短波紫外线辐照对近江牡蛎眼点幼虫存活及附着的影响

近江牡蛎(Crassostrea ariakensis)是海洋中主要污损生物之一,对海上养殖设施以及海洋工程装备存在较大的影响。波长短能量大的短波紫外线(UV-C,波长200~280 nm)辐照能够损伤贝类幼虫的DNA和蛋白质结构,影响其存活和附着,可用于防治生物污损。本研究选用二倍体近江牡蛎附着变态期的眼点幼虫为研究对象,采用单一变量法,研究不同强度和剂量UV-C的眼点幼虫致死响应,以及不同UV-C辐照频率和辐照距离下眼点幼虫的附着率差异性。研究结果表明,10 W短波紫外线灯辐照试验中部分处理组和对照组在观测时间段内存在显著差异(P<0.05),24 h后所有处理组试验单元内无存活幼虫,此时对照组存活率为(26.3±1.9)%;20W短波紫外线灯辐照试验中处理组和对照组在所有观测时间段的存活率均存在显著差异(P<0.05),24 h后所有处理组试验单元内没有存活幼虫,此时对照组存活率为(22.3±1.3)%;辐照频率达5 min/h时,平均附着率从(12.83±1.17)%降低至(3.31±0.69)%,显著地降低了附着率;装置距离网衣15和20 cm对附着率的辐照效果无显著差异,与对照组相比均能有效减少附着。本研究可为UV-C防治生物污损的装备设计提供参考。

近江牡蛎单体苗种繁育技术

近江牡蛎是我国重要的海水贝类养殖品种,营养价值高、肉质鲜美,深受消费者喜爱。由于牡蛎具群居固着生活的习性,生长过程中始终存在空间和饵料竞争,生长受限,且长成后壳形不规则,因而极大降低了近江牡蛎产量(王昌勃等,2016;王岩等,2023)。单体牡蛎无附着基,呈游离状态,生长不受空间限制,形状规则。开展近江牡蛎单体苗种繁育,推广单体牡蛎养殖,可提高养殖效益。利用肾上腺素诱导是国内外常用的生产牡蛎单体苗种的方法,本研究对肾上腺素诱导近江牡蛎单倍体苗种进行探究,以期获得高质量单体苗种。

近江牡蛎冻干组织糖原含量近红外模型的建立

糖原直接影响牡蛎的风味和营养品质,常作为评价牡蛎品质质量的重要标准。近红外光谱(NIR)模型可以实现糖原含量的快速准确检测。本研究以近江牡蛎(Crassostrea ariakensis)为研究对象,采用微量蒽酮法、近红外技术分别获取了外套膜、鳃、闭壳肌、肝胰腺、唇瓣、性腺等6个组织及全软体部混样共909份样品的糖原含量及光谱数据,结合最小二乘法建立了近江牡蛎6个组织及全软体部的糖原含量预测模型,并对该模型进行了外部验证和交叉验证。结果显示,所测样品光谱数据经一阶求导、乘法散射校正及平滑预处理后,建立的模型最优;所建立的7个模型的建模相关系数(RC)为0.9716~0.9963,其外部验证相关系数(REV)及交叉验证相关系数(RCV)分别为0.9490~0.9908和0.9694~0.9969,且模型交叉验证和外部验证的RPD值均大于2.5,表明所建立的模型能准确预测近江牡蛎相应组织样品的糖原含量。本研究建立的近江牡蛎糖原含量NIR分析模型,不仅丰富了牡蛎糖原含量检测方法的研究资料,还为实现近江牡蛎糖原成分的快速、准确测定提供了技术支撑,在近江牡蛎品质性状改良等领域具有重要的应用价值。

