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两株鸡源印度不动杆菌的分离鉴定及系统进化分析 被引量:1
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作者 邓宇 刘华园 +2 位作者 王景景 王浩千 王新卫 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2024年第9期71-76,119,共7页
为了探究鸡源不动杆菌的生物学特性,试验对采自河南省信阳市固始县某养鸡场的鸡口咽拭子进行细菌的分离纯化,通过革兰氏染色、形态特征观察、生化试验,16S rRNA基因及rpoB基因zone1、zone2片段分析鉴定分离菌,并进行药敏试验、系统进化... 为了探究鸡源不动杆菌的生物学特性,试验对采自河南省信阳市固始县某养鸡场的鸡口咽拭子进行细菌的分离纯化,通过革兰氏染色、形态特征观察、生化试验,16S rRNA基因及rpoB基因zone1、zone2片段分析鉴定分离菌,并进行药敏试验、系统进化分析、核苷酸相似性分析和小鼠致病性试验。结果表明:从鸡口咽拭子样品中分离出2株细菌,分别命名为HNXY29R和HNXY36Q。2株分离菌在普通琼脂、麦康凯琼脂及血琼脂培养基上均能生长,经镜检确定为球杆状或短棒状的革兰氏阴性菌,生化特性与印度不动杆菌相符。2株分离菌的16S rRNA与GenBank中印度不动杆菌的核苷酸序列相似性在99%以上,其rpoB基因zone1、zone2可变区片段与GenBank中的印度不动杆菌的核苷酸相似性在98%以上,进一步确定这2株分离菌为印度不动杆菌。2株分离菌对青霉素、阿莫西林、新霉素、大观霉素、卡那霉素、红霉素、环丙沙星、诺氟沙星、利福平、多西环素、复方新诺明、氟苯尼考和替加环素耐药。用浓度为8.05×10^(8 )cfu/mL的菌液感染小鼠后,24 h内感染HNXY29R的小鼠有3只死亡,感染HNXY36Q的小鼠有2只死亡,直至第7天再无小鼠死亡。说明采集样本的河南省信阳市固始县某养鸡场的鸡群中存在印度不动杆菌,且该菌有一定的致病性。 展开更多
关键词 印度不动杆菌 分离 鉴定 药敏试验 系统进化分析
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木珊瑚科Cladopsammia gracilis和Rhizopsammia wettsteini线粒体全基因组比较与系统进化分析
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作者 霍嘉欣 李颖心 +5 位作者 宋严 朱晴 周伟华 袁翔城 黄晖 刘胜 《热带海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期22-30,共9页
木珊瑚科(Dendrophylliidae)下的枝沙珊瑚属(Cladopsammia)和Rhizopsammia属的物种分类目前仍存在模糊的界定,本研究结合形态特征与微观结构和线粒体全基因组测序对Cladopsammia gracilis与Rhizopsammia wettsteini进行形态和分子进化... 木珊瑚科(Dendrophylliidae)下的枝沙珊瑚属(Cladopsammia)和Rhizopsammia属的物种分类目前仍存在模糊的界定,本研究结合形态特征与微观结构和线粒体全基因组测序对Cladopsammia gracilis与Rhizopsammia wettsteini进行形态和分子进化水平的分析比较。结果显示:形态学特征上,R.wettsteini通过生殖根出芽,珊瑚肋上具有小尖状突起,隔片薄而脆;而C.gracilis则无生殖根,珊瑚肋上突起为细瘤状,隔片颗粒感强且较厚。两个物种的线粒体基因组组成十分相似,同样包含13个蛋白编码基因、2个rRNA基因和2个tRNA基因,与大部分六放珊瑚相同;在基因重叠情况和密码子偏好性上则有别于大部分六放珊瑚。基于CO1基因的系统进化分析显示,C.gracilis和R.wettsteini关系较近,却与枝沙珊瑚属(Cladopsammia)其他物种关系较远,因此C.gracilis是否归入枝沙珊瑚属(Cladopsammia)值得探讨,同时提示我们需要重新审视枝沙珊瑚属(Cladopsammia)的分类地位。 展开更多
关键词 木珊瑚科 线粒体基因组 分类学 进化分析
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藜麦CqGAI基因密码子偏好性与进化分析
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作者 丰扬 郭凤根 +2 位作者 王仕玉 刘正杰 龙雯虹 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期27-36,共10页
为了阐明藜麦CqGAI基因密码子使用特性,克隆获得藜麦CqGAI基因序列,运用CodonW、SPSS软件及EMBOSS在线程序分析藜麦CqGAI基因密码子使用偏好性,并与25种植物的GAI基因进行中性绘图、ENC分析和奇偶偏好偏差性分析。结果表明,藜麦CqGAI基... 为了阐明藜麦CqGAI基因密码子使用特性,克隆获得藜麦CqGAI基因序列,运用CodonW、SPSS软件及EMBOSS在线程序分析藜麦CqGAI基因密码子使用偏好性,并与25种植物的GAI基因进行中性绘图、ENC分析和奇偶偏好偏差性分析。结果表明,藜麦CqGAI基因编码序列(coding sequence,CDS)全长1 782 bp,编码593个氨基酸,包含DELLA基因家族特有结构域DELLA、TVHYNP、NLS、VHIID、LHR、RVER;CqGAI基因能够迅速响应赤霉素(gibberellins,GA),在GA信号通路中起关键作用;密码子偏好性分析显示,CqGAI基因的有效密码子数(effective number of codon,ENC)、密码子适应指数(codon adaptation index, CAI)及GC含量分别为54.14、0.21和46.18%,密码子偏好性较弱,偏好以A/T结尾,有27个高频密码子。聚类分析表明,藜麦CqGAI基因与石竹目植物的亲缘关系较近。碱基组成与相关性分析发现,CqGAI基因密码子偏好性受碱基突变和选择效应影响。密码子使用频率表明,大肠杆菌与酵母菌均适用于藜麦CqGAI基因异源表达,拟南芥、烟草、甜菜均可作为藜麦CqGAI基因功能分析的遗传转化受体。以上研究结果为进一步研究藜麦CqGAI基因功能和异源表达提供了重要参考。 展开更多
