海洋硫酸多糖911的荧光标记研究

硫酸多糖 (91 1 )还原性末端的半缩醛基 ,通过还原胺化反应与酪胺 (Tyr)的氨基共价偶联 ,91 1 -Tyr中酪胺引入的仲氨基通过与异硫氰酸酯荧光素 (FITC)进行亲核反应 ,实现对 91 1还原末端的选择性荧光标记 .用 UV-Vis吸收光谱、1 H NMR和 HPSEC对偶联与标记结果进行确证 ,从 1 H NMR谱推测 91 1与酪胺的偶联率及 FITC对 91 1 -Tyr标记率分别为 60 %和 80 % .由于采用的是 91 1末端选择性标记 ,对 91 1的抗凝活性无明显影响 ,也无明显的细胞毒性 .以荧光标记的 91 1作为探针 ,对淋巴细胞有较强的选择性标记染色 .

皂荚多糖胶酶解制备低聚糖

利用β-甘露聚糖酶对皂荚多糖胶进行解聚改性。采用L9(34)正交设计法对底物质量浓度、加酶量、反应温度和反应时间4个因素进行考察。正交试验结果表明:皂荚多糖胶酶解的最佳工艺条件为底物质量浓度50g/L、加酶量1300U/g、反应温度65℃、反应时间11h。在此最佳工艺条件下,还原性末端糖基得率为49.92%,酶解产物的平均聚合度为2.00。此外,通过初期补料方式提高底物浓度,在反应24h后100g/L和150g/L的反应液中还原性末端糖基得率分别为50.89%和46.97%。表面活性剂对酶解反应有促进效果,皂荚皂素和吐温80可将还原性末端糖基得率分别相对提高5.25%和9.40%。高效液相色谱分析表明,皂荚多糖胶的酶解产物主要为甘露四糖(17.25%)、甘露三糖(28.68%)、甘露二糖(4.55%),水解产生的单糖仅为1.81%。