性类固醇激素在近江牡蛎性腺发育周期的分布特征

性类固醇激素在脊椎动物的性别分化、生长发育、生殖代谢等过程中发挥着重要的生理作用,但是目前对软体动物性类固醇激素的了解还十分有限。本研究结合组织学方法根据性腺发育状态将近江牡蛎性腺划分为三个组别,即前期(Ⅰ期)、中期(Ⅱ期)和后期(Ⅲ期),并利用酶联免疫吸附测定(ELISA)分析了孕酮、睾酮、雌二醇三种重要的性类固醇激素在性腺三个时期的变化特征。结果表明:性腺中孕酮、睾酮和雌二醇含量范围分别是22.2~346.6 pg·g^(-1)、1.9~28.7 pg·g^(-1)和23.2~258.1 pg·g^(-1);且平均含量雌二醇>孕酮>睾酮,分别为所测激素总含量的57%、40%和3%。近江牡蛎卵巢中孕酮含量在Ⅰ期和Ⅲ期显著高于精巢,精巢中睾酮含量在Ⅰ期显著高于卵巢,卵巢中雌二醇含量在Ⅱ期和Ⅲ期显著高于精巢。三种激素含量的变化在雌雄间和不同发育阶段都具有明显差异,表明性类固醇激素在近江牡蛎性别分化以及性腺发育过程中发挥了重要作用。该研究结果丰富了性类固醇激素在双壳贝类中的研究资料,可为制定近江牡蛎苗种繁育策略提供参考。

近江牡蛎受精过程、胚胎及早期幼虫发育特征

为了解近江牡蛎(Crassostrea ariakensis)从受精到早期幼虫发育阶段的发育特性,在水温22~24℃、盐度20~22的实验室环境中对采自山东东营丁字湾海域的近江牡蛎进行人工授精,利用普通光学显微镜和荧光显微镜对近江牡蛎受精、早期胚胎和幼虫发育过程中的形态和核行为变化进行观察,并对这一过程中牡蛎的壳长变化进行了统计分析。结果表明,近江牡蛎成熟的未受精卵呈梨形,卵径为50μm左右,核相处于第一次成熟分裂中期。受精卵在受精后15~20min、25~30min,先后排出第一、第二极体,完成第一次和第二次成熟分裂,在受精后30min左右先后形成雄原核和雌原核;雌、雄原核各自形成染色体组,在卵子中央发生联合,染色体排列于赤道板上,形成第一次有丝分裂的中期分裂相;受精后45min左右,受精卵进行第一次卵裂,形成2个体积不等的卵裂球;受精75min后,受精卵开始第二次卵裂,90min后形成4个卵裂球,进入4细胞时期;6h后受精卵发育至桑葚期,8~10h进入囊胚期,12~15h后发育至担轮幼虫,27~30h左右发育成D形幼虫,5d左右进入壳顶幼虫时期,17d后幼虫陆续开始出现眼点,22d后发育为附着幼虫,而后在30 d左右变态为附着稚贝。研究中还发现了少数多精入卵现象,该过程会影响受精卵的正常分裂,造成胚胎发育畸形乃至死亡。研究结果可为近江牡蛎的苗种繁育、遗传育种等研究提供参考资料。

微塑料对近江牡蛎免疫力的影响

为探究微塑料对牡蛎免疫力的影响,该研究对近江牡蛎(平均壳长:6.6cm)采用壳内推注的方式注入不同浓度的聚苯乙烯微塑料(0.05、0.5、5 mg·L^(-1),以无菌生理盐水为稀释液),分别胁迫24 h、48 h和72 h后,检测分析牡蛎鳃组织的免疫指标(碱性磷酸酶(AKP)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、一氧化氮合成酶(NOS)和乙酰胆碱酯酶(AChE))的变化。结果显示,在胁迫24 h后,微塑料浓度对AKP的活力有显著影响(P<0.05)。SOD、AKP和结构型一氧化氮合成酶的活性呈现明显的先升后降的趋势。在胁迫48 h后,微塑料浓度上升导致A-chE活力显著下降(P<0.05),CAT、SOD和AKP呈现先升后降的趋势。在胁迫72 h后,微塑料浓度的升高,AKP和AChE的活力呈现先降后升的趋势,而SOD、CAT和诱导型一氧化氮合成酶的活力与之呈现相反的趋势,显示先升后降的趋势。随时间和浓度的增长,MDA处于一直上升的趋势。以上结果表明,微塑料可使牡蛎产生免疫应激反应,且胁迫时间越长,牡蛎免疫应激反应越剧烈。

低氧胁迫对近江牡蛎生理能量的影响

[目的]探究低氧胁迫对近江牡蛎生理能量的影响。[方法]设置了0.5、1.0、2.0、3.0和5.0 mg/L(CK)共5个溶解氧梯度,研究低氧适应和低氧突变2种低氧胁迫方式对近江牡蛎存活率、滤水率、耗氧率、排氨率以及氧氮比的影响。[结果]低氧适应组的生理代谢水平显著高于低氧突变组(P<0.05),其中,当溶解氧浓度为0.5 mg/L时,低氧突变组和低氧适应组的滤水率最低,分别为1.47和3.57 L/(g·h)。溶解氧浓度越低,近江牡蛎生理能量水平越差,存活率也越低,当溶解氧水平在2.0 mg/L以上时,低氧胁迫7 d后,近江牡蛎的存活率保持在90%以上。[结论]相对于突变的低氧环境,近江牡蛎对低氧适应一段时间后,具有一定耐受性,能够在低氧环境下进行生理活动。

