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液相色谱-串联质谱法同时测定人血浆中的还原型和氧化型辅酶Q10
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作者 袁博 李烜 李鹏飞 《国际检验医学杂志》 CAS 2024年第23期2908-2912,共5页
目的建立一种快速、灵敏的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法用于同时测定人血浆中的还原型辅酶Q10(泛醇-10)和氧化型辅酶Q10(泛醌-10),并实现临床应用。方法血浆标本经甲醇沉淀蛋白,以辅酶Q9为内标,使用Kinetex C18(3.0×50 mm,2.6μm... 目的建立一种快速、灵敏的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法用于同时测定人血浆中的还原型辅酶Q10(泛醇-10)和氧化型辅酶Q10(泛醌-10),并实现临床应用。方法血浆标本经甲醇沉淀蛋白,以辅酶Q9为内标,使用Kinetex C18(3.0×50 mm,2.6μm,100?)色谱柱等度洗脱进行柱分离。采用电喷雾离子源正离子化方式,以多反应监测方式进行质谱定量检测。考察该方法的特异性、标准曲线与定量下限、精密度与正确度、稳定性等。结果泛醇-10和泛醌-10的保留时间分别为1.07和1.81 min,单个样品分析时间为3.2 min。泛醇-10和泛醌-10分别在50~2000和1~100 ng/mL的线性范围内具有良好的线性关系,且定量下限均可达1 ng/mL。批内和批间精密度均≤9.7%,正确度为96.2%~103.9%,该方法具备较高的正确度和精密度。室温放置6 h、4~8℃冷藏5 d、-20℃冷冻放置30 d存放条件不影响对分析物浓度进行准确测定。结论该方法分析时间短,灵敏度较高,血浆用量少,适用于血浆标本中泛醇-10和泛醌-10的血药浓度监测及准确测定。 展开更多
关键词 辅酶Q10 液相色谱-串联质谱法 还原辅酶Q10 氧化型辅酶Q10 血药浓度监测
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秀珍菇3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶基因的克隆及表达分析
2
作者 周小华 林佳瑶 陆娜 《中国食用菌》 2024年第1期61-66,共6页
为获得秀珍菇3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)全长基因,并分析该基因在秀珍菇正常状态及热胁迫处理下的表达差异,对秀珍菇进行RNA测序(RNA-seq),经生物信息学分析筛选获得HMGR全长基因(命名为Pphg1),并利用荧光定量PCR(qRT-PCR)... 为获得秀珍菇3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)全长基因,并分析该基因在秀珍菇正常状态及热胁迫处理下的表达差异,对秀珍菇进行RNA测序(RNA-seq),经生物信息学分析筛选获得HMGR全长基因(命名为Pphg1),并利用荧光定量PCR(qRT-PCR)的方法,分析该基因在秀珍菇不同温度处理下的表达情况。结果表明,获得的Pphg1全长由4059个核苷酸组成,编码1352个氨基酸,其蛋白分子质量约144.04 kDa。经qRT-PCR检测,该基因在秀珍菇受热胁迫后表达量升高。本研究中首次克隆并获得秀珍菇HMGR基因全长cDNA,推测其与秀珍菇热胁迫应答相关,为阐明秀珍菇体内次生代谢产物合成的分子机制及其分子育种提供科学依据。 展开更多
关键词 秀珍菇 克隆 RT-PCR 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶基因
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抗合成酶抗体综合征合并抗3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶还原酶蛋白抗体阳性坏死性肌病1例
3
作者 程路 高文佳 徐艳 《安徽医药》 CAS 2024年第11期2269-2272,共4页