关键词 藜麦 CqGAI基因 密码子偏好性 进化分析
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山东地区1株牛病毒性腹泻病毒的分离鉴定及遗传进化分析
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作者 毕峻铭 董雅琴 +7 位作者 崔进 沙洲 顾丛丛 郑辉 魏荣 孙福亮 张锋 张志宏 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期4485-4499,共15页
【目的】了解并掌握山东地区牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)流行毒株的生物学特性和遗传变异情况,为BVDV防控提供理论依据和技术支持。【方法】采集养牛场疑似BVDV感染样品制备组织上清液,利用RT-PCR方法进行病原... 【目的】了解并掌握山东地区牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)流行毒株的生物学特性和遗传变异情况,为BVDV防控提供理论依据和技术支持。【方法】采集养牛场疑似BVDV感染样品制备组织上清液,利用RT-PCR方法进行病原鉴定,接种MDBK细胞进行病毒分离培养,采用间接免疫荧光试验(IFA)和电镜观察对分离毒株进行鉴定,对分离毒株全基因组进行分段扩增、克隆和测序,并采用Lasergene等软件分别对全基因组序列、N^(pro)和E2基因进行比对和遗传演化分析。【结果】病料样品BVDV特异性引物RT-PCR扩增得到大小约504 bp的目的条带,与预期大小一致。IFA结果显示特异性绿色荧光;电镜下可见直径约50 nm的病毒粒子,表明分离到1株非致细胞病变型BVDV毒株,命名为SDNF9株。分离株基因组全长为12232 nt,与BVDV参考毒株的全基因组核苷酸相似性为79.1%~93.8%,其中,与中国分离毒株22AH-1和澳大利亚毒株Bega-like的相似性最高,为93.8%;N^(pro)和E2蛋白氨基酸存在多个位点变异;SDNF9分离毒株与BVDV2型毒株和BVDV3型毒株处于遗传演化的不同分支,而与BVDV 1型毒株处于同一分支,属于BVDV 1c基因型。【结论】本研究成功分离到1株BVDV 1c流行毒株,并进行基因组和遗传演化分析,与中国分离毒株22AH-1亲缘关系最近,为山东地区牛病毒性腹泻的防控和疫苗研制提供数据和材料支持。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒(BVDV) 分离 鉴定 序列分析 遗传进化分析
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河北省牛梨形虫流行病学调查及遗传进化分析
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作者 孙通宝 陈丽凤 +4 位作者 邹亚学 吴晨雨 果欣雨 张雪晴 王秋悦 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期529-534,共6页
为了解我国河北省牛梨形虫的种类、感染率、遗传进化及季节流行性情况,本研究共收集河北省7个地级市的牛血液样品564份,以提取的牛全血液基因组DNA为模板,采用套式PCR对牛梨形虫18S r RNA基因进行扩增检测,并鉴定虫种,选取10份不同地区... 为了解我国河北省牛梨形虫的种类、感染率、遗传进化及季节流行性情况,本研究共收集河北省7个地级市的牛血液样品564份,以提取的牛全血液基因组DNA为模板,采用套式PCR对牛梨形虫18S r RNA基因进行扩增检测,并鉴定虫种,选取10份不同地区牛犁形虫阳性样品测序,并构建其18S r RNA基因系统进化树分析其遗传进化特征。结果显示,我国河北省牛梨形虫总感染率为18.6%(105/564),其中张家口地区牛梨形虫感染率最高,为83.3%(20/24),极显著高于河北省其他地区(P<0.01),唐山、沧州、石家庄及承德的牛梨形虫感染率分别为27.4%(32/117)、22.1%(17/77)、25.0%(20/80)和19.0%(16/84),秦皇岛和衡水地区牛梨形虫感染率为0。感染梨形虫的虫种主要为双芽巴贝斯虫、牛巴贝斯虫和瑟氏泰勒虫,感染率最高的为双芽巴贝斯虫(12.2%,69/564)。18S r RNA基因的进化树分析结果显示,10份牛梨形虫18S r RNA基因均呈地区性聚集;统计学分析结果显示,8月份河北省牛梨形虫感染率最高(29.7%),显著高于其他月份(P<0.05),4月~8月间牛梨形虫感染率呈逐渐上升的趋势,8月份达到顶峰后感染率逐渐下降。本研究首次对河北省牛梨形虫进行了流行病学调查,并分析了其遗传进化特征,结果表明河北省存在牛梨形虫的感染,尤其是张家口地区,该地区应在夏季应加强对牛梨形虫的重点防控。本研究为河北省牛梨形虫的防制提供了科学依据。 展开更多
关键词 牛梨形虫 巴贝斯虫 泰勒虫 感染调查 遗传进化分析
