过氧化物酶6在大鼠附睾中的表达及分布

通过双向电泳结合质谱技术分离鉴定正常成年大鼠附睾头段与尾段管腔液中的蛋白组成,从附睾头段及尾段管腔液的22个差异蛋白点中鉴定出12个蛋白质.其中11个蛋白质在不同种属哺乳动物的附睾组织中已有鉴定报道,而过氧化物酶6(peroxiredoxin 6,Prdx6)为新发现的存在于附睾头段及尾段管腔液中的体液蛋白.采用RT-PCR、Western印迹及免疫组化技术,对该蛋白在大鼠附睾中的表达及分布进行了分析.实验表明,Prdx6与精子的成熟、贮存及保护有一定关系,其具体机制值得进一步深入研究.

斜卧青霉菌P6木素过氧化物酶的纯化与特性

木素过氧化物酶是降解木素类物质的主要酶类。使用硫酸铵盐析、DEAE 纤维素和CM 纤维素离子交换层析、SephadexG 10 0凝胶过滤等分离与纯化技术 ,从斜卧青霉菌P6 (PenicilliumdocumbensP6 )发酵培养 7d的液体培养液中分离纯化得到电泳纯的木素过氧化物酶 ,经SDS PAGE鉴定为单一条带 ,表观相对分子质量为 4 6 3× 10 3 。以藜芦醇为底物测定了该酶的Km,vmax,作用的 pH和温度范围 ,结果为Km0 5 6 5mmol·L-1,vmax0 0 88mmol·(L·min) -1,pH 4～ 9,温度 2 5～ 5 5℃。N末端序列为VLLPADEKNA ,与真菌LiP无同源性。

过氧化物酶1,6和GFAP在人脑星形胶质细胞瘤中的表达及临床意义

目的确定星形胶质细胞瘤中过氧化物酶1(Prx1)、过氧化物酶6(Prx6)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达情况,探讨其表达水平与星形胶质细胞瘤恶性程度的关系。方法采用Western blot、RT-PCR和免疫组化检测52例星形胶质细胞瘤(Ⅱ级23例、Ⅲ级15例、Ⅳ级14例)和12例正常脑组织标本中Prx1、Prx6和GFAP的表达情况。结果 Prx1、Prx6在正常脑组织、Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级星形胶质细胞瘤中蛋白和mRNA的表达水平逐渐升高,具有统计学意义(P<0.05);GFAP在Ⅲ、Ⅳ级星形胶质细胞瘤中蛋白和mRNA的表达水平低于Ⅱ级星形胶质细胞瘤和正常脑组织(P<0.05)。结论 Prx1、Prx6和GFAP可能是临床评价星形胶质细胞瘤恶性程度和侵袭性的潜在生物标志物,可作为星形胶质细胞瘤生物治疗的潜在靶分子。

甘露醇和6-BA处理对水稻细胞过氧化物酶及IAA氧化酶活性的影响

研究了甘露醇和 6- BA处理对水稻悬浮细胞再分化、过氧化物酶及 IAA氧化酶的影响。结果表明 ,甘露醇处理能延迟水稻细胞衰老 ,提高细胞再分化能力 ,降低细胞过氧化物酶和 IAA氧化酶活性 ;6- BA( 2 mg/L )虽然明显降低细胞过氧化物酶活性 ,但对 IAA氧化酶及细胞衰老无明显影响。讨论了过氧化物酶及 IAA氧化酶在水稻胚性细胞形成上的可能作用。

邻苯二甲酸二丁酯诱导孕鼠尿道下裂模型后仔鼠睾丸细胞过氧化物酶6的表达

前期实验发现在邻苯=甲酸二丁酯孕期暴露诱导的仔鼠睾丸发育中蛋白过氧化物酶6表达显著增高。目的：进一步验证邻苯二甲酸二丁酯胚胎期暴露对胎鼠睾丸蛋白过氧化物酶6表达的影响。方法：妊娠14～18d按800mg，（kg·d）邻苯二甲酸二丁酯染毒孕鼠，妊娠21d取出胚胎大鼠睾丸，提取蛋白，通过WeslembIotting及免疫组织化学方法检测睾丸细胞过氧化物酶6的表达，以正常雄性仔鼠睾丸为对照。结果与结论：WeslembIot帅g检测显示，实验组过氧化物酶6的相对表达量为0．205±0．020，对照组为0．110±O．020，实验细明显高于对照组（P〈0．05）。免疫组织化学方法发现过氧化物酶6主要定位于胎鼠睾丸Leydig细胞中。说明过氧化物酶6可能通过发挥抗氧化作用及刺激Leydig细胞增殖功能抵抗邻苯二甲酸=!丁酯的毒性作用，其功能有待进一步研究。

