驱动蛋白家族成员18B与恶性肿瘤发生发展及肿瘤干细胞干性维持的关系

恶性肿瘤严重威胁人类生命和健康,是死亡的首要原因和主要的公共健康问题。通过调节微管动力,驱动蛋白家族成员18B(KIF18B)在有丝分裂中对染色体的配对和分离起着重要作用。它在诸多恶性肿瘤中呈现的异常高表达可促进恶性肿瘤的发生发展,导致患者不良预后。近年来研究发现KIF18B是肿瘤干细胞(CSC)干性相关基因,可能在CSC干性维持中起着重要的作用。

藏红花素对脊髓损伤大鼠运动功能、炎症的影响及机制研究

目的 探讨藏红花素对脊髓损伤大鼠运动功能、炎症及Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶(ROCK)信号通路的影响。方法 构建脊髓损伤大鼠模型,将建模成功的48只大鼠随机分为模型组、藏红花素低(25 mg/kg)、高(50 mg/kg)剂量组、甲泼尼龙琥珀酸钠(30 mg/kg)组,每组12只;另取12只大鼠作为假手术组。各组给予对应药物干预14 d(每天1次)。评估大鼠运动功能,并采用苏木素-伊红和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法染色分别观察脊髓组织病理变化和细胞凋亡,酶联免疫吸附试验法检测脊髓组织肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平;荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检测脊髓组织RhoA、ROCK1、ROCK2信使RNA(mRNA)和蛋白水平。结果 假手术组大鼠脊髓组织结构正常,无明显变化;与假手术组相比,模型组大鼠脊髓组织出现坏死灶,伴随嗜伊红色素颗粒生成,可见较多胶质瘢痕及空洞,BBB评分显著降低(P<0.05),脊髓组织细胞凋亡率、TNF-α、IL-1β、IL-6、RhoA、ROCK1、ROCK2 mRNA和蛋白水平显著升高(P<0.05);与模型组相比,藏红花素低、高剂量组大鼠脊髓组织病理损伤程度依次减轻,BBB评分依次升高(P<0.05),脊髓组织细胞凋亡率、TNF-α、IL-1β、IL-6、RhoA、ROCK1、ROCK2 mRNA和蛋白水平依次降低(P<0.05);甲泼尼龙琥珀酸钠组和藏红花素高剂量组大鼠脊髓组织病理变化程度及各项指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 藏红花素能改善脊髓损伤大鼠运动功能,抑制脊髓组织细胞凋亡和炎症反应,其机制可能与抑制RhoA/ROCK信号通路的激活有关。

醛脱氢酶18家族成员A1在食管癌细胞中结合的靶标及测序分析

目的研究醛脱氢酶18家族成员A1(aldehyde dehydrogenase 18 family member A1,ALDH18A1)作为一种RNA结合蛋白在食管癌细胞(KYSE150细胞)中结合RNA的分子特征及对肿瘤生长的影响。方法通过体外培养人食管鳞癌细胞(KYSE150细胞)。同时,采用RNA免疫共沉淀技术研究细胞内RNA与蛋白结合情况,利用目标蛋白的抗体将相应的RNA-蛋白复合物沉淀下来,分离纯化捕获的RNA。分析ALDH18A1结合RNA的分子特征,并且对ALDH18A1结合靶基因进行京都基因与基因组百科全书聚类分析。结果蛋白质免疫印迹实验显示目的蛋白被抗体较好富集。ALDH18A1具有广泛的RNA结合活性,结合显著富集在编码区、内含子和5’非翻译区。ALDH18A1主要结合在RNA的UGUAAUC基序。聚类分析结果表明,ALDH18A1结合的RNA分子主要参与了在对焦点黏附、癌症的中心碳代谢、细胞周期、剪接体、RNA运输和泛素介导的蛋白水解等。结论ALDH18A1能结合RNA分子,可在食管癌相关基因的表达过程以及相关的生物学过程过程中发挥作用。