目的总结抗合成酶抗体综合征(ASS)合并免疫介导坏死性肌病的疾病特点及治疗经验。方法回顾性分析2022年1月南京医科大学附属宿迁第一人民医院收治的1例ASS合并抗3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶还原酶蛋白(HMGCR)抗体阳性坏死性肌病病人,总结... 目的总结抗合成酶抗体综合征(ASS)合并免疫介导坏死性肌病的疾病特点及治疗经验。方法回顾性分析2022年1月南京医科大学附属宿迁第一人民医院收治的1例ASS合并抗3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶还原酶蛋白(HMGCR)抗体阳性坏死性肌病病人,总结此类病人的临床特点。结果病人主诉咳嗽1周,查肌炎抗体谱:抗组氨酰tRNA合成酶(Jo-1)抗体(+++)、抗SSA/Ro52抗体(+++)、抗HMGCR抗体(+++),诊断:抗合成酶抗体综合征、抗HMGCR抗体阳性坏死性肌病、间质性肺病、低蛋白血症。该病人通过糖皮质激素、免疫抑制剂及丙种球蛋白等治疗后症状缓解。结论不同类型的特发性炎性肌病(IIM)临床表现差异较大,各亚型之间也存在重叠表现,其预后及治疗各不相同。如有两种及以上肌炎的合并,则进展快,预后差,需早期完善肌炎抗体谱检查,明确分型,精准治疗。 展开更多
关键词 肌病 抗合成酶抗体综合征 抗3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶还原酶蛋白抗体 抗Ro52抗体 皮肌炎 间质性肺病
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大黄酸对糖尿病大鼠肾脏还原型辅酶Ⅱ基因表达的影响 被引量:11
4
作者 黄娟 陈文莉 +1 位作者 黄云芳 牛力 《医药导报》 CAS 北大核心 2012年第10期1285-1288,共4页
目的观察大黄酸对糖尿病大鼠肾脏氧化应激的影响。方法链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病肾病大鼠模型随机分为模型组与治疗组,治疗6周后,比较各组大鼠肾组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,同时检测各组大鼠血糖、血肌酐、尿... 目的观察大黄酸对糖尿病大鼠肾脏氧化应激的影响。方法链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病肾病大鼠模型随机分为模型组与治疗组,治疗6周后,比较各组大鼠肾组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,同时检测各组大鼠血糖、血肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白定量等。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测p22phox及p47phox的表达。结果治疗组较模型组明显改善尿清蛋白、尿素氮水平和肾脏肥大指数。肾脏MDA含量明显下降(P<0.05),SOD活性显著上升(P<0.05)。与对照组比较,模型组p47phox和p22phoxmRNA表达明显增多,大黄酸干预使其表达明显降低。结论大黄酸对2型糖尿病肾脏病变有一定的保护作用,其机制可能是通过抑制氧化应激反应,下调糖尿病大鼠p22phox及p47phox的表达对2型糖尿病模型大鼠肾脏产生保护作用。 展开更多
关键词 大黄酸 还原辅酶Ⅱ氧化酶 糖尿病肾病 氧化应激
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石榴肉桂酰辅酶A还原酶基因的克隆与表达分析 被引量:13
5
作者 董丽丽 龚凌燕 +2 位作者 陈磊 涂佳丽 张水明 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期747-753,共7页
[目的]肉桂酰辅酶A还原酶(CCR)是木质素合成的关键酶。本文旨在通过克隆和鉴定石榴CCR基因(Pg CCR)来探究石榴木质素的合成机制以及培育软籽石榴新品种。[方法]以石榴品种‘红玉石籽’(Punica granatum‘Hongyushizi’)籽粒为材料... [目的]肉桂酰辅酶A还原酶(CCR)是木质素合成的关键酶。本文旨在通过克隆和鉴定石榴CCR基因(Pg CCR)来探究石榴木质素的合成机制以及培育软籽石榴新品种。[方法]以石榴品种‘红玉石籽’(Punica granatum‘Hongyushizi’)籽粒为材料,利用RACE和RT-PCR的方法,获得Pg CCR基因的全长序列。通过实时荧光定量PCR分析Pg CCR基因在不同品种、不同组织、籽粒不同发育时期的表达水平。