菌胁迫对近江牡蛎子代母源C型凝集素mRNA表达及抗菌影响

为了揭示近江牡蛎(Crassostrea rivularis)C型凝集素(C-type lectin,CTL)母源免疫在子代胚胎发育早期过程中的免疫防御影响,文章运用荧光定量PCR、人工促排、免疫相关酶活测定等实验,开展了菌胁迫近江牡蛎子代母源CTL m RNA表达及抗菌影响。结果表明:近江牡蛎子代胚胎发育早期可检测到母源CTL转录本,母贝分别在不同菌刺激后,其子代在受精卵、32细胞期、桑葚期、囊胚期CTL m RNA相对表达均出现不同程度的升高,与相应空白组比较差异显著(P<0.05);其子代在受精卵期、32细胞期的Cu/Zn-SOD活力和抑菌活性显著高于相应空白组(P<0.05);其子代在原肠胚期、担轮幼虫期累计死亡率均显著低于空白组(P<0.05)。结论:该近江牡蛎CTL具有母源免疫传代和子代免疫时效,当母源受到适当的免疫刺激可以增加其子代胚胎发育早期对相同病原感染的免疫防御能力。

菌胁迫对近江牡蛎C型凝集素母源免疫传递及抑菌影响

为丰富无脊椎贝类母源免疫调控机制研究,文章采用底物显色原位杂交、荧光定量PCR和人工促排等技术,研究了菌胁迫对近江牡蛎(Crassostrearivularis)C型凝集素(C-typelectin,CTL)母源免疫传递及抑菌影响。结果表明:CTL定位于成贝卵巢组织的滤泡细胞和卵原细胞中;成贝卵巢组织和成熟卵子中均能检测到CTL转录本;成贝注射金黄色葡萄球菌或大肠杆菌后,卵巢组织CTLmRNA表达量均有一个持续上升过程,注射后12h的CTLmRNA表达量达最高峰,注射后48h大致恢复至空白组水平;成贝注射金黄色葡萄球菌或大肠杆菌12h后,人工促排,与空白组比较,实验组成熟卵子中CTLmRNA相对表达量均显著上调(P<0.05);抑菌活性实验显示成熟卵子蛋白具有抑菌活性,且抑菌强度随孵育时间的延长和蛋白浓度的增加而增强,但其中的CTL与其抗体结合后,抑菌活性下降,菌存活率显著上调(P<0.05)。该CTL在近江牡蛎中具有明显的母源免疫传递效应,且成熟卵子中母源CTL具有重要的抑菌活性。

近江牡蛎围垦区高效养成及育肥技术

技术依托单位汕头市水产技术推广中心站技术优势利用大面积围垦区池塘开展近江牡蛎养殖,突破其只能养殖在河海交汇处滩涂、浅海的区域限制,充分利用了水体的立体空间,在不影响围垦区池塘中鱼虾蟹收成的同时开展近江牡蛎的养殖生产,既增加单位水体的经济效益,也产生较大的生态效益。

近江牡蛎肠道细菌及其产酶能力的研究

从近江牡蛎(Jinjiang Ostrea vivularisGould)肠道中分离出21株菌,其中9株革兰氏阳性菌,12株革兰氏阴性菌。并检测其蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶的产酶能力。结果表明,13株菌(61.9%)能分泌蛋白酶,13株(61.9%)分泌淀粉酶;11株(52.4%)产脂肪酶;7株(33.3%)产纤维素酶。产4种酶的有5株,产3种酶的3株,产2种酶的5株,产1种酶的3株,不产酶的仅有5株。产酶菌株的比例高达76.2%(16/21),可见近江牡蛎肠道细菌对食饵消化有重要作用。