过氧化物酶6与精子活力相关性的研究

目的探讨过氧化物酶6(PRDX6)与精子活力的相关性,以及PRDX6与热休克蛋白70-2(HSPA2)的关系。方法 107例精液标本,按照精子活力分组,A组(a+b)≤20%,B组为30%≤(a+b)<40%,C组(a+b)≥40%。提取精子蛋白,经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离后,Western-blot检测精子质膜PRDX6的表达情况;通过凝胶成像分析系统分析精子中PRDX6和HSPA2的IOD值,用统计学软件分析两者相关性及与活力的关系。结果 A、B、C三组精子标本,质膜PRDX6表达率分别为81.5%、70.0%和17.1%,A组PRDX6阳性检出率显著高于其他两组(P<0.01);PR DX6与HSPA2的表达量呈正相关(r=0.713,P=0.000),两者分别与精子活力相关。结论精子膜PRDX6表达与精子活力相关,提示其可能是精子活力的指标;精子全蛋白中PRDX6与HSPA2相关,提示其与精子成熟度相关。

谷胱甘肽过氧化物酶模拟物6-CySeCD对过氧化氢诱导小鼠成纤维细胞损伤的保护作用

考察不同剂量的H2O2作用于小鼠成纤维细胞(NIH3T3)后,细胞脂质过氧化、存活率、DNA片段化的变化情况,并研究谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)的模拟物6A,6B-环己胺-6A′,6B′-硒桥联-β-CD(6-CySeCD)抗H2O2诱导小鼠成纤维细胞损伤的能力.结果表明:H2O2对NIH3T3细胞有严重损伤;6-CySeCD能有效保护细胞,防止紫外线引起的损伤.

血清孕酮、IL-6和甲状腺过氧化物酶抗体联合检测在先兆流产患者中的临床应用价值

目的探讨血清孕酮、白细胞介素-6(IL-6)以及甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)水平变化与先兆流产患者的关系及其临床价值。方法选择2018年1月至2019年7月在该院妇产科住院的先兆流产患者44例为研究对象,根据盆腔检查宫口表现,并结合B超检查,分为先兆流产继续妊娠组23例和难免流产组21例,另取同期30例正常妊娠孕妇作为对照组。检测孕酮、IL-6及TPOAb水平,运用SPSS22.0软件进行统计分析。结果(1)先兆流产继续妊娠组和难免流产组流产史、TPOAb、孕酮和IL-6水平与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)当孕酮、IL-6、TPOAb的截断值分别为23.50 ng/mL、6.45 pg/mL、28.15 IU/mL时,预测先兆流产发病风险的ROC曲线下面积分别为0.941、0.939、0.831;但是联合检测ROC曲线下面积高达0.962,约登指数为0.829。(3)多元Logistic回归分析显示孕酮水平降低是先兆流产患者的独立风险因素,比值比(OR)为19.356。经Pearson相关分析显示,先兆流产的发生与孕酮之间呈负相关(r=-0.709,P<0.05)。(4)先兆流产继续妊娠患者治疗前IL-6和TPOAb水平明显高于治疗后;而先兆流产继续妊娠患者治疗前孕酮水平明显低于治疗后,差异均有统计学意义(P<0.001)。结论在预测先兆流产患者风险因素时,孕酮是较好的预测指标,孕酮联合IL-6和TPOAb检测可预测先兆流产的发病风险。