[结果]Pg CCR基因c DNA全长序列1 017 bp,编码338个氨基酸,包含被认为是CCR蛋白催化位点的保守序列KNWYCYGK。系统进化树分析表明,Pg CCR与其他物种起源相同,而与葡萄Vv CCR的亲缘关系最近。Pg CCR基因在不同品种的石榴籽粒中均有表达,其中‘红玉石籽’中表达较高,‘会理软籽’和‘突尼斯软籽’中表达量较低。Pg CCR在叶、花、茎中均有表达,茎中的表达量最高,而叶片中的表达量最低。Pg CCR在‘红玉石籽’籽粒的不同时期均有表达,20-80 d相对表达量逐步上升,并在80 d时达到峰值,80 d以后表达量逐渐下降。[结论]克隆得到石榴CCR基因,其表达水平与木质素的合成及含量有一定相关性。 展开更多
关键词 石榴 肉桂酰辅酶A还原酶基因(CCR) 基因克隆 表达分析
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阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征及其相关高血压患者血浆还原型谷胱甘肽与氧化型谷胱甘肽和血清还原型辅酶Ⅱ与氧化型辅酶Ⅱ水平的变化 被引量:6
6
作者 平芬 王静 +2 位作者 牛占丛 韩书芝 苏力 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期928-931,共4页
目的观察阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)及阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征相关高血压(OSAHAHT)患者血浆还原型谷胱甘肽(GSH)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)及血清还原型辅酶Ⅱ(NADPH)、氧化型辅酶Ⅱ(NADP+)水平。探讨OSAHS患者氧化还... 目的观察阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)及阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征相关高血压(OSAHAHT)患者血浆还原型谷胱甘肽(GSH)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)及血清还原型辅酶Ⅱ(NADPH)、氧化型辅酶Ⅱ(NADP+)水平。探讨OSAHS患者氧化还原态的变化。方法选择OSAHS患者39例,其中无并发症的OSAHS患者20例,OSAHAHT患者19例,;健康对照组19例,应用比色法和酶联免疫吸附法测定血浆GSH、GSSG,血清NADPH、NADP+水平。结果3组受检者血浆GSH、GSSG及血清NADPH、NADP+水平比较,差异均有统计学意义(P<0.01),其中OSAHS患者与对照组比较,OSAHAHT与OSAHS患者组比较,血浆GSH/GSSG、血清NADPH/NADP+比值均降低(P<0.05),并且与反映睡眠呼吸暂停严重程度的指标均呈负相关(P<0.05)。结论OSAHS患者存在GSH/GSSG、NADPH/NADP+比值的变化,且与OSAHS的病情严重程度相关;氧化还原态的变化在OSAHAHT患者中更明显。 展开更多
关键词 睡眠呼吸暂停 阻塞性 高血压 谷胱甘肽 还原辅酶 氧化型辅酶 氧化还原
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茶树‘紫娟’肉桂酰辅酶A还原酶基因(CCR)克隆及序列分析 被引量:6
7
作者 陈林波 宋维希 +4 位作者 李晓霞 夏丽飞 周萌 梁名志 焉文光 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期80-85,共6页
通过克隆茶树肉桂酰辅酶A还原酶基因(CCR)的cDNA序列,为研究其蛋白结构和功能奠定基础。对利用cDNA-AFLP技术获得的‘紫娟’茶树成熟叶片上调的差异表达片段TDF,设计特异引物,利用RACE末端扩增技术,分别扩增出5′端和3′端目的片段,测... 通过克隆茶树肉桂酰辅酶A还原酶基因(CCR)的cDNA序列,为研究其蛋白结构和功能奠定基础。对利用cDNA-AFLP技术获得的‘紫娟’茶树成熟叶片上调的差异表达片段TDF,设计特异引物,利用RACE末端扩增技术,分别扩增出5′端和3′端目的片段,测序后进行拼接获得茶树肉桂酰辅酶A还原酶基因(CCR)cDNA全长序列,并进行序列分析。结果表明:克隆的茶树CsCCR基因cDNA全长1 259bp(GenBank登录号为KJ995737),其中开放阅读框957bp。同源比对发现,与蓖麻、丹参、草莓、番茄的CCR蛋白同源性分别为67%、68%、69%和70%。 展开更多