KIF18B通过激活Wnt/βcatenin信号通路促进子宫内膜癌细胞增殖和转移的实验研究

目的 探讨驱动蛋白家族成员18B(kinesin family member18b,KIF18B)在子宫内膜癌组织中的表达,及促进子宫内膜癌细胞增殖和转移的作用机制。方法 收集子宫内膜癌组织50例和正常子宫内膜组织30例,采用免疫组织化学染色检测KIF18B表达水平,分析KIF18B表达与子宫内膜癌患者临床病理特征的关系及对患者预后的影响。KIF18B小干扰RNA(siRNA)转染子宫内膜癌细胞Ishikawa,分为si-NC组和si-KIF18B组,蛋白免疫印迹法检测KIF18B siRNA的转染效果;噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞的增殖能力;Transwell实验检测细胞的转移能力;双荧光素酶报告基因实验检测各组细胞中的Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路活性;蛋白免疫印迹法检测Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白Wnt3a和β-catenin,及其下游增殖相关蛋白cMYC,细胞周期蛋白D1(cyclinD1)和转移相关蛋白基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase,MMP-2)、基质金属蛋白酶7 (matrix metalloproteinase-7,MMP-7)的表达。结果KIF18B在子宫内膜癌组织中的阳性表达率高于正常子宫内膜组织(70.00%vs 46.67%),差异有统计学意义(χ2=4.301,P=0.038)。FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移患者KIF18B阳性表达率高于FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期(88.89%vs47.82%)、无淋巴结转移患者(86.36%vs 57.14%),差异有统计学意义(χ2=9.972, 5.009;P=0.002,0.025)。KIF18B高表达组五年总生存率低于KIF18B低表达组(34.29%vs 66.67%),差异有统计学意义(χ2=4.305,P=0.038)。siKIF18B组KIF18B表达低于si-NC组(0.15±0.04 vs 1.01±0.03),差异有统计学意义(t=29.790,P<0.001)。第2~5天si-KIF18B组细胞增殖率低于si-NC组,差异均有统计学意义(t=3.267~11.080,均P<0.05)。si-KIF18B组细胞穿膜数目低于si-NC组(39.67±4.52个vs 74.33±4.51个),差异有统计学意义(t=9.402,P<0.001)。si-KIF18B组细胞中荧光素酶相对活性低于si-NC组(0.41±0.04 vs 1.00±0.03),差异有统计学意义(t=20.438,P<0.001)。si-KIF18B组Wnt3a,β-catenin,cMYC,cyclinD1,MMP-2和MMP-7表达低于si-NC组,差异均有统计学意义(t=4.695~36.509,均P <0.05)。结论 KIF18B在子宫内膜癌组织中表达增加,下调KIF18B可以抑制子宫内膜癌细胞的增殖和转移,KIF18B可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路参与子宫内膜癌的发生、发展。

运动对c-Jun氨基末端激酶影响研究进展

c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase,JNK）家族是1990年被发现的丝裂原活化蛋白激酶（mito-gen-activated protein kinase,MAPK）超家族成员之一,涉及多种生理过程,在细胞分化、细胞凋亡、应激反应中起着至关重要的作用。JNK也参与了许多病理过程，可能介导了病理性心脏肥大反应、高血糖引起的血管内皮细胞凋亡、胰岛素抵抗、胰岛β细胞凋亡、神经萎缩和多种人类肿瘤的发生发展。JNK信号通路已成为近年来研究的热点。

结直肠癌肿瘤组织中TMPRSS4、c-Met、KIF18A表达水平与其病理特性和生存状态的关系

目的探讨结直肠癌肿瘤组织中跨膜丝氨酸蛋白酶4(TMPRSS4)、间质表皮转化因子(c-Met)、驱动蛋白家族成员18A(KIF18A)表达水平与其病理特性和生存状态的关系。方法选取该院于2015年3月至2017年6月确诊的102例结直肠癌患者作为研究对象,比较癌变组织和癌旁组织TMPRSS4、c-Met阳性率及KIF18A水平的差异,不同病理状态及生存状态患者的TMPRSS4、c-Met阳性率及KIF18A水平的差异,分析患者的病理状态及生存状态与TMPRSS4、c-Met阳性率和KIF18A水平的相关性。结果癌变组织TMPRSS4、c-Met阳性率及KIF18A水平明显高于癌旁组织(P<0.05);不同性别、年龄患者TMPRSS4、c-Met阳性率及KIF18A水平比较差异均无统计学意义(P>0.05),而不同病程、TNM分期、临床分型患者之间比较差异有统计学意义(P<0.05);通过对患者的随访,生存患者61例,死亡患者41例,生存组TMPRSS4、c-Met阳性率及KIF18A水平明显低于死亡组(P<0.05);患者的TNM分期、临床分型、病程及生存状态与TMPRSS4、c-Met阳性率及KIF18A的水平呈正相关(r=0.165~0.998,P<0.05)。结论结直肠癌肿瘤组织中TMPRSS4、c-Met阳性率及KIF18A水平与其病理特性和生存状态存在一定的相关性,可作为结直肠癌患者诊断辅助参考之一。