爱罗咳喘宁对COPD稳定期大鼠白细胞介素-6、髓过氧化物酶及肺组织结构的影响

目的探讨爱罗咳喘宁方对慢性阻塞性肺疾病(COPD)的抗炎机制,观察爱罗咳喘宁对COPD大鼠模型支气管肺泡灌洗液和肺匀浆中白细胞介素-6(IL-6)和髓过氧化物酶(MPO)的影响。方法制备COPD稳定期大鼠模型,随机分为正常对照组、病理模型组、急支糖浆组,爱罗咳喘宁高、中、低剂量组。正常组、模型组灌胃蒸馏水(15.52 m L/(kg·d),急支糖浆组爱罗咳喘宁口服液高、中、低剂量组分别灌胃(31.04,15.52,7.75 g/(kg·d),连续14 d。酶联免疫法(ELISA)测定各组大鼠BALF和肺组织匀浆中IL-6含量,比色法测定MPO活性。结果与正常对照组比较,模型组BALF和肺组织匀浆IL-6和MPO均显著升高(均P<0.05);与模型组相比,爱罗咳喘宁中剂量组IL-6和MPO均显著降低(均P<0.05)。结论爱罗咳喘宁对COPD有抗炎作用,其机制可能与减少IL-6的释放、抑制MPO的活性有关。

膳食维生素B_6对硒的生物利用率影响的研究──Ⅲ．对成年大鼠组织中硒和谷胱甘肽过氧化物酶水平的影响

１２周龄雄性大鼠饲缺维生素Ｂ６（ＶＢ６）缺硒酪蛋白蔗糖基础膳食，３周后按体重把动物分成６组。分别喂饲三种膳食，即基础膳食、基础膳食中补充硒０．２５ｍｇ／ｋｇ的亚硒酸钠或ＤＬ－硒蛋氨酸，在此基础上每种膳食又分为补充（２．５μｇ／ｇ）或不补充盐酸吡哆醇两组。实验期为１４周。补Ｖ８６各组的红细胞和骨骼肌中硒水平和谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活性均显著高于相应缺ＶＢ６各组，ＶＢ６对饲亚硒酸钠大鼠肝硒和ＧＳＨ－Ｐｘ水平没有影响；但当补充硒蛋氨酸时，与补ＶＢ６大鼠相比缺ＶＢ６大鼠的肝硒水平较高而ＧＳＨ－Ｐｘ活性则显著降低。这些研究结果进一步证明，ＶＢ６与血浆硒的转运和硒的利用有关，并且可能参与了硒蛋氨酸在肝脏中的代谢过程。

6-α-葡糖基-β-环糊精对辣根过氧化物酶热力学稳定性的影响

对经 6 α 葡糖基 β 环糊精 (G β CD)修饰后的辣根过氧化物酶 (HRP)的热力学稳定性进行了研究。实验结果显示 ,在G β CD与HRP的摩尔比为 5 ,pH 7.5条件下经低温混合处理 2 .5h后的修饰HRP获得较好的热稳定性综合改善作用。与天然酶相比 ,修饰酶活力约为 94% ,表观热失活常数k降低至原来的 2 7%。经 75℃经

膳食维生素B_6对硒的生物利用率影响的研究 Ⅱ．对大鼠组织谷胱甘肽过氧化物酶活性的影响

实验用４周龄断乳雄性大鼠观察膳食维生素Ｂ６（ＶＢ６）对饲亚硒酸钠（ＳｅＬ）或ＤＬ－硒蛋氨酸（ＳｅＭｅｔ）大鼠组织中ＧＳＨ－Ｐｘ活性的影响，实验期为４周。实验证明：与补ＶＢ６各组相比，缺ＶＢ６各组血浆ＧＳＨ－Ｐｘ活性较高，而在红细胞中的结果相反（Ｐ＜０．０５）；缺ＶＢ６各组动物的骨骼肌、心肌和脾脏中ＧＳＨ－Ｐｘ活性都显著低于补Ｂ６各组（Ｐ＜０．０５），上述结果与给硒的化学形式无关。在用ＳｅＭｅｔ的处理组，缺Ｂ６大鼠的肝脏中ＧＳＨ－Ｐｘ活性显著低于补ＶＢ６的大鼠；而在用ＳｅＬ的处理组则没有观察到ＶＢ６的这种影响。本研究结果提示，硒掺入ＧＳＨ－Ｐｘ是通过一个ＶＢ６依存的过程。

