河南进境毛皮携带致病菌的调查及检测方法的研究

为了掌握河南进境毛皮携带致病菌的种类、性质及研究其检测方法,试验对河南进境的680份毛皮样品进行调查并采用CTAB法、酚氯仿抽提法、Na I-玻璃粉法、Na OH-SDS 4种方法提取、分离细菌基因组,比较核酸提取效果,使用细菌通用16S rRNA引物,PCR扩增细菌核酸,并进行序列测定。结果表明:CTAB法和酚氯仿抽提法能提取出相对完整的基因组片段;Na I-玻璃粉法和Na OH-SDS法不能提取出完整的核酸,但对于复杂环境的样品提取结果满足PCR扩增的需要。酚氯仿抽提法可以作为一种通用的毛皮携带细菌DNA的提取技术,试验建立的细菌PCR结合核酸测序技术可以满足出入境系统快检、快放的要求。