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猪流行性腹泻病毒CH/SCJY/2022株的分离鉴定及遗传进化分析
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作者 吴学婧 于吉锋 +13 位作者 肖璐 毛从剑 叶勇刚 曾凯 潘梦 谢晶 曹冶 李兴玉 林毅 叶健强 张先惠 魏勇 青易 康润敏 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2024年第18期64-74,133,共12页
2022年四川省简阳地区某规模化猪场仔猪发生严重腹泻甚至死亡,疑似猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)感染。为确定病原并了解其遗传进化特征,试验无菌采集病死腹泻仔猪小肠组织样本,提取RNA后采用RT-PCR方法对病... 2022年四川省简阳地区某规模化猪场仔猪发生严重腹泻甚至死亡,疑似猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)感染。为确定病原并了解其遗传进化特征,试验无菌采集病死腹泻仔猪小肠组织样本,提取RNA后采用RT-PCR方法对病原进行检测,并对病毒进行分离和半数组织培养感染剂量(TCID_(50))测定、间接免疫荧光试验、全基因组测序和遗传进化分析。结果表明:腹泻仔猪小肠组织样本为PEDV阳性,小肠组织过滤上清液接种Vero细胞盲传至第3代出现致细胞病变效应(cytopathic effect,CPE),盲传至第9代时出现稳定的CPE,第9代病毒液的TCID_(50)为1×10^(-5.2)/0.1 mL;在以鼠源抗PEDV-S蛋白单克隆抗体为一抗、FITC标记的羊抗鼠IgG为二抗的间接免疫荧光试验中,接种分离毒株的Vero细胞呈现特异性绿色荧光,未接种分离毒株的Vero细胞无特异性绿色荧光。将分离毒株命名为CH/SCJY/2022。经PCR分段扩增、测序、拼接后得到CH/SCJY/2022株全基因组序列,大小为28038 bp。CH/SCJY/2022株S基因、ORF3基因、M基因、N基因与参考毒株(CV777、AJ1102、LW/L、virulent DR13、LZC)核苷酸相似性分别为93.11%~97.71%、95.41%~98.37%、96.62%~98.09%、94.72%~96.38%。CH/SCJY/2022株全基因组序列与30株PEDV参考毒株核苷酸相似性为96.0%~98.9%,其中与强毒变异株YC2014的相似性最高(98.9%),与韩国毒株SM98的相似性最低(96.0%),与疫苗毒株CV777、AJ1102的相似性分别为96.4%和98.3%。基于全基因组序列构建的遗传进化树中可见CH/SCJY/2022株与CH/SCZY103/2017位于同一小分支,亲缘关系最近,属于GⅡb基因亚群;与疫苗毒株LW/L、AJ1102、XJ-DB2、CV777、attenuated DR13的亲缘关系较远。与参考毒株(attenuated DR13、LW/L、CV777、AJ1102、XJ-DB2)相比,CH/SCJY/2022株S蛋白氨基酸序列存在6处特有的氨基酸位点突变,分别为N139D、I289M、R492K、F541L、L1000M、S1080L。说明试验成功从该养猪场腹泻仔猪小肠组织样本中分离鉴定到1株PEDV GⅡb亚群变异株,并获得了该毒株的全基因组序列,具有独特的分子特征。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 全基因组测序 同源性分析 遗传进化分析 分离 鉴定
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河南省猪细小病毒2型流行特征和遗传进化分析
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作者 许夕雅 韩紫薇 +3 位作者 杨寒 高冬生 王永生 陈陆 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第9期23-29,共7页
为了解河南省猪细小病毒2型(PPV2)的遗传进化和流行特征,本试验对2021—2022年河南省不同地区猪养殖场送检的759份临床样品进行PCR检测,选取4份不同地区的PPV2阳性样品,对其进行全基因组测序,并与35条国内外PPV2参考序列进行同源性分析... 为了解河南省猪细小病毒2型(PPV2)的遗传进化和流行特征,本试验对2021—2022年河南省不同地区猪养殖场送检的759份临床样品进行PCR检测,选取4份不同地区的PPV2阳性样品,对其进行全基因组测序,并与35条国内外PPV2参考序列进行同源性分析、系统发育分析和重组分析。结果显示,送检临床样品PPV2检出率为15.81%(120/759),与猪细小病毒7型(PPV7)、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV2)的混合感染率依次为35.83%、25.00%和20.83%。鉴定的4株PPV2分别命名为PPV2XM-15/2021、PPV2ZMD-20/2021、PPV2ZK-9/2021和PPV2SQ-16/2021。4株PPV2鉴定株的全基因组核苷酸同源性为95.0%~99.7%,处在不同进化分支,亲缘性较远,与35株PPV2参考株的全基因组核苷酸同源性为93.9%~99.8%、NS基因核苷酸和氨基酸同源性均为92.6%~99.8%、Cap基因核苷酸和氨基酸同源性均为88.7%~100%。PPV2ZMD-20/2021株、PPV2ZK-9/2021株和PPV2SQ-16/2021株可能为重组毒株。结果表明,河南省猪场PPV2检出率较高,且与多种病原混合感染,其中与PPV7混合感染最常见;PPV2遗传进化差异较大,存在重组现象,且重组位置不唯一。 展开更多
