重组鼠过氧化物还原酶-5体内抗胰腺癌作用研究

目的:探讨鼠源重组过氧化物还原酶-5(mPRDX5)在小鼠体内是否具有抗肿瘤活性,从而进一步确证PRDX5的抗肿瘤活性和作用机制。方法:通过体外异源表达和纯化获得高纯度的mPRDX5。小鼠左侧腋背部皮下接种胰腺癌Pan02细胞建立荷瘤小鼠模型。小鼠随机分为PBS(溶剂对照)组、GEM(吉西他滨)50.0 mg/kg组和mPRDX510.0 mg/kg组,每组10只,检测小鼠肿瘤相关指标。结果:与PBS组比较,GEM组荷瘤小鼠体质量降低明显,mPRDX5组小鼠体质量有一定程度的增加。PBS组肿瘤生长良好,根据肿瘤体积计算,与PBS组相比,GEM组、mPRDX510.0 mg/kg组在D7肿瘤生长抑制率分别为87.07%和52.82%;按瘤重计算,与PBS组相比,GEM组、mPRDX510.0 mg/kg组在D7肿瘤生长抑制率分别为95.39%和48.33%。对PBS组和mPRDX5组小鼠肿瘤组织中的巨噬细胞极化状态进行分析,发现相较于PBS组,mPRDX5组小鼠肿瘤组织中表达CD86的M1型巨噬细胞显著增加,而表达CD206的M2型巨噬细胞显著减少。结论:mPRDX5在小鼠体内具有显著的抗胰腺癌活性,且活性的发挥是通过促进肿瘤微环境中的巨噬细胞向M1型极化实现。

日本沼虾过氧化物还原酶基因的克隆及其表达分析

利用 cDNA 末端快速克隆方法获得了青虾（Macrobrachium nipponense）的过氧化物还原酶基因（Prx）全长cDNA序列。该基因cDNA全长878 bp,包括72 bp的5′末端非翻译区,594 bp的开放阅读框（ORF）,212 bp的3′末端非翻译区,开放阅读框编码198个氨基酸。氨基酸相似度比对显示,所分离的青虾过氧化物还原酶基因包括两个半胱氨酸残基的区域“FYPLDFTFVCPTEI”和“GEVCPA”。系统进化树分析表明,青虾过氧化物还原酶基因与南美白对虾（Litopenaeus vannamei）过氧化物还原酶聚在一起,具有最近的亲缘关系。荧光定量 PCR 检测显示,过氧化物还原酶基因在青虾不同组织中均有表达,其表达量由低到高依次为肠道、心脏、卵巢、肌肉、鳃、肝胰腺。使用荧光定量PCR检测青虾在低氧胁迫和复氧条件下肝胰腺中的过氧化物还原酶基因mRNA的时空表达情况,结果显示,与对照组相比,实验组青虾过氧化物还原酶在肝胰腺和鳃组织中的表达量分别在低氧胁迫12~24 h 和复氧6 h出现了3次明显上调,由此推测过氧化物还原酶基因参与低氧应激分子过程。本研究结果可为进一步了解青虾低氧应激分子机制提供参考。

阴道毛滴虫硫氧还原蛋白过氧化物酶的cDNA克隆及序列分析(英文)

目的 :获取阴道毛滴虫硫氧还原蛋白过氧化物酶的cDNA克隆 ,研究其还原烷基氢过氧化物和氢过氧化物的抗氧化作用 ,以及调节由氢过氧化物介导的信号转换。 方法 :提取阴道毛滴虫的总RNA ,用λTripIEx2噬菌体载体构建cDNA表达文库 ,阳性质粒cDNA克隆进行测序 ,并用生物软件RPS Blast,NCBIBlast和ClustalW等对 6个读码框架进行序列分析。 结果 :获得一株开放阅读框为 5 88对碱基的cDNA克隆 ,推测肽链有 196个氨基酸。序列分析表明 ,该肽链与衣滴虫过氧化物氧化还原酶 (Prx1蛋白 )及人的自然杀伤增强因子B分别有 5 6 %和 6 1%的同源性 ;除了两个高度保守的半胱氨酸作用基序外 ,还有蛋白激酶C磷酸化和酪氨酸激酶磷酸化作用基序 ,N 豆蔻酰化作用位点 ,脂质运载蛋白信号位点等。 结论 :该蛋白有 >5 6 %的可能性位于胞浆 ,和典型 2 CysPrx亚家族有很高 (5 6 %～ 6 2 % )的同源性 ,很可能是其中的一个新成员。