太平洋牡蛎与近江牡蛎的种间杂交

为了评估太平洋牡蛎与近江牡蛎能否产生远缘杂种优势,于2010年5月,以成熟的两种牡蛎亲本为材料开展了2×2远缘杂交研究,由长牡蛎自繁组GG(Crassostrea gigas♀×C.gigas♂)、近江牡蛎自繁组AA(C.ariakensis♀×C.ariakensis♂)、正交组GA(Crassostreagigas♀×C.ariakensis♂)、反交组AG(C.ariakensis♀×C.gigas♂)4个实验组组成。分析了子代早期表型性状和杂种优势,并对杂交子代进行了遗传鉴定。结果表明:GA杂交组与AG组的受精强度具有不对称性。幼虫浮游期间,表型性状的中亲杂种优势几乎为0,GA组生长与存活性状表现出积极的单亲杂种优势,而AG组则具有明显的远交衰退现象;幼虫早期表型性状受到母本效应影响,而后减弱。变态期间,GA组变态率较高,得到了大量杂交稚贝;而AG组变态率极低,仅获得了72个杂交稚贝。稚贝培育期间,稚贝表现出中亲生长劣势与存活优势;GA组具有明显的单亲生长与存活优势,而AG组则表现出生长劣势并具有一定程度的存活优势。利用复合COI及ITS2鉴定了种间杂交子结果表明:正反交组杂交子均为真正意义上的两性融合杂交子。实验获得了具有显著杂种优势的GA组杂交子,为现有牡蛎的遗传改良提供了新的方向。

盐度对长牡蛎和近江牡蛎及其杂交稚贝生长和存活的影响

2011年8月以长牡蛎自繁组GG(Crassostrea gigas♀×C.gigas♂),近江牡蛎自繁组AA(C.ariakensis♀×C.ariakensis♂)、正交组GA(Crassostrea gigas♀×C.ariakensis♂)、反交组AG(C.ariakensis♀×C.gigas♂)为实验材料,开展了稚贝对盐度的适应性研究。结果发现长牡蛎的最适生存盐度为15—35,最适生长盐度为25—35;近江牡蛎的最适生存盐度为10—25,最适生长盐度为20—25;GA的最适生存盐度为15—30,最适生长盐度为15—30,AG的最适生存盐度为20—30,最适生长盐度为20—25。GG对低盐度敏感,AA对高盐度敏感,AG具有高盐度存活的杂种优势,在盐度30时,中亲杂种优势HG×A为13.32,单亲杂种优势HGA和HAG分别为1.89和27.88,在盐度40时,HAG上升到400,GA和AG都不具有生长优势。杂种稚贝对盐度适应介于双亲之间,且表现出一定程度的父系遗传特点。

香港巨牡蛎与近江牡蛎杂交及回交子代早期生长发育比较

为评估香港巨牡蛎与近江牡蛎杂交及回交育种的可行性,以香港巨牡蛎与近江牡蛎为实验对象,比较了两种牡蛎杂交与回交子代的受精率、孵化率、幼虫及稚贝的生长和存活率。结果表明,香港巨牡蛎卵子可以与近江牡蛎精子受精,受精率为47.33%±2.52%,但近江牡蛎卵子与香港巨牡蛎精子不受精。在回交实验中,香港巨牡蛎(H♀)与近江牡蛎(A♂)的杂交牡蛎(HA)与香港巨牡蛎(HH)或近江牡蛎(AA)都可以正常交配,但各回交组受精率明显低于两牡蛎自交组。幼虫期,HA幼虫存活率明显低于两牡蛎自交组HH和AA;HA幼虫生长快于AA,但慢于HH;A♀×HA♂回交组和HA自繁组的幼虫存活率为0。稚贝期,HA稚贝存活率与HH、AA自交组存活率差异不显著。HA稚贝生长快于HH,但慢于AA。另外,研究发现H♀×HA♂回交组幼虫和稚贝的生长与HA差异不显著,优于其它回交组。

混合暴露条件下近江牡蛎对重金属的积累与释放特征

选择近江牡蛎作为试验生物,研究了混合暴露条件下8种重金属在近江牡蛎体内的积累和释放特征.结果表明:近江牡蛎对重金属Pb、Cu、Ni、Cd、Cr和Hg有很强的累积能力,可较好地指示溶液中的重金属浓度水平,但对重金属Zn和As的积累能力很小,不能真实反映溶液中重金属Zn和As含量的变化水平.在随后35 d的释放阶段,8种重金属在近江牡蛎体内的含量没有明显变化,表明近江牡蛎对重金属的释放能力较差.双箱动力学模型可较好地反映混合暴露条件下近江牡蛎对重金属的积累特征,但不适合对其释放特征进行描述.