关键词 猪细小病毒2型 全基因组 流行特征 遗传进化分析 重组分析
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牛环曲病毒云南株纤突蛋白基因分子特征及进化分析
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作者 耿娟 曲伟杰 +10 位作者 张晓梅 魏志杰 钟德凯 王鑫文 李文贵 张双玲 李金存 张振兴 张以芳 郑锦玲 宋建领 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期4943-4955,共13页
【目的】了解牛环曲病毒(Bovine torovirus,BToV)在云南部分地区牛群中的流行及其S基因遗传进化情况。【方法】采集云南省内13个地区15个牛场不同年龄牛的粪便样品655份,利用RT-PCR方法检测BToV,并对其中6株BToV阳性样品进行S基因扩增... 【目的】了解牛环曲病毒(Bovine torovirus,BToV)在云南部分地区牛群中的流行及其S基因遗传进化情况。【方法】采集云南省内13个地区15个牛场不同年龄牛的粪便样品655份,利用RT-PCR方法检测BToV,并对其中6株BToV阳性样品进行S基因扩增、克隆、测序及遗传进化分析。【结果】RT-PCR检测结果显示,655份牛粪便样品检出71份BToV阳性,总阳性率为10.8%;其中腹泻样品阳性率为21.2%(59/278),非腹泻样品阳性率为3.2%(12/377);1周龄、1周龄~1月龄、1~6月龄和1岁及上样品的阳性率分别为15.0%(3/20)、17.7%(20/113)、14.0%(45/321)和1.5%(3/201)。相似性分析结果显示,6条BToV S基因序列相似性为96.0%~99.8%,且与原始毒株Breda1的相似性为94.7%~96.0%,与国内流行毒株的相似性为95.2%~99.7%。遗传进化分析结果显示,6条S基因均与原始毒株Breda1不在同一大分支,与国内四川、河南毒株及土耳其毒株形成一个大分支,表明云南省BToV毒株与目前国内流行毒株一致,亲缘关系近。氨基酸突变位点分析结果显示,S基因存在少量独特的氨基酸突变位点。重组分析结果显示,BTOV-China/YN03-2021、BTOV-China/YN01-2021和BTOV-China/YN06-2022为重组序列,其中重组序列BTOV-China/YN06-2022得分最高,重组区域为1438~1609 bp区间,主要亲本为BTOV-China/YN05-2021;重组序列BTOV-China/YN03-2021,重组区域位于1668~3569 bp区域,主要亲本为土耳其毒株BToV-HT2-TUR(MG957146.1);重组序列BTOV-China/YN01-2021,重组区域位于261~2552 bp,主要亲本为土耳其毒株BToV-HT2-TUR(MG957146.1)。基因选择压力分析结果显示,BToV S基因的进化方式主要以中性选择为主,但同时也存在净化选择和正向选择的压力影响。【结论】本研究揭示了BToV已存在于云南省部分地区牛群体中且防控形势较严峻,可为中国研究BToV流行病学和BToV S基因遗传进化关系提供参考,同时也为云南地区制定BToV感染的防控措施提供理论依据。 展开更多
关键词 牛环曲病毒(BToV) S基因 分子特征 进化分析
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草地早熟禾胚胎发生标记基因BBM的鉴定及系统进化分析
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作者 余江弟 苗佳敏 +1 位作者 李玉珠 马晖玲 《草原与草坪》 CAS CSCD 2024年第2期38-48,共11页
【目的】利用生物信息学方法,鉴定草地早熟禾(Poa pratensis)胚胎发生标记基因PpBBM,并通过保守基序比对和进化树分析,推测可能具有孤雌生殖功能的PpBBM基因。【方法】基于草地早熟禾转录组数据库信息,检索PpBBM基因。通过生物信息学软... 【目的】利用生物信息学方法,鉴定草地早熟禾(Poa pratensis)胚胎发生标记基因PpBBM,并通过保守基序比对和进化树分析,推测可能具有孤雌生殖功能的PpBBM基因。【方法】基于草地早熟禾转录组数据库信息,检索PpBBM基因。通过生物信息学软件分析PpBBMs蛋白理化特性,比较不同PpBBMs蛋白的系统进化关系和保守基序差异。【结果】共获得3个具有完整开放阅读框的PpBBMs基因,其编码的蛋白均含有2个AP2结构域,其中,PpBBM1和PpBBM2具有相同的motif类型和数量。3个PpBBMs蛋白都是酸性蛋白,定位于细胞核,不存在跨膜结构和信号肽。系统进化分析表明,30个物种的BBM/BBML蛋白成员共聚为5类。其中,PpBBM1、PpBBM2聚在第2分支,分别与BdBBM和SbBBML亲缘关系最近;PpBBML位于第5分支,与ZmBBML亲缘关系最近。PpBBM1、PpBBM2和PpBBML均具有BBM基因所特有的bbm-1基序以及AP2亚家族特定的euANT2-4基序,但PpBBML蛋白的所有基序均有个别氨基酸残基存在变异。【结论】与PpBBML基因相比,PpBBM1和PpBBM2更有可能具有诱导孤雌生殖的功能。 展开更多
关键词 草地早熟禾 BBM基因 系统进化分析 保守基序
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犬冠状病毒Ⅱ毒株的分离鉴定及其基因的遗传进化分析
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作者 刘可欣 谭斌 +3 位作者 张傲 王倩颖 杨森 张淑琴 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第4期104-110,共7页
