过氧化物酶增殖激活受体γC161T基因多态性与低出生体质量新生儿的关系

目的探讨基因过氧化物酶增殖激活受体(PPAR)γC161T多态性对低出生体质量新生儿的影响。方法用横断面调查法,使用统一的调查表,对入住本院分娩的孕妇及其单胎、活胎的低出生体质量儿和健康对照新生儿进行调查,共得到有效样本268个母亲-新生儿对,并根据出生体质量和孕周进行分组,分为健康对照组和低出生体质量组,其中低出生体质量组包括早产儿组和小于胎龄儿组。使用多聚酶链-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测其外周血基因PPARγC161T单核苷酸多态性,分析不同基因型对其低出生体质量的影响。结果 1.根据双变量Logistic回归分析得出低出生体质量与父母的受教育水平、职业、家庭居住环境和氛围及维生素的补充相关,相关系数分别为-0.434、-0.337、-0.343、-0.269、-0.691、0.296、0.235。2.PPARγC161T多态性CC型、CT型与TT型基因频率分布在健康对照组、小于胎龄儿组和早产儿组分别为53.33%、14.44%、21.11%,75.00%、18.18%、6.82%和76.67%、20.00%、3.33%,早产儿组和小于胎龄儿组比较均无统计学差异,但与健康对照组比较均有统计学差异。携带C等位基因增加低出生体质量的风险,低出生体质量组携带CC基因型风险与健康出生体质量儿的OR值分别为1.938(95%CI:1.001～3.750,P=0.002)、2.122(95%CI:1.091～4.127,P=0.000)。结论低出生体质量是环境和遗传因素共同作用的结果,PPARγC161T多态性与低出生体质量有关,C等位基因可能是低出生体质量的遗传易感基因。

过氧化物酶体增殖物激活受体γC161T点突变与2型糖尿病合并冠心病的相关性

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)C161T点突变与2型糖尿病(T2DM)合并冠心病(CHD)的相关性。方法研究对象分3组正常对照组(NC)118例,T2DM组152例,T2DM合并CHD组150例、应用聚合酶链反应限制性酶切片段长度多态性技术检测PPARγC161T基因突变。结果T2DM合并CHD组与T2DM和NC组相比,T2DM合并CHD组CC基因型频率显著升高(78.7%,62.5%,63.6%,P<0.05),CT基因型频率显著降低(17.3%,34.9%,33.9%,P<0.05);CT基因型者空腹血糖、总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇水平低于CC、TT基因型(P<0.05);多因素logistic回归分析提示CC基因型为T2DM合并CHD的独立危险因素(OR=2.257,95%CI=1.15～4.45)。结论PPARγC161T点突变与T2DM合并CHD相关,降低T2DM合并CHD的患病风险。

过氧化物酶体增殖物激活受体γC161-T、细胞色素P450ⅡE1基因多态性与脂肪性肝病相关性研究

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γC161-T(PPARγC161-T)、细胞色素P450ⅡE1(CYPⅡE1)基因多态性脂肪性肝病的关系。方法检测183例脂肪肝患者和40例健康对照者PPARγC161-T、CYPⅡE1的基因多态性。检测所有受试者的BMI、腰围、血压,测定谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、谷氨酰转肽酶(GGT)、空腹血糖(FBG)、腹胰岛素(FINS)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)等指标。结果脂肪肝组腰围、BMI、SBP、FBG、HOMA-IR、TG、TC、UA、ALT、AST、GGT均高于对照组;PPAR-γC161-T基因型频率及等位基因频率在脂肪肝组与对照组差异无显著性;PPAR-γC161-T基因型CC和CT/TT型比较,对照组中基因型CT/TT的FBG较CC基因型高;CYPⅡE1基因型C_1C_2、C_2C_2频率及等位基因C_2频率脂肪肝较对照组增加。CYPⅡE1基因型C_1C_1和C_1C_2/C_2C_2型比较,脂肪肝组C_1C_2/C_2C_2型的GGT增高。结论 CYPⅡE1基因多态性与脂肪肝脂质过氧化密切相关,等位基因C_2与脂肪肝的发病密切相关。CYPⅡE1基因多态性可能在脂肪肝的形成中起着决定性的作用。

