单链远侧上游因子结合蛋白1在肝癌发病机制中的作用

单链远侧上游因子结合蛋白1（FUBP1）是新近发现的转录因子，又名FUSE结合蛋白、DNA解螺旋酶V，在体内外均能与单链DNA上的远侧上游元件结合，促进含FUSE的各种基因（尤其是c-myc基因）的转录。

远端上游元件结合蛋白1在胃癌中的表达及其对胃癌细胞增殖和侵袭能力的影响

目的研究远端上游元件结合蛋白1(FUBP1)在胃癌中的表达,探讨其对胃癌细胞增殖侵袭能力的影响。方法采用实时PCR检测FUBP1基因在胃癌组织中的表达。采用单因素方差分析分析FUBP1基因表达与胃癌临床病理因素的相关性。构建FUBP1基因表达沉默载体p S-FUBP1并转染SGC7901细胞,实时PCR检测转染效果。采用CCK8法及Transwell法检测FUBP1基因表达沉默对于SGC7901细胞的增殖和侵袭能力的影响。结果 FUBP1基因在胃癌组织中表达显著上调,且随着分化水平的降低、浸润深度和转移淋巴结数量的增加,胃原发癌中FUBP1基因表达明显增高。p S-FUBP1载体能够显著沉默FUBP1基因的表达。FUBP1表达沉默的SGC7901细胞的增殖及侵袭能力下调明显。结论 FUBP1基因在胃癌中高表达,与胃癌的发生进展相关,沉默其表达能够抑制胃癌细胞的增殖和侵袭能力。

远端上游元件结合蛋白1在食管癌中的表达及意义

目的探讨远端上游元件结合蛋白1(FUBP1)在食管癌组织中的表达及其与食管癌临床特征的关系。方法应用免疫组织化学技术检测37例食管癌组织、35例食管癌癌旁组织、12例食管炎组织中FUBP1的表达水平;采用荧光定量反转录聚合酶链反应(FQ-PCR)检测32例食管癌、32例食管癌癌旁组织中FUBP1 mRNA的表达水平。结果免疫组化结果显示,FUBP1在食管癌的阳性表达率为81.1%,明显高于癌旁组织(31.4%)和食管炎(33.3%,P<0.05),而癌旁组织与食管炎组织之间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。FQ-PCR结果显示,FUBP1 mRNA在食管癌组织中的相对表达量(0.2650±0.1356)明显高于在癌旁组织中的相对表达量(0.1982±0.0263,t=2.638,P=0.013)。FUBP1 mRNA含量在食管癌及癌旁组织中的表达与性别、年龄无关(P>0.05),与分化程度、淋巴结转移、远处转移有关(P<0.05)。结论 FUBP1在食管癌的发生、发展中起重要作用,其表达升高增强了食管组织癌变的易感性,可能在食管癌的发生、发展、浸润、转移中发挥重要作用。

远端上游元件结合蛋白1的生物学功能

远端上游元件结合蛋白1(far upstream element binding protein 1,FUBP1)通过特异性结合远端上游元件(upstream element,FUSE)调控原癌基因c-Myc的转录。FUBP家族包括FUBP1、FUBP2、FUBP3及FUBP4,其序列具有高度同源性,但功能各不相同。FUBP1蛋白由3个结构域构成,具有两亲性螺旋结构的N端、富含酪氨酸的C端以及1个DNA结合区域。生理状态下,FUBP1蛋白定位于细胞核。除了调控c-Myc转录外,FUBP1还可结合RNA,参与调控mRNA稳定性、病毒复制及RNA的剪接。

远端上游元件结合蛋白1与消化道肿瘤的研究进展

远端上游元件结合蛋白1(FUBP1)是一种单链核酸结合蛋白,由有螺旋结构的N端、富含酪氨酸的C端和一个DNA结合区域构成,与远端上游元件(FUSE)结合后可调控原癌基因c-Myc的转录。FUBP1通过调控基因转录、翻译、RNA复制和剪接,影响细胞增殖、迁移、凋亡等过程,在多种肿瘤的发生、发展中扮演重要角色。本文就FUBP1的结构、功能、家族成员及其与消化道肿瘤相关机制的研究作一综述。