自长春市某宠物医院临床症状为肠胃炎的幼犬腹泻粪便中分离到1株病毒,该分离毒株在CRFK细胞上出现明显的细胞病变,经RT-PCR、序列测定和直接免疫荧光鉴定可知该分离毒株为犬冠状病毒株(Canine coronavirus,CCV),命名为CCV-CC01。利用PC... 自长春市某宠物医院临床症状为肠胃炎的幼犬腹泻粪便中分离到1株病毒,该分离毒株在CRFK细胞上出现明显的细胞病变,经RT-PCR、序列测定和直接免疫荧光鉴定可知该分离毒株为犬冠状病毒株(Canine coronavirus,CCV),命名为CCV-CC01。利用PCR技术扩增CCV-CC01 S基因序列全长4273 bp,ORF-3序列1071 bp,N基因序列全长1202 bp。对分离毒株与其他冠状病毒毒株进行同源性比对并绘制系统进化树,结果显示该毒株与美国分离的CCV S378株亲缘关系最近,处于同一分支,与SARS-CoV-2亲缘关系较远,该毒株的出现可能与国际贸易相关。该毒株的分离鉴定为犬冠状病毒病的诊断、防治及后续疫苗研发奠定了基础。 展开更多
关键词 CCV 分离鉴定 直接免疫荧光法 遗传进化分析
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病毒宏基因组学检测猪博卡病毒及其遗传进化分析
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作者 孙晓瑜 单虎 黄娟 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第4期50-57,共8页
为了探明导致某养猪场中仔猪腹泻的病原,本试验将患病仔猪样本处理并提取核酸后进行病毒宏基因组测序,对测序结果进行序列比对分析和遗传进化分析,并对样本核酸进行PCR检测验证。结果显示,RNA样本中只注释到A型流感病毒(H1N1和H3N2),读... 为了探明导致某养猪场中仔猪腹泻的病原,本试验将患病仔猪样本处理并提取核酸后进行病毒宏基因组测序,对测序结果进行序列比对分析和遗传进化分析,并对样本核酸进行PCR检测验证。结果显示,RNA样本中只注释到A型流感病毒(H1N1和H3N2),读数比为6.8%,未发现其他猪病相关RNA病毒。DNA样本注释到的病毒主要为猪博卡病毒(PBoV),读数比为34.5%,命名为PBoV-SDPD-2022;其余猪病相关病毒包括猪巨细胞病毒、猪乳腺腺病毒和猪细环病毒,读数比均小于1.0%。基于全基因组、NS 1基因和VP 1基因构建的系统发育进化树均显示,PBoV-SDPD-2022与参考毒株PBoV3_VIRES_HuB01_C1处于同一分支,属于PBoV G3群。与21株参考毒株相比,PBoV-SDPD-2022 NS1蛋白的编码基因核苷酸和氨基酸序列同源性分别为49.6%~97.2%和38.5%~95.3%;VP1蛋白的编码基因核苷酸和氨基酸序列同源性分别为47.9%~97.9%和34.8%~98.8%;NP1蛋白的编码基因核苷酸和氨基酸序列同源性分别为35.2%~98.5%和26.9%~97.4%。与G3群参考毒株相比,PBoV-SDPD-2022 NS1蛋白在第654位点处有1个氨基酸的缺失;VP1蛋白在第151、152位点处有2个氨基酸的插入,且包含基序YLGPF(VPl aa 18~22)和HDLAY(VP1 aa 41~45);NP1蛋白在第15、16、35、36、212位点处发生氨基酸的缺失,在第95位点处有1个氨基酸的插入。PCR检测证实样本核酸为PBoV阳性。结果表明,导致该养猪场仔猪腹泻的优势病原是G3群PBoV。本试验有助于进一步了解我国PBoV基因组序列特征,并为未来PBoV流行病学调查提供了参考依据。 展开更多
关键词 病毒宏基因组学 猪博卡病毒 遗传进化分析
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螺杆菌属细菌致病基因系统进化分析
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作者 徐乐 刘兴 +3 位作者 吴琦 华召来 杨菲 张军峰 《世界华人消化杂志》 CAS 2024年第1期58-70,共13页
背景螺杆菌属(Helicobacter)与多种消化道疾病相关,除幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)外,多种非H.pylori螺杆菌属细菌(non-Helicobacter pylori Helicobacters,NHPH)也从多种动物宿主的肝脏、肠道和胆囊中分离出来,作为潜在... 背景螺杆菌属(Helicobacter)与多种消化道疾病相关,除幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)外,多种非H.pylori螺杆菌属细菌(non-Helicobacter pylori Helicobacters,NHPH)也从多种动物宿主的肝脏、肠道和胆囊中分离出来,作为潜在的人畜共患病病原体,其感染和致病机制尚不清楚.目的基于H.pylori致病基因探讨螺杆菌属细菌的系统进化关系.方法调取12株H.pylori和38株NHPH的基因组,基于16S rRNA、鞭毛、尿素酶以及毒力因子基因,利用MAGA 11软件进行序列比对并构建系统进化树.结果基于16S rRNA基因的系统进化分析结果显示,胃内螺杆菌(Gastric Helicobacter,GH)和肝肠螺杆菌(Enterohepatic Helicobacter Species,EHS)聚集为2个大支,GH宿主均为哺乳动物,而EHS宿主多为禽类和哺乳动物.基于细菌鞭毛动力相关基因(flaA、flaB、fliP、fliQ、fliR、fliG、fliM、fliN)的系统进化分析支持基于16S rRNA基因所得到的系统发育关系,基于脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)合成相关基因(lptA,waaC和waaF)的系统进化关系也具有类似的规律.尿素酶基因存在于12株H.pylori和13株胃内NHPH中,仅在4株EHS(H.hepaticus、H.muridarum、H.bilis、H.anseris)中存在,但7个尿素酶基因的系统进化树未见明显一致性规律.结论螺杆菌属细菌的系统进化受到胃和肝肠定植部位的显著影响. 展开更多