狼疮方含药血清对人近端肾小管上皮细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ表达及CD40、RANTES的影响

目的:观察狼疮方含药血清对人近端肾小管上皮细胞(HK-2)过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)及干扰素(INFγ)和肿瘤坏死因子(TNFα)诱导的白细胞分化抗原40(CD40)、受激活调节的正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)表达的影响,探讨该复方体外抗炎效应及其可能机制。方法:制备狼疮方含药大鼠血清;HK-2细胞株体外培养,分组如下:(1)培养基对照组;(2)正常鼠血清对照组;(3)狼疮方含药血清组;(4)IFNγ+TNFα刺激组;(3)刺激+10%狼疮方血清组;(4)刺激+10%正常鼠血清对照组。采用免疫印迹(Western-blot)检测PPARγ蛋白表达,半定量逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测CD40 mRNA、RANTES mRNA表达水平。结果:(1)正常HK-2细胞基础量表达PPARγ;10%狼疮方含药血清作用下,PPARγ蛋白表达呈现时间依赖性先增高后降低的趋势。(2)正常HK-2细胞基础水平表达CD40、RANTES。IFNγ+TNFα刺激后,CD40和RANTES表达显著升高;10%狼疮方含药血清可显著抑制IFNγ+TNFα诱导的CD40和RANTES表达;正常鼠对照血清对CD40和RANTES表达无明显影响。结论:狼疮方含药血清可能通过激活PPARγ途径抑制人近端肾小管上皮细胞CD40和RANTES表达,从而发挥抗炎效应。

氧化低密度脂蛋白对THP-1巨噬细胞脂质蓄积、亲脂素与过氧化物酶体增殖物激活受体γ表达及蛋白激酶Cα活性的影响

目的:以THP-1巨噬细胞为研究对象,观察氧化低密度脂蛋白(oxLDL)对细胞内脂质蓄积、亲脂素(adi-pophilin)与过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)表达以及蛋白激酶Cα(PKCα)活性的影响。方法:用0、10、20、40、80 mg/L oxLDL与THP-1巨噬细胞共孵育24 h,油红O染色和高效液相色谱检测细胞内脂质蓄积情况;半定量RT-PCR和Western blot检测adipophilin、PPARγ和PKCα表达的变化情况;PepTag(非放射性蛋白激酶检测法对荷脂细胞胞膜PKCα活性进行定量检测。结果:随着oxLDL浓度的增加,THP-1巨噬细胞内脂滴增加变大,胆固醇酯/总胆固醇比值升高,adipophilin、PPARγ和PKCα表达增强(与0 mg/L oxLDL处理组比较,P均<0.05),胞膜PKCα活性由(0.07±0.01)kU/L增至(0.14±0.02)kU/L(P<0.05)。结论:oxLDL可增强巨噬细胞PKCα活性,上调PKCα、PPARγ和adipophilin的表达,促进THP-1巨噬细胞中脂质的蓄积;oxLDL、PKCα、PPARγ和adipophilin之间可能存在着某种调控机制。

