蒙药用植物赤瓟块根中过氧化物酶的稳定性分析

研究蒙药用植物赤瓟(Thladiantha dubia Bunge)块根过氧化物酶(POD)的活性,确定最适反应温度和pH,并测定其在不同温度条件、pH和保存条件下的稳定性。结果表明,赤瓟块根POD的最适温度为30℃,最适pH为7.2,在不同温度条件下保温30 min时,高于40℃时酶活性开始降低,保温60 min时,高于35℃时酶活性开始降低;该酶的pH稳定性范围为6.6~8.2;室温光照条件下存放1 d后活性开始下降,7 d时活性基本丧失,室温黑暗条件保存3 d后活性开始降低,8 d时活性完全丧失。赤瓟块根POD在30℃、中性条件和黑暗环境中具有较高的活性和稳定性。

10个苜蓿品种过氧化物同工酶(POD)分析

采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对10个苜蓿品种的根和叶作过氧化物酶(POD)同工酶分析。研究表明,不同器官酶谱带数目、迁移率(R)、酶活性及分布特征均有不同程度的差异。不同品种间酶谱带有较大差异,初步探讨了10个品种间亲缘关系。

菊花品种间过氧化物酶、酯酶同工酶的遗传多样性分析

【目的】揭示不同类型栽培菊花品种间的遗传多样性,为栽培菊花品种分类、品种鉴定和保护提供生化依据。【方法】采用过氧化物酶(POD)、酯酶(EST)2个酶系统的12个同工酶位点,对栽培菊进行同工酶遗传多样性分析。【结果】(1)栽培菊花品种间的遗传变异很丰富,93个品种平均有效等位基因数(A)、多态位点比率(P)、观察杂合度(Ho)分别为1.5699、43.23%、0.5699。其中遗传多样性最高的是‘紫宫翎管’,其有效等位基因数(A)、多态位点比率(P)、观察杂合度(Ho)分别是1.8889、66.67%、0.8889;遗传多样性最低的是‘粉紫管’、‘粉管托桂’和‘丰收’,3个指标分别是1.3000、25.00%、0.3000。(2)基于品种间遗传距离的UPGMA聚类图将栽培菊花品种按花径聚类,体现了栽培菊花品种花径的遗传分化特征,托桂品种独立成组。另外,A、P、Ho3个指标完全相同的大菊品种有70.37%聚在一起,小菊品种有87.18%聚在一起。(3)‘染水金涛’、‘风珠秋意’、‘金陵之光’、‘金陵春色’具有品种特异的同工酶谱POD-3的F带,可以从生化水平为菊花品种鉴定和保护提供生化证据。【结论】菊花品种间POD和EST的遗传变异丰富;属于同一花径类型品种的遗传多样性较为一致,其中平瓣与匙瓣的遗传变异相近;瓣型和花色与POD和EST没有直接相关性。

野生大豆接种大豆疫霉根腐病菌后过氧化物酶(POD)活性变化

对大豆疫霉菌胁迫下抗感不同野生大豆根、茎、叶中过氧化物酶(peroxidase,POD)活性的变化进行了初步研究。结果表明:抗病野生大豆接种后叶中POD活性在病程的大部分阶段高于感病野生大豆,同时高于未接种植株;而根和茎中的POD酶活性在病程的大部分阶段有所增加,但变化幅度不大。

鲜切芦蒿过氧化物酶特性的研究

芦蒿去除不可食部分、冰水清洗、切分后在磷酸缓冲液中用研钵碾成匀浆状于4℃低温下以10000r/min离心30min,获得的过氧化物酶(POD)粗酶液用于酶活力和酶特性的研究。结果表明,鲜切芦蒿中过氧化物酶活力最适宜的pH为5.0,最适宜的温度为40.0℃,且在60℃以上的温度下易失活。H2O2浓度在0.4%以下时,鲜切芦蒿POD活力随浓度增加直线上升,0.6%时达到饱和。鲜切芦蒿POD与不同酚类底物的亲和力顺序为焦性没食子酸>绿原酸>愈创木酚>儿茶酚>酪氨酸>苯酚、间苯二酚。