关键词 螺杆菌属 16S rRNA 致病基因 进化分析
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新疆和田地区鹅细小病毒感染调查及VP1基因遗传进化分析
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作者 肖海侠 马万鹏 +4 位作者 王燕 马雪连 米晓云 刘黎 苏战强 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2024年第14期68-73,共6页
为了解新疆和田地区鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)的感染情况及遗传进化特征,试验采集新疆和田地区和田县、于田县、皮山县鹅养殖场的578只死亡雏鹅的内脏(肝脏、脾脏)及肛拭子样本(和田县344只,于田县67只,皮山县167只),采用PCR方... 为了解新疆和田地区鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)的感染情况及遗传进化特征,试验采集新疆和田地区和田县、于田县、皮山县鹅养殖场的578只死亡雏鹅的内脏(肝脏、脾脏)及肛拭子样本(和田县344只,于田县67只,皮山县167只),采用PCR方法对鹅细小病毒进行检测,并随机选取2份阳性病料样本对鹅细小病毒VP1基因进行PCR扩增、测序、BLAST比对和遗传进化分析。结果表明:共检测出44份鹅细小病毒阳性样品,总阳性率为7.61%(44/578),其中新疆和田地区和田县鹅细小病毒阳性率为12.50%(43/344),于田县鹅细小病毒阳性率为1.49%(1/67),皮山县未检测到鹅细小病毒。随机选取的2株鹅细小病毒(XJHT-1、XJHT-2株)均为经典鹅细小病毒,与鹅细小病毒各参考毒株VP1基因编码氨基酸序列相似性分别为89.5%~95.8%和92.1%~97.3%,与番鸭细小病毒参考毒株VP1基因编码氨基酸序列相似性分别为76.0%~85.4%和78.5%~88.7%。鹅细小病毒XJHT-1、XJHT-2株与鹅细小病毒DY16株(中国江苏)的相似性最高,分别为95.8%和97.3%,遗传距离最近;XJHT-1株与鹅细小病毒GD株(中国广东)和SD-F30株(中国河北)的相似性较低,分别为89.5%和89.6%;XJHT-2株与鹅细小病毒SHM319株(德国)、GD株(中国广东)和SD-30株(中国河北)的相似性较低,分别为92.1%、92.8%和92.8%。说明和田地区部分鹅场存在鹅细小病毒的感染,但阳性率较低,选取的2株毒株与鹅细小病毒DY16株(中国江苏)的氨基酸序列相似性最高,推测可能由鹅细小病毒DY16株进化而来。 展开更多
关键词 和田地区 鹅细小病毒 流行病学调查 VP1基因 遗传进化分析
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新疆阿克苏和吐鲁番地区硬蜱中3种立克次体检测及遗传进化分析
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作者 温丽翠 李才善 +6 位作者 周娜 赵珊珊 石文玉 普浩 刘诗语 伍军 巴音查汗 《动物医学进展》 北大核心 2024年第7期42-47,共6页
分析采自新疆阿克苏(SY)和吐鲁番(ADH)两地共132只蜱样本,研究蜱与其携带共生菌、病原三者之间的遗传进化关系。提取单个蜱总DNA,采用PCR方法对132份DNA样品进行无浆体16S rRNA基因扩增检测,挑选7份阳性样本基于COI基因进行分子生物学鉴... 分析采自新疆阿克苏(SY)和吐鲁番(ADH)两地共132只蜱样本,研究蜱与其携带共生菌、病原三者之间的遗传进化关系。提取单个蜱总DNA,采用PCR方法对132份DNA样品进行无浆体16S rRNA基因扩增检测,挑选7份阳性样本基于COI基因进行分子生物学鉴定;使用MEGA X构建系统发育树,采用DNA SP V5.0软件统计两地蜱单倍型的数量,计算突变位点和核甘酸多样性。经PCR检测发现蜱无浆体总感染率为34.8%(46/132);测序结果发现SY1为图兰扇头蜱(46/132),携带斑点热立克次体,SY2、SY3及SY4为亚洲璃眼蜱,其中SY2、SY3携带Ca.M.mitochondrii sp.,SY4携带嗜吞噬细胞无浆体;ADH1、ADH2及ADH3为小亚璃眼蜱,ADH1携带绵羊无浆体,ADH2、ADH3携带Ca.M.mitochondrii sp.。构建系统发育树分析发现,ADH2、ADH3、SY2、SY3中鉴定出的Candidatus Midichloria mitochondrii sp.(Ca.M.mitochondrii sp.),与意大利株Ca.M.mitochondrii同源性较高聚为一支,SY4中鉴定出的Anaplasma sp.与新疆株嗜吞噬细胞无浆体聚为一支,ADH1中鉴定的Anaplasma sp.与意大利株绵羊无浆体聚为一支;SY1与斑点热立克次体表现出较近的亲缘关系;单倍型结果分析显示,H.asiaticum单倍型数量为2,突变位点为4,核酸多样性为0.00408。H.anatolicum单倍型数量为3,突变位点为3,核酸多样性为0.00303,两个地区亚洲璃眼蜱和小亚璃眼蜱的基因流动性较低。研究从亚洲璃眼蜱和小亚璃眼蜱中均检测出Ca.M.mitochondrii sp.,可为后续蜱-蜱传疾病-共生菌三者之间的关系提供理论基础。 展开更多