近江牡蛎对Pb的累积和排出

采用更新式在自然光照和窒温条件下进行了近江牡蛎Ｃｒａｓｓｏｓｔｒｅａｒｉｖｕｌａｒｉｓ对Ｐｂ的累积和排出试验。近江牡蛎对海水中Ｐｂ的累积是净累积型，其体内的Ｐｂ含量与海水的Ｐｂ浓度之间呈显著的线性正相关（Ｐ＜０．０１），近江牡蛎体内的Ｐｂ含量与暴露时间之间呈显著的线性正相关（Ｐ＜０．０１），Ｐｂ从近江牡蛎体内排出的生物学半衰期为１４ｄ，近江牡蛎对Ｐｂ的累积随海水盐度的升高而呈明显的下降趋势，海水盐度的升高有利于近江牡蛎体内残留Ｐｂ的排出。近江牡蛎是比较理想的海洋重金属Ｐｂ污染监测生物。

近江牡蛎糖胺聚糖的酶解提取及其抗肿瘤活性研究

探讨酶解法提取近江牡蛎糖胺聚糖(SG1)的条件,结果表明:先用枯草杆菌中性蛋白酶1.0%(质量分数),pH7.0,50℃酶解5h,再加胰蛋白酶1.0%(质量分数),pH7.8,50℃酶解5h效果最佳。粗提物SG1的得率为2.40%,总糖胺聚糖含量为13.6%,总糖含量为61.3%。采用四氮唑蓝还原法(MTT法)研究粗提物SG1对人宫颈癌细胞(Hela细胞)的体外抗肿瘤活性,结果显示:500μg/mL剂量组与600μg/mL剂量组48h时的抑制率分别为43.1%(P<0.05),55.8%(P<0.05),近江牡蛎糖胺聚糖粗提物SG1具有较明显的抗肿瘤活性,存在一定的量效关系。

近江牡蛎养殖群体数量性状间的相关及通径分析

为了查明近江牡蛎养殖群体数量性状间的相关性及影响产量的因素组成,随机选取140只2.5龄贝,对其形态性状(壳长、壳高、壳宽)和重量性状(活体重、软体重)等5个数量性状进行测量,并应用遗传相关、多元回归、通径分析、决定系数等方法讨论了形态性状对重量性状的影响。结果表明受测的5个数量性状间的相关性均达到显著水平(P<0.05),相关系数从0.16710到0.81988。形态性状对活体重和软体重具有相同的影响:对二者起直接作用最大的均是壳高,其值分别为33.84%和34.20%;对二者起间接作用最大的均为壳长,其值分别为17.84%和13.23%;壳宽的作用最小。多元回归分析建立了壳长(x1)、壳高(x2)、壳宽(x3)3个估计活体重(Y1)和软体重(Y2)的回归方程,分别为:Y1=-104.50715+1.29795x1+0.91435x2+1.39589x3(R2=0.7818),Y2=-10.54062+0.14956x1+0.14361x2+0.12205x3(R2=0.6008)。研究结果为近江牡蛎选择育种提供了理论依据,即以提高活体重或软体重为目标,主要选择壳高,同时加强对壳长的协同选择。

中国近海“近江牡蛎”的分类和订名

牡蛎（Ostreidae）属软体动物门（Mollusca）、双壳纲（Bivalvia）、珍珠贝目（Pterioidae），为世界性广分布种类。由于其肉味鲜美，营养丰富，从远古时代就被人类所食用，具有很高的经济价值，是世界各国海水养殖业重要的养殖对象，是目前中国乃至世界产量最大的经济贝类。

盐度对近江牡蛎幼虫生长及存活的影响

采用室内培育手段,研究了盐度对近江牡蛎(Crassostrea rivularis)幼虫生长及存活的影响。将人工授精孵育的面盘幼虫分别置于盐度依次为16,25,30的砂滤海水中培育至眼点幼虫。每隔一天检测各盐度组幼虫的壳长、壳高和存活数量。结果表明,16盐度组的幼虫生长最快,25盐度组次之,30盐度组最慢。从受精后第14天开始,16盐度组幼虫的生长显著快于30盐度组(P<0.05)。在整个浮游幼虫阶段,高盐度组幼虫的存活率低于低盐度组,其中30盐度组的存活率最低。16和25盐度组在幼虫出现眼点之前均出现大量死亡现象,而30盐度组并没有出现大量死亡现象。上述结果说明,近江牡蛎幼虫经过高盐驯化,对高盐环境的抗性具有一定的提高。