过氧化物还原酶蛋白家族与疾病

过氧化物还原酶(Peroxiredoxins,Prxs)属于抗氧化蛋白超家族,广泛存在于原核生物和真核生物中。作为抗氧化剂,Prxs蛋白含有能够氧化H2O2的活性半胱氨酸位点,能够清除正常组织和细胞内的活性氧,保护细胞抵抗氧化应激。Prxs蛋白与氧化应激相关疾病都有着密切联系。文中就Prxs蛋白家族及其与肿瘤等相关疾病的研究进展作一综述,以期为临床相关疾病的诊断及治疗提供新的思路。

中药漏芦对口腔鳞癌细胞中转录因子Ets-1及过氧化物还原酶Prx1表达的影响

目的通过检测中药漏芦乙酸乙酯提取物(ethyl acetate extract,EA)对口腔鳞癌细胞株SCC15中转录因子Ets-1及过氧化物还原酶家族成员Prx1的表达水平的影响,初步探讨漏芦对口腔鳞癌细胞氧化应激作用的分子机制,为指导口腔癌临床用药提供新的思路。方法 50μg/ml漏芦EA处理口腔鳞癌细胞株SCC15 48h后,采用荧光定量PCR和Western Blot,检测药物处理组和对照组中Ets-1和Prx1的mRNA与蛋白表达情况。结果倒置显微镜下观察,50μg/ml漏芦EA处理SCC15细胞48h后,细胞生长速度较对照组减慢,细胞形态变圆,部分出现皱缩变圆甚至脱落。与对照组相比,药物处理组中Ets-1和Prx1的mRNA相对表达量显著降低(P=0.002,P=0.025),蛋白表达水平显著降低(P=0.030,P=0.042),差异有统计学意义。结论漏芦可能通过抑制氧化应激相关蛋白Ets-1和Prx1表达来抑制口腔癌细胞的生长。

短蛸(Octopus ocellatus)过氧化物还原酶(OoPrx-4)基因的克隆及其对鳗弧菌胁迫的转录调控分析

从本研究前期构建的短蛸(Octopus ocellatus)cDNA文库中克隆得到过氧化物还原酶(OoPrx-4)基因的cDNA全长,该基因cDNA全长934bp,包括5′非编码区(UTR)19bp,3′UTR177bp,开放阅读框(ORF)738bp,共编码245个氨基酸,理论等电点为6.65,预测分子量27.1kDa。采用实时荧光定量PCR法分析了OoPrx-4基因在短蛸各组织及鳗弧菌胁迫下的表达规律,结果表明,OoPrx-4在短蛸血细胞、肌肉、系统心脏、鳃、胃、肾囊、性腺、外套膜和肝胰腺等检测组织中都有表达,其中在肝胰腺的表达量最高。经鳗弧菌刺激后,Prx-4在血细胞中的表达量分别在6h和48h出现了两次明显上调。Prx-4作为抗氧化酶可能在减少机体因抵御鳗弧菌胁迫所产生的过氧化物方面发挥重要的作用。

我国汉族华法令抗凝治疗患者维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位1基因多态性的研究

目的探讨我国汉族口服华法令抗凝治疗患者维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位1(VKORC1)-1639基因多态性的特点。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析方法检测184例口服华法令抗凝治疗患者VKORC1-1639基因的多态性。结果 184例口服华法令抗凝治疗患者VKORC1-1639基因AA、AG、GG型分别为152例(82.6%)、31例(16.9%)、1例(0.5%),等位基因G和A的频率分别为9.0%和91.0%。184例患者VKORC1-1639基因多态性Hardy-Weinberg平衡拟合度良好(χ2=0.19,P>0.05)。结论我国汉族口服华法令抗凝治疗患者中存在VKORC1-1639突变基因,其基因分布频率与欧洲等其他人群存在种族差异。使用华法令抗凝治疗时应检测患者的VKORC1-1639基因型,以便为临床个体化用药提供依据。