关键词 茶树 肉桂酰辅酶A还原 基因克隆 序列分析
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Pd(Ⅱ)与还原型辅酶Ⅰ和溶菌酶相互作用的荧光和共振瑞利散射光谱研究 被引量:2
8
作者 刘绍璞 刘林丰 +3 位作者 刘忠芳 孔玲 胡小莉 田伦富 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1-13,共13页
在弱酸性介质中,Pd(Ⅱ)能分别与还原型辅酶Ⅰ(NADH)和溶菌酶(Lyso)形成1∶1和2∶1的复合物,并导致NADH和Lyso的荧光猝灭,但不能引起共振瑞利散射(RRS)的变化和增强.但是当Pd(Ⅱ)与NADH和Lyso同时作用并形成n(Pd(Ⅱ))∶n(NADH)∶n(Lyso)=... 在弱酸性介质中,Pd(Ⅱ)能分别与还原型辅酶Ⅰ(NADH)和溶菌酶(Lyso)形成1∶1和2∶1的复合物,并导致NADH和Lyso的荧光猝灭,但不能引起共振瑞利散射(RRS)的变化和增强.但是当Pd(Ⅱ)与NADH和Lyso同时作用并形成n(Pd(Ⅱ))∶n(NADH)∶n(Lyso)=2∶2∶1的三元复合物时,不仅能使Lyso的荧光猝灭,而且能引起RRS显著增强并出现最大散射波长位于309 nm附近的RRS光谱.研究了Pd(Ⅱ)-NADH-Lyso反应体系的荧光和RRS光谱特征,适宜的反应条件,探讨了反应机理及Pd(Ⅱ)与NADH和Lyso的结合位点和结合模式,考查了荧光猝灭和RRS增强的原因.当Pd(Ⅱ)和Lyso过量时,散射增强(ΔI)在一定范围内与NADH的质量浓度成正比,对NADH的检出限为5.7 ng/mL(8.6×10-9mol/L).同样当Pd(Ⅱ)和NADH过量时,散射增强(ΔI)在一定范围内与Lyso的质量浓度成正比,检出限为15.1 ng/mL(1.06×10-9mol/L).因此RRS光谱不仅可为研究金属离子与不同生物分子之间的相互作用提供新的信息,而且也为高灵敏度定量测定痕量NADH和Lyso这样的生物分子创造了条件. 展开更多
关键词 溶菌酶 还原辅酶i Pd(1I) 荧光 共振瑞利散射
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工业微生物还原型辅酶Ⅱ的代谢调控研究进展 被引量:4
9
作者 陈宏文 刘薇 +2 位作者 杜钰 陈国 方柏山 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第11期2535-2541,共7页
还原型辅酶Ⅱ(NADPH)主要参与细胞合成代谢,是微生物代谢网络中含量最丰富的氧化还原辅酶之一。辅酶工程作为代谢工程的重要分支,通过改变微生物胞内辅酶再生途径,进而改变细胞内代谢产物构成。本文在归纳NADPH产生途径和调控的基础上,... 还原型辅酶Ⅱ(NADPH)主要参与细胞合成代谢,是微生物代谢网络中含量最丰富的氧化还原辅酶之一。辅酶工程作为代谢工程的重要分支,通过改变微生物胞内辅酶再生途径,进而改变细胞内代谢产物构成。本文在归纳NADPH产生途径和调控的基础上,分析和评述了工业微生物基于辅酶工程的NADPH代谢调控研究进展,包括过量表达NADPH代谢相关酶、敲除NADPH代谢相关基因及引入特定代谢途径等策略,指出今后的研究重点在于深入理解NADPH调控与中心碳代谢网络的相互作用,为利用代谢工程进行细胞工厂改造提供基础。 展开更多
关键词 还原辅酶 辅酶工程 代谢调控 工业微生物
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痕量还原性辅酶I的抑制荧光法测定 被引量:7
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作者 陈亚红 蔡汝秀 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2004年第6期719-723,共5页
