鼻咽癌组织中还原型辅酶Ⅱ氧化酶4和表皮生长因子受体的表达与调强放疗预后的相关性研究

目的 探讨鼻咽癌组织中还原型辅酶Ⅱ氧化酶4(reduced coenzyme II oxidase 4,NOX4)和表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的表达与调强放疗预后的相关性。方法 回顾性收集2018年1月~2021年6月南阳市中心医院收治的82例拟接受调强放疗的鼻咽癌患者及30名健康志愿者的临床资料,分别设为研究组和对照组。免疫组织化学法检测并比较研究组鼻咽癌组织与对照组正常鼻黏膜中NOX4和EGFR的表达情况;分析研究组鼻咽癌组织NOX4和EGFR表达水平与临床病理特征的关系;采用Cox比例风险模型和Kaplan-Meier生存曲线分析NOX4和EGFR表达与鼻咽癌患者预后生存的关系。结果研究组鼻咽癌组织NOX4高表达率、EGFR高表达率均高于对照组鼻黏膜组织(P<0.05)。T分级、N分级、临床分期及放疗敏感性与NOX4的表达有统计学意义(P<0.05),性别、年龄、肿瘤体积与NOX4的表达无统计学意义(P>0.05);年龄、T分级、N分级、临床分期及放疗敏感性与EGFR的表达有统计学意义(P<0.05),性别、肿瘤体积与EGFR的表达无统计学意义(P>0.05)。截止2022年6月31日,中位随访时间24个月(9~52个月),10.98%(9/82)局部复发、19.51%(16/82)远处转移、14.63%(12/82)死亡。Cox多因素回归分析结果显示,年龄>60岁、T3~T4分级、NOX4高表达、EGFR高表达是影响总生存期的独立危险因素(P<0.05)。NOX4高表达与低表达患者3年累积生存率分别为55.1%、80.0%;EGFR高表达与低表达患者3年累积生存率分别为47.3%、80.2%,Kaplan-Meier生存曲线分析显示,NOX4、EGFR低表达患者的累积生存曲线分别优于NOX4、EGFR高表达患者(Log rank χ^(2)=3.805、4.664,P<0.05)。结论鼻咽癌组织中NOX4和EGFR均异常高表达,二者表达情况与T分级、N分级、临床分期及放疗敏感性关系密切,NOX4和EGFR高表达患者调强放疗预后更差。

兔肝辅酶Ⅱ依赖性视黄醛还原酶在大肠杆菌中的表达及其对维生素K3的还原作用和产物的鉴定

目的:检测兔辅酶Ⅱ依赖性视黄醛还原酶(NDRR)对维生素K3的催化活性并对该酶还原K3所生成的产物进行鉴定。方法:构建含6×His标签的兔NDRR的表达菌株,诱导表达并超声裂解后,通过Ni2+亲和层析纯化得到重组兔NDRR。在相对去氧隔绝空气反应体系以及存在高浓度十二烷基磺酸钠的反应条件下,利用高效液相色谱(HPLC)对兔NDRR还原K3的催化活性进行酶动力学研究。利用化学合成,HPLC及荧光光谱扫描对其还原产物进行鉴定。结果:诱导表达后的细菌裂解上清液经一步亲和层析后得到单一酶蛋白,其对K3的比活性分别是原空白菌裂解上清液和经诱导表达后的菌裂解上清液的比活性的18.6和7.3倍。经过HPLC测定,兔NDRR对K3的Km值为30.7,Vmax0.046μmoL/(min.mg)。利用四氢硼酸钠与K3化学合成的产物进行HPLC分析,其保留时间与酶反应所产生的产物峰保留时间一致,而且反应后短时间内能利用荧光光谱扫描得到K4相应的光谱图。结论:兔NDRR对K3存在还原活性,并生成K4。

人辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶在新疆汉族妇女宫颈病变中的表达及意义

目的:探讨人辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶在新疆汉族妇女宫颈病变中的表达及临床意义,为新疆地区宫颈癌高危人群的识别、预防及诊断提供依据。方法:依据病理诊断结果,将80例新疆地区汉族妇女宫颈组织标本分为4组,正常及慢性炎症组20例、CINⅠ组20例、CINⅡ-Ⅲ组20例、宫颈鳞癌组20例,采用免疫组化SP法检测不同级别宫颈病变中DHRS4基因的表达。结果:DHRS4基因在正常及慢性炎症组、CINⅠ组、CINⅡ-Ⅲ组、宫颈鳞癌组标本中阳性表达有统计学意义(P<0.05),分别进行组间比较,正常宫颈及慢性炎症组与宫颈CINⅠ组有统计学差异(P<0.05),正常宫颈及慢性炎症组与宫颈CINⅡ-Ⅲ组有统计学差异(P<0.05),正常宫颈及慢性炎症组与宫颈癌组有统计学差异(P<0.05),宫颈CINⅠ组与宫颈癌组无统计学差异(P>0.05),CINⅡ-Ⅲ组与宫颈癌组无统计学差异(P>0.05)。结论:DHRS4基因在人体宫颈鳞癌组织中高表达,且随着宫颈病变的进展表达阳性率逐渐升高,可能与宫颈疾病及其癌变的发生有关。

大黄酸对糖尿病大鼠肾脏还原型辅酶Ⅱ基因表达的影响

目的观察大黄酸对糖尿病大鼠肾脏氧化应激的影响。方法链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病肾病大鼠模型随机分为模型组与治疗组,治疗6周后,比较各组大鼠肾组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,同时检测各组大鼠血糖、血肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白定量等。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测p22phox及p47phox的表达。结果治疗组较模型组明显改善尿清蛋白、尿素氮水平和肾脏肥大指数。肾脏MDA含量明显下降(P<0.05),SOD活性显著上升(P<0.05)。与对照组比较,模型组p47phox和p22phoxmRNA表达明显增多,大黄酸干预使其表达明显降低。结论大黄酸对2型糖尿病肾脏病变有一定的保护作用,其机制可能是通过抑制氧化应激反应,下调糖尿病大鼠p22phox及p47phox的表达对2型糖尿病模型大鼠肾脏产生保护作用。

嗜尸性苍蝇mtDNA中COⅠ和COⅡ基因序列检测及法医学应用

目的 利用线粒体DNA(m t DNA)上细胞色素氧化酶辅酶 和 (CO 、CO )中2 78bp和6 35 bp基因序列对嗜尸性苍蝇及其幼虫、卵进行种属鉴定。方法 随机采集放置在呼和浩特地区室外草地兔尸体和甘肃敦煌戈壁滩猪尸体上的嗜尸性苍蝇、幼虫、苍蝇腹中的卵,提取苍蝇m t DNA进行PCR扩增;并进行扩增结果检测;PCR胶回收纯化、测序并进行序列分析和构建系统发育树。结果 上述嗜尸性苍蝇mt DNA上CO 和(或) CO 基因序列在双翅目嗜尸性苍蝇的种内基因差异均数小于1% ,种间差异均数大于3% ,成虫与幼虫、卵之间几乎没有明显差异,表明在嗜尸性苍蝇种内和种间序列差异均数百分比范围内无重叠,并由此根据CO 和(或) CO 序列差异判断两个个体是否同种。结论 mt DNA上CO 和(或) CO 序列分析均能有效地对嗜尸性苍蝇及其幼虫、卵进行种属鉴定,CO +CO 和CO 的检验效能要高于CO 。

非对称性二甲基精氨酸诱导内皮祖细胞氧化应激损伤及L-精氨酸的保护作用

目的:研究非对称性二甲基精氨酸(ADMA)对人脐带血内皮祖细胞氧化应激影响及观测L-精氨酸对内皮祖细胞的保护作用。方法:从脐带血中分离出内皮祖细胞,细胞随机分5组:对照组,ADMA组,ADMA+L-精氨酸组,ADMA+PDTC(吡咯烷二硫代氨基甲酸酯)组,L-精氨酸组。运用荧光染料检测细胞活性氧的产生。逆转录多聚酶链反应检测还原型辅酶Ⅱ氧化酶亚基及细胞内抗氧化剂超氧化物歧化酶mRNA变化。结果:①ADMA显著增加细胞内活性氧的生成;L-精氨酸和抗氧化剂(PDTC)能抑制ADMA刺激后的细胞内活性氧产生。②ADMA诱导还原型辅酶Ⅱ氧化酶p22phox亚基、gp91phox亚基mRNA的表达明显上调,L-精氨酸和抗氧化剂(PDTC)能阻断这些基因的上调。但ADMA对抗氧化剂超氧化物歧化酶mRNA表达没有影响。结论:ADMA可能通过诱导氧化应激,抑制内皮祖细胞的生物学活性,影响内膜的再生化,而给与外源性L-精氨酸能起到保护作用。