远端上游元件结合蛋白1在幽门螺杆菌相关性胃炎中的表达及机制研究

目的研究远端上游元件结合蛋白1(far upstream element-binding protein 1,FUBP1)在幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H. pylori)相关性胃炎中的表达,并初步探讨H. pylori引起FUBP1表达变化的可能机制。方法分别采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-q PCR)、蛋白质印迹法(Western blotting)和免疫组织化学技术检测H. pylori阴性和H. pylori阳性胃炎组织中FUBP1mRNA和蛋白的表达。国际标准测序株H. pylori 26695及其提取的LPS分别刺激AGS、SGC7901细胞,RT-q PCR和Western blotting检测FUBP1 mRNA和蛋白的表达。分别使用H. pylori和H. pylori-LPS灌胃,构建小鼠感染模型,于灌胃结束后4周、8周取小鼠胃黏膜组织,RT-q PCR和Western blotting检测FUBP1 mRNA和蛋白表达。结果 H. pylori阳性组织中FUBP1 mRNA及蛋白表达水平均低于H. pylori阴性组织,FUBP1蛋白水平的表达差异有统计学意义(P <0. 05)。H. pylori刺激AGS和SGC7901细胞后FUBP1mRNA和蛋白水平降低,且呈时间依赖性,H. pylori-LPS刺激细胞后,FUBP1 mRNA和蛋白水平表达降低,但无时间及浓度依赖性。动物模型中,与对照组相比,H. pylori组和H. pylori-LPS组的FUBP1 mRNA和蛋白表达水平均明显降低,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论 FUBP1在H. pylori相关性胃炎中表达下降,H. pylori和H. pylori毒力因子LPS均能诱导FUBP1下调,FUBP1可能成为评价慢性胃炎患者H. pylori感染的一个潜在指标。

敲低远端上游元件结合蛋白1的表达对胰腺癌细胞侵袭迁移能力的影响

目的:研究敲低远端上游元件结合蛋白1(FUBP1)的表达对胰腺癌细胞增殖和侵袭迁移能力的影响。方法:细胞转染干扰序列siFUBP1降低胰腺癌细胞PaTu8988中FUBP1的表达,FUBP1-nc作为阴性对照。CCK-8实验检测细胞增殖能力,细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞侵袭迁移能力。结果:敲低胰腺癌细胞PaTu8988中FUBP1的表达能明显抑制细胞增殖,细胞侵袭迁移数目减少,降低细胞侵袭迁移能力。结论:敲低FUBP1的表达能显著抑制胰腺癌细胞增殖及侵袭迁移能力。

远端上游元件结合蛋白1在肿瘤中的研究进展

远端上游元件结合蛋白1(FUBP1)是一种单链DNA结合蛋白。在多种肿瘤中,FUBP1可影响肿瘤细胞的增殖、转移和侵袭等生物学行为,进而促进肿瘤的发生发展。本文旨在对FUBP1在肿瘤中的生物学功能和机制进行简要概述。随着对FUBP1的功能和机制的深入探究,FUBP1有望作为多种肿瘤的生物标志物和治疗靶点。

远端上游元件结合蛋白1调节肝癌细胞中长链非编码RNA表达的实验研究

目的筛选肝癌细胞中受远端上游元件结合蛋白1(FUBP1)调节的长链非编码RNA(lncRNAs)。方法通过慢病毒介导不同肝癌细胞株中(MHCC97H、MHCC97L和Huh7)过表达FUBP1,利用定量PCR的方法鉴定过表达效率。利用芯片的方法筛选过表达FUBP1后肝癌细胞株中差异表达的lncRNAs,并利用定量PCR验证结果。利用生物信息学的方法确定差异表达的lncRNAs与mRNAs的共表达网络。结果以对照组中FUBP1的表达量为1,慢病毒感染的MHCC97H、MHCC97L和Huh7肝癌细胞株中FUBP1的mRNA水平分别为3.28±0.15、2.75±0.26和4.25±0.35,明显高于对照组(均P<0.01)。芯片结果显示,共有12个lncRNA在3种细胞株中具有一致的表达变化,包括3个上调和9个下调。定量PCR验证结果与芯片结果一致,其中lnc-ARF6-3下调最明显,lnc-BCAS2-1上调最明显。lnc-BCAS2-1、lnc-USP9X-3、lncLYZ-2和lnc-C14orf135-3与FUBP1具有共表达网络。结论 FUBP1诱导肝癌细胞中lncRNAs的表达紊乱,FUBP1-lncRNAs的表达网络可能与肝癌的发展和转移密切相关。

