T2DM患者血清过氧化还原酶1水平与抑郁症状及主观应激间的关系

目的:分析血清过氧化还原酶1(PRDX1)水平与2型糖尿病(T2DM)患者抑郁症状及主观应激的相关性。方法:选择2019年7月至2021年12月陕西省榆林市第二医院的256例T2DM患者,根据抑郁—焦虑—压力量表-21(DASS-21)抑郁评分将患者分为抑郁症状组(n=56)及无抑郁症状组(n=200)。采用酶联免疫吸附法检测血清PRDX1水平。根据DASS-21评估患者心理状态。采用压力知觉量表(PSS)评估患者的主观应激程度。结果:根据DASS-21评分,抑郁症状组中血清PRDX1水平显著高于无抑郁症状组的患者(P<0.05);所有T2DM患者血清PRDX1水平为(12.98±3.70)ng/mL,且血清PRDX1水平与DASS-21抑郁评分和压力评分均呈正相关关系(P<0.05);经受试者工作特征曲线分析,血清PRDX1水平诊断T2DM合并抑郁症状的曲线下面积为0.767(95%CI:0.699~0.835),灵敏性、特异性分别为87.5%、68.5%;经Pearson相关性分析和校正多种干扰因素的多元线性回归分析,血清PRDX1水平与有抑郁症状的T2DM患者PSS评分呈正相关关系(P<0.001),但与无抑郁症状的患者PSS评分无相关关系(r=0.076,P=0.283)。此外,对于有抑郁症状的T2DM患者,血清PRDX1水平与IL-6、TNF-α水平亦呈正相关关系(P<0.001)。结论:血清PRDX1水平对诊断T2DM患者是否合并抑郁症有良好的效能,且对于出现抑郁症状的T2DM患者,血清PRDX1水平持续增加与患者机体低度炎症反应以及主观应激程度有关。

肠易激综合征患者血清中过氧化还原酶1和脑源性神经营养因子与抑郁和焦虑症状的相关性研究

目的探讨肠易激综合征(IBS)患者血清中过氧化还原酶1和脑源性神经营养因子与抑郁和焦虑症状的相关性研究。方法回顾性选择2020年2月至2021年3月上海中医药大学附属曙光医院消化科门诊收治的150例慢性腹泻患者。参考罗马Ⅳ标准将患者分为IBS 80例(IBS组),非IBS 70例(非IBS组);检测并比较两组患者的血清过氧化还原酶1(PRDX1)水平、脑源性神经营养因子(BDNF)水平及抑郁自评量表(SDS)和焦虑自评量表(SAS)的评分情况。结果IBS组患者的血清PRDX1水平为(13.47±4.26)ng/L,高于非IBS组[(8.56±2.21)ng/L],血清BDNF水平为(947.21±131.64)pg/mL,低于非IBS组[(1425.67±136.12)pg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。IBS组患者的SAS评分、SDS评分均高于非IBS组,差异有统计学意义(P<0.05);IBS患者血清PRDX1、BDNF水平与抑郁和焦虑症状间存在相关性(P<0.05)。采用Pearson进行相关性分析,结果发现,IBS患者PRDX1、BDNF水平与抑郁、焦虑症状呈相关性,与抑郁(r=0.276,P<0.001;r=0.322,P<0.001)、易怒(r=0.314,P<0.001;r=0.367,P<0.009)、惊恐(r=0.256,P<0.005;r=0.247,P<0.001)、焦虑(r=0.229,P<0.011;r=0.342,P<0.012)评分呈正相关。结论IBS患者血清PRDX1高表达及血清BDNF低表达,且与抑郁和焦虑症状存在相关性,PRDX1和BDNF可能成为IBS诊疗过程中的生物标志物和靶点。

血流感染致脓毒症患者血清降钙素原、过氧化还原酶4、高迁移率族蛋白B1水平及其对预后影响

目的探讨血流感染致脓毒症患者血清降钙素原(PCT)、过氧化还原酶4(Prx4)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)水平,并分析其对预后的影响。方法选取自2018年6月至2019年6月收治的96例血流感染致脓毒症患者为观察组,选取同期进行体检的50例健康者为健康组。根据治疗28 d后观察组患者预后情况分为存活组(n=59)与病死组(n=37)。记录并比较健康组与观察组患者血清PCT、HMGB1、Prx4水平;分析不同预后的血流感染致脓毒症患者血清PCT、HMGB1、Prx4水平,采用Pearson相关性分析对血清PCT、HMGB1、Prx4水平与预后相关性进行分析。结果观察组患者血清PCT、HMGB1、Prx4水平均明显高于健康组,差异有统计学意义(P<0.05)。病死组患者治疗前的血清PCT、HMGB1、Prx4水平均明显高于存活组,差异有统计学意义(P<0.05)。病死组患者在进入ICU后第1、3、7天血清PCT、HMGB1、Prx4水平均明显高于存活组,差异有统计学意义(P<0.05)。血流感染致脓毒症患者治疗前的血清PCT、HMGB1、Prx4水平与病死情况呈正相关(r=0.813,r=0.792,r=0.689,P<0.05)。结论血流感染致脓毒症患者体内血清PCT、HMGB1和Prx4水平明显升高,且血清PCT、HMGB1和Prx4水平越高,患者预后越差。可通过监测PCT、HMGB1、Prx4水平来评估病情进展及判断预后。