Cd^(2+)污染对草鱼不同组织中过氧化物酶活性的影响

采用细静水生物测试法研究Cd2+对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)的肝胰脏、肾脏和鳃组织过氧化物酶(POD)活性的影响。结果表明,在7 d的试验时间内,低浓度Cd2+胁迫时,肝胰脏和肾脏组织POD活性随时间变化均呈先降低后升高再降低的变化趋势,而高浓度Cd2+胁迫时,肝胰脏组织POD活性始终受到显著抑制(P<0.05),肾脏组织POD活性短时间内被诱导,但随着暴露时间的延长,其受到显著抑制(P<0.05);鳃组织在受到Cd2+污染时POD活性随时间变化呈先升高后降低变化趋势。草鱼鳃组织POD活性明显低于肝胰脏和肾脏组织。

磁场对棕壤过氧化氢酶和过氧化物酶活性的影响

探讨磁场处理棕壤后,土壤中过氧化氢酶和过氧化物酶活性的动态变化。以棕壤为供试土壤,研究不同磁场强度(0、100,300,500mT)磁处理土壤后,对土壤过氧化氢酶和过氧化物酶活性的影响。棕壤风干土经磁场处理后,100和300mT磁场强度促进了过氧化氢酶和过氧化物酶活性,磁致效应为正效应。磁处理后的28d内,500mT磁场处理抑制了棕壤过氧化氢酶的活性,仅在培养的第14天,500mT处理过氧化物酶活性高于对照,比对照增加34.50%;棕壤湿土经磁处理后第1天,100mT对过氧化氢酶活性表现出正效应,300mT和500mT处理对湿土的过氧化氢酶无明显影响,磁处理后的7～28d,磁处理后过氧化氢酶活性比对照均增加。磁场处理土壤后的28d,各处理过氧化物酶活性与对照相比均增加。低磁场对过氧化氢酶和过氧化物酶活性有促进作用,但是不同场强的磁致效应有所差异。100mT场强处理对两种酶活性均为促进作用,而500mT场强处理对过氧化氢酶活性有一定的抑制作用。

超声波对海芋过氧化物酶催化活性影响的机理

从海芋叶中分离和纯化过氧化物酶(POD),研究了不同参数超声波对其活性作用效果.结果表明,经不同频率、功率超声波处理不同时间后,酶活性均比未经超声波处理的活性低.将粗酶经硫酸铵分级沉淀、透析、DEAE-纤维素离子交换柱层析,在聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱上显示出1条蛋白带.对纯酶进行动力学分析,结果表明,超声波处理后,POD的Km值变大,而vm ax值变化不大,说明超声波处理使酶与底物的亲和力降低.紫外吸收光谱、紫外差示光谱和荧光发射光谱的研究进一步表明,超声波处理使酶分子的构象发生变化,从而导致酶活性的改变.

淹水对转超氧化物歧化酶或过氧化物酶基因烟草某些生理生化指标的影响

对盆栽十二叶龄的3个烟草近等基因系进行淹水处理后的结果表明:随着淹水时间的延长,细胞质膜透性、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性均显著升高;叶绿素和可溶性蛋白质含量、株高、叶片数及生物量均下降。各种指标在短时间内不能恢复到正常水平或者根本不能恢复。3个品系抗涝性强弱依序为:转基因抗坏血酸过氧化物酶(APX)高表达品系>转Mn-SOD基因叶绿体高表达品系>非转基因品系。

木耳菜过氧化物酶活性及其影响因素的研究

对鲜木耳菜经离心后获得的过氧化物酶(POD)粗酶液进行酶活力和酶特性的研究。结果表明,鲜切木耳菜中过氧化物酶活力最适宜的pH值为4.0,温度为40℃(温度>60℃易失活),最适作用时间为6min。H2O2浓度<0.6%时,鲜切木耳菜POD活力随浓度增加直线上升,0.8%时达到饱和。不同酚类底物与鲜切木耳菜POD的亲和力顺序为草酸>愈创木酚>儿茶酚>焦性没食子酸>酪氨酸、苯酚、间苯二酚。柠檬酸和抗坏血酸处理后,POD活力逐渐下降,Na+、Ca2+和Zn2+对POD具有抑制作用,Mg2+对其有激活作用。