C3H1型锌指结合蛋白36介导的星形胶质细胞活化在肌萎缩侧索硬化症运动神经元退变中的作用

目的探讨C3H1型锌指结合蛋白36(ZFP36L1)介导的星形胶质细胞活化在肌萎缩侧索硬化症(ALS)运动神经元退变中的作用。方法以铜锌超氧化物歧化酶1(SOD1)-G93A转基因小鼠作为动物模型,同窝野生型小鼠作为对照(突变型及野生型小鼠各时间点分别取13只小鼠);Real-time PCR、Western blotting检测小鼠发病早期、中期及晚期脊髓内ZFP36L1 mRNA及蛋白变化,免疫荧光染色检测ZFP36L1在脊髓内的表达及分布;出生后1~2 d新生小鼠15只,建立SOD1-G93A突变型原代星形胶质细胞模型,Real-time PCR、Western blotting检测星形胶质细胞内ZFP36L1 mRNA及蛋白水平的变化,si-ZFP36L1转染SOD1-G93A突变型原代星形胶质细胞,Western blotting检测转染效率,Western blotting及ELISA检测转染后星形胶质细胞分泌炎性因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素18(IL-18)变化;沉默SOD1-G93A突变型原代星形胶质细胞内ZFP36L1后,与SOD1-G93A突变型NSC34细胞共培养,通过5’-乙炔基-2’-脱氧尿苷(EdU)实验和观察增殖细胞核抗原(PCNA)的水平明确ZFP36L1对NSC34细胞增殖的影响,通过TUNEL实验及观察剪切Caspase-3(cleaved-Caspase-3)的水平明确ZFP36L1对NSC34细胞凋亡的影响,以转染空白小干扰RNA(siRNA)作为对照组。结果与野生型小鼠相比,ZFP36L1在SOD1-G93A转基因小鼠脊髓组织内mRNA及蛋白水平均下调,在野生型小鼠脊髓组织内,ZFP36L1主要与β-微管蛋白Ⅲ(β-tubulinⅢ)阳性的神经元共表达,而SOD1-G93A突变型小鼠的脊髓组织内,ZFP36L1在神经元内表达减弱,与胶质纤维酸性蛋白(GFAP)标记的星形胶质细胞共表达明显增加;SOD1-G93A突变型原代星形胶质细胞内ZFP36L1表达增加,si-ZFP36L1能明显降低SOD1-G93A突变型原代星形胶质细胞内ZFP36L1水平;沉默ZFP36L1后星形胶质细胞分泌炎性因子TNF-α、IL-18明显降低。此外,沉默ZFP36L1后,SOD1-G93A突变型原代星形胶质细胞能显著增强NSC34细胞增殖活性,抑制NSC34细胞凋亡。结论在ALS发病过程中,星形胶质细胞被激活,ZFP36L1通过星形胶质细胞分泌的炎性因子促进了ALS运动神经元的退变。