青蒿琥酯对非酒精性脂肪炎大鼠肝组织中过氧化物酶体增殖物激活受体γ和固醇调节元件结合蛋白-1c表达的影响

目的探讨青蒿琥酯对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)和固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)表达的影响。方法采用高脂饲料喂养的方法复制大鼠NASH模型,实验分正常组、模型组、易善复组、青蒿琥酯低剂量组、中剂量组和高剂量组。正常组每天予以标准饲料喂养,正常组和模型组给予同等剂量的生理盐水。给药治疗8周后,提取肝组织,运用免疫组化方法测定各组大鼠肝组织PPARγ、SREBP-1c蛋白表达情况;采用硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量;采用黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)含量;采用分光光度法测定谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-Px)含量;光镜观察肝脂肪变、炎症及纤维化程度。结果与正常组相比,在模型组中不仅PPARγ蛋白表达(1.67±1.01)明显减少,而且SREBP-1c蛋白表达(3.27±1.03)明显增多(均P<0.01);青蒿琥酯低中剂量组与模型组相比,PPARγ蛋白表达增多,SREBP-1c蛋白表达明显减少,并且呈剂量依赖性(均P<0.05),青蒿琥酯高剂量组PPARγ为(3.21±1.02),SREBP-1c为(1.32±0.77),与模型组相比,差异均有高度统计学意义(P<0.01)。与模型组相比,青蒿琥酯各剂量组能提高SOD和GSH-Px的含量,降低MDA的含量,并且呈剂量依赖性(均P<0.05);青蒿琥酯能明显改善大鼠肝组织脂肪变、炎症程度和肝纤维化程度。结论青蒿琥酯治疗大鼠NASH的机制可能与上调PPARγ和下调SREBP-1c的表达有关。

人绒毛膜促性腺激素对3T3-L1脂肪细胞过氧化物酶增殖体激活受体γ及脂联素mRNA表达的影响

目的:探讨人绒毛膜促性腺激素(HCG)对3T3-L1脂肪细胞过氧化物酶增殖体激活受体γ(PPARγ)及脂联素mRNA表达的影响。方法:分别用50、500和5000U/LHCG干预未分化脂肪细胞2、4和6d,未用HCG干预为空白对照组,PT-PCR测定PPARγmRNA的表达;用诱导分化液(1μmol/L地塞米松+0.5mmol/L3-异丁基-1-甲基黄嘌呤+10ng/L胰岛素)诱导3T3-L1脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞,油红O染色鉴定后用5000U/LHCG干预成熟脂肪细胞6、12和24h,未用HCG干预为空白对照组,用RT-PCR测定PPARγ及脂联素mRAN的表达情况。结果:不同剂量HCG干预未分化3T3-L1脂肪细胞,与空白对照组相比,不同剂量干预组未分化脂肪细胞PPARγmRNA的表达量均增加,差异有统计学意义(F=19.823、21.352和23.519,P均<0.001);不同剂量HCG干预组组间比较,5000U/L剂量干预组PPARγ的表达量较50和500U/L剂量组增加,差异均有统计学意义(P均<0.05);50和500U/L剂量组比较,PPARγmRNA的表达量差异无统计学意义(P>0.05)。5000U/LHCG干预已分化3T3-L1脂肪细胞后,空白对照组、干预6、12和24h组相比,脂肪细胞PPARγmRNA的表达差异有统计学意义(F=26.907,P<0.001),脂联素mRNA的表达差异无统计学意义(F=0.066,P=0.976)。结论:HCG可能促进3T3-L1脂肪细胞的分化,但对脂联素的分泌无影响。

过氧化物酶增殖物激活受体γ与固醇调节元件结合蛋白-1c的研究进展

非酒精性脂肪性肝病（nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD）,从病理上分为单纯性脂肪肝、脂肪性肝炎、脂肪性肝纤维化和脂肪性肝硬化.国内外研究发现众多肥胖相关因子都与之相关,过氧化物酶体增殖物激活受体γ（Proliferator-Activated Receptorγ,PPAR-γ）与固醇调节元件结合蛋白-1c （sterol regulatory element-binding protein-1,SREBP-1c）就是其中的两个重要的相关因子[1].

