脂质运载蛋白型前列腺素D合成酶在恶性肿瘤中的研究进展

脂质运载蛋白型前列腺素D合成酶(L-PGDS)是脂质运载蛋白超家族成员中较重要的成分,除参与前列腺素合成和脂质转运外,其近年在恶性肿瘤中相关作用的研究也引起了广泛关注。L-PGDS基因在人类多种恶性肿瘤中表达异常,且与肿瘤患者预后有关,其可能通过参与调控肿瘤细胞的增殖、迁移和凋亡等生物学行为过程,促进肿瘤的发生和发展。因此,较全面地阐明L-PGDS基因在人类恶性肿瘤中的的作用机制将为未来发现新的肿瘤标志物和治疗靶点提供新思路。

癫痫大鼠海马组织中脂质运载蛋白型前列腺素D合成酶的表达变化

目的观察癫痫大鼠海马脑组织中脂质运载蛋白型前列腺素D合成酶(L-PGDS)的表达变化。方法取35只大鼠,随机分为观察组30只和对照组5只,观察组采用氯化锂-匹罗卡品建立癫痫持续状态模型;对照组和观察组建模后第1、3、7、14、30、60天各取5只,麻醉后断头取海马组织,用Western bolt法检测海马组织L-PGDS蛋白,免疫荧光双标技术对L-PGDS进行海马区细胞定位。结果对照组大鼠海马组织中L-PGDS蛋白相对表达量为0.172±0.007,观察组建模后第1、3、7、14、30、60天大鼠海马组织中L-PGDS蛋白相对表达量分别为0.190±0.004、0.195±0.003、0.231±0.010、0.322±0.010、0.417±0.006、0.454±0.009;观察组随着建模时间延长L-PGDS蛋白相对表达量增加(P均<0.05),且各时点均高于对照组(P均<0.01)。免疫荧光双标检测发现,L-PGDS主要表达于神经元的树突和星形胶质细胞的胞质中。结论 L-PGDS在癫痫大鼠海马组织中表达增加,可能参与了癫痫的发生发展过程,可作为癫痫诊断的分子标志物和治疗靶点。

脂质运载蛋白型前列腺素D合成酶水平在1型发作性睡病患者日间过度嗜睡中的作用研究

背景前列腺素D2(PGD2)通过其受体DP1诱导腺苷生成,发挥强效促眠效果。近年来研究显示发作性睡病患者存在PGD2-DP1通路异常,合成PGD2的脂质运载蛋白型前列腺素D合成酶(L-PGDS,中枢系统PGD2关键合成酶)可能参与了该类患者日间过度嗜睡(EDS)的调节。目的探讨1型发作性睡病患者脑脊液(CSF)和血清L-PGDS水平的变化,以及L-PGDS在EDS中的作用。方法选取2013年12月—2015年12月北京大学人民医院睡眠中心收治的79例1型发作性睡病患者为研究对象(NT1组),选取同期就诊北京大学人民医院行腿部手术接受蛛网膜下腔阻滞麻醉(腰麻)的47例患者作为对照组。NT1组进行日间多次睡眠潜伏期试验(MSLT),计算睡眠潜伏期(SL)及睡眠起始快速眼动睡眠(SOREMPs)次数;两组均检测血清L-PGDS,CSF L-PGDS、HCRT水平及HLA-DQB1*0602表型。结果两组年龄、性别、BMI和HLA-DQB1*0602阳性比例比较,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组CSF HCRT水平高于NT1组,CSF(P=0.029)和血清(P<0.001)L-PGDS水平低于NT1组。NT1组、对照组CSF L-PGDS水平与CSF HCRT均无相关性(NT1组:rs=-0.160,P=0.159;对照组:rs=-0.179,P=0.229)。对照组(rs=0.358,P=0.014)和NT1组(rs=0.267,P=0.017)年龄与CSF L-PGDS水平均呈正相关。年龄与血清L-PGDS水平无相关关系(对照组:rs=-0.251,P=0.088,NT1组:rs=-0.058,P=0.612)。CSF L-PGDS及血清L-PGDS与BMI均无相关关系(CSF L-PGDS:对照组:rs=-0.097,P=0.521,NT1组:rs=0.122,P=0.283;血清L-PGDS:对照组:rs=-0183,P=0.223,NT1组:rs=0.188,P=0.098)。对NT1组和对照组年龄、性别及BMI进行1∶1匹配,获得了12组配对样本。匹配后,NT1组CSF L-PGDS及血清L-PGDS水平高于对照组(P<0.05)。结论I型发作性睡病患者的血清和CSF L-PGDS水平较对照组明显增高,提示L-PGDS在EDS发病机制中发挥重要的作用。

