局部应用CpG寡聚核苷酸联合4-1BB单克隆抗体治疗小鼠肝癌荷瘤的研究

目的探讨局部应用CpG寡聚核苷酸(CpG-ODN)联合4-1BB单克隆抗体对小鼠肝癌的疗效,并评价4-1BB单克隆抗体对CpG-ODN免疫治疗效果的影响。方法在BALB/c雄鼠四肢腋窝皮下注射H22单细胞悬液,建立荷瘤小鼠模型,7 d后筛选出30只荷瘤体积相当的小鼠,随机分成模型对照组、CpG组和CpG+4-1BB组,并在左下肢瘤内注射药物。选取同批正常小鼠作为正常对照组。记录小鼠生存情况,计算荷瘤体积、脏器指数,检测血清白细胞介素(IL)-12和干扰素(IFN)γ浓度以及脾脏CD8+T淋巴细胞比例。计量数据用方差分析,各组小鼠存活率采用Log-Rank检验分析。结果处死前模型对照组小鼠荷瘤持续增长,CpG组和CpG+4-1BB组荷瘤体积[(976.08±29.55)mm3、(47.25±0.93)mm3)]与模型组[(1 336.52±39.40)mm3]相比均减小(F = 5 329.273,P < 0.05);CpG+4-1BB组远处荷瘤体积[(611.83±113.02)mm3]与模型组和CpG组[(1 406.62±51.09)mm3、(1 380.01±51.44)mm3]相比减小(F = 247.160,P < 0.05),但CpG组与模型组无明显差异(P > 0.05)。模型组血清IL-12浓度[(23.90±2.33)pg/ml]、IFNγ浓度[(103.02±6.10)pg/ml]和脾脏CD8+T淋巴细胞比例(4.54%±0.62%)较正常组均减低(P值均< 0.05);CpG组和CpG+4-1BB组血清中IL-12浓度[(29.21±2.23)pg/ml、(37.04±1.49)pg/ml]、IFNγ浓度[(116.12±4.08)pg/ml、(138.65±1.72)pg/ml)、CD8+T淋巴细胞比例(6.65%±0.64%、12.73%±0.88%)均高于模型组(P值均< 0.05);CpG+4-1BB组高于CpG组(P < 0.05)。CpG+4-1BB组小鼠存活率均高于模型组和CpG组(χ2 = 25.544,P < 0.05),CpG组与模型组之间无明显差异(P > 0.05)。四组脏器指数无明显差异(P > 0.05)。结论4-1BB单克隆抗体联合CpG-ODN治疗可使肝癌荷瘤体积缩小,并可抑制远处荷瘤增长,明显延长小鼠存活时间。