髓核内注射过氧化还原酶Ⅱ对兔椎间盘退变过程的影响

目的探讨髓核内注射人重组过氧化还原酶(Peroxiredoxin,Prx)对兔椎间盘退变过程的影响。方法通过纤维环穿刺法建立新西兰大白兔椎间盘退变模型(L3～4～L5～6),24只兔随机分为高浓度组、低浓度组和对照组,每组各8只。4周后MRI显示造模成功,然后行L3～4～L5～6椎间盘内注射,高浓度组和低浓度组分别注射1 mg/mL、10μg/mL Prx蛋白,对照组注射0.1%磷酸盐缓冲液,注射量均为25μL。在注射后2、4、12、16周每组分别随机取2只兔行脊柱MRI检查,采用硫酸咔唑法检测髓核蛋白多糖的含量,免疫组化检测型胶原含量,并做病理切片HE染色观察组织及细胞的改变情况。结果蛋白注射后三组椎间盘均发生不同程度退变,注射后16周,高浓度组髓核内水分的含量明显低于低浓度组和对照组(P<0.05);髓核内蛋白多糖含量高浓度组显著低于低浓度组和对照组(P<0.05);细胞外基质型胶原灰度值高浓度组显著低于低浓度组和对照组(P<0.05),而低浓度组和对照组比较差异没有统计学意义(P>0.05)。结论高浓度(1 mg/mL)Prx在椎间盘退变过程中起促进退变作用。

受精和生精过程中的氧化还原调节

氧化应激是男性不育的重要原因之一，它可以损害生精细胞、生精过程以及精子功能。最新的氧化还原生物学研究揭示了细胞所产生的活性氧（ROS）的信号作用。虽然羟自由基等高活性氧化剂有大量的有害作用，但由于过氧化氢为中等应激并有膜渗透性，而且只能氧化有限数量的生物分子功能团，所以过氧化氢可以作为一个信号调停者切实发挥作用。氨基酸支链最敏感的氧化部位是半胱氨酸的巯基，这也是一些常见酶参与催化反应的部位。虽然半胱氨酸的巯基化反应性在普通蛋白质中并不高，但一些磷酸酶在催化中心具有高反应性的巯基组，从而可通过细胞外刺激并在一定的环境条件下暂时升高过氧化氢水平而被氧化灭活。相应的，过氧化还原酶有中等的过氧化氢还原活性，而磷酸酶受到保护以免被氧化灭活，能调节过氧化还原酶在普通细胞中的由活性氧介导的信号转导调节作用，这已经受到越来越多的关注。虽然目前我们关于活性氧在男性生殖系统的信号作用知之甚少，但其重要意义正逐渐成为一个焦点问题。因此，本文把睾丸中过氧化氢作为新兴信号的作用加以综述。

基因沉默PRDX1表达对人结直肠癌SW480细胞侵袭迁移的影响

目的:探讨RNA干扰过氧化还原酶1(Peroxiredoxin 1,PRDX1)表达对人结直肠癌SW480细胞侵袭转移能力的影响。方法:筛选RNA干扰PRDX1的慢病毒质粒,与阴性对照慢病毒质粒分组转染结直肠癌SW480细胞,转染后的SW480细胞可分为PRDX1基因沉默组(si-PRDX1)和阴性对照组(Vector)。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和免疫印迹法(Western blot)分别检测两组细胞中PRDX1 mRNA和蛋白表达;采用Transwell侵袭和迁移实验检测基因沉默PRDX1表达对结直肠癌细胞侵袭及迁移能力的影响;通过Western blot检测两组细胞中基质金属蛋白酶(MMP)家族部分蛋白表达水平。结果:基因沉默PRDX1表达可有效抑制结直肠癌SW480细胞中PRDX1 mRNA和蛋白水平的表达,与阴性对照组相比(Vector),差异均具有统计学意义(P<0.01),说明基因沉默PRDX1的SW480细胞系构建成功;Transwell侵袭和迁移实验显示si-PRDX1组细胞的侵袭及迁移能力较对照组均明显降低(P<0.01);Western blot结果显示,与Vector组相比,si-PRDX1组细胞中组织基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)的表达明显增加,而MMP-2及MMP-9的表达显著下降,且差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:基因沉默人结直肠癌SW480细胞的PRDX1表达可有效抑制细胞的侵袭、迁移及转移能力,其机制可能会通过调控TIMP-2、MMP-2及MMP-9的表达介导。