人股动脉粥样硬化并高血压患者血浆脂质运载蛋白型前列腺素D合成酶和内脂素水平的变化

目的 探讨血浆脂质运载蛋白型前列腺素D合成酶（L-PGDS）及内脂素水平与人股动脉粥样硬化并高血压及其相关危险因素的关系.方法 根据股动脉内膜-中层厚度（IMT）将152例患者分为股动脉粥样硬化组102例,健康对照组50例.股动脉粥样硬化组根据有无高血压分为股动脉粥样硬化并高血压组（48例）,股动脉粥样硬化无高血压组（54例）,测定空腹血浆L-PGDS与内脂素水平,所有受试者测定血压、身高、体质量、血脂、空腹血糖,计算体质量指数（BMI）.结果 与对照组比较股AS患者血浆内脂素水平为（5.02±2.89） μg/L,明显偏高,血浆L-PGDS水平为（0.58±0.11） mg/L （P＜0.05）.股AS合并高血压患者与股AS患者比较,血浆内脂素水平[（28.89 ±4.33） μg/L]及L-PGDS水平[（0.90 ±0.30） mg/L]均明显升高（P＜0.05）.血浆内脂素与TG、LDL-C、CRP、BMI、IMT、DBP呈正相关,与年龄、HDL-C呈负相关（P＜0.05）,血浆L-PGDS与年龄、SBP呈正相关,与BMI、IMT及LDL-C、CRP水平呈负相关.血浆内脂素与L-PGDS水平呈负相关（P＜0.05）.结论 人股动脉粥样硬化并高血压患者血浆内脂素及L-PGDS水平明显改变,可能通过多种途径参与了动脉粥样硬化并高血压病的病理生理过程.

脂质运载蛋白型前列腺素D合成酶作为难溶性药物给药载体的研究进展

增加难溶性药物的溶解度一直是药物开发的极大挑战。脂质运载蛋白型前列腺素D合成酶(L-PGDS)属于脂质运载蛋白超家族成员,可作为一种新型的给药载体,用于制备难溶性药物给药系统。本文通过分析归纳现有文献,对L-PGDS的结构、性质和制备及L-PGDS与难溶性药物的作用机制、制备方法和应用等进行综述。L-PGDS通过亲水-疏水相互作用与难溶性药物形成复合物,显著提高药物的溶解度、生物利用度和疗效,目前已应用于口服和注射给药系统,其处方工艺简单,生物相容性好,在难溶性药物新剂型和新品种开发方面具有良好的应用前景。

Lipocalin型前列腺素D合成酶的结构、定位与特性

Lipocalin型前列腺素D合成酶 (L PGDS)是一种糖基化、双功能、单体蛋白质 ,具有催化PGD2的合成和转运亲脂性物质的作用。它在中枢神经系统、雄性生殖器官和人与猴的心脏等器官中有分布 ,并被分泌到脑脊液、精浆及血浆内。L PGDS浓度的检测对神经错乱、精子生成障碍、心血管疾病和肾功能障碍等疾病具有辅助诊断作用。

Lipocalin型前列腺素D合成酶在大鼠睾丸和附睾中的分布与定位

目的 分析大鼠睾丸和附睾中Lipocalin型前列腺素D合成酶 (LPGDS)的分布与定位 ,探讨LPGDS在男性生殖中的作用。 方法 选用 2月龄SD大鼠睾丸与附睾 ,运用Westernblot方法分析LPGDS在大鼠睾丸与附睾头、附睾体和附睾尾中的表达及其差异 ;运用免疫组织化学方法分析LPGDS在睾丸与附睾头、附睾体和附睾尾中的分布。 结果 Westernblot研究发现 ,LPGDS在大鼠睾丸中没有表达 ,在附睾中有较强表达 ,附睾头表达量最高 ,附睾体次之 ,附睾尾最低。免疫组织化学结果显示 ,免疫阳性产物定位于附睾上皮细胞的胞质和纤毛上。 结论LPGDS在大鼠睾丸中没有表达 ,在附睾中有较强表达 ,表达量存在差异。提示 ,LPGDS在精子成熟过程中起着一定的作用。