基于烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 (简称辅酶I ,NADH)对血红蛋白催化H2 O2 氧化L 酪氨酸的反应具有强烈的抑制作用 ,提出了一种新的测定NADH的荧光分析法。该方法灵敏 ,简单 ,其线性范围为 5 .0× 1 0 -8~2 .0× 1 0 -6mol/L ;检出限... 基于烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 (简称辅酶I ,NADH)对血红蛋白催化H2 O2 氧化L 酪氨酸的反应具有强烈的抑制作用 ,提出了一种新的测定NADH的荧光分析法。该方法灵敏 ,简单 ,其线性范围为 5 .0× 1 0 -8~2 .0× 1 0 -6mol/L ;检出限为 2 .0× 1 0 -8mol/L。进一步探讨了NADH对血红蛋白催化反应的抑制机理 。 展开更多
关键词 还原辅酶i 痕量测定 抑制荧光法 血红蛋白 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸
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高效液相色谱法测定3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶抑制剂的活性 被引量:12
11
作者 于刚 曹晓钢 +4 位作者 叶小利 李学刚 陈竹 袁吕江 王立军 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2009年第1期87-90,共4页
通过检测反应体系中烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(NADPH)浓度的变化,建立了测定HMG-CoA还原酶抑制剂活性的HPLC法。使用Hypersil C18色谱柱,流动相V(K2HPO4-KH2PO4):V(甲醇)=4:1,pH7.2,流速1mL/min,柱温25℃,检测波长337nm。在NADPH浓度为0.5... 通过检测反应体系中烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(NADPH)浓度的变化,建立了测定HMG-CoA还原酶抑制剂活性的HPLC法。使用Hypersil C18色谱柱,流动相V(K2HPO4-KH2PO4):V(甲醇)=4:1,pH7.2,流速1mL/min,柱温25℃,检测波长337nm。在NADPH浓度为0.5~100μmol/L时,其浓度与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9995);检出限为0.01μmol/L;方法对NADPH的回收率为99.8%~100.7%;相对标准偏差(RSD)为1.04%~1.25%(n=5)。 展开更多
关键词 3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原 抑制剂 烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸 高效液相色谱
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苎麻肉桂酰辅酶A还原酶基因cDNA序列的克隆与分析 被引量:11
12
作者 唐映红 陈建荣 +3 位作者 刘芳 袁有美 郭清泉 昌洪涛 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1324-1332,共9页
根据苎麻转录组测序信息,利用RACE法克隆出2个肉桂酰辅酶A还原酶基因全长cDNA序列,对其进行生物信息学分析,并利用荧光定量技术对苎麻快速生长期、成熟期和成熟后期该基因在木质部和韧皮部的表达模式进行研究。结果表明,BnCCR1全长1056 ... 根据苎麻转录组测序信息,利用RACE法克隆出2个肉桂酰辅酶A还原酶基因全长cDNA序列,对其进行生物信息学分析,并利用荧光定量技术对苎麻快速生长期、成熟期和成熟后期该基因在木质部和韧皮部的表达模式进行研究。结果表明,BnCCR1全长1056 bp,编码277个氨基酸,Blast比对BnCCR1基因与白桦、蓖麻CCR基因核苷酸序列相似性均为70%,推测的氨基酸与蓖麻CCR基因氨基酸序列相似度为77%,蛋白质预测显示其N端存在一个3 Beta-HSD/Epimerase/NAD-binding-10的保守域;BnCCR2基因全长1291 bp,编码248个氨基酸,Blast比对BnCCR2基因与毛果杨CCR基因核苷酸序列相似度为74%,推测的氨基酸与蓖麻、毛果杨CCR基因氨基酸序列相似度均为81%,蛋白质预测显示其N端存在一个3 Beta-HSD/Epimerase/NAD-binding-4的保守域;BnCCR1和BnCCR2基因编码蛋白三维模型与矮牵牛CCR基因相似度分别达30.68%、44.77%,建模结果可靠;荧光定量结果显示BnCCR1和BnCCR2基因具有时期表达差异性,不具有组织表达差异,但不同组织表达量具有差异。推测BnCCR1和BnCCR2基因是存在于苎麻木质素代谢中的两种CCR基因。 展开更多