PRDX1通过上皮间质转化促进结肠癌SW480细胞侵袭转移

目的探讨过氧化还原酶1(Peroxiredoxin 1,PRDX1)在结肠癌上皮间质转化(epithelialmesenchymal transition,EMT)发生中的作用及其参与结肠癌侵袭转移的可能机制。方法通过慢病毒转染使结肠癌SW480细胞PRDX1过表达并通过Western blot检测验证;采用Transwell方法和细胞划痕实验检测细胞侵袭及转移能力的变化;免疫细胞荧光检测结肠癌SW480细胞EMT相关蛋白Twist1、E-cadherin及Vimentin的表达;Western blot方法检测EMT转录因子Twist1、EMT相关蛋白E-cadherin、N-cadherin及Vimentin及转移相关蛋白MMP-9的表达。结果转染PRDX1组SW480细胞中PRDX1呈过表达;Transwell法和细胞划痕实验显示过表达PRDX1组细胞的侵袭及转移能力较对照组明显增强;免疫细胞荧光显示转染PRDX1组细胞其上皮细胞标记E-cadherin明显下调,间质标记Vimentin及EMT转录因子Twist1表达明显上调;Western blot结果表明过表达PRDX1组E-cadherin较对照组显著降低(P<0.01),而Twist1、MMP-9、N-cadherin及Vimentin较对照组显著升高(P<0.05)。结论 PRDX1可促进人结肠癌SW480细胞EMT的发生,从而增强结肠癌SW480细胞的侵袭、转移能力。

PRDX6在多囊卵巢综合征患者中的表达变化及其与糖脂代谢、性激素水平的相关性分析

目的探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者血浆过氧化还原酶6(PRDX6)的表达变化及其与糖脂代谢、性激素水平的相关性。方法本研究为回顾性病例对照研究。收集2020年1-10月陆军军医大学第二附属医院收治的47例PCOS患者(PCOS组)的临床资料,并选择同期在本院体检中心体检的60名健康女性为健康对照组。两组分别再按体重指数(BMI)分为两个亚组,其中,PCOS组BMI≤24 kg/m^(2)17例、BMI>24 kg/m^(2)30例,健康对照组BMI≤24 kg/m^(2)36例,BMI>24 kg/m^(2)24例。比较各组血浆PRDX6水平的差异及其与糖脂代谢和性激素指标的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析PRDX6对糖脂代谢和性激素指标的预测价值。结果PCOS组的血浆PRDX6水平明显高于健康对照组(P<0.0001)。相关性分析结果显示,在所有患者中,PRDX6水平与糖脂代谢指标三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、空腹胰岛素(FINS)、糖化血红蛋白(HbA_(1c))、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和胰岛β细胞功能(HOMA-β)呈正相关,与高密度脂蛋白(HDL)呈负相关(P<0.05);当BMI>24 kg/m^(2)时,PRDX6与糖脂代谢指标TG、LDL、FINS、HbA_(1c)、HOMA-IR、HOMA-β呈正相关,与HDL呈负相关(P<0.05);当BMI≤24 kg/m^(2)时,PRDX6与糖脂代谢无相关性(P>0.05)。在所有患者中,PRDX6与性激素指标睾酮(T)、促黄体素(LH)、促黄体素/促卵泡素(LH/FSH)比值呈正相关,与雌二醇(E_(2))和孕酮(P)呈负相关(P<0.05);当BMI>24 kg/m^(2)时,PRDX6与T、LH、LH/FSH呈正相关,与E_(2)和P呈负相关(P<0.05);当BMI≤24 kg/m^(2)时,PRDX6与T和LH/FSH呈正相关,与E_(2)和P呈负相关(P<0.05)。PRDX6预测所有患者糖脂代谢指标HOMA-IR和性激素指标LH的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.753和0.592(P<0.0001),预测PCOS患者HOMA-IR和LH的AUC分别为0.917和0.544(P<0.0001,P=0.461)。结论PRDX6高表达可能是PCOS患者糖脂代谢和性激素指标异常的危险因素,且对PCOS患者糖脂代谢异常具有较高的预测价值。