人Lipocalin型前列腺素D合成酶真核载体的构建及酵母表达菌株的建立

目的 :在毕赤酵母中表达人睾丸Lipocalin型前列腺素D合成酶 (L PGDS) ,以利于生物学功能及临床应用研究。 方法 :用PCR的方法从质粒pGEX 2T htL PGDS上扩增出人睾丸L PGDS基因编码序列 ,构建该基因的酵母表达质粒 ;将表达质粒电转化毕赤酵母 ,甲醇诱导L PGDS的表达。 结果 :PCR扩增的L PGDS成熟肽基因编码序列克隆T载体后 ,经测序证明与所报道的人睾丸L PGDScDNA完全一致。对培养上清进行SDS PAGE分析显示 ,在相对分子质量为 2 70 0 0处有重组蛋白的表达 ,与理论值完全一致。 结论 :人Lipocalin型前列腺素D合成酶在毕赤酵母中获得了高效。

脂质运载型前列腺素D合成酶在围手术期认知功能障碍中的作用

围手术期神经认知功能障碍(perioperative neurocognitive disorders,PND)是手术和麻醉后一种常见的并发症,包括记忆力的下降和行为、性格、认知功能的改变。PND可延长病人的住院时长,影响病人的生活质量,并可增加死亡风险。随着老龄化社会的到来,PND的发病率也随之增高,防治PND以缓解其带来的经济负担和社会负担已成为临床研究热点。尽管针对PND的研究已取得重大进展,但其发病机制仍不清楚,研究表明海马神经元的凋亡可能是潜在机制之一。脂质运载型前列腺素D合成酶(lipocalin-type prostaglandin D synthase,LPGDS)是β-淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)主要的分子伴侣,可通过调控神经元凋亡改善认知功能。本文就L-PGDS在PND中的作用进行综述,旨在为防治PND提供新的思路。

前列腺素D合成酶单克隆抗体的制备及其在精子中的定位

目的制备小鼠抗人Lipocalin型前列腺素D合成酶的单克隆抗体,探讨Lipocalin型前列腺素D合成酶在精子表面的定位与分布。方法用毕氏酵母表达的Lipocalin型前列腺素D合成酶作抗原免疫BALBc小鼠,制备杂交瘤,产生单克隆抗体,ELISA与Westernblot分析鉴定其特异性,免疫组织化学法探讨Lipocalin型前列腺素D合成酶在人精子表面的分布与定位。结果获得了1株抗人Lipocalin型前列腺素D合成酶的单克隆抗体,其效价为1∶1000,抗体亲和力为2×108molL,小鼠IgG亚型为IgG1,Westernblot结果显示该抗体能特异性识别Lipocalin型前列腺素D合成酶,组化结果显示Lipocalin型前列腺素D合成酶定位于人精子表面。结论成功制备了1株鼠抗人Lipocalin型前列腺素D合成酶的单克隆抗体,精子的表面有Lipocalin型前列腺素D合成酶的分布。

可溶性重组人睾丸前列腺素D合成酶的原核表达及活性鉴定

目的 得到纯化的、可溶性的、且有活性的重组人睾丸前列腺素D合成酶（rhtL-PGDS)。方法 通过降温诱导重组质粒pGEX-2T/htL-PGDS表达，获得了可溶性重组融合蛋白。用谷胱甘肽琼脂糖珠纯化和凝血酶酶切重组融合蛋白制备纯化的rhtL-PGDS。根据L－PGDS与视黄酸结合后发生波谱红移鉴定其活性。结果 诱导温度从37℃降至15℃，重组融合蛋白以可溶性形式表达。通过凝血酶酶切和谷胱甘肽琼脂糖珠纯化获得了纯化的rhtL-PGDS。rhtL-PGDS与视黄酸结合后波谱从342nm迁移至374nm，证实rhtL-PGDS具有生物学活性。结论 降温诱导重组质粒pGEX-2T/htL-PGDS可避免包涵体形成，获得可溶性的具有生物学活性的rhtL-PGDS。