关键词 苎麻 肉桂酰辅酶A还原酶基因 木质素 组织表达
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植物肉桂酰辅酶A还原酶(CCR)基因的研究进展 被引量:36
13
作者 李波 梁颖 柴友荣 《分子植物育种》 CAS CSCD 2006年第z1期55-65,共11页
植物体内通过公共苯丙烷途径而进入木质素特异途径来合成木质素,这条代谢途径涉及到许多酶的参与,其中肉桂酰辅酶A还原酶(cinnamoyl-CoAreductase,CCR)是木质素特异途径的第一个关键酶,可催化3种羟基肉桂酸的CoA酯的还原反应,生成相应... 植物体内通过公共苯丙烷途径而进入木质素特异途径来合成木质素,这条代谢途径涉及到许多酶的参与,其中肉桂酰辅酶A还原酶(cinnamoyl-CoAreductase,CCR)是木质素特异途径的第一个关键酶,可催化3种羟基肉桂酸的CoA酯的还原反应,生成相应的肉桂醛。因此人们认为此酶可能对木质素合成途径的碳流具有潜在的调控作用,对木质素单体的生物合成起着重要作用。本文主要综述了CCR在木质素生物合成途径中的地位、CCR的分布、酶的提取和基本特性、CCR基因的克隆进展、CCR基因的转录特点、CCR启动子研究情况、转基因植物中表达抑制CCR基因的生物学效应等,并展望了CCR基因研究对于植物木质素研究、植物抗病和抗逆性研究、作物品质改良以及植被保护研究的意义。 展开更多
关键词 进展 木质素 肉桂酰辅酶A还原酶(CCR) 生物合成途径
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尾叶桉GLU4肉桂酰-辅酶A还原酶基因克隆及原核表达 被引量:3
14
作者 陈博雯 盖颖 蒋湘宁 《中南林业科技大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期71-76,97,共7页
肉桂酰-辅酶A还原酶(Cinnamoyl Co-A Reductase,CCR)是木质素合成中的关键酶,根据植物中CCR保守序列设计引物,以尾叶桉GLU4嫩茎为材料克隆到其CCR基因,命名为Eu CCR。该基因g DNA长2 918bp,c DNA长1 045 bp,CDS区编码336个氨基酸。EuCC... 肉桂酰-辅酶A还原酶(Cinnamoyl Co-A Reductase,CCR)是木质素合成中的关键酶,根据植物中CCR保守序列设计引物,以尾叶桉GLU4嫩茎为材料克隆到其CCR基因,命名为Eu CCR。该基因g DNA长2 918bp,c DNA长1 045 bp,CDS区编码336个氨基酸。EuCCR核酸序列与Gen Bank已登录的桉属植物CCR基因同源性达到96%以上,与伞房属、杯果木属植物CCR的同源性达85%以上,其编码的氨基酸序列经比对发现具有完整FR_SDR_e结构域及NADP结合位点和底物结合位点,与可可树等植物中CCR基因编码序列同源性也在84%以上,确定为CCR基因。对EuCCR蛋白序列理化性质及结构进行生物信息学分析,利用MEGA软件对基因序列进行系统进化树分析。采用pQE30/M15系统对EuCCR进行原核表达,重组质粒成功表达分子量约36 kD的目的蛋白。本研究从尾叶桉GLU4中克隆得到EuCCR基因并原核表达,为该基因的酶学分析以及利用该基因转化调控尾叶桉木质素合成奠定基础。 展开更多
关键词 尾叶桉 肉桂酰-辅酶A还原 生物信息学分析 原核表达
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芹菜肉桂酰辅酶A还原酶基因的克隆与表达分析 被引量:7
15
作者 吴蓓 李梦瑶 +2 位作者 王广龙 黄蔚 熊爱生 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期907-914,共8页