还原型辅酶Ⅱ氧化酶NOX家族在急性肺损伤中的作用

急性肺损伤(ALI)及其严重形式急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是临床常见危重症,发病诱因复杂多样,主要病理特征是气血屏障破坏导致的弥漫性炎性、蛋白性肺水肿。活性氧(ROS)可氧化脂质、蛋白质、核酸等大分子物质从而介导氧化损伤。在产生ROS的诸多体系中,还原型辅酶Ⅱ(NADPH)氧化酶介导的ROS是其主要来源,其功能亚基、跨膜亚基NOX家族在肺组织中的分布具有细胞类型依赖性。NOX来源的ROS参与肺组织的防御功能并且与ALI/ARDS的发生发展相关。本文主要从NOX家族在肺组织中的细胞分布、活化因素及与ALI发生发展的关系进行综述。

发酵液中酮基还原酶活性测定方法的构建

本研究以4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)为底物,还原型辅酶Ⅱ(NADPH)为辅酶,应用紫外-可见光分光光度计法测定发酵液中酮基还原酶活性,通过连续测定NADPH消耗量来计算酶活力,得到了最佳反应体系:NADPH浓度为0.2 mmol/L,COBE浓度为1.0 mmol/L,磷酸缓冲溶液浓度为100 mmol/L、p H值为6,反应温度为40℃。在此条件下平行检测5次酶活,相对标准偏差(RSD)为0.48%。此方法操作简便,耗时短,精确度高,重复性好,可作为发酵液中酮基还原酶活性测定方法加以推广。

还原型辅酶Ⅱ氧化酶抑制剂夹竹桃麻素对重症急性胰腺炎大鼠肠道损伤的保护作用

目的探讨还原型辅酶Ⅱ（NADPH）氧化酶抑制剂夹竹桃麻素（Apocynin）对大鼠重症急性胰腺炎（SAP）大鼠肠道损伤的的保护作用及其机制。方法雄性Wistar大鼠48只，随机分为假手术组（SO组，n=8）、重症急性胰腺炎组[SAP组，按时间分3、12、24h亚组（n=8）]、Apocynin预处理组（APO组，n=8）、Apocynin药物对照组（APO-CON组，n=8）。SAP大鼠胆胰管逆行注射5％牛磺胆酸钠制备SAP模型。APO组造模同SAP组，在造模前30rnin股静脉注射Apocynin（50mg/kg），SO组仅翻动胰腺后关腹，APO-CON组仅行股静脉注射Apocynin（50mg／kg），余同S0组。全自动生化仪检测各组大鼠血清淀粉酶（AMY）及脂肪酶（HP）水平。苏木素一伊红（HE）染色观察各组胰腺组织及回肠组织病理改变。采用免疫组织化学法检测p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶（p—p38MAPK）及核转录因子-κB（NF—κB）回肠组织的表达。透射电镜下观察回肠黏膜上皮细胞超微结构改变。结果与SO组AMY、LIP胰腺病理评分及回肠病理评分（1236．00±155．72、90．50±9．60、0．24±0．07、0．34±0．18）比较，SAP组大鼠血清AMY、HP、胰腺和回肠病理评分升高明显（4918．20±389．63、1712．90±103．80、12．45±1．01、3．50±0．31，P〈0．05）。APO组上述指标明显下降（3698．00±386．93、659．40±92．40、8．76±1．34、2．20±0．36）。APO—CON组上述指标与SO组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。SAP组肠组织光镜下可见损伤严重，APO组光镜下回肠组织病理损伤较SAP组减轻。免疫组织化学检查显示SAP组大鼠回肠组织p38、P-p38及NF—κB表达较SO组与APO—CON组升高明显（P〈0．05），APO组上述指标均明显下降（P〈0．05）。电镜下可见APO组大鼠回肠黏膜上皮细胞超微结构改变较SAP组减轻。光镜下及电镜下，SO组及APO—CON组均无明显改变。结论Apoeynin通过减少重症急性胰腺炎肠组织p38MAPK、NF—κB表达，对重症急性胰腺炎肠损伤具有保护作用。