关键词 蜱传疾病 共生菌 进化分析
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欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒GD2022株的分离鉴定及遗传进化分析
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作者 邓可辉 王修武 +3 位作者 郭智轩 韩淑杰 孙守湖 贺东生 《动物医学进展》 北大核心 2024年第3期34-41,共8页
为了解广东省欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV-1)流行情况,将RT-PCR检测PRRSV-1阳性的病料(肺脏和淋巴结)接种猪肺泡巨噬细胞(PAMs)进行病原分离鉴定,以分离毒株核酸作为模板,对分离的PRRSV-1进行全基因克隆和测序,并与国内外PRRSV-... 为了解广东省欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV-1)流行情况,将RT-PCR检测PRRSV-1阳性的病料(肺脏和淋巴结)接种猪肺泡巨噬细胞(PAMs)进行病原分离鉴定,以分离毒株核酸作为模板,对分离的PRRSV-1进行全基因克隆和测序,并与国内外PRRSV-1和PRRSV-2参考毒株序列进行同源性及遗传进化分析。结果显示,成功分离1株PRRSV-1,命名为GD2022株,其接种PAMs可引起典型的细胞病变,从出现病变的F5细胞中提取核酸,用PCR分段扩增出PRRSV-1 GD2022株10个基因组片段,分别连接到pCE2 TA/Blunt-Zero载体进行测序,拼接后获得PRRSV-1 GD2022株全基因组长15058个核苷酸(不包含polyA尾)。同源性分析显示,该分离株全基因组序列与PRRSV-1参考毒株(LV株)和PRRSV-2参考毒株(VR2333株)核苷酸序列同源性分别为87%和59.7%。遗传进化树分析显示,全基因序列和ORF5基因与国内外PRRSV-1毒株为同一进化分支,且与疫苗毒分支较远,推断分离株为1株PRRSV-1,属于基因亚型1。氨基酸序列比对分析显示,ORF3和ORF4重叠区域缺失3个核苷酸,导致GP3蛋白和GP4蛋白分别在第245和第65氨基酸位点缺失了1个氨基酸,且与LV株比对,GD2022毒株GP5的氨基酸序列在中和抗原表位第33氨基酸位点(D→A)出现点突变,在高变区第56氨基酸位点(D→A)和第63氨基酸位点(G→D)出现两处突变。重组分析显示,GD2022毒株未发生重组事件。成功分离鉴定1株PRRSV-1毒株,为国内PRRSV-1生物学特性研究提供了材料,也为了解广东省内PRRSV-1流行情况及变异特点提供参考依据。 展开更多
关键词 欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒 分离鉴定 全基因组测序 遗传进化分析
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野鸟源禽副黏病毒的流行病学调查及遗传进化分析
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作者 李乔乔 刑亚楠 +6 位作者 胡斌 韩姝伊 高思潮 王继普 王业 何宏轩 李文超 《安徽科技学院学报》 2024年第5期8-14,共7页
目的:调查我国野生鸟类中禽副黏病毒(Avian Paramyxoviruses,APMV)的流行和进化趋势。方法:通过RT-PCR、鸡胚分毒、血凝试验、遗传进化分析对野鸟源样品进行APMV流行病学调查和进化分析。结果:1219份野鸟样品中共检测出9份APMV阳性样品,... 目的:调查我国野生鸟类中禽副黏病毒(Avian Paramyxoviruses,APMV)的流行和进化趋势。方法:通过RT-PCR、鸡胚分毒、血凝试验、遗传进化分析对野鸟源样品进行APMV流行病学调查和进化分析。结果:1219份野鸟样品中共检测出9份APMV阳性样品,APMV感染率为0.74%。其中APMV-1有8份,感染率为0.66%;APMV-4有1份,感染率为0.08%。鸡胚分毒成功分离出1株鸽源PPMV-1,遗传进化分析显示其属于基因VI.2.1.1.2.2型,与近年来国内流行的基因型一致。结论:野鸟在APMV的传播中具有重要作用,应加强对野鸟源PPMV-1的监测,研究结果对可能因跨种传播导致的公共卫生事件进行早期预警防控提供理论依据。 展开更多
关键词 APMV 分离鉴定 遗传进化分析 野鸟
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云南省某牛场牛轮状病毒检测及遗传进化分析
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作者 孙绍美 李飞 +3 位作者 李优英 柴俊 张以芳 郑锦玲 《云南畜牧兽医》 2024年第5期16-20,共5页
为查明云南省某牛场牛轮状病毒(BRV)感染情况,本研究采集了94份临床疑似感染BRV的牛粪便样本,提取RNA,设计特异性引物进行RT-PCR扩增,阳性产物测序结果提交NCBI进行序列分析。94份牛粪便样本中有11份检测出BRV阳性,感染率为11.7%;通过... 为查明云南省某牛场牛轮状病毒(BRV)感染情况,本研究采集了94份临床疑似感染BRV的牛粪便样本,提取RNA,设计特异性引物进行RT-PCR扩增,阳性产物测序结果提交NCBI进行序列分析。94份牛粪便样本中有11份检测出BRV阳性,感染率为11.7%;通过序列分析发现测序株BRV-YNDL-2023株与爱尔兰毒株CIT-A18同源性最高,为98.8%。本次检测分析结果明确了该牛场存在BRV的流行,为云南省牛场BRV的免疫防控措施提供参考。 展开更多
