双乙酰还原酶的分离纯化研究

比较了５种细菌、４种酵母菌和鸡肝中双乙酰还原酶含量，其中粪肠杆菌（Ｅｎｔｅｒｏ－ｃｏｃｃｕｓｆａｅｃａｌｉｓ）ＡＳ１．５９５中含量较高，为９．６ＩＵ／ｇ湿菌体。并对ＡＳ１．５９５菌酶和鸡肝酶进一步经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００和ＤＺＡＥ柱分离纯化，提纯倍数分别为４５、８９３，最后收率分别为１８．５％、５．１％。

重组大肠杆菌产双乙酰还原酶的发酵条件优化

光学纯2,3-丁二醇是重要的手性合成砌块。采用双乙酰还原酶催化还原双乙酰底物是一种合成光学纯2,3-丁二醇的绿色方法。作者在摇瓶中对产双乙酰还原酶重组大肠杆菌的发酵培养基及诱导条件进行了优化。优化后的发酵培养基组成为:甘油5 g/L,酵母浸膏10 g/L,鱼粉蛋白胨5 g/L,(NH_4)_2SO_41.5 g/L,柠檬酸钠5 g/L,KH_2PO_41 g/L,MgSO_4·7H_2O 0.5 g/L,NaCl 2 g/L;优化后的诱导条件为37℃,IPTG终浓度为0.1 mmol/L。在优化培养基中,37℃和0.1 mmol/L IPTG条件下诱导发酵6 h,单位菌体(干重)产双乙酰还原酶量达13.84 kU/g,产酶水平达33.65kU/L,分别为基础培养基的2.04和4.23倍,LB培养基的1.16和1.71倍。在此最优条件,在3 L发酵罐中进行了重组大肠杆菌产双乙酰还原酶的验证,发酵8 h时酶活最高,单位菌体产双乙酰还原酶量达14.09 kU/g,产酶水平达64.62 kU/L。本研究为高效制备可用于不对称还原合成光学纯2,3-丁二醇的双乙酰还原酶奠定了基础。

双乙酰生物传感器的研究

试验研究了粪肠杆菌（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｕｓｆａｅｃａｌｉｓ）中双乙酰还原酶的提取纯化，以及双乙酰生物传感器制备和测定性能。以双乙酰还原酶和还原型辅酶Ｉ（ＮＡＤＨ）共固定作为工作酶膜，用Ｆｅ２＋／Ｆｅ和双乙酰还原过程中产生的ＮＡＤ＋／ＮＡＤＨ组成生物传感器，可准确测定０１～０５μｇ／ｍＬ浓度范围内的双乙酰含量，响应时间小于２ｍｉｎ。９ｄ内传感器工作性能稳定。研究表明，啤酒内典型的金属离子和有机物在相应浓度内不影响传感器工作性能。同时。

关于双乙酰控制及检测方法的探讨

本文主要讨论了啤酒中双乙酰含量与酿造过程中一些条件控制及分析方法的关系,双乙酰的形成和降低,受到酵母、麦汁组成份、酶制剂使用等诸多因素影响。本文对一些影响双乙酰控制的因素进行了探讨,并对于国标双乙酰分析方法在半成品分析中的应用提出了不同的意见。

现场酵母扩培工艺对双乙酰指标的影响

本文主要探讨三次工艺优化试验对于降低酵母菌种A发酵双乙酰积极的影响.通过现场酵母扩培工艺的不断优化,大大提高了双乙酰还原速度,缩短了啤酒后熟时间,降低了双乙酰含量.

LLS催代酶在啤酒生产中的应用研究

就海洋活性物质LLS催代酶的特性及其在啤酒生产中应用机理进行了一定的探讨 ,并对它在啤酒生产中的应用效果做了较为系统的研究 ;特别是LLS催代酶对酵母活性的提高 ,对双乙酰还原的加速、双乙酰前驱体α

a-乙酰乳酸脱羧酶在啤酒生产中的应用

双乙酰是啤酒酵母发酵的必然副产物之一,是影响啤酒风味的主要成分,其含量多少,是啤酒口味成熟的标志。控制双乙酰含量是提高啤酒质量的重要因素之一。生产过程中控制双乙酰生成的措施很多。诸如:提高麦汁中a-氨基氮的含量;使用还原双乙酰能力强的酵母菌种;提高双乙酰还原温度;控制麦汁溶解氧等,这些都是正常生产必须做到的。本文将介绍使用a-乙酰乳酸脱羧酶转化其前驱物质a-乙酰乳酸,抑制双乙酰生成,也是控制双乙酰含量的方法之一。尤其是在生产旺季,发酵贮酒能力不足时,使用a-乙酰乳酸脱羧酶可以缩短酒龄。

酵母回收再用于发酵和生产优质啤酒的关键

接种酵母的活性是酿造优质啤酒最重要的因素。然而 ,目前在啤酒厂的露天锥形罐中流行使用的是在双乙酰还原结束之后收获的酵母的活性 ,有时用于重复使用并不令人满意。现报道的即是某一啤酒厂中的一个例子 ,作者通过分析结果希望找出原因和解决的方法。

降低发酵液乙醛含量的试验

本文通过研究乙醛产生的特点，从改变主酵压力、麦汁充氧量、充氧方式、酵母添加量、升温时间、延长双乙酰还原时间及CO2洗涤进行工艺试验，从而确定降低发酵液乙醛含量的工艺参数。

酵母营养盐在啤酒生产中的应用

在啤酒生产过程中,影响啤酒质量的主要因素有:酵母菌种、麦汁成份、工艺参数。我公司选用的酵母为双乙酰峰值低、凝聚性适中的优良菌种,回收酵母进行酸洗后进罐。糖化麦汁浓度为10~0,辅料比34%,麦汁的平均α-氨基氮在130mg/100g。然而当酵母使用到3代、4代时,降糖、双乙酰还原所需时间均较1代、2代酵母长,啤酒的风味也稍有差异。试验在麦汁中加入酵母营养盐,进行了实验室和生产现场的使用对比,我们认为可以较快地恢复酵母细胞的活力,保持啤酒质量的稳定。

高湿期排放酵母的试验

目前,大多数啤酒厂排放酵母的时间是在双乙酰还原完成,并降温至4～5℃,停留12～24小时,酵母充分沉淀之后,叫做降温期排放酵母。我们试验了高温期排放酵母的办法,结果降低了酵母死亡率,提高了酵母活性。我们在双乙酰还原的中期,即糖度降至4～5°P、封罐后4天左右,这时酒液内悬浮酵母数约为4～10×10~6个/毫升。排放回收的酵母量约为总酵母排出量的80％左右,在正常情况下,足够作为连续生产种酵母之用。高温期排放酵母,酵母死亡率低、活性高。

DAB啤酒酵母及工艺特点

啤酒酵母是啤酒生产的灵魂,不同风格的酵母菌种,在啤酒发酵代谢过程中产生不同的物质组分,从而形成不同的啤酒产品。德国DAB酵母是一种底面发酵菌种,它活力高,适应性强,发酵速度快,双乙酰还原迅速,在生产中可缩短酒令,优化工艺。