消化性溃疡患者胃壁一氧化氮合酶神经组化分布

近年研究证实,一氧化氮是胃肠非肾上腺素能非胆碱能(NANC)神经的一种新的抑制性递质,主要介导平滑肌的松弛效应,对维持胃粘膜正常血供、胃壁的正常运动有重要意义。NO是由一氧化氮合酶(NOS)催化L-精氨酸生成。NADPH硫辛酰胺脱氢酶(NADPH-diaphorase,ND)组织化学方法是一种间接证实NOS的存在部位(主要是神经成分)的较常用方法。我们应用该方法观察了8例消化性溃疡(PU)患者胃壁内NOS的分布情况并探讨其意义。 1 材料和方法 1.1 材料 PU患者胃大切新鲜手术标本8例,其中幽门管溃疡6例,幽门管、十二指肠球部复合性溃疡2例,年龄36岁～56岁,均为男性,取新鲜手术标本胃体大弯(正常部位)、幽门管(溃疡基底部及周边)各取1.0cm×1.0cm大小组织1块。

正常肝和肝癌细胞中DHRS4L2基因选择性剪接亚型的克隆及其表达调控研究

目的:鉴定正常肝细胞HL-7702和肝癌细胞Hep-G2中DHRS4L2基因的选择性剪接新亚型,并探讨其表达调控机制。方法:应用RT-PCR,3′RACE和生物信息学方法发现并鉴定DHRS4L2基因的选择性剪接新亚型;去甲基化药物5-aza-dC处理HL-7702和Hep-G2细胞,通过RT-PCR和real-time PCR方法检测DHRS4L2的表达情况。结果:发现了2个新的DHRS4L2剪接亚型DHRS4L2A和DHRS4L2A3,2个新亚型均出现了新的第1个外显子,命名为Ea,前者缺失外显子1,后者缺失外显子1和3;在正常肝细胞中去甲基化后含DHRS4L2外显子1的转录产物比处理前明显增加,在肝癌细胞中则比处理前减少。结论:获得2个新的DHRS4L2剪接亚型,并发现DHRS4L2的表达和甲基化调控相关,且甲基化的调控作用在正常肝与肝癌细胞之间存在差异,其机制尚待进一步探讨。

衰老的Ⅱ型肺细胞与电离辐射诱导的放射性肺炎小鼠持续性肺纤维化的相关性研究

目的:探讨衰老的Ⅱ型肺细胞与电离辐射诱导的放射性肺炎小鼠持续性肺纤维化的机制。方法:使用10周龄的雌性C57Bl/6NCr小鼠,用X-RAD 320(精确X射线,北布兰福德,CT)以2.61 Gy/min的2.0-mm Al过滤(300 kV峰)递送辐射。根据实验要求对不同组的小鼠给予不同剂量的射线处理,分别为0 Gy,5 Gy,17.5 Gy,持续15周。根据实验要求将实验小鼠随机分为3组:对照组(每次射线剂量为0 Gy,n=6);5 Gy组(每次射线剂量为5 Gy,n=6);17.5 Gy(每次射线剂量为17.5 Gy,n=6)。根据不同剂量的射线,将小鼠原代培养肺细胞分为原代细胞对照组、5 Gy+原代细胞组、17.5 Gy+原代细胞组、17.5 Gy+DPI+原代细胞组。通过蛋白质印迹法测定β-gal的蛋白表达水平;通过qRT-PCR分析TNF-α、Caspase-3的mRNA表达水平;通过TUNEL测定AEC Ⅱ细胞凋亡情况;通过Masson三色技术分析细胞纤维化程度,免疫组化测定细胞胶原蛋白情况。结果:3周和10周时,对照组AEC Ⅱ细胞凋亡率(7.36±1.25,5.41±1.36)较5 Gy组的(23.71±5.62,16.52±2.58)、17.5Gy组的(32.55±6.48,19.23±2.11)更低(P<0.05);17.5 Gy组的TNF-α、Caspase-3 mRNA表达(3.87±0.55,4.13±0.68)较5 Gy组的(2.56±0.17,2.66±0.21)、对照组的(1.06±0.02,1.12±0.03)升高(P<0.05);17.5 Gy组β-gal蛋白表达(4.19±3.67)较5 Gy组的(1.37±2.55)、对照组的(1.06±0.36)升高(P<0.05),5 Gy组与对照组比较,差异无统计学意义;通过各原代培养肺细胞中纤维细胞率及胶原蛋白含量比较发现,5 Gy+原代细胞组、17.5 Gy+原代细胞组、17.5 Gy+DPI+原代细胞组较原代细胞对照组升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:衰老的Ⅱ型肺细胞会增加电离辐射诱导的放射性肺炎持续纤维化的发展,还原性辅酶Ⅱ是辐射诱导的Ⅱ型肺细胞衰老和肺持续性纤维化的关键介质。