[目的]肉桂酰辅酶A还原酶CCR(cinnamoyl-Co A reductase)在植物木质素代谢中起重要的作用,能够将羟基肉桂酸还原生成肉桂醛。本文目的是研究不同芹菜中肉桂酰辅酶A还原酶基因AgCCR在芹菜中组织表达和非生物胁迫过程中的响应情况。[方法]... [目的]肉桂酰辅酶A还原酶CCR(cinnamoyl-Co A reductase)在植物木质素代谢中起重要的作用,能够将羟基肉桂酸还原生成肉桂醛。本文目的是研究不同芹菜中肉桂酰辅酶A还原酶基因AgCCR在芹菜中组织表达和非生物胁迫过程中的响应情况。[方法]以2个芹菜品种‘六合黄心芹’和‘文图拉’为材料,分别克隆出编码肉桂酰辅酶A还原酶的基因AgCCR。利用荧光定量PCR分析不同芹菜组织和2种芹菜在高温、低温、干旱和盐胁迫下AgCCR的表达情况。[结果]序列分析表明,‘六合黄心芹’和‘文图拉’中AgCCR基因均含有1个长度为1 014 bp的开放阅读框,编码337个氨基酸,二者的核苷酸位点有3个位点的差异,编码的氨基酸有1个位点的差异。对2个芹菜中的AgCCR基因进行多重比对并绘制进化树,发现其编码的氨基酸序列与其他15种植物的CCR蛋白同源性较高,氨基酸高度保守。荧光定量PCR(qRT-PCR)分析表明,芹菜AgCCR基因在‘六合黄心芹’和‘文图拉’叶中的表达水平较高,AgCCR基因在高温和低温下表达上调,在干旱处理下表达下调。[结论]芹菜AgCCR基因对多种非生物胁迫均有响应。特别是低温下该基因响应明显,表明AgCCR基因或许与芹菜抗寒机制相关。 展开更多
关键词 芹菜 肉桂酰辅酶A还原酶基因 序列分析 非生物胁迫 基因表达
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3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶抑制剂的构效关系研究进展 被引量:8
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作者 蔡正艳 周伟澄 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第22期1907-1912,共6页
3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A(HMG CoA)还原酶抑制剂是治疗高胆固醇血症的有效药物。现综述该类药物的发展概况和作用机制,并从母环、连接链和侧链三部分总结其构效关系,为国内研发新的HMG CoA还原酶抑制剂提供参考。
关键词 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶抑制剂 构效关系 降血脂药
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还原型辅酶Ⅰ荧光特性的初步观察 被引量:1
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作者 邵丽丽 潘瑾 肖洁 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期287-288,共2页
目的 了解NADH的荧光特性。方法 用荧光光度计扫描NADH 340~ 4 2 0nm范围确定其激发波长 ,扫描 390~ 5 6 0nm范围确定其发射波长。扫描氧化型辅酶Ⅰ (NAD)标准品激发波长范围及发射波长范围 ,再于NADH中加入NAD ,观察其对NADH的干... 目的 了解NADH的荧光特性。方法 用荧光光度计扫描NADH 340~ 4 2 0nm范围确定其激发波长 ,扫描 390~ 5 6 0nm范围确定其发射波长。扫描氧化型辅酶Ⅰ (NAD)标准品激发波长范围及发射波长范围 ,再于NADH中加入NAD ,观察其对NADH的干扰。加入LD液及乳酸反应体系 ,观察其对NADH的干扰。结果 NADH激发波长为 382nm ,发射波长为 4 6 0nm。NAD在 2 80~ 4 2 0nm处无激发波峰 ,4 0 0~ 5 0 0nm处无发射波峰。NADH中加入NAD后激发波峰有改变。加入LD液后NADH的激发波峰及发射波峰无改变。加入乳酸反应体系后激发波峰有改变。结论 利用NADH的荧光特性 ,在检测中只需固定其发射波长 ,通过观察NADH荧光强度的变化 ,就可以对一些微量物质进行检测 ,可将其测定灵敏度提高 2~ 展开更多
关键词 还原辅酶 荧光特性 LD液 乳酸反应体系
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青花菜肉桂酰辅酶A还原酶基因的克隆与表达特征分析 被引量:6
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作者 李小艳 裴徐梨 +1 位作者 荆赞革 唐征 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2016年第11期2199-2203,共5页