肝硬化合并自发性细菌性腹膜炎病原菌及前列腺素E2、D二聚体、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白检测的临床意义

目的探讨肝硬化合并自发性细菌性腹膜炎(SBP)病原菌及前列腺素E2(PGE2)、D二聚体(D-D)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)的临床意义。方法以60例肝硬化合并SBP患者为对象,以同期60例肝硬化无SBP患者为对照组。检测患者PGE2、D-D、NGAL水平,分析其诊断肝硬化合并SBP的效能。结果观察组PGE2、NGAL水平高于对照组,D-D水平低于对照组(P<0.05)。PGE2诊断肝硬化合并SBP的AUC、敏感度、特异度、最佳截断点分别为0.876(95%CI:0.803~0.929)、86.67%、81.67%、43.08 pg/mL;D-D诊断肝硬化合并SBP的AUC、敏感度、特异度、最佳截断点分别为0.907(95%CI:0.840~0.952)、100.00%、81.67%、0.93 mg/L;NAGL诊断肝硬化合并SBP的AUC、敏感度、特异度、最佳截断点分别为0.814(95%CI:0.733~0.880)、83.33%、85.00%、24.44 ng/mL;联合检测诊断肝硬化合并SBP的AUC、敏感度、特异度、最佳截断点分别为0.976(95%CI:0.931~0.995)、100.00%、91.67%、0.35。PGE2、D-D、NGAL联合监测诊断肝硬化合并SBP的AUC高于PGE2、D-D、NGAL单独诊断(P<0.05)。结论肝硬化合并SBP患者PEG2、NGAL水平降低,D-D水平升高,检测三者水平有助于准确诊断该病。

载脂蛋白A-Ⅰ(apoA-Ⅰ)促进单核细胞源性巨噬细胞产生前列腺素E_2(PGE_2)和前列腺素D_2(PGD_2)

目的探讨人单核细胞THP-1源性巨噬细胞产生的Lipocalin型前列腺素D合酶(lipocalin typeprostaglandin D synthase,L-PGDS)、前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)和前列腺素D2(PGD2)与载脂蛋白A-Ⅰ(apolipoprotein A-Ⅰ,apoA-Ⅰ)抗动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)作用之间的关系。方法采用MTT法确定合适的给药浓度。用不同浓度(0、12.5、25、50、100和200μg/mL)apoA-Ⅰ处理体外培养的THP-1细胞源性巨噬细胞24 h后,逆转录-聚合酶链式反应法(RT-PCR)检测L-PGDS mRNA表达的变化,酶联免疫测定法(ELISA)检测PGE2和PGD2蛋白表达的变化。结果 apoA-Ⅰ处理24 h的巨噬细胞中L-PGDS mRNA、PGE2和PGD2蛋白的表达均显著高于未用apoA-Ⅰ处理的巨噬细胞(P均<0.001);apoA-Ⅰ浓度为50μg/mL时,作用效果最明显。结论 apoA-Ⅰ的抗AS作用可能与上调THP-1细胞源性巨噬细胞中L-PGDS mRNA以及PGE2和PGD2蛋白的表达有关。

2型糖尿病患者血清超敏C反应蛋白及8异前列腺素F2α与下肢动脉病变相关性

下肢动脉病变是2型糖尿病（T2DM）常见并发症，严重者导致坏疽。据统计T2DM患者下肢截肢率比正常人高5-15倍[1]。近年研究发现，超敏C-反应蛋白（hs-CRP）作为炎症因子与T2DM外周血管病变相关[2]。氧化应激可以改变血管内皮细胞功能，刺激炎症蛋白，参与T2DM大血管病变的发生和发展[3]。8-异前列腺素F2α（8-iso-PGF2α）是评价机体氧化应激的理想指标[4]。本研究检测T2DM患者血清hs-CRP、血浆8-iso-PGF2α，并观察二者与T2DM下肢动脉病变的关系，为其防治提供理论依据。