关键词 牛轮状病毒 RT-PCR 遗传进化分析
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郑州地区犬细小病毒VP2基因遗传进化分析
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作者 张爱国 温良海 +7 位作者 陈廷毅 王艺格 胡梦真 马琰君 靳双星 黄啟雪 张瑶 宋超 《现代牧业》 2024年第1期1-7,共7页
为了解郑州地区犬细小病毒(CPV)的流行特征及遗传变异情况,采集81份2017—2022年郑州市疑似感染CPV犬的粪便或肛门拭子进行PCR检测。随机挑选出21份经PCR检测的CPV阳性样本,扩增其VP2基因,连接至载体并测序,用MegAlign软件对流行株进行... 为了解郑州地区犬细小病毒(CPV)的流行特征及遗传变异情况,采集81份2017—2022年郑州市疑似感染CPV犬的粪便或肛门拭子进行PCR检测。随机挑选出21份经PCR检测的CPV阳性样本,扩增其VP2基因,连接至载体并测序,用MegAlign软件对流行株进行同源性和氨基酸变异分析,并通过MEGA6.0软件构建基因遗传进化树。结果显示:2017—2018年郑州地区CPV流行基因型为New CPV-2a亚型,2019—2022年则以CPV-2c亚型为主导。21株CPV流行株与疫苗株的核苷酸同源性为98.3%~99.0%,其中CPV-79流行株与疫苗株的核苷酸同源性最低,仅为98.3%,且该毒株在VP2蛋白GH环区出现多位点氨基酸突变;部分CPV-2c亚型流行株第5和370位氨基酸出现A到G和Q到R的变异。研究结果表明:郑州地区当前流行基因型为CPV-2c亚型,虽出现多位点氨基酸突变,但未形成明显的国内进化分支。值得注意的是,New CPV-2a亚型在进化过程中形成了不同分支且存在抗原突变的风险。本研究丰富了郑州地区CPV的分子流行病学调查数据,也为我国CPV流行疫苗株的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 犬细小病毒 VP2基因 遗传进化分析 郑州地区
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侵染甘肃茉莉的茉莉T病毒鉴定及分子进化分析
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作者 陈雅寒 路云爽 +1 位作者 何志兰 王骆凡 《北方园艺》 CAS 北大核心 2024年第17期61-66,共6页
以表现黄色环纹症状的8份茉莉叶片为试材,采用RT-PCR方法,研究了待测茉莉的病毒种类及茉莉T病毒(jasmine virus T,JaVT)外壳蛋白(coat protein,CP)基因序列遗传多样性,以期为茉莉病毒病的防治提供参考依据。结果表明:4份样品中检测到Ja... 以表现黄色环纹症状的8份茉莉叶片为试材,采用RT-PCR方法,研究了待测茉莉的病毒种类及茉莉T病毒(jasmine virus T,JaVT)外壳蛋白(coat protein,CP)基因序列遗传多样性,以期为茉莉病毒病的防治提供参考依据。结果表明:4份样品中检测到JaVT,并扩增出4条JaVT的外壳蛋白(CP)基因序列。4个JaVT分离物CP基因间核苷酸序列的一致性为92.20%~95.20%,与NCBI已发表的4个JaVT CP基因核苷酸序列一致性为91.40%~94.00%。基于8个JaVT CP基因全长序列进行系统发育分析,结果表明该研究中的4个JaVT分离物与来自中国的JaVT-MZ962345聚集在一起。8条JaVT全长CP基因序列中检测到3个重组事件。这是甘肃省首次报道茉莉T病毒。 展开更多
关键词 茉莉 JaVT 病毒检测 CP 分子进化分析
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陕西奶牛源微小隐孢子虫的基因亚型鉴定及其遗传进化分析
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作者 张迎锐 王占宏 +4 位作者 丰嘉怡 赵永攀 陈超 李韬 张智鹏 《家畜生态学报》 北大核心 2024年第10期72-76,共5页
隐孢子虫是一种寄生于人和多种动物消化道的人兽共患寄生性原虫,可通过污染食物、水源等感染宿主,常引起宿主水样腹泻,甚至死亡。微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)是隐孢子虫属中致病力较高的种类之一,有研究表明,C.parvum的致病... 隐孢子虫是一种寄生于人和多种动物消化道的人兽共患寄生性原虫,可通过污染食物、水源等感染宿主,常引起宿主水样腹泻,甚至死亡。微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)是隐孢子虫属中致病力较高的种类之一,有研究表明,C.parvum的致病力与其gp60基因亚型有强相关性。因此,本研究基于gp60基因位点并应用分子生物学方法对分离自陕西奶牛源微小隐孢子虫进行基因亚型鉴定和遗传进化分析。结果表明,该研究中奶牛源C.parvum分离株(SX-1)属于Ⅱd亚型家族,基因亚型为ⅡdA19G1,与GenBank中MH049734、MN304768、MT156342和AY738194等参考分离株同归于一个大支,均属于Ⅱd亚型家族。该研究所获得的结果表明C.parvum在陕西省奶牛中分布广泛且具有遗传多样性,对做好犊牛腹泻疾病的精准防控具有重要意义,可为陕西奶牛源C.parvum有效防控策略的制定提供理论基础和数据支撑。 展开更多
关键词 微小隐孢子虫 基因亚型 遗传进化分析 奶牛 陕西
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