双龙接骨丸联合正骨紫金丹治疗脑卒中偏瘫侧桡骨远端闭合性骨折的临床效果

目的探讨双龙接骨丸联合正骨紫金丹对脑卒中偏瘫侧桡骨远端闭合性骨折患者神经和腕关节功能的影响。方法入选脑卒中偏瘫侧桡骨远端闭合性骨折患者以随机数表法分为试验组和对照组。对照组采用正骨紫金丹治疗,每晨餐后30 min服用1次,每次15 g,连服8周。试验组在对照组的基础上联合双龙接骨丸治疗,温水送服,每天1次,每次15 g,早餐后30 min服用,连续用药8周。对比2组美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)和临床疗效;用Gartland Werley评分评估治疗后1和2个月腕关节功能;用酶联免疫吸附试验法检测血清基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)与基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达量;观察并统计2组药物不良反应发生率。结果试验组和对照组分别纳入44例受试者。试验组和对照组的总有效率分别为93.18%(41例/44例)和86.37%(38例/44例),差异有统计学意义(P<0.05);对照组残余畸形、客观评价、主观评价和并发症评分分别是2.00±0.78、4.00±0.56、4.00±0.12和4.00±0.46;试验组残余畸形、客观评价、主观评价和并发症评分分别是1.00±0.67、2.00±0.12、1.00±0.98和2.00±0.23;组间比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。治疗后,试验组和对照组的NIHSS评分分别为1.42±0.47和3.65±0.74,试验组和对照组的腕关节功能Gartland Werle评分分别为2.92±0.48和4.76±0.89,试验组和对照组血清TIMP-1表达量分别为(425.61±15.57)和(362.94±13.25)μg·L^(-1),血清MMP-9表达量分别为(46.25±3.34)和(57.82±4.18)μg·L^(-1),试验组上述指标与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);治疗后,试验组和对照组的总药物不良反应发生率分别为6.82%和27.27%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论双龙接骨丸联合正骨紫金丹治疗脑卒中偏瘫侧桡骨远端闭合性骨折患者疗效显著,可改善患者的神经功能和腕关节功能,下调MMP-9水平和上调TIMP-1水平,减轻脑屏障受损情况与炎症反应的发生,降低药物不良反应发生率。

FUBP1表达沉默对A549细胞生长和化疗敏感性影响研究

目的:探讨人远端上游元件结合蛋白1(far upstream element binding protein 1,FUBP1)基因在肺腺癌组织中的表达及其对肺腺癌A549细胞化疗敏感性的影响。方法:选取43例来源于201-03-17-2012-05-09沈阳军区总医院胸外科,手术患者的肺腺癌及相应距肿瘤>1cm的癌旁组织标本为研究对象。Real-time PCR检测FUBP1mRNA在肺腺癌组织中的表达;RNA干扰技术沉默A549细胞中FUBP1基因的表达,蛋白质印迹法检测抑制效果;MTT法和流式细胞术测定FUBP1基因表达沉默对细胞生长抑制率和凋亡率的影响。不同浓度顺铂(DDP)处理FUBP1基因表达沉默的A549细胞,检测细胞生长抑制率和凋亡率。结果:FUBP1基因在肺腺癌组织中的表达显著上调,为癌旁正常组织中FUBP1的177.65%,t=2.858,P=0.006。FUBP1随着分化程度的降低和分期的升高呈逐渐增高趋势,且与淋巴结及远处转移相关,P<0.01。siRNA-FUBP1能够显著抑制A549细胞中FUBP1蛋白的表达,F=14.726,P<0.001;而FUBP1基因表达沉默的A549细胞的生长抑制率由1.4%升高至29.5%,F=16.302,P<0.001;凋亡率由2.68%升高至5.84%,F=19.497,P<0.001。FUBP1基因表达沉默的A549细胞分别经1、3和5μg/mL DDP处理后,生长抑制率由14.418%、17.460%和23.545%分别升高至21.693%、27.513%和37.566%,相同DDP浓度的2组间比较的t值分别为21.074、25.835和29.473,P值均<0.001;DDP的IC50由(5.12±0.31)μg/mL降至(3.93±0.24)μg/mL,t=3.487,P=0.001;而凋亡率由8.85%、14.37%和18.21%分别升高至13.25%、18.46%和26.52%,相同DDP浓度组间比较的t值分别为7.279、15.878和23.111,P值均<0.001。结论:FUBP1的表达上调与肺腺癌相关,FUBP1表达沉默能够增加A549细胞的生长抑制率和凋亡率,并且可以提高A549细胞对化疗药物DDP的敏感性。