6BA诱导的带正电荷的葡萄叶过氧化物酶

河岸葡萄叶的带正电荷过氧化物酶（ｃａｔｉｏｎｉｃ ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ， ＣＰＯＤ） 可受６ＢＡ 诱导，但盐、Ｈ２Ｏ２ 或Ｆｅ２＋＋ Ｈ２Ｏ２ 均使叶片ＣＰＯＤ 活性明显下降，而高浓度的无机盐明显刺激纯ＣＰＯＤ 活性增加。在以愈创木酚为底物时ＣＰＯＤ 最适ｐＨ 为４ ．６０ ～５ ．７５ ，对Ｈ２Ｏ２ 的表观Ｖｍａｘ 和Ｋｍ 值分别为１１０ Ｕ／ｍｇ 蛋白和１ ．１５ｍ ｍｏｌ／Ｌ。

红花注射液对急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征大鼠髓过氧化物酶肿瘤坏死因子-α白细胞介素-6及膜泵的影响

急性肺损伤（acute lung injury，ALI）是心源性以外的各种肺内外因素导致的急性、进行性呼吸衰竭，感染、氧中毒、机械刺激等多种原因均可引起。 ALI以顽固性呼吸困难、低氧血症、肺水肿为主要临床表现；以弥漫性肺泡-毛细血管损伤为主要病理特征。 ALI的严重阶段或终末阶段称为急性呼吸窘迫综合征（acute respiratory distress syndrome，ARDS）， ALI/ARDS的本质是炎症反应：肺内大量聚集的中性粒细胞产生炎症介质等，损伤肺泡上皮、血管内皮，导致肺水肿的发生，从而影响肺氧合功能，造成低氧血症。红花为菊科植物，其性辛温，归心肝经，具活血通经，祛瘀止痛功效[1]，为常用中药材之一。红花注射液由中草药红花提取精制而成，在临床上多用于冠心病、脑梗死等疾病的治疗[2，3]。近年来有学者将红花注射液用于呼吸系统疾病的实验研究，发现其对肺血栓栓塞症、肺缺血-再灌注损伤都有较好的疗效[4]。但红花注射液对ALI/ARDS是否有治疗作用？目前相关报道较少，本研究旨在观察红花注射液对ALI/ARDS大鼠的影响，为ALI/ARDS的治疗提供新的方法。

6-BA和硫酸腺素对香蕉试管苗的过氧化物酶及其同工酶酶谱的影响

本文以香蕉试管苗为材料，ＭＳ培养基为对照，分别加入６－ＢＡ和硫酸腺素（硫酸腺嘌呤）进行香蕉试管苗的继代培养。实验结果表明，附加６－ＢＡ和硫酸腺素后，香蕉试管苗的过氧化物酶活性明显低于对照组，而他们的同工酶酶谱差异不明显。

过氧化物酶6与肺部炎症性疾病关系的研究进展

机体发生氧化应激时,大量的超氧阴离子和活性氧(ROS)会在肺内沉积,当其含量超出机体抗氧化酶清除能力时,会引起多种肺部炎症性疾病,如急性肺损伤(ALI)、哮喘、特发性肺间质纤维化(IPF)和慢性阻塞性肺疾病(COPD)等。为了对抗氧化应激导致的不良后果,机体细胞会释放大量抗氧化物酶。过氧化物酶6(Prdx6)同时具有谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和磷脂酶A2(PLA2)活性,能够维持机体氧化还原平衡,修复由氧化应激引起的膜损伤,调节肺泡表面活性物质的新陈代谢,改善肺泡上皮细胞凋亡程度,从而在肺部炎症中扮演重要角色。本文对Prdx6在肺部炎症性疾病中的作用进行综述。

15-脱氧前列腺素J_2对脂肪肝大鼠肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ、肿瘤坏死因子α和白细胞介素6表达的影响