aKinesin家族成员18A在肺腺癌进展中的作用

目的探讨Kinesin家族成员(Kinesin family member,KIF)18A在肺腺癌中的表达水平及其在肺腺癌进展中的作用。方法选取2014年4月至2018年5月在连云港第二人民医院进行手术治疗的102例肺腺癌患者,均留取肺腺癌组织及癌旁组织。采用免疫组化方法检测肺腺癌组织及癌旁正常组织中KIF18A的表达水平。并行体外细胞试验观察KIF18A对肺腺癌细胞增殖、迁移、入侵等的影响,以及动物实验观察KIF18A对小鼠肿瘤生长和转移的影响。结果免疫组化检测:KIF18A主要表达于肺腺癌细胞的细胞质中,而癌旁组织中KIF18A的表达水平明显较低。定量PCR检测:转染KIF18A shRNA质粒后,KIF18A在A549和H1975细胞中的表达均被有效抑制。免疫印迹分析:转染KIF18A shRNA质粒的A549和H1975细胞中KIF18A的表达水平明显降低。菌落测定:KIF18A的消耗明显降低了菌落数目。MTT检测:两种类型的肺腺癌细胞在570 nm处的吸光度值明显降低。伤口愈合试验:KIF18A的耗竭显著抑制了A549和H1975细胞的伤口愈合程度。Transwell实验:KIF18A的耗竭显著阻断了A549和H1975细胞的侵袭,细胞数量显著下降。动物实验:KIF18A基因敲除小鼠的肿瘤体积明显小于对照组,KIF18A的表达水平也明显降低;肿瘤转移8周后,A549细胞的肺转移发生率明显低于对照组。结论KIF18A参与了肺腺癌的进展和转移,这将为肺腺癌的靶点治疗提供新的可能。

IL-37的研究新进展

2000年,Kumar等[1]发现了一种与经典IL-1家族成员具有共同结构域的前体肽,需经过半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1（caspase-1）的剪切变成熟.2001年Eleanor [2]发现这种前体肽是IL-1家族的第7个细胞因子,于是将其命名为IL-1F7.已有研究证明IL-1F7与IL-18Rα链非竞争性结合形成复合体,抑制了NF-κB和MAPK等途径,使IFN-γ的合成下降,对IL-1家族受体后信号传导产生负性调节作用,但是IL-37对IL-18的活性并未产生影响 [3-5].成熟的IL-1F7还可以进入细胞核与Smad3结合形成复合体,通过调节基因转录抑制促炎因子的产生[6].

KIF18B通过调控细胞周期促进了三阴性乳腺癌的进展

三阴性乳腺癌(TNBC)是一种高度侵袭性的癌症,是女性肿瘤相关死亡的主要原因之一.驱动蛋白家族成员18B(KIF18B)是一种基于微管的运动蛋白,参与了多种细胞过程,如细胞分裂等.KIF18B已被证明能促进多种肿瘤的进展.前期研究表明,KIF18B可以通过调节GSK-3β/β-catenin信号,促进乳腺癌的增殖、侵袭和化疗耐药.然而,KIF18B和TNBC之间的关联还不清楚.通过TCGA数据库分析,发现KIF18B在侵袭性乳腺癌组织中高表达,并提示患者的不良预后.此外,CCLE数据库显示,KIF18B在TNBC细胞系中过度表达.通过转染sh RNA,在MDA-MB-231和HCC-1937细胞系中敲低KIF18B的表达后,集落形成实验和CCK-8实验显示细胞增殖受到抑制.此外,KIF18B敲低导致细胞周期停滞在G2/M期.裸鼠异种移植瘤模型进一步证明,KIF18B敲低抑制了体内的肿瘤生长.实验结果表明,KIF18B通过调控细胞周期诱导TNBC增殖.KIF18B可能是TNBC的一个潜在的治疗靶点.

四次跨膜蛋白1在肾透明细胞癌组织中的表达及意义

目的探讨肾透明细胞癌组织中四次跨膜蛋白1(TM4SF1)的表达改变及临床意义。方法选取2018年至2019年青岛大学医学院附属医院经手术切除的肾透明细胞癌的住院患者标本20例作为试验组,癌旁组织作为对照组。采用荧光定量PCR技术和蛋白印迹方法检测TM4SF1在肾透明细胞癌组织中表达的改变,并与癌旁组织相比较,探讨TM4SF1在肾透明细胞癌发生发展中的变化。结果与癌旁组织比较,肾癌组织中TM4SF1的mRNA表达水平显著下降,差异有统计学意义(P<0.05);与癌旁组织比较,肾癌组织中TM4SF1的蛋白表达水平明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论TM4SF1可能是未来肾癌治疗的潜在靶点。TM4SF1在不同组织中的表达结果不一致可能与组织类型有一定的关系。