急性缺血性脑卒中患者血清Txn2、Prdx6水平与病情及治疗结局的相关性

目的:探讨急性缺血性脑卒中患者血清硫氧化还原蛋白2(Txn2)、过氧化还原酶6(Prdx6)水平与病情及治疗结局的相关性。方法:抽取2020年10月至2022年10月濮阳市安阳地区医院收治的急性缺血性脑卒中患者157例,采用酶联免疫吸附法检测血清Txn2、Prdx6水平。根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分将其分为轻度组(NIHSS评分<4分,67例)、中度组(NIHSS评分4~15分,51例)、重度组(NIHSS评分>15分,39例)。连续随访半年后,根据改良Rankin量表(mRS)评分将其分为预后良好组(mRS评分≤2分,112例)和预后不良组(mRS评分>3分,45例)。采用曲线下面积(AUC)评估血清Txn2、Prdx6水平对急性缺血性脑卒中患者预后的预测价值。结果:血清Txn2、Prdx6水平随着患者病情加重逐渐降低(轻度组>中度组>重度组),P<0.05。预后良好组患者血清Txn2、Prdx6水平高于预后不良组(P<0.05)。血清Txn2、Prdx6预测急性缺血性脑卒中患者预后的AUC(95%CI)分别为0.752(0.701~0.803)、0.849(0.798~0.900),截点值分别为4.48 ng/ml、61.42 pg/ml,特异度分别为57.03%、64.59%,灵敏度分别为91.46%、91.46%;Txn2与Prdx6联合检测的AUC(95%CI)为0.902(0.851~0.953),特异度为85.46%,灵敏度为87.21%。结论:血清Txn2、Prdx6水平下调与急性缺血性脑卒中患者病情加重和预后不良有关,两者可作为预测急性缺血性脑卒中患者预后的潜在血清标志物。

薯蓣皂苷对胰腺癌MiaPaCa-2细胞凋亡的影响及机制

目的探讨薯蓣皂苷对胰腺癌细胞MiaPaCa-2凋亡的作用及其对细胞中过氧化还原酶1（PRDXl）表达水平的影响。方法采用四甲基偶氮唑蓝法检测不同浓度薯蓣皂苷对MiaPaCa一2细胞增殖抑制的影响，流式细胞术检测细胞的凋亡，Western blot检测PRDXl以及凋亡相关蛋白的表达，DCFH-DA荧光探针检测细胞中活性氧簇（ROS）的水平。结果薯蓣皂苷可以抑制MiaPaCa-2细胞的增殖，且有剂量一效应依赖关系。薯蓣皂苷可以诱导MiaPaCa-2细胞内ROS水平明显上升。2．5μmol/L和5μmol/L薯蓣皂苷处理MiaPaCa-2细胞12h后，细胞凋亡率分别为（28．4±0．9）％和（49．6±2．7）％，与空白对照组[（3．5±O．7）％]比较，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。Western blot检测结果显示，与对照组比较，薯蓣皂苷组的抗凋亡蛋白表达降低，而凋亡蛋白表达上调，但加入N-乙酰半胱氨酸（NAC）后，薯蓣皂苷组的这种诱导作用受到抑制。10mmol/LNAC和2．5μmol/L薯蓣皂苷、10mmol/LNAC和5μmol/L薯蓣皂苷处理MiaPaCa-2细胞12h后，凋亡率分别为（10．8±2．3）％和（18．8±3．0）％。薯蓣皂苷可以降低MiaPaCa-2细胞的PRDXl蛋白表达。过表达PRDXl后，薯蓣皂苷诱导MiaPaCa-2细胞内ROS水平上升和凋亡的作用明显受到抑制，凋亡率为（21．3±5．9）％。结论薯蓣皂苷可以下调胰腺癌MiaPaCa-2细胞中PRDXl的表达水平，进而导致ROS过度蓄积引起细胞凋亡。

基于天然产物的白血病细胞分化机制的化学生物学研究

天然产物由于具有结构多样性和新颖性,具有独特的生理活性和新的作用机制,因此是开展化学生物学研究的重要工具,同时也是创新药物和先导化合物的重要来源.最近,我们研究发现天然活性化合物腺花素能够在体内和体外诱导维甲酸敏感和耐药的急性粒细胞性白血病细胞发生分化,有效延长白血病小鼠生存时间.在此基础上,以腺花素为分子探针,"垂钓"其潜在的靶分子,结果发现腺花素特异性靶向过氧化还原酶(Peroxiredoxin)Ⅰ//Ⅱ蛋白,导致H2O2的积聚,H2O2作为第二信使可诱导白血病细胞分化的信号通路.本文对这些工作做了论述和展望.