Rho/ROCK通路与NADPH氧化酶在糖尿病肾病中的作用

Rho/ROCK通路与NADPH氧化酶的激活,都能够促进糖尿病肾病的发生发展。Rho/ROCK通路与NADPH氧化酶可能也存在着某些联系,研究二者之间的关系与相关机制,对发现治疗糖尿病肾病的新药可能具有重要的意义。本文首先介绍了Rho/ROCK通路与NADPH氧化酶及二者的激活因素,然后总结了二者在糖尿病肾病中对肾脏血流动力学、滤过功能以及肾内基质的影响,最后简要介绍了与二者相关的糖尿病肾病药物治疗靶点。

还原型辅酶Ⅱ氧化酶抑制剂Apocynin对急性坏死性胰腺炎大鼠肾损伤的保护作用

目的探讨还原型辅酶Ⅱ氧化酶(NADPH oxidase,NOX2)抑制剂夹竹桃麻素(Apocynin)对急性坏死性胰腺炎(acute necrotic pancreatitis,ANP)模型大鼠肾损伤的保护作用。方法 30只Wistar大鼠随机分为3组:假手术组(SO组)、急性坏死性胰腺炎组(ANP组)、Apocynin治疗组(APO组),每组各10只大鼠。ANP组采用逆行胆胰管注射牛磺胆酸钠溶液1 ml/kg(STC)制备ANP模型。APO组在造模前30 min股静脉注射Apocynin(50 mg/kg),其余同ANP组。SO组开腹后仅翻动十二指肠和胰腺。造模后12 h处死大鼠,下腔静脉采血,留取各组大鼠肾组织以4%多聚甲醛固定。全自动生化仪检测血清淀粉酶(AMY)、脂肪酶(LIPA)、肌酐(Cr)、尿素(BUN)水平,肾脏组织固定行HE染色,光学显微镜下观察肾脏病理改变,免疫组化及免疫荧光法检测肾脏组织半胱天冬酶-3(Caspase-3)、核转录因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、肠黏膜髓过氧化酶(MPO)水平。结果 (1)ANP组大鼠血清AMY、LIP、Cr、BUN水平及组织病理改变较SO组明显升高(P<0.05),应用Apocynin后降低(P<0.05)。(2)ANP组大鼠Caspase-3、NF-κB、TNF-α表达水平较SO组升高(P<0.05),应用Apocynin后有所降低(P<0.05)。(3)ANP组大鼠髓过氧化酶(MPO)表达水平较SO组升高(P<0.05),应用Apocynin后有所降低(P<0.05)。结论 NOX2抑制剂Apocynin可减轻ANP模型大鼠肾脏损伤。