外源过氧化物酶对小麦后期生长的影响

为了研究外源过氧化物酶 (POD)对小麦后期生长的影响 ,在小麦生长后期 (扬花后占 1周 )用不同浓度的粗提POD酶液喷施小麦叶片 ,检测旗叶POD活性、超氧化物岐化酶 (SOD)活性、丙二醛 (MDA)、可溶性蛋白和叶绿素含量。结果表明 ,外施POD对小麦旗叶POD活性、SOD活性、MDA和可溶性蛋白含量均有不同程度的影响 。

睡莲不同器官和不同生长阶段的过氧化物酶和酯酶同工酶比较

利用聚丙烯酰胺垂直板电泳技术对3个睡莲Nymphaea品种‘彼得’‘Peter Slocum’,‘玛珊姑娘’‘Masaniello’和‘得克萨斯’‘Texas Dawn’不同器官(未展开的幼叶、展开的幼叶、老叶、花瓣、花蕾、叶柄)和未展开的幼叶在营养生长阶段和生殖生长阶段的过氧化物酶(POD)和酯酶(EST)同工酶进行了研究。结果表明:①3个品种共有12种过氧化物酶酶带,6种酯酶酶带。②睡莲的过氧化物酶和酯酶具有组织特异性,其中未展开嫩叶和展开嫩叶的酶带最多,叶柄和花蕾次之,花瓣和老叶最少。未展开幼叶为较适合用于睡莲同工酶分析。③与生殖生长阶段相比,3个睡莲品种未展开幼叶在营养生长阶段的酯酶表达量更大,条带更多;而过氧化物酶同工酶表达量则是生殖生长阶段的表达量大,但3个品种的酶条带变化不一致,其中‘彼得’和‘玛珊姑娘’在生殖生长阶段的过氧化物酶同工酶阶段条带多‘得克萨斯’则相反。

低温胁迫对小麦品种过氧化物酶的影响

新发现小麦材料SCREEM具有较强的抗寒性,为了充分了解该材料抗寒能力,以另外4个不同抗寒类型的小麦品种为对照,对其大田条件下的旗叶和幼穗进行过氧化物酶(POD)的酶活性测定和POD同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE);并对其水培幼苗设置了25℃、0℃、-10℃和-20℃4个温度参数的胁迫,测定了各温度条件下的POD酶活性,也进行了POD同工酶PAGE。酶活测定和PAGE结果表明:①相同的大田条件和试验条件下,各品种(系)幼穗的酶活力要大于旗叶叶片的酶活力;幼穗的POD同工酶PAGE谱带要比旗叶叶片的同工酶谱带丰富;两个冬性材料京冬8号和SCREEM分别在幼穗和叶片有较高的酶活力。②4种温度条件下25℃时的酶活力较强,0℃次之,-10℃和-20℃较低,且-10℃和-20℃下的酶活力基本一样;在各温度条件下,冬性品种京冬8号和SCREEM均表现出较强的酶活力,但没有特殊的同工酶谱带。

辐照诱导的新雄性不育系过氧化物酶和脂酶同工酶分析

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳法,对甘蓝型油菜细胞质雄性不育系Polima、Shan2A、Ogu和辐照处理的新雄性不育系Xin1和Xin2及其保持系Shan2B的种子进行了脂酶和过氧化物酶分析,结果表明:5个细胞质雄性不育系比保持系Shan2B多1条迁移率为0.45的脂酶(EST)谱带;Xin1、Shan2A和Polima各有4条过氧化物酶(POD)谱带,保持系缺少1条迁移率为0.61的POD谱带,推测这一同工酶的表达可能与雄性不育相关。

黄瓜雌核发育早期过氧化物同工酶活性的变化

以离体培养的黄瓜未受精子房为试材,测定了黄瓜离体雌核发育早期过氧化物酶及其同工酶的活性。结果表明,在培养的0～9d,总的过氧化物酶(POD)、NADH氧化酶(NADHPOD)和生长素氧化酶(IAAO)活性均呈上升趋势;细胞色素氧化酶(COX)、抗坏血酸氧化酶(ASP)活性均呈下降趋势;谷胱甘肽过氧化物酶(GSH Px)则先升后降。雌核发育早期过氧化物酶及其同工酶活性,尤其是NADHPOD和GSH Px活性的急剧升高是雌核发育的重要标志。