过氧化物酶体增殖物激活受体γ激动剂对小鼠变应性鼻炎治疗的作用与机制研究

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferators-actived receptor,PPAR)γ激动剂对小鼠变应性鼻炎的治疗作用及机制。方法采用卵清蛋白(OVA)建立变应性鼻炎小鼠模型,观察吡格列酮(PIO)对变应性鼻炎症状的改善;取鼻腔组织行HE染色,采用real time PCR检测脾脏Foxp3、T-bet、GATA-3 mRNA表达;流式细胞仪检测脾脏中CD4^+Foxp3^+T细胞含量。结果小鼠变应性鼻炎组(AR组)喷嚏和搔鼻频率明显高于对照组(control组),经PIO治疗后症状得以改善;AR组小鼠鼻黏膜上皮连续性破坏,黏膜下大量炎症细胞浸润;PIO治疗后炎症细胞浸润明显减少,同时上皮完整性修复良好;PIO组Foxp3 mRNA表达高于AR组(P<0.001),GATA-3则较AR组明显降低(P<0.001),而T-bet无统计学差异;AR组CD4^+Foxp3^+T细胞含量(4.43%±0.25%)较control组(5.19%±0.39%)降低(P<0.001),PIO治疗后CD4^+Foxp3^+T细胞含量(6.35%±0.37%)高于control组及A R组。结论 PPA Rγ激动剂能够有效缓解小鼠鼻过敏症状,调节Th1/Th2平衡;PPARγ激动剂可能是通过促进Foxp3表达,进而扩增调节性T细胞达到治疗变应性鼻炎的作用。

过氧化物酶体增殖物激活受体γC161→T基因多态性与冠心病的关系

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisomeproliferation activatedreceptor gamma ,PPARγ)C16 1→T基因多态性与冠心病的关系。方法 运用聚合酶链式反应及限制酶片段长度多态性技术分析无血缘关系汉族人群 (包括 89例正常健康人 ,2 0 3例冠心病患者 )的PPARγC16 1→T基因多态性 ;结合放射免疫技术、冠状动脉造影 ,以及临床常规生化检测指标 ,综合分析基因型频率、等位基因频率分布及不同基因型与临床资料、生化指标的关系 ,并对不同基因型患者冠心病的危险性进行评价。结果 存在冠状动脉病变的冠心病组以CC基因型为主 ,与T等位基因携带者 (CT +TT)相比较差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,且T等位基因携带者 (OR∶0 5 6 ,95 %CI∶0 2 4 0 6 3)冠心病危险性低于CC基因型 (OR∶1 92 ,95 %CI∶1 0 9 2 5 4 )。结论 PPARγC16 1→T的置换与冠心病之间有重要的相关性 ,T等位基因携带者可以减少冠心病的危险性 ,可能与PPARγ作用于血管壁局部 ,参与动脉粥样硬化的形成有关。

代谢综合征患者过氧化物酶体增殖物激活受体δ+294T/C基因多态性与血脂、肥胖和左室肥厚的关系

目的探讨代谢综合征(MS)患者过氧化物酶体增殖物激活受体δ(PPARδ)+294T/C基因多态性与血脂、肥胖和左室肥厚的关系。方法检测300例MS、174例高血压病(EH)和143例2型糖尿病(DM)患者的体重指数(BMI)、腰围、血压、血脂、空腹血糖(FBG)和空腹血浆胰岛素(FINS)。MS诊断根据1999年WHO亚太诊断标准,其中389例患者行超声心动图检测心脏结构改变,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法测定PPARδ+294T/C基因多态性。结果PPARδ+294T/C基因多态性各基因型频率分布组间比较差异无统计学意义。MS组血浆总胆固醇、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平和BMI明显高于DM组。MS组和EH组的左室重量(LVM)、左室重量指数(LVMI)和左室肥厚罹患率均明显高于DM组。MS组CC型血浆总胆固醇和LDL-C水平明显高于TT型和TC型[总胆固醇:CC型(6.13±1.86)mmol/L比TC型(5.14±1.10)mmol/L或TT型(4.99±1.42mmol/L),P<0.05或P<0.01;LDL-C:CC型(3.82±1.52)mmol/L比TC型(3.14±0.88)mmol/L或TT型(2.90±0.87)mmol/L,P<0.05或P<0.01]。分析PPARδ各基因型与LVMI和BMI的关系,发现MS组C等位基因携带者(CC+TC)LVMI和BMI明显高于TT型[LVMI:CC+TC(46±10)g/m2.7比TT(44±10)g/m2.7;BMI:CC+TC(26±3)kg/m2比TT(25±3)kg/m2,P<0·05]。结论MS患者PPARδ+294T/C基因多态性与肥胖和脂质紊乱关系密切,C等位基因携带者较TT基因型患者左室重构明显。