基于Nox4/NLRP3通路探讨桃叶珊瑚苷干预动脉粥样硬化的作用机制

目的:探究桃叶珊瑚苷干预动脉粥样硬化大鼠的作用机制。方法:将SD雄性大鼠采用高脂饲料联合维生素D_(3)腹腔注射的方法建立动脉粥样硬化模型。颈动脉超声和苏木精-伊红(HE)染色评估大鼠建模;建模后分为模型组、辛伐他汀组(20 mg/kg)及桃叶珊瑚苷高剂量(40 mg/kg)组、中剂量(20 mg/kg)组、低剂量(10 mg/kg)组,每组8只;另设正常组,8只大鼠给予普通饲料喂养并腹腔注射生理盐水。分组完成后开始给药,辛伐他汀组给予辛伐他汀溶液灌胃,桃叶珊瑚苷各剂量组腹腔注射相应剂量的桃叶珊瑚苷,正常组和模型组灌胃和注射等量的生理盐水,每日1次,连续给药4周。给药结束后,检测大鼠血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素(IL)-18、IL-1β水平;HE染色观察颈动脉组织病理学变化;荧光探针测定颈动脉中活性氧(ROS)的生成;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测颈动脉组织还原型辅酶Ⅱ氧化酶4(Nox4)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)通路相关蛋白的表达。结果:造模大鼠管腔内出现大量动脉粥样硬化病变,颈动脉出现狭窄,局部血管壁上明显有斑块形成,颈动脉内膜中层厚度(IMT)增加,大量炎性因子浸润。与正常组比较,模型组大鼠血清TC、TG、LDL-C、ox-LDL、TNF-α、IL-1β、IL-18水平和颈动脉ROS荧光强度、Nox4、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、Cleaved Caspase-1的表达明显升高(P<0.05),HDL-C水平明显降低(P<0.05),颈动脉组织内膜层增厚,局部有斑块形成,内皮受损,大量炎性因子浸润;与模型组比较,辛伐他汀组和桃叶珊瑚苷高剂量组、桃叶珊瑚苷中剂量组大鼠血清TC、TG、LDL-C、ox-LDL、TNF-α、IL-1β、IL-18水平和颈动脉ROS荧光强度、Nox4、NLRP3、ASC、Cleaved Caspase-1的表达明显下降(P<0.05),HDL-C水平明显升高(P<0.05),大鼠颈动脉内膜增厚、炎性因子浸润程度减少;且桃叶珊瑚苷高剂量组对Nox4/NLRP3通路的抑制作用以及对颈动脉组织的改善作用与辛伐他汀组接近。结论:桃叶珊瑚苷可调节血脂异常、抑制氧化应激和炎症反应,减轻动脉粥样硬化病变,其作用机制可能与抑制Nox4/NLRP3通路的激活有关。

糖尿病性白内障晶状体上皮细胞中NOX4、GRP78表达水平及临床意义

目的分析糖尿病性白内障(DC)晶状体上皮细胞(LECs)中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达水平及其临床意义。方法选取2018年1月至2021年9月北京市中关村医院收治的58例DC患者为DC组,另选取同期55例年龄相关性白内障(ARC)患者为ARC组。测定两组患者LECs中NOX4、GRP78、白细胞介素-8(IL-8)、血管内皮生长因子(VEGF)信使核糖核酸(mRNA)和蛋白表达水平及LECs凋亡率;Pearson法分析DC患者LECs中NOX4、GRP78 mRNA表达水平与IL-8、VEGF mRNA、LECs凋亡率的相关性。结果DC组LECs中NOX4、GRP78、IL-8、VEGF mRNA和蛋白表达水平、LECs凋亡率高于ARC组(P<0.05);DC患者LECs中NOX4、GRP78 mRNA表达水平与IL-8、VEGF mRNA、LECs凋亡率均呈正相关(P<0.05);DC患者LECs中NOX4 mRNA表达水平与GRP78 mRNA呈正相关(P<0.05)。结论DC患者LECs中NOX4、GRP78表达水平较高,与IL-8、VEGF、LECs凋亡率关系密切,NOX4、GRP78可能是诊治DC的分子靶标,为治疗DC提供新思路。

慢性阻塞性肺疾病合并肺动脉高压患者血清活性氧和硫化氢水平及肺组织还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶-4和胱硫醚-γ-裂解酶表达及其意义