缬沙坦联合灯盏细辛注射液对老年H型高血压患者血浆L-PGDS及内脂素水平的影响

目的研究缬沙坦联合灯盏细辛注射液对H型高血压患者血浆脂质运载蛋白型前列腺素D合成酶(L-PGDS)及内脂素水平的影响。方法84例H型高血压患者根据抽签法分为观察组和对照组,每组42例。对照组使用常规治疗并联合缬沙坦,观察组在对照组治疗基础上使用灯盏细辛注射液进行治疗。评价两组临床疗效,比较两组治疗前后血压、血脂、血浆L-PGDS、内脂素、白细胞介素(IL)-6、可溶性细胞黏附分子(sICAM)-1、同型半胱氨酸(Hcy)水平的变化。结果治疗后,观察组总有效率显著高于对照组〔92.86%(39/42)vs69.05%(29/42),P<0.05〕。治疗前,两组舒张压(DBP)、收缩压(SBP)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平比较差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组SBP、DBP、TC、TG、LDL-C水平均较治疗前显著降低(P<0.05)、HDL-C较治疗前显著升高(P<0.05),且观察组的SBP、DBP、TC、TG、LDL-C水平显著低于对照组(P<0.05)、HDL-C水平明显高于对照组(P<0.05)。治疗后,两组血浆L-PGDS水平较治疗前显著升高(P<0.05),血清IL-6、sICAM-1、Hcy及内脂素水平较治疗前显著降低(P<0.05),并且观察组的L-PGDS水平显著高于对照组(P<0.05)、血清IL-6、sICAM-1、Hcy及内脂素水平显著低于对照组(P<0.05)。结论缬沙坦联合灯盏细辛注射液能有效升高H型高血压患者血浆L-PGDS水平,降低内脂素水平,改善患者临床症状,临床疗效良好。

Lipocalin型前列腺素D合成酶、尿微量白蛋白与妊娠期高血压疾病肾功能损伤的关系研究

目的通过检测Lipocalin型前列腺素D合成酶(L-PGDS)、尿微量白蛋白(UmALb),探讨两者在妊娠期高血压疾病早期肾损伤诊断中的价值。方法选取2014年5月-2015年4月该院收治的妊娠期高血压疾病患者95例为妊娠期高血压疾病组,其中妊娠期高血压30例,轻度子痫前期32例,重度子痫前期33例;同期选取该院健康产检孕妇40例为对照组,采用酶联免疫吸附试验检测L-PGDS,免疫透射比浊法检测UmALb,并进行比较分析。结果与对照组比较,妊娠期高血压疾病组L-PGDS水平明显降低,UmALb明显升高,差异有统计学意义(均P<0.01);与妊娠期高血压患者比较,轻度子痫前期患者L-PGDS明显降低,UmALb明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),重度子痫前期患者L-PGDS明显降低(P<0.01),UmALb明显升高(P<0.01);与轻度子痫前期患者比较,重度子痫前期患者L-PGDS明显降低(P<0.05),UmALb明显升高(P<0.01);妊娠期高血压疾病患者L-PGDS与UmALb水平成负相关,(r=-0.625,P<0.01)。结论联合检测尿L-PGDS与UmALb,能发现妊娠期高血压疾病患者早期肾功能的改变,避免发生不可逆的肾损伤,有重要临床意义。