为研究肉桂酰辅酶A还原酶在青花菜生长发育中的作用,采用RT-PCR技术克隆青花菜Bo CCR基因全长c DNA序列,并利用q RT-PCR检测其在不同器官中的表达模式。结果表明:Bo CCR基因开放阅读框为987 bp,推导编码328个氨基酸。预测蛋白分子量为36... 为研究肉桂酰辅酶A还原酶在青花菜生长发育中的作用,采用RT-PCR技术克隆青花菜Bo CCR基因全长c DNA序列,并利用q RT-PCR检测其在不同器官中的表达模式。结果表明:Bo CCR基因开放阅读框为987 bp,推导编码328个氨基酸。预测蛋白分子量为36.86 ku,PI值为6.04。该蛋白亲水性氨基酸多于疏水性氨基酸,为亲水性蛋白。高级结构预测表明青花菜Bo CCR蛋白具有完整的二级结构,三级结构的α-螺旋主要位于外部,β-折叠位于内部。分子进化分析显示CCR蛋白在植物进化过程中,各属形成单独的分枝,可以区分其亲缘关系。荧光定量技术检测到青花菜的Bo CCR基因在花蕾发育早期表达最高,推测该基因可能与青花菜花粉发育相关。 展开更多
关键词 青花菜 肉桂酰辅酶A还原 基因克隆 表达分析
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羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶抑制剂对尿微量白蛋白排泄率影响的临床观察 被引量:2
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作者 钟海花 杨军 马红艳 《临床荟萃》 CAS 北大核心 2005年第21期1243-1244,共2页
关键词 羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶类 抑制剂 糖尿病肾病 尿白蛋白排泄率
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马尾松肉桂酰辅酶A还原酶基因(CCR)克隆及分析(英文) 被引量:9
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作者 陈碧华 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第12期46-53,共8页
对马尾松肉桂酰辅酶A还原酶基因(CCR)进行扩增、克隆和测序(GenBank登录号:EU753854)。应用MEGA4.0.2软件对不同树种CCR基因的核苷酸和氨基酸序列进行比对,结果表明:马尾松CCR基因的外显子和内含子数目与火炬松、杨树、银合欢、光皮桦... 对马尾松肉桂酰辅酶A还原酶基因(CCR)进行扩增、克隆和测序(GenBank登录号:EU753854)。应用MEGA4.0.2软件对不同树种CCR基因的核苷酸和氨基酸序列进行比对,结果表明:马尾松CCR基因的外显子和内含子数目与火炬松、杨树、银合欢、光皮桦、冈尼桉、柳桉、蓝桉的外显子和内含子数目相同,都有5个外显子和4个内含子。马尾松CCR基因编码区975bp,编码324个氨基酸。马尾松外显子Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,V分别为133,155,186,353,148bp,而内含子Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ分别为1450,216,737,941bp。马尾松CCR外显子和内含子连接处序列除内含子Ⅱ/外显子Ⅲ出现GTPuGG/外显子Ⅲ,其余遵循外显子/GTPuAG/外显子组成规律。马尾松外显子Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ核苷酸数目与桉属、杨属、桦木属和松属树种相同,但外显子Ⅰ和外显子Ⅴ不尽相同。比对的树种间在该基因编码区核苷酸序列和氨基酸序列上相对保守,也存在一定差异。马尾松与火炬松、光皮桦、银合欢、杨树、冈尼桉、柳桉、蓝桉各物种间编码区核苷酸序列相似性大小分别为99.2%,67.8%,68.0%,68.9%,69.5%,69.3%,69.9%,而相应的氨基酸序列间相似性大小分别为99.1%,73.5%,72.5%,74.4%,75.0%,74.4%,75.0%。马尾松与其他13个树种CCR序列构建的系统进化树表明:3个针叶树种形成1个独立分支,而且最早进化。 展开更多
关键词 马尾松 肉桂酰辅酶A还原酶基因(CCR) 克隆 序列分析 系统进化树
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