胰岛素受体底物1基因沉默对3T3-L1细胞CCAAT增强子结合蛋白α、过氧化物酶体增殖物激活受体γ表达的影响

目的研究胰岛素受体底物1(IRS-1)沉默对3T3-L1前脂肪细胞分化关键分子CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)mRNA及蛋白表达的影响,并观察IRS-1沉默后前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞能力的改变,探讨胰岛素受体底物(IRSs)是否作为C/EBPα、PPARγ的上游调节信号在前脂肪细胞分化中起到重要的调节作用。方法合成4条IRS-1 shRNA,Western blotting筛选出沉默效率最高的1条。3T3-L1前脂肪细胞分为IRS-1沉默组和对照组。IRS-1沉默组细胞用沉默效率最高的IRS-1 shRNA质粒转染3T3-L1前脂肪细胞,沉默细胞中的IRS-1分子;对照组采用无意义IRS-1 shRNA质粒转染3T3-L1前脂肪细胞。转染24 h后诱导其分化成熟,分化72 h后检测促进前脂肪细胞分化的关键分子C/EBPα、PPARγ的表达。继续诱导分化至第7天,油红O染色观察IRS-1沉默后前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞的比例,检测其分化能力的改变。结果与对照组相比,IRS-1沉默组在诱导分化72 h后,Real-time PCR结果显示3T3-L1前脂肪细胞中C/EBPαmRNA、PPARγmRNA表达明显下降(Pa<0.05),Western blotting结果显示C/EBPα、PPARγ蛋白水平也同样显著下降(Pa<0.05);细胞继续分化至第7天,油红O染色显示,IRS-1沉默组前脂肪细胞分化成熟的比例与对照组比较显著降低。结论胰岛素可能通过IRS-1刺激C/EBPα、PPARγ的表达促进前脂肪组织的分化。

蛋白激酶C活性变化对Adipophilin介导THP-1巨噬细胞脂质蓄积的影响

以THP-1巨噬细胞为研究对象,观察蛋白激酶C(PKC)激动剂佛波酯(PMA)和抑制剂钙磷酸结合蛋白C(CalphostinC)对胞膜PKC活性、胞膜PKCα及胞浆内过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)和adipophilin表达以及细胞内脂质蓄积的影响,初步探讨PKC调控adipophilin表达及脂质蓄积的作用机制.采用PepTagRAssay、RT-PCR、蛋白质印迹、油红O染色和高效液相色谱法,观察到100nmol/LPMA在激活胞膜PKC((0.2514±0.0154)U/ml)的同时可以与氧化低密度脂蛋白(oxLDL)协同增强PKCα、PPARγ和adipophilin表达并使细胞内脂滴的蓄积极大地增强.细胞内胆固醇酯/总胆固醇比值增至(69.8±9.5)%;300nmol/L CalphostinC对荷脂THP-1巨噬细胞的处理则抑制酶活性至((0.0927±0.0056)U/ml,细胞内脂滴减少,胆固醇酯/总胆固醇比值降至(40.1±9.1)%;CalphostinC呈剂量依赖性的方式下调酶活性、PKCα、PPARγ和adipophilin表达,400nmol/LCalphostinC基本上可以逆转50mg/LoxLDL诱导的酶活化和PKCα、PPARγ和adipophilin表达的上调.结果提示,蛋白激酶C活性的改变可以影响adipophilin介导的脂质蓄积,其中PPARγ可能在这一调控机制中发挥了重要作用.