脂质运载蛋白型前列腺素D合酶在脑胶质瘤中的表达研究

目的 研究脂质运载蛋白型前列腺素D合酶 (L PGDS)mRNA及其蛋白在脑胶质瘤中的表达。方法 用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)和免疫印记 (westernblot)检测L PGDSmRNA及其蛋白在脑胶质瘤组织和脑脊液中的表达水平。结果 实时荧光定量RT PCR显示 ,L PGDS的mRNA在 2 3例脑胶质瘤组织中的表达水平范围为 1 5× 10 3～ 7 0× 10 4 copy/μgRNA ,均值为 1 6×10 4 copy/μgRNA ,而在 5名正常组织中的表达水平均值为 8 1× 10 5copy/μgRNA。经统计学分析 ,两组间差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,且表达水平与胶质瘤恶性程度相关。胶质瘤细胞株U 2 5 1的表达水平为4 7× 10 3copy/μgRNA。蛋白定量显示 ,脑胶质瘤患者脑脊液中L PGDS的吸光度比率均值为 0 47±0 12 ,而正常脑脊液中为 0 92± 0 2 6 ,两组间差异有非常显著性 (P <0 0 1)。结论 发现在脑胶质瘤中L PGDSmRNA及其蛋白表达水平下降 ,这可能对脑胶质瘤的诊断、治疗有潜在的应用价值。

PGD2-DP1受体途径在人腹主动脉瘤形成中的作用

目的了解前列腺素D2（prostaglandin D2，PGD2）-DPI受体途径相关的酶前列腺素G／H合成酶（cyclooxygenase，COX）-1、COX-2和脂质运载蛋白型前列腺素D合成酶（lipocalin—type prostagladin Dsynthase，L—PGDS）及DPI受体在人腹主动脉瘤（abdominal aortic aneurysm，AAA）组织中的表达定位，分析其与人AAA直径及破裂的相关性，探讨PGD2-DPI受体途径对人AAA的血管平滑肌细胞表型变异及炎性细胞趋化的影响。方法采用免疫组化及免疫荧光染色方法，检测已破裂、未破裂AAA组织和正常胸内动脉组织COX-1、COX-2、L—PGDS及DPI受体表达，利用RT—PCR方法检测人AAA组织中COX-1、COX-2、L—PGDS及DPI受体mRNA表达，使用Westernblot方法检测L—PGDS及DPI受体蛋白的表达，结合临床资料记录的AAA直径和是否破裂进行相关性分析。结果COX-1、COX-2、L—PGDS及DPI受体表达于人AAA组织的结构性细胞和炎性细胞，L—PGDS的表达量与AAA的直径和破裂呈负相关，COX-2的表达量与AAA的直径呈正相关。结论人AAA中存在PGD2-DPI受体途径相关的酶及受体表达，且COX-2的表达量与AAA直径相关，L—PGDS表达量与AAA直径和破裂相关。

L-PGDS在匹罗卡品诱导癫痫大鼠海马组织中的表达及作用

目的：探讨脂质运载蛋白型前列腺素D合成酶（Lipocalin-type prostaglandin D syn-thase，L-PGDS）在匹罗卡品诱导的癫痫大鼠海马脑组织中的表达变化及意义。方法：35只SD雄性大鼠随机分成对照组和模型组，模型组依据观察时间点不同又分成建模后1d、3d、7d、14d、30d和60d6个亚组，每组各5只大鼠。模型组大鼠用氯化锂-匹罗卡品诱导癫痫持续状态后，用蛋白免疫印迹检测大鼠海马组织内L-PGDS蛋白表达水平，并用免疫荧光双标技术对L-PGDS进行海马区细胞定位。结果：大鼠癫痫持续状态后第1天，海马组织内L-PGDS蛋白表达水平较对照组有所升高，随着时间的延长，L-PGDS蛋白表达水平逐渐升高，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。免疫荧光双标检测发现L-PGDS主要表达于神经元的树突和星型胶质细胞的胞质胞浆中。结论：L-PGDS在癫痫模型中表达异常升高，可能参与了癫痫的发生发展过程，有望成为临床癫痫诊断的一个分子标志物和新的抗癫痫药物治疗的靶点。

L-PGDS基因在大鼠睾丸与附睾中的表达

选用 2月龄SD大鼠睾丸与附睾总RNA为模板 ,运用RT PCR和蛋白质印迹技术探讨了Lipocalin型前列腺素D合成酶 (L PGDS)基因在大鼠睾丸与附睾头、附睾体和附睾尾中的表达及其差异。结果表明 ,L PGDS基因在大鼠睾丸中没有表达 ,在附睾中有较强表达 ,附睾头表达量最高 ,附睾体次之 ,附睾尾最低 ,表达量存在差异。提示 ,L PGDS在精子成熟过程中起着一定的作用。