酶表达的影响

目的通过观察替米沙坦对HepG2细胞和C2C12细胞过氧化物酶体激增剂激活受体(PPAR)α和脂蛋白脂肪酶(LPL)表达的影响,以探讨其改善脂肪酸代谢的机制。方法在HepG2细胞和诱导成熟后的C2C12细胞中加入不同浓度的替米沙坦培养48h以及同一浓度替米沙坦作用的不同时间,应用RT-PCR方法检测PPAR-α和LPLmRNA的表达,用Western blot杂交法检测PPARα和LPL蛋白的表达。然后在HepG2细胞血用PPARα选择性拮抗剂MK886阻断替米沙坦作用,24h后观察LPLmRNA的表达。结果 (1)替米沙坦呈剂量和时间依赖性增强HepG2细胞中PPARα和LPLmRNA和其蛋白质的表达,但对C2C12中PPARα和LPL的表达无明显影响。(2)替米沙坦对HepG2细胞中LPLmRNA的上调作用可以被MK886抑制。结论替米沙坦在人类肝脏细胞中可以同时上调PPARα和LPL的表达,并且对LPL的调节作用是通过PPARα介导的。

球形脂联素对胰岛β细胞胰岛素分泌和凋亡的影响

目的观察脂联素对胰岛β细胞胰岛素分泌、UCP-2、PPARγmRNA表达和凋亡的影响。方法大鼠胰岛细胞株RIN-m5F分别用5.6mmol/L和16.7 mmol/L葡萄糖,并加入不同浓度的球形脂联素(0～2500μg/L)培养48 h。放免法测定胰岛素含量,RT-PCR检测UCP-2、PPARγmRNA的表达。流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western Blot检测激活型Caspase3的表达。结果高糖培养下脂联素同时干预后基础胰岛素分泌显著降低,高糖刺激的胰岛素分泌显著增加。和高糖组比较,脂联素组UCP-2、PPARγmRNA的表达显著降低(P<0.05),细胞凋亡率和激活型Caspase-3的表达显著降低(P<0.05)。结论脂联素能改善高糖所致的β细胞胰岛素分泌异常,其机制可能与通过下调PPARγ降低UCP-2的表达有关。脂联素可拮抗高糖所致的β细胞凋亡。