PPAR-α激活对ET-1诱导的心肌肥大和转录因子NFATc4的影响

目的:研究过氧化物酶体增殖物激活受体-α(PPAR-α)激活对内皮素-1(ET-1)诱导的心肌肥大和活化T细胞核因子c4(NFATc4)的影响,探讨在心肌肥大发病过程中PPAR-α和NFATc4的相互作用。方法:培养新生SD大鼠心肌细胞,采用[3H]亮氨酸法和RT-PCR法观察PPAR-α激动剂非诺贝特对ET-1诱导的心肌细胞肥大的影响;应用免疫荧光和免疫共沉淀技术分别检测非诺贝特对ET-1诱导的NFATc4核转位以及PPAR-α和NFATc4相互作用的影响;用Western blotting法检测NFATc4的胞浆和胞核表达。结果:(1)PPAR-α激动剂非诺贝特显著抑制ET-1诱导的肥厚反应。(2)非诺贝特阻止ET-1诱导NFATc4由胞浆到胞核的转位。(3)在心肌细胞中,PPAR-α和NFATc4之间存在相互作用,非诺贝特加强了这种相互作用。结论:PPAR-α激活后可以通过调控转录因子NFATc4来抑制ET-1诱导的心肌肥大反应。

过氧化物酶体增殖体激活受体γ2表达诱导NIH3T3细胞向脂肪细胞分化

目的 通过应用重组逆转录病毒介导小鼠过氧化物酶体增殖体激活受体γ２（ｍＰＰＡＲγ２）基因整合入ＮＩＨ３Ｔ３细胞基因组中进行表达，并研究其功能。方法 从经测序证实含正确序列ｍＰＰＡＲγ２的重组质粒ｐｃＤＮＡ３／ｍＰＰＡＲγ２中，双酶切下ｍＰＰＡＲγ２全长ｃＤＮＡ序列，亚克隆入逆转录病毒载体ｐＧＣＥＮ中构建重组逆转录病毒载体ｐＧＣＥＮ／ｍＰＰＡＲγ２。对ｐＧＣＥＮ／ｍＰＰＡＲγ２及ｐＧＣＥＮ进行包装及Ｇ４１８抗性筛选，收集病毒上清，感染靶细胞ＮＩＨ３Ｔ３细胞，进行Ｇ４１８抗性筛选并进行扩增。在含过氧化物酶体增殖体激活受体γ（ＰＰＡＲγ）激活物５，８，１１，１４二十碳四烯酸等分化介质中，诱导ＰＰＡγ２表达增加，使ＮＩＨ３Ｔ３细胞向脂肪细胞分化。结果 构建了含ｍＰＰＡＲγ２全长ｃＤＮＡ重组逆转录病毒载体，获得了滴度分别为５ ｘ １０４ ＣＦＵ／ｍｌ和６ｘ１０５ ＣＦＵ／ｍｌ的ｐＧＣＥＮ／ｍＰＰＡＲγ２及ｐＧＣＥＮ的病毒上清。经油红Ｏ染色证实分化１０ｄ的表达ｍＰＰＡＲγ２的ＮＩＨ３Ｔ３细胞中明显积聚了较多的中性脂肪，其细胞形态也与体内成熟脂肪细胞相似。结论 本研究在体外建立了由ＰＰＡＲγ２诱导ＮＩＨ３Ｔ３细胞向脂肪细胞分?

人白血病相关蛋白16基因对3T3-L1脂肪细胞葡萄糖摄取及过氧化物酶体增殖物激活受体γ活性的影响

目的探讨人白血病相关蛋白(LRP)16对3T3-L1脂肪细胞葡萄糖摄取及过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ活性的影响。方法利用脂质体转染及慢病毒介导的RNA干扰技术构建LRP16过表达、抑制表达及对照细胞系。检测LRP16对细胞葡萄糖摄取的影响。Luciferase法检测LRP16对PPAR反应元件(PPRE)相对荧光素酶活性的影响。Western Blot法检测LRP16对PPARγ及葡萄糖转运蛋白(GluT)-4表达的影响。结果 (1)成功构建LRP16过表达、抑制表达及对照细胞系。(2)过表达LRP1 6抑制细胞胰岛素刺激的葡萄糖摄取;抑制表达LRP16促进细胞胰岛素刺激的葡萄糖摄取。(3)LRP16剂量依赖性的抑制COS7细胞PPRE的相对荧光素酶活性;(4)LRP16抑制脂肪细胞PPARγ及GluT-4蛋白表达。结论 LRP16通过下调PPARγ活性抑制3T3-L1脂肪细胞葡萄糖摄取导致胰岛素抵抗。

