近缘新对虾PCNA基因的克隆及表达分析

增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen, PCNA)作为DNA聚合酶δ的辅助蛋白,在DNA复制过程中发挥重要作用。近缘新对虾(Metapenaeus affinis)卵巢发育过程中存在细胞增殖活动旺盛的阶段,但目前关于其卵巢发育的分子机制研究较少。利用RACE (Rapid amplification of cDNA ends)技术获得近缘新对虾PCNA (MaPCNA)基因的cDNA序列全长,并通过实时荧光定量PCR (qRT-PCR)对其进行卵巢发育相关的表达分析。MaPCNA全长为1 144 bp,包含140 bp的5’非编码区,221 bp的3’非编码区,开放阅读框(ORF)为783 bp,编码260个氨基酸。MaPCNA蛋白的相对分子质量为28.82 kD,理论等电点为4.5。多重比对分析表明,PCNA氨基酸序列在甲壳动物中较为保守。组织表达结果显示,MaPCNA基因在检测的组织中均有表达,其中在卵巢中的表达量最为显著(P<0.05)。在不同发育阶段的卵巢中,MaPCNA基因的表达出现变化(P<0.05),从Ⅰ期开始逐渐上升,到Ⅲ期表达量最高,之后显著降低并趋于平稳。MaPCNA基因在幼体发育不同时期的表达呈现出一定的规律性趋势,在受精卵时期的表达量最高,之后呈下降趋势,从无节幼体Ⅵ期开始表达平稳。研究结果提示PCNA基因可能在近缘新对虾的卵巢发育过程中发挥重要作用。

近缘新对虾室内工厂化生态育苗技术探究

近缘新对虾(Metapenaeus affinis)俗称沙虾,隶属于节肢动物门,甲壳纲,十足目,对虾科,新对虾属。它具有杂食性强、广温、广盐、生长迅速、抗病害能力强等优点。我国是近缘新对虾的重要产区,在我国海南、广西、广东、福建等沿海以及印度、澳大利亚、日本、马六甲海峡等海域均有分布。

近缘新对虾cyclin B基因的克隆与原核表达

采用RACE技术,克隆了近缘新对虾cyclin B基因,该序列全长1 667 bp,编码区1 209bp共编码402个氨基酸,所推导的氨基酸序列N端不存在信号肽。BLAST比对后发现,其氨基酸序列与刀额新对虾的同源性达90%。经RT-PCR检测,cyclin B基因在近缘新对虾的卵巢和肌肉中表达水平最高,胸神经节和心脏次之,鳃、眼柄神经节、肝胰腺几乎没有表达。推测主要与cyclin B在细胞周期中调控细胞分裂的功能有关。原核表达结果显示,pET32a表达载体在0.2 mmol/L IPTG、25℃诱导4 h条件下可得到纯度较高的分子量约67 ku的蛋白。

滦南县南堡镇成功引进近缘新对虾品种

为解决本地对虾养殖品种日益老化及淡水虾池冬春季节闲置时间过长等问题，近期，滦南县南堡镇从南方成功引进近缘新对虾幼体苗种200万尾，投放到面积为6．67hm^2的水面中，经试验长势良好。近缘新对虾俗称泥虾，在我国主要分布于东海和南海一带，该品种耐低温，耐粗饲，抗病能力强，生长周期短，经济价值较高。

大亚湾两种重要经济虾类热效应

中国第1座大型核电站位于广东省大亚湾西侧,第1期工程于1994年初并网发电,第2期工程于2 0 0 3年5月正式投产,总装机容量为4 0 0 0 MW,经冷却系统排入大亚湾的热废水达2 0 0 m3/ s。核电站温排水的生态热效应问题引起人们普遍关注。针对这一问题进行了大亚湾海区斑节对虾(Penaeus monodon)和近缘新对虾(Metapenaeus affinis)两种重要经济虾类的高温热效应试验研究,测试了多项重要温度指标基准值。结果表明,斑节对虾和近缘新对虾的适宜生长温度范围均为2 9～35℃,最适生长温度(OGT)均为33℃;在不同的驯化温度下,斑节对虾和近缘新对虾的起始致死温度(IL T50 )分别为37.5～38.1℃和38.9～39.3℃;最高起始致死温度(UIL T50 )分别为38.1℃和39.3℃;临界热最大值(CTM)分别为4 2 .72～4 3.6 0℃和4 1.5 8～4 3.90℃;生长的最高周平均温度(MWAT)分别为34.7℃和35 .1℃;短期暴露最高温度(MTSTE)分别为37.12和37.89℃;在不同驯化温度下,斑节对虾主动趋向选择的最适温度为2 6 .4～32 .5℃,近缘新对虾为30 .7～33.1℃;起始致死温度、临界热最大值和选择的最适温度等与驯化温度呈正相关关系,随着驯化温度提高,其数值也增大,并逐渐趋向某一恒定的温度值。根据斑节对虾和近缘新对虾的热效应研究结果,结合这两种虾类的生?

虾头的内源蛋白酶酶解研究

本实验对近缘新对虾虾头内所含的内源蛋白酶的性质进行了初步研究,在此基础上分析和比较利用内源蛋白酶对虾头的酶解工艺,当固液比1:2,酶解温度60℃,pH值7.06,酶解时间4h,酶解产物中游离氨基酸含量较高;固液比1:2,酶解温度50℃,pH值8.2,酶解时间4h,酶解产物中TCA可溶性蛋白(短肽)含量较高。

沙虾

沙虾是刀额新对虾、近缘新对虾等新对虾的总称，是港媪中虾类的主要种类。因为野生虾喜好生活在沙泥底及盐分较低的浅海中，平时习惯将身体收藏人海床中，只凸出双眼及头部前端呼吸，俗称沙虾、麻虾，粤港地区又称基围虾。