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期患者血清活性氧(ROS)、硫化氢(H2S)水平,及COPD 稳定期患者肺组织中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADPH)氧化酶-4 (NOX4)、胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)表达及其意义.方法(1)选2015年11月至2016年12月在宁夏回族自治区人民医院呼吸科住院的COPD急性加重患者60例,根据是否合并肺动脉高压(PH)分为COPD急性加重合并PH组和COPD急性加重未合并PH组,另选同期健康体检者30例为健康对照组,采用酶联免疫法测3组受试者血清ROS、H2S水平.(2)收集2012年11月至2017年4月在宁夏回族自治区人民医院心胸外科因肺癌行肺叶切除42例患者的肺组织,根据是否合并PH分为COPD稳定期合并PH组和COPD稳定期未合并PH组、对照组,免疫组化法测3组患者肺组织NOX4、CSE表达,并观察肺小动脉壁厚度.结果(1)COPD急性加重合并PH组患者血清ROS水平[(613.52± 69.66)IU/ml]高于COPD急性加重未合并PH组[(565.76±71.33)IU/ml]、健康对照组[(294.63±60.39) IU/ml],COPD急性加重未合并PH组患者血清ROS水平高于健康对照组(P<0.05).COPD急性加重合并PH组患者血清H2S水平[(18.59±5.50)nmol/ml]低于COPD急性加重未合并PH组[(20.49± 4.97)nmol/ml]、健康对照组[(38.03±4.43)nmol/ml],COPD急性加重未合并PH组患者血清H2S水平低于健康对照组(P<0.05).ROS水平与肺动脉收缩压(PASP)呈正相关(r=0.59,P<0.05),H2S水平与PASP呈负相关(r=-0.62,P<0.05).(2)COPD稳定期合并PH组肺组织NOX4表达(0.08±0.01)高于COPD稳定期未合并PH组(0.06±0.01)、对照组(0.03±0.01),COPD稳定期未合并PH组肺组织NOX4表达高于对照组(P<0.05).COPD稳定期合并PH组肺组织CSE表达(0.03±0.01)低于COPD稳定期未合并PH组(0.07±0.02)、对照组(0.12±0.02),COPD稳定期未合并PH组肺组织CSE表达低于对照组(P<0.05). COPD稳定期合并PH组WT%[(40.58±6.63)%]高于COPD稳定期未合并PH组[(36.87±5.60)%]、对照组[(31.27±6.24)%],COPD稳定期未合并PH组WT%高于对照组(P<0.05).COPD稳定期合并PH组WA%[(32.33±6.27)%]高于COPD稳定期未合并PH组[(30.20±5.28)%]、对照组[(25.20±4.31)%],COPD稳定期未合并PH组WA%高于对照组(P<0.05).NOX4表达与WT%、WA%呈正相关(r值分别为0.81、0.66,P值均<0.05),CSE表达与WT%、WA%呈负相关(r值分别为-0.55、-0.39,P值均<0.05).结论 NOX4/ROS和CSE/H2S信号通路在COPD合并PH的发病机制中可能起重要作用.

NQO1基因多态性与大肠癌遗传易感性

目的:探讨依赖还原型辅酶Ⅰ/Ⅱ:醌氧化还原酶(NQO1)基因多态性与大肠癌遗传易感性之间的相关性。方法:采用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)基因型分析技术对101例大肠癌患者及103例对照者NQO1cDNA609位点多态性进行测定。结果:基因型频率分布在大肠癌组与对照组差异显著(χ2=9.52,P<0.01),T/T基因型携带者大肠癌患病危险性是野生纯合型(C/C)的3.56倍(OR=3.56,95%CI为1.58～7.96)。NQO1T等位基因及C等位基因频率在大肠癌组与对照组分别为42.1%、57.3%,57.9%、42.7%,T等位基因频率两组有显著差异(χ2=9.43,P<0.01),T等位基因携带者患大肠癌的危险性是C等位基因携带者的1.85倍,(OR=1.85,95%CI为1.25～2.73)。结论:NQO1在大肠癌的形成过程中起一定的保护作用,而NQO1cDNA609位点T等位基因可能是大肠癌发生的危险因素,NQO1基因的多态性与生活特征共同决定个体大肠癌的患病风险。

嗜尸性蝇类线粒体DNA分子标记检测的研究进展

嗜尸性蝇类种属鉴定是利用昆虫进行检案的重要一步,常常对案件的侦破起到关键作用。传统上,仅依据其形态学特征来判断嗜尸性蝇类的种属。由于其形态结构复杂和种间形态差异微小等特点,尤其在其幼期很难鉴别其种属。利用线粒体DNA(mtDNA)上细胞色素氧化酶辅酶Ⅰ和Ⅱ(COⅠ和COⅡ)的序列对嗜尸性蝇类进行种属鉴定,是近几年来发展起来的新技术,该检测方法能有效地将嗜尸性蝇类鉴定到属种的水平,目前国内尚无这方面的报道,本文对国外这方面工作的进展作一综述。