水分胁迫下白术过氧化物酶同工酶的变化分析

目的研究不同处理条件下,水分胁迫对不同形态类型白术叶和花蕾中过氧化物酶(POD)同工酶的影响。方法采用盆栽控制试验,利用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳分析技术进行同工酶分析。结果(1)在一定水分胁迫范围内,白术叶片的POD同工酶的活性及酶带数目随水分亏缺的加剧而升高和增多,但过度水分胁迫时,酶的活性有所下降且数目减少;(2)不同形态类型白术叶片的POD同工酶在水分胁迫下的变化有所不同,其中中间型白术的耐旱性略高于阔叶和狭叶白术;(3)叶片中的POD同工酶的表达较花蕾中的丰富,且酶带的变化也较大,研究水分胁迫对白术POD同工酶的影响以取叶片作分析材料为佳。结论研究水分胁迫下白术体内POD同工酶的变化,可为白术抗旱性提供生理生化参考依据。

几种柑橘果实白皮层中过氧化物酶特性的比较研究

分离出柑橘果实的白皮层,充分切细使其粒径为0.5～1mm,用冷磷酸缓冲液浸提24h后四层纱布过滤,所得过氧化物酶(POD)粗酶液用于酶特性研究。结果表明,几种柑橘果实之间酶活性差异很大,最适宜的pH和温度均为5.0和40～60℃;随着底物浓度的升高,酶活力也升高,并在H2O2为0.07%时达到饱和状态。以塔希提柠檬白皮层中POD为研究对象,添加不同剂量的VC和Na2SO3作抑制剂,在浓度分别达到0.1%和0.5%时POD活力受到明显长时抑制。

龙眼果皮过氧化物酶的分离纯化

以福眼龙眼(D im ocarpus longanaLour.cv.Fuyan)果皮为材料,经硫酸铵盐析分级,以及Stream line Phenyl、DEAE-Cel-lu lose、Phenyl Sepharose H igh Perform ance、Superdex 200 prep grade等柱层析分离,得到由分子质量约45.6 ku的单一亚基组成的4个POD组分,其分子质量分别为290.1、232.1、188.5和170.7 ku.

常见观赏竹类过氧化物酶同工酶及可溶性蛋白分析

为了探讨常见观赏竹类的亲缘关系,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术分析了竹类植物过氧化物酶同工酶和可溶性蛋白。结果表明:供试材料的过氧化物酶同工酶和可溶性蛋白的位点和数目均存在差异。相似性系数在0.400～0.762,同一种属的金边富贵竹与青叶富贵竹相似性系数最高(0.762)。聚类结果显示,6个供试样品聚成二大类,与形态分类结果基本一致。试验结果可以初步作出常见观赏竹类品种间亲缘关系的判定。

木薯过氧化物酶基因序列分析及其乙烯和茉莉酸甲酯诱导表达特性

【目的】分析木薯ClassⅢ过氧化物酶(POD)基因(MePOD)的序列特征,并检测乙烯(ET)和茉莉酸(JA)逆境信号对其表达的影响,为研究木薯对逆境胁迫的响应和调控模式及培育抗逆新品种提供理论依据。【方法】从木薯基因组数据库中获取MePOD基因序列并进行分析;以木薯品种华南8号悬浮培养细胞为材料,利用实时荧光定量PCR(qPCR)检测木薯MePOD基因在乙烯利和茉莉酸甲酯(MeJA)处理后的表达特性。【结果】MePOD基因编码区含4个外显子和3个内含子;转录起始位点位于起始密码子上游1061 bp处;启动子区域含多个顺式作用元件,但无ET和JA响应元件。MePOD蛋白由33 1个氨基酸组成,分子量为37.476 kD,理论等电点为8.66;有一个含信号肽的跨膜结构,是一种阳离子分泌型C1assⅢPOD。系统发育进化树分析结果表明,木薯MePOD蛋白与大戟科橡胶树(Hevea brasiliensis,ADR70870.1)的亲缘关系最近,且除两种裸子植物外,其他17种被子植物聚为一类,且同一科植物进一步相聚,此结果与进化地位一致。qPCR检测结果表明,MeJA诱导0.5 h后,MePOD基因表达量整体上呈先升高后下降的变化趋势,而乙烯利诱导0.5 h后其表达量呈缓慢上升的变化趋势,但整体上维持在本底水平之下。【结论】JA和ET逆境信号不直接通过相应响应元件上调MePOD基因表达,而与其他激素信号进行综合调控,并进一步参与植物体内的抗氧化过程。