目的观察15-脱氧前列腺素J2(15d-PGJ2)对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)表达的影响。方法普通饲料喂养的雄性Wistar大鼠作为正常对照组8只;高脂饲料喂养雄性Wistar大鼠建造NAFLD模型16只,将建模成功的大鼠随机分为模型对照组8只和实验组8只。模型对照组大鼠腹腔注射生理盐水2ml·kg-1·d-1;实验组大鼠腹腔注射15d-PGJ210μg·kg-1·d-1。干预2周后处死各组大鼠,检测各组肝组织匀浆总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)含量,苏木精-伊红(HE)染色光镜下观察各组大鼠肝组织的病理改变,免疫组织化学法检测各组大鼠肝组织PPAR-γ、TNF-α和IL-6的表达。结果模型对照组肝组织总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平明显高于正常对照组,TC(1.27±0.26)mmol/g vs(0.74±0.18)mmol/g、TG(1.56±0.27)mmol/g vs(1.13±0.39)mmol/g(P<0.01);实验组肝组织TC、TG水平明显低于模型对照组,TC(1.01±0.22)mmol/g vs(1.27±0.26)mmol/g、TG(1.15±0.20)mmol/g vs(1.56±0.27)mmol/g(P<0.05)。光镜下未见正常对照组肝组织病理形态学异常;模型对照组可见大量肝细胞脂肪变性及肝组织多处点状坏死;实验组大鼠肝细胞脂肪变性及点状坏死较模型对照组减轻;正常对照组肝组织PPAR-γ普遍表达而TNF-α和IL-6几乎不表达;实验组肝组织PPAR-γ表达强于模型对照组,而TNF-α和IL-6表达低于模型对照组。结论 15d-PGJ2可以缓解NAFLD大鼠肝细胞脂肪变性和坏死、降低肝组织TC和TG水平,这种效果可能是通过增加肝脏PPARγ和减少TNF-α、IL-6的表达来实现的。

急性心肌梗死病人血清髓过氧化物酶和白细胞介素6水平与冠状动脉病变程度的相关性

[目的]探讨急性心肌梗死病人血清髓过氧化物酶(MPO)及白细胞介素6(IL-6)水平与冠状动脉病变程度的关系.[方法]采用Judkin’s法为急性心肌梗死组(31例)及正常对照组(28例)行选择性冠状动脉造影检查,按照病变范围将急性心肌梗死组患者分为单支、双支及三支病变组,按照Gensini积分系统分为低于等于20分组、21～40分组及高于40分组.采用ELISA法测定所有对象的血清MPO,IL-6水平.[结果]急性心肌梗死组患者血清MPO,IL-6水平均明显高于正常对照组;随着病变范围的扩大和狭窄程度的加重,血清MPO,IL-6水平均呈显著增高趋势.[结论]急性心肌梗死病人血清MPO,IL-6水平均显著升高,并与病变范围及狭窄程度呈正相关.

6-BA和不同温度水处理对采后西兰花过氧化物酶活性的影响

[目的]明确采后西兰花过氧化物酶(POD)活性与其小花黄化的关系。[方法]用愈创木酚法测定不同处理西兰花的POD活性,分析温水和6-BA处理对其POD活性的影响。[结果]45℃温水处理减缓黄化速率的效果最明显。0.04%6-BA比0.02%6-BA的保绿效果更明显。45℃温水处理的西兰花黄化速率和POD活性较对照低。不同浓度6-BA处理的西兰花中POD活性均呈上升趋势。后期,6-BA处理的POD活性均低于对照,并且0.02%6-BA处理中POD活性增加较0.04%6-BA处理的慢。[结论]45℃温水处理和0.04%6-BA处理均能较好地减缓西兰花小花的黄化速率。

基于2,6-二-(2-吡啶基)-4-吡啶甲酸的紫外法检测辣根过氧化物酶浓度

本文首次提出采用2,6-二-(2-吡啶基)-4-吡啶甲酸(配体L)-H2O2-HRP测定HRP酶浓度的新体系。利用紫外考查HRP催化H2O2氧化配体L体系的光谱变化。在pH = 7.2,25℃下,配体L浓度为6 &#215;10−6 mol/L,H2O2浓度为1 &#215;10−4 mol/L时,回归方程为A = −0.0034x + 1.072,线性相关系数为0.9909,该体系的检测范围可达10−8~10−9 mol/L,灵敏度较高,操作简便,抗干扰能力强,稳定性好,可用作检测游离HRP酶的新方法,具有实际的应用前景。