小鼠过氧化物酶体增殖体激活受体γ_2重组逆转录病毒载体在NIH3T3细胞中的表达

目的 通过应用重组逆转录病毒介导小鼠过氧化物酶体增殖体激活受体γ2(mPPARγ2 )基因整合入NIH3T3细胞基因组中并进行表达。方法 从经测序证实含正确序列mPPARγ2的重组质粒pcDNA3/mPPARγ2 中 ,双酶切下约 1.5Kb的mPPARγ2 全长cDNA编码序列 ,亚克隆入逆转录病毒载体pGCEN中构建重组逆转录病毒载体pGCEN/mPPARγ2 。pGCEN/mPPARγ2 及pGCEN经LipofectAMINE感染病毒包装细胞系PA317细胞 ,通过筛选PA317细胞G418抗性克隆 ,收集病毒上清 ,然后用其感染靶细胞NIH3T3细胞 ,用免疫荧光染色及Western印迹方法鉴定mPPARγ2 在NIH3T3细胞中的表达情况。结果 构建了含mPPARγ2 全长cDNA重组逆转录病毒载体 ,获得了滴度分别为 5×10 4 CFU/ml和 6× 10 5CFU/ml的pGCEN/mPPARγ2 及pGCEN的病毒上清。经鉴定pGCEN/mPPARγ2 能有效地感染靶细胞NIH3T3细胞并表达mPPARγ2 。结论 本研究结果为在体外建立脂肪细胞分化模型及为进一步研究PPARγ2

糖脂平对胰岛素抵抗大鼠PGC-1α、细胞色素C、ATP合成酶β亚基基因表达影响

目的观察糖脂平对高脂饮食诱导的胰岛素抵抗(IR)大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助因子1α(PGC-1α)、细胞色素C、ATP合成酶β亚基基因表达的影响。方法将80只雄性SD大鼠随机分为正常组(20只)和造模组(60只),造模组用高脂高糖饲料喂养8周造模,其中54只造模成功的大鼠分为模型组、中药组、西药组,每组18只。中药组和西药组分别给予糖脂平和二甲双胍灌胃,模型组和正常组灌服等量的生理盐水。给药8周后,用RT-PCR测定各组大鼠骨骼肌PGC-1α和细胞色素C、ATP合成酶β亚基基因表达情况。结果与正常组相比,模型组大鼠PGC-1α、细胞色素C及ATP合成酶β亚基基因表达量明显下降(P<0.05);与模型组比较,糖脂平可以上调PGC-1α、细胞色素C及ATP合成酶β亚基的基因表达量(P<0.05)。结论中药糖脂平可以上调PGC-1α的基因表达量,从而提高细胞色素C及ATP合成酶β亚基基因表达量,具用明显改善IR大鼠线粒体氧化磷酸化功能的作用。

过氧化物酶体增殖物激活受体γ与调节性T细胞

调节性T细胞（regulatory T cells，Tregs）已成为变应性疾病、自身免疫性疾病、移植耐受和肿瘤免疫等领域的研究热点。近年来研究发现过氧化物酶体增殖物激活受体（peroxisome proliferators—actived receptor，PPAR）γ配体可以通过PPARγ-依赖和／或PPARγ-非依赖途径诱导Tregs的转化和扩增，从而在变应性疾病和自身免疫性疾病的免疫调节中发挥重要作用。本文就PPARγ及其配体与Tregs转化和扩增的作用机制做一综述。