过氧化物还原酶I与肿瘤关系的研究进展及其在核医学中的应用

过氧化物还原酶(Peroxiredoxin,Prx)蛋白属于抗氧化蛋白超家族新成员,它通过硫氧还蛋白还原过氧化物和超氧化物。PrxⅠ作为Prx家族的重要成员之一,在多种肿瘤组织细胞(肺癌、肝癌、直肠癌、甲状腺癌等)中高表达。本文从PrxⅠ的生物学特性、在各种肿瘤中的表达情况,及其对肿瘤分化、侵袭、复发与预后等方面的影响关系的研究进展进行了综述。而后,介绍了我核医学科最新发展的靶向Prx蛋白的特异性分子探针,并对将其用于肺部肿瘤诊断的转化医学的研究进行前瞻性分析。

氧化物共还原制取W-Cu和Mo-Cu复合材料的研究

近些年来,国内外研究了一些制备高分散度W/Cu和Mo/Cu复合粉末的方法,高分散度的粉末具有高的烧结致密度,用氧化物共还原粉末可在较低温度下进行烧结得到接近和达到100%的理论密度。这样的复合材料有细而均匀的组织和较好的性能。本文报道近来的研究状况,并就共还原法所用的前驱体原料种类、工艺条件、粉末特性和复合材料的性能进行评述。

凡纳滨对虾过氧化物还原酶3基因的分子克隆与功能分析

【目的】探究凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)过氧化物还原酶3(Peroxiredoxin 3,Prx3)基因(LvPrx3)的结构特征、组织分布和抗胁迫能力,为揭示凡纳滨对虾抗环境胁迫的应答机制提供理论依据。【方法】通过RACE克隆技术取得LvPrx3基因的全长cDNA序列,应用Clustal X、EditSeq、ExPASy、MEGA 6.0、SignalP 5.0和TMHMM 2.0等多个软件开展Prx3的生物信息学分析。运用半定量PCR和qRT-PCR技术检测分析LvPrx3基因在多种组织和不同胁迫条件下的表达响应情况。【结果】LvPrx3基因cDNA全长序列962 bp,内含45 bp 5′端非编码区(5′-UTR)、233 bp 3′端非编码区(3′-UTR)和684 bp开放阅读框(ORF),可编码227个氨基酸残基。LvPrx3的蛋白分子质量为25.09 ku,理论等电点(pI)为6.22,属于典型的2-Cys Prx,包含高度保守的“FYPLDFTFVCPTE”N端和“GEVCPA”C端。进化树分析显示,LvPrx3与节肢动物门的Prx亲缘关系较近,与斑节对虾(Penaeus monodon)的Prx氨基酸序列相似性最高,为98%。LvPrx3在眼柄中的表达量最高,肠道次之,在其他组织中的表达量无明显区别。脂多糖(LPS)注射后,眼柄中LvPrx3的表达分别在胁迫3 h和12~48 h时显著上调,而肠道中,LvPrx3表达量在胁迫3~24 h时均显著下调;在4-壬基酚(4-NP)胁迫后,眼柄中LvPrx3表达量在胁迫6~24 h后显著上调,24 h时最高,为对照组的4.11倍;肠道中的LvPrx3表达量在胁迫12 h时显著上调,在胁迫48 h时显著下调;以上显著性水平α均为0.05。【结论】LvPrx3基因属典型的2-Cys Prx,主要在凡纳滨对虾眼柄和肠道中高表达。脂多糖LPS刺激和4-NP胁迫可明显诱导凡纳滨对虾LvPrx3基因的表达水平,表明LvPrx3在对虾抵御病原菌感染及抗逆境胁迫的调控中发挥重要作用。

华法林相关维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位1及细胞色素P450 2C9基因型快速检测的方法研究

目的建立一种快速、准确、简便、经济的检测维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位1（VKORC1）和细胞色素P450 2C9（CYP2C9）基因型的方法。方法提取220例肺栓塞患者外周血的DNA，针对2个基因的SNP位点设计特异性引物，并进行荧光聚合酶链反应（PCR），根据荧光PCR的熔解曲线分析样本的基因型。同时对样本进行传统的限制性酶切片段长度多态性（PCR—RFLP）基因分型，从时间、通量、费用、准确性等方面对2种方法进行比较。结果VKORC1 1693G〉A和CYP2C91 075A〉C两个SNP位点的不同基因型具有不同的熔解曲线峰型。220例样本中，VKORC1基因AA型184例，AG型34例，GG型2例，各占83．6％、15．5％、0．9％；CYP2C9基因＊1／＊1型加1例，＊1／＊3型19例，各占91．4，％、8．6％，无＊3／＊3型纯合子。PCR-RFLP检测结果与上述结果基本相同。2种方法相比，前者较后者操作步骤少，用时少，费用相当，结果更准确。结论利用荧光PCR检测VKORC1及CYP2C9的SNP分型操作简便、快速、经济、准确，适用于临床实验室开展基因分型。

过氧化物还原酶在MAPK信号通路中的调节作用

过氧化物还原酶(Prx)是高度保守的过氧化物酶。Prx的硫氧还蛋白过氧化物酶的活性对维持低水平内源性过氧化氢具有重要意义,并有促进过氧化氢介导的信号功能。丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号途径介导细胞对包括活性氧(ROS)在内的多种刺激作出反应。文章在此总结Prx可以在MAPK的激活中同时扮演传感器和障碍的证据,并讨论所涉及的具体机制,特别是其与硫氧还蛋白(Trx)的关系。

细胞色素P450 2C9和维生素K环氧化物还原酶复合体1基因多态性对非瓣膜性心房颤动患者华法林维持剂量的影响

目的 探讨细胞色素P450（CYP）2C9和维生素K环氧化物还原酶复合体1（VKORC1）基因多态性对非瓣膜性心房颤动患者华法林维持剂量的影响。方法 选择2015年1月至2016年9月于上海交通大学医学院附属新华医院心内科病房住院的非瓣膜性心房颤动并服用华法林的患者100例。采用等位基因特异性引物结合实时荧光聚合酶链反应法测定100例非瓣膜性心房颤动患者CYP 2C9和VKORC1基因多态性。收集患者性别、年龄、体质量、华法林稳定维持剂量、凝血酶原时间国际标准化比值等指标做分析。结果 100例非瓣膜性心房颤动患者的CYP 2C9基因检测有93例野生纯合体型、7例突变杂合体型，VKORC1基因检测有89例野生A/A型、11例突变A/G型。CYP 2C9杂合体型患者较野生纯合体型患者所需华法林稳态剂量小［（1.8±0.8）mg比（2.4±1.0）mg］，VKORC1基因A/A型较A/G型华法林稳态剂量小［（2.2±1.0）mg比（3.1±0.8）mg］，男性患者所需的华法林稳定维持剂量高于女性患者［（2.6±1.2）mg比（2.1±0.8）mg］，差异均有统计学意义（均P〈0.01）。随着患者年龄的增加，50~59岁、60~69岁、70~79岁患者所需华法林维持稳态剂量呈降低趋势［（2.8±1.6）、（2.4±0.9）、（2.2±0.8）、（2.1±0.9）mg］。结论 CYP 2C9和VKORC1基因多态性与华法林维持剂量的个体间差异有关系。年龄和性别是影响华法林维持量的重要因素。

胃癌组织中Krüppel样因子4、过氧化物还原酶1的表达及与临床特征的关系

目的探讨胃癌组织中Krüppel样因子4(KLF4)、过氧化物还原酶1(PRDX1)的表达及与临床特征的关系。方法收集70例胃癌患者的临床资料,取其胃癌组织及癌旁组织,比较KLF4、PRDX1表达情况,分析KLF4、PRDX1阳性表达情况与临床特征的关系。结果胃癌组织中KLF4阳性表达率明显低于癌旁组织,PRDX1阳性表达率明显高于癌旁组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。不同临床分期、浸润程度、分化程度、淋巴结转移情况及远处转移情况胃癌患者的胃癌组织中KLF4阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05);不同肿瘤直径、临床分期、浸润程度、分化程度、淋巴结转移情况及远处转移情况胃癌患者的胃癌组织中PRDX1阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论胃癌组织中KLF4表达明显降低,PRDX1表达明显升高,其促进了胃癌的发生和发展,可作为判断早期胃癌预后的指标。

吸烟对口腔癌前病变细胞中过氧化物还原酶1表达及丝裂原活化蛋白激酶信号通路的影响

口腔癌是发生在口腔的恶性肿瘤的总称,包括舌癌、口底癌、软硬腭癌、上颌窦癌等以及发生于颜面部皮肤黏膜的癌症,是头颈部较为常见的恶性肿瘤之一。口腔白斑是口腔癌最为常见的癌前病变,发病率约为10.47%,单纯白斑的癌变率约为4%~17.5%,白斑合并上皮异常增生者癌变率约为36%。

蛋氨酸硫氧化物还原酶研究进展

蛋氨酸硫氧化物还原酶(methionine sulfoxide reductases,Msr)是各种生物体内普遍存在的重要酶类,可将蛋白质中或游离的被氧化的蛋氨酸还原为蛋氨酸,起抗氧化和蛋白修复作用,并可清除体内的活性氧,同时还具有蛋白功能调节的作用。Msr目前可分为MsrA和MsrB两型。本文对Msr酶类基本特点和生物学作用进行了综述。

同位素金属氧化物的还原技术研究

系统研究了同位素金属氧化物的3种常用还原技术,即高温还原、氢气还原和电解还原,并利用这3种还原技术成功将大量金属同位素氧化物还原成相应的金属同位素单质,它们的平均还原收集效率分别为93.1%、98.9%和94.2%。最后,在扫描电子显微镜上分析了所还原金属的纯度,结果显示,氢气还原的金属纯度最好,均在99%以上;其次是高温还原的金属纯度,在98%以上;电解还原的金属中杂质含量相对最高,其纯度在92%～97%之间不等。

老年骨肉瘤术后组织过氧化物氧化还原蛋白-1、C-myc和P53的表达及相关性

目的检测老年人骨肉瘤术后组织中过氧化物氧化还原蛋白(PRDX)-1、人C-myc癌基因产物(C-myc)和突变型P53基因(P53)的表达及临床意义。方法老年骨肉瘤术后组织68例作为观察组,49例老年人骨样骨瘤组织作为对照组,应用免疫组化SP法检测PRDX-1、C-myc和P53的表达。结果观察组PRDX-1、C-myc和P53表达阳性率明显高于对照组,观察组PRDX-1、C-myc和P53表达与肿瘤最大径、转移、分期及脉管浸润相关。观察组PRDX-1和P53、C-myc和P53表达具有正相关性。结论老年人骨肉瘤术后组织中PRDX-1、C-myc和P53高表达,不仅可以促进骨肉瘤的恶变进程,还可以使肿瘤处于高度增殖状态。PRDX-1和C-myc对肿瘤的促进作用可能与对P53的调节有关。

热解酸洗污泥用于氮氧化物还原的研究

金属表面处理过程排出的酸洗废水经处理产生的酸洗污泥,若是处理不合理就会引发极其严重的环境污染问题,经过热解处理后可以得到含有碳和重金属的固体产物。以热解酸洗污泥为还原剂,考察其脱硝性能以及反应温度、氧气浓度、反应时间对热解酸洗污泥脱硝效率的影响。结果表明,该热解酸洗污泥有良好的脱硝性能,在反应温度为800℃,氧气浓度为1%的条件下,脱硝效率可达95.093%,可以作为脱除NO x的还原剂。热解酸洗污泥的脱硝效率随着温度的升高和氧气浓度的增加而降低,并且随着时间的推移,脱硝效率下降较快。

褶纹冠蚌过氧化物还原酶6基因的克隆及原核表达

过氧化物还原酶6具有谷胱甘肽过氧化物酶和磷脂酶A2的双重活性,在机体抗氧化保护及肺表面活性物质代谢中具有重要的作用。研究克隆和分析了褶纹冠蚌Prx6(CpPrx6)基因的cDNA序列特征。结果表明CpPrx6基因的cDNA全长1617 bp;其中5′端非翻译区为71 bp,3′端非翻译区为889 bp,开放阅读框为657bp,可以编码218个氨基酸。CpPrx6氨基酸序列与其他已知贝类Prx6的同源性为70%—72%。CpPrx6蛋白含有1-Cys型Prx共有的保守催化中心"PVCTTE"和脂肪酶基序"GKSWA",三级结构中包含6个α螺旋、12个β折叠,催化中心位于第5个α螺旋内。CpPrx6基因在褶纹冠蚌血细胞、外套膜、闭壳肌、肝胰腺、鳃等组织中均有表达,其中鳃的表达量最大。嗜水气单胞菌刺激后6h和12h时CpPrx6在肝胰腺中的表达量明显增加(6h,P<0.05;12h,P<0.01),在血细胞和鳃组织中12h的表达量增加,24h时恢复到正常水平。将CpPrx6基因亚克隆到pET-32a(+)质粒中构建了重组质粒,SDS-PAGE分析发现重组质粒在